戴小宇

江西省吉安市永新縣人民醫(yī)院 （江西吉安 343400）

隨著病情的發(fā)展，乙型肝炎病毒（HBV）感染可演變?yōu)榧甭愿窝?、肝硬化、肝癌等疾病，現(xiàn)已成為危害生命健康的公共衛(wèi)生問題。因此，及時、準(zhǔn)確地監(jiān)測HBV感染，對防治乙型肝炎具有重要意義[1]。現(xiàn)階段，臨床上最常采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法對血清中的乙型肝炎標(biāo)志物水平進(jìn)行測定，但在實(shí)際應(yīng)用中其無法對標(biāo)志物水平進(jìn)行定量分析，難以準(zhǔn)確判斷HBV感染情況。化學(xué)發(fā)光免疫分析（CLIA）法是近年來發(fā)展起來的檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物的方法，具有操作簡單、靈敏度及特異度高等優(yōu)勢，同時還可進(jìn)行定量分析，較好地彌補(bǔ)了ELISA法檢測的不足[2-3]。本研究采用CLIA法與ELISA法檢測乙型肝炎病毒感染性標(biāo)志物，對兩者臨床應(yīng)用價值進(jìn)行對比分析。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2018年11月江西省吉安市永新縣人民醫(yī)院接收的疑似乙型肝炎患者165例，其中男86例，女79例；年齡11～78歲，平均（42.86±3.82）歲。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：可耐受且配合本研究；均自愿參與研究，且已簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病患者；存在其他肝臟疾病患者；無法自主配合實(shí)施檢測患者。

1.2 方法

抽取患者清晨空腹肘靜脈血4 ml，于室溫下放置30 min后開始析出血清，即將血液標(biāo)本放于離心機(jī)內(nèi)，以3 500 r/min離心15 min，留取上層血清待檢。將獲得的血清分為均等的2份，分別采用CLIA法及ELISA法對血清中的乙型肝炎表面抗體（HBsAb）、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎E抗原（HBeAg）、乙型肝炎核心抗體（HBcAb）、乙型肝炎E抗體（HBeAb）5項(xiàng)乙型肝炎病毒感染性標(biāo)志物進(jìn)行檢測。其中，CLIA檢測儀采用安圖公司生產(chǎn)的A2000化學(xué)發(fā)光儀，ELISA檢測儀采用上?？迫A有限公司生產(chǎn)的KHB-st-360酶標(biāo)儀。所有檢測步驟均嚴(yán)格遵循儀器操作要求及試劑盒相關(guān)說明進(jìn)行。

1.3 臨床評價

（1）比較兩種方法檢測HBV感染性標(biāo)志物的結(jié)果，當(dāng)HBsAb 水平≥10.0 mIU/ml、HBsAg水平≥0.2 ng/ml、HBeAg水平 ≥0.05 NCU/ml、HBcAb 水 平 ≥1.5 NCU/ml、HBeAb 水 平≥2.0 NCU/ml時，可判定HBV感染性標(biāo)志物為陽性[4]。（2）比較兩種方法檢測低水平HBsAg的結(jié)果及靈敏度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBV感染性標(biāo)志物檢測結(jié)果

CLIA法檢測HBsAg、HBeAg、HBeAb的陽性率均高于ELISