徐小艷，陳昌海，王相子，開 妍，邱 冬

（江蘇省動物疫病預防控制中心，江蘇南京 210036）

2019 年6 月，根據農業(yè)農村部辦公廳和江蘇省農業(yè)農村廳有關獸醫(yī)系統實驗室檢測能力比對的文件要求，江蘇省動物疫病預防控制中心組織實施了2019 年度江蘇省獸醫(yī)系統實驗室檢測能力比對。全省12 個市級、65 個縣級實驗室參加了比對，均在規(guī)定時間內完成了各項比對任務，比對結果較客觀地反映了江蘇省獸醫(yī)系統實驗室的檢測能力現狀。為更好地發(fā)揮比對結果作用，本文對此次比對結果進行了分析和討論，旨在進一步做好獸醫(yī)系統實驗室管理工作，促進全省獸醫(yī)系統檢測能力提升。

1 材料與方法

1.1 比對項目

根據市級和縣級實驗室檢測能力的不同，本次比對設置了市級比對項目和縣級比對項目兩大類。市級設置了高致病性豬藍耳病病毒檢測、非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gE 抗體檢測和新城疫抗體檢測4 個項目；縣級設置了新城疫抗體檢測、非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gB 抗體檢測和小反芻獸疫抗體檢測4 個項目。

1.2 比對方法、標準和試劑

針對不同的比對項目，明確了各自檢測方法，采用國家標準或國家參考實驗室推薦的方法進行比對，涉及5 種動物疫病、5 種檢測方法。所用試劑由參加比對的實驗室自行準備（表1）。

1.3 比對樣品

由江蘇省動物疫病預防控制中心完成所有比對項目樣品的制備、標定、分裝、編號和保存。分發(fā)時將樣品用裝有冰袋的冷藏箱運送，由各個市級實驗室派專人在規(guī)定的時間內統一領取本市所有樣品，并在當日分發(fā)到轄區(qū)內各個實驗室。

1.3.1 高致病性豬藍耳病病毒檢測樣品 參考值為陽性和陰性的高致病性豬藍耳病疫苗稀釋物樣品中隨機抽取5 份，組成1 組樣品。

1.3.2 非洲豬瘟病毒檢測樣品 參考值為陽性和陰性的盲樣中隨機抽取5 份，組成1 組樣品。

1.3.3 豬偽狂犬病gE 抗體檢測樣品 參考值為陽性和陰性的豬血清樣品中隨機抽取5 份，組成1組樣品。

1.3.4 豬偽狂犬病gB 抗體檢測樣品 參考值為陽性和陰性的豬血清樣品中隨機抽取5 份，組成1組樣品。

1.3.5 新城疫抗體檢測樣品 參考值為3log2、6log2、9log2 的雞血清樣品中隨機抽取5 份，組成1 組樣品。

1.3.6 小反芻獸疫抗體檢測樣品 參考值為陽性和陰性的羊血清樣品中隨機抽取5 份，組成1 組樣品。

1.4 結果評判標準

高致病性豬藍耳病病毒檢測、非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gE 抗體檢測、豬偽狂犬病gB抗體檢測和小反芻獸疫抗體檢測項目的評判標準：樣品檢測值與參考值完全一致判為正確，即陽性樣品的檢測值應為“陽性”，陰性樣品的檢測值應為“陰性”，否則判為錯誤；新城疫抗體檢測項目的評判標準：檢測值與參考值的偏差不超過1log2，判為正確，否則判為錯誤。

2 比對結果

2.1 總體情況

根據比對結果評判標準，在12 個市級、65個縣級實驗室中，有12 個市級和60 個縣級實驗室所有比對項目檢測結果全部正確，其余5 個縣級實驗室部分比對項目檢測值存在較大偏差；整體樣品正確率為99.32%，實驗室正確率為93.51%（表2）。

2.2 市級實驗室比對

12 個市級實驗室分別進行了高致病性豬藍耳病病毒檢測、非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gE抗體檢測和新城疫抗體檢測4 個項目的比對，所有檢測值全部正確，樣品正確率為100%，實驗室正確率為100%。

2.3 縣級實驗室比對結果

65 個縣級實驗室參加了豬偽狂犬病gB 抗體檢測、新城疫抗體檢測和小反芻獸疫抗體檢測比對，21 個縣級實驗室參加了非洲豬瘟病毒檢測比對。有60 個實驗室各個比對項目檢測值均正確，實驗室正確率為92.31%。個別實驗室檢測值出現較大偏差，1 個實驗室非洲豬瘟病毒、3 個實驗室豬偽狂犬病gB 抗體、1 個實驗室新城疫抗體檢測值出現較大偏差，樣品正確率為99.17%（表3）。

