王曉寧，孫 巖，盧偉偉，劉 冰

(吉林大學(xué)第一醫(yī)院 輸血科，吉林 長(zhǎng)春130021)

1 案例分析

患者，男，65歲，因血友病貧血入院，常規(guī)進(jìn)行輸血檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)患者血型：O型 RhD陽性、不規(guī)則抗體篩查陽性。進(jìn)一步鑒定抗體，并進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，滿足患者輸血需求。

1.1 試劑與儀器

抗-A、抗-B試劑(批號(hào) 20170509、20190510)(上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-N 試劑(批號(hào)20160811、20180810) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-M試劑(批號(hào)20161221、20181220) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-D(IgM)試劑(批號(hào)20161811、20181114) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-C 試劑(批號(hào)20163003、20181103) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-c 試劑(批號(hào)20163103、20181106) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-E 試劑(批號(hào)20163202、20181106) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-e 試劑(批號(hào)20163303、20181227) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、ABO 反定型試劑 (批號(hào)20185313、20180712) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、篩選細(xì)胞(批號(hào)20187014、20180717) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、譜細(xì)胞 (Saquin)(批號(hào)8000248526、20180705)、譜細(xì)胞 (REAGENS)(批號(hào)731811、20180716)、抗-Dia (批號(hào)8000238598、8000232510)(上海血液中心自制) 、抗球蛋白試劑(批號(hào)20165002、20180725) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-IgG(批號(hào)20175102、20190629) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-C3d(批號(hào)20165201、20180727) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、聚凝胺試劑 (批號(hào)20167507、20181208) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、細(xì)胞洗滌離心機(jī)(日本久保田)、水浴箱。

1.2 方法抗體

血型鑒定均采用試管法，鑒定采用試管法、抗人球蛋白法，交叉配血采用鹽水、聚凝胺、抗人球蛋白法互相驗(yàn)證[1]。

2 結(jié)果

2.1 血型鑒定

ABO血型、M、N型血清學(xué)測(cè)定，結(jié)果見表1，Rh五分型、Dia 、Dib血清學(xué)測(cè)定結(jié)果見表2。

表1 ABO血型血清學(xué)測(cè)定結(jié)果

表2 Rh五分型、Dia血清學(xué)測(cè)定結(jié)果

綜合表1、表2血清學(xué)結(jié)果分析，患者血型為：O型、“CCDee”、“MM”、“Di(a-b-)”。

2.2 抗體篩查及鑒定結(jié)果

2.2.1不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)

試管法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)，結(jié)果見表3。

表3 不規(guī)則抗體篩選結(jié)果

在鹽水介質(zhì)中，通過抗篩譜分析發(fā)現(xiàn)抗-N抗體，進(jìn)一步進(jìn)行譜細(xì)胞鑒別，鑒定其抗體的特異性。

2.2.2譜細(xì)胞鑒定試驗(yàn)

應(yīng)用匈牙利進(jìn)口譜細(xì)胞(REAGENS)(批號(hào)731811、20180716)鑒別其抗體的特異性，結(jié)果見表4(患者自身IS、抗人球卡、-2ME卡法中均陰性)。

表4 譜細(xì)胞鑒定結(jié)果

進(jìn)口譜細(xì)胞與患者血清反應(yīng),反應(yīng)格局見表4。結(jié)果表明存在抗-E 抗體(IgG),抗-N抗體(IgM)，抗-Dia抗體(IgM)。

2.2.3譜細(xì)胞排除抗體

由于抗-E抗體經(jīng)常聯(lián)合抗-c抗體[2]，因此為保證患者輸血安全，進(jìn)一步排除了抗-c抗體。

2.3 交叉配血結(jié)果

篩選O型，“CCDee”、“MM”、“Di(a-b-)”獻(xiàn)血員，與患者標(biāo)本進(jìn)行交叉配血。采用鹽水介質(zhì)、聚凝胺、抗人球蛋白卡法三種方法配血，結(jié)果相合。

3 討論

本次案例是一例罕見的三抗聯(lián)合的配血案例，患者先后產(chǎn)生了抗-E抗體、抗-N抗體、抗-Dia抗體?？?E抗體是Rh血型系統(tǒng)中較為常見的血型，根據(jù)國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)告，RhE抗原陰性人群比例約為46%[3]，產(chǎn)生輸血反應(yīng)的案例也有很多報(bào)道。隨著對(duì)抗體篩查和Rh同型輸注問題的重視，這類問題在逐漸減少。

本案例中單克隆檢出抗-N，抗-N同抗-M比起來相對(duì)稀少[4，5]，通過2-ME破壞發(fā)現(xiàn)為IgM的抗-N,大多數(shù)抗-N是天然抗體IgM型,在25℃以上沒有活性，37℃凝集消失，因此在抗人球介質(zhì)中IgM的抗-N一般不會(huì)發(fā)生明顯的配血不合現(xiàn)象。但國(guó)內(nèi)也有IgM型抗-N抗體導(dǎo)致交叉配血的案例分析[6]。因此單一使用抗人球法配血，將會(huì)漏檢部分鹽水，因此針對(duì)鹽水抗篩陽性的配血案例，要選用多種介質(zhì)進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)，保證試驗(yàn)的準(zhǔn)確性，避免因輸血而產(chǎn)生相關(guān)抗體，提高輸血安全。

根據(jù) Layrisse等的描述Dia是1955年在委內(nèi)瑞拉的一個(gè)家系中發(fā)現(xiàn)[7]。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)這一血型和南美印第安人關(guān)系密切，而在歐洲血統(tǒng)的人群中罕見[7，8]。1967年Thompson等報(bào)道了有兩例可檢測(cè)其對(duì)偶抗原Dib的抗體[9]。根據(jù)Dia的分布及頻率大量研究發(fā)現(xiàn)，它可以作為人類學(xué)的標(biāo)記。Dia幾乎是蒙古人種中獨(dú)有的，而在那些罕見的例外中,往往難以排除蒙古血統(tǒng)祖先的存在。在東南亞人群中，Dia的頻率從2%-12%不等[10]，中國(guó)約為5%[11]，日本人中的頻率比中國(guó)人群稍高約為10%[12]。因此在獻(xiàn)血員中篩選Dia (-)的血并不困難，在12袋O型獻(xiàn)血隊(duì)員中篩選“CCDee/MM”、Dia (-)的紅細(xì)胞懸液1袋，應(yīng)用鹽水、聚凝胺、抗人球卡法三種配血方式配血，主側(cè)、次側(cè)均無凝集、無溶血，配血相合。3天后，患者再次提出輸血要求，復(fù)查鹽水抗篩：凝集減弱為1+，認(rèn)為為患者選取的“CCDee/MM”、Dia (-)血液，有很好的輸注效果。

綜上所述，在抗體篩選和交叉配血時(shí)，不能單一依靠一種方法，不同的方法對(duì)不同類型的抗體的敏感度不同，可能漏檢抗體或造成假陰性結(jié)果。