表3 縣級實驗室檢測能力比對結果

3 討論

從比對結果來看，整體樣品正確率為99.32%，實驗室正確率為93.51%，說明參加比對的實驗室均具備正常開展主要動物疫病監(jiān)測和檢測的能力與條件，對實驗室質量管理較為重視，其檢測能力與技術水平可以滿足工作需要。需要關注的是，仍有個別縣級實驗室個別比對項目檢測值存在較大偏差，說明這些實驗室的質量管理和檢測能力水平有待進一步提高。

在比對項目的設置上，根據當前非洲豬瘟疫情流行現狀，首次在全省獸醫(yī)系統實驗室檢測能力比對中設置非洲豬瘟病毒檢測項目。在參加該項目比對的33 個實驗室中，有32 個實驗室檢測值全部正確，實驗室正確率為96.97%（32/33），有兩份樣品檢測值出現較大偏差，樣品正確率為98.79%（163/165）。同時，密切關注常見動物疫病檢測能力，設置了高致病性豬藍耳病病毒檢測、新城疫抗體檢測、小反芻獸疫抗體檢測比對項目；著力推進動物疫病凈化工作，設置了豬偽狂犬病gE 抗體檢測、豬偽狂犬病gB 抗體檢測項目，提高了檢測能力比對工作的科學性、實用性和創(chuàng)造性，也取得了較滿意的效果。

按市級和縣級兩類實驗室進行統計，本次比對涉及12 個市級和65 個縣級實驗室。12 個市級實驗室各個比對項目檢測值均正確，樣品正確率為100%，實驗室正確率為100%；65 個縣級實驗室在4 個比對項目中，只有小反芻獸疫抗體檢測項目的檢測值全部正確，在非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gB 抗體檢測和新城疫抗體檢測3 個項目中，均出現個別實驗室個別檢測值出現較大偏差的情況，樣品正確率為99.17%，實驗室正確率為92.31%。結果表明：市級和縣級實驗室檢測能力均達到較高水平，但市級實驗室整體檢測能力高于縣級。這與之前的分析結果一致[1-2]，也進一步說明持續(xù)加強縣級實驗室建設的重要性和必要性。

按不同檢測方法進行統計，將高致病性豬藍耳病病毒檢測和非洲豬瘟病毒檢測歸為PCR方法，將豬偽狂犬病gE 抗體檢測、豬偽狂犬病gB 抗體檢測和小反芻獸疫抗體檢測歸為ELISA 方法，將新城疫抗體檢測歸為HI 方法。三類方法的樣品正確率分別為99.11%、99.15%和99.69%，均處于較高水平。但65 個縣級實驗室中，有44 個尚不能正常開展熒光PCR 檢測，且大多數縣級實驗室技術人員對于分子生物學檢測比較陌生，其操作水平和理論知識儲備都存在很大上升空間，需要在完善分子生物學相關儀器設備配置的基礎上，通過理論培訓、實際操作等形式，進一步提高學習能力。

本次比對，各實驗室自行準備的檢測試劑涉及不同生產廠家，不同批次，但檢測結果整體情況較好，各比對項目樣品正確率均高于98%，說明目前的高致病性豬藍耳病病毒檢測、非洲豬瘟病毒檢測、豬偽狂犬病gE 抗體檢測、豬偽狂犬病gB抗體檢測、新城疫抗體檢測和小反芻獸疫抗體檢測試劑質量較好。個別縣級實驗室的個別比對項目檢測值出現較大偏差，可能是因為儀器設備配置不到位、理論知識學習不充分、技術人員操作不熟練等原因造成。

為進一步有效提升獸醫(yī)系統實驗室檢測能力，發(fā)揮其在動物疫病防控中的重要作用，應加強以下工作：

一要高度重視檢測能力比對工作。切實加強獸醫(yī)實驗室建設管理，落實相對穩(wěn)定的實驗室人員，保證實驗室工作的連續(xù)性，采取各種措施減少拆遷、搬遷等不利因素的影響，保證實驗室工作正常有序開展。本次比對中，個別市級和少量縣級實驗室由于拆遷、搬遷等原因未參加比對，或未按有關要求開展非洲豬瘟病毒檢測工作，這些市、縣要高度重視，加強實驗室建設、儀器設備配置、人員配備，切實提高動物疫病防控能力。

二要強化整改完善。結合檢測能力比對工作開展情況，認真總結經驗，比對結果偏差較大的要深入分析，查找原因，研究制定改進和提高檢測能力的措施，并狠抓落實，切實提高獸醫(yī)實驗室的能力和水平。

三要強化實驗室質量管理。對照有關要求，采取針對性措施，進一步健全完善實驗室質量管理體系。

四要強化培訓指導。定期組織開展業(yè)務培訓，提高實驗室人員專業(yè)理論知識水平、設備維護使用能力、實驗操作技能，全面提升實驗室管理和運行水平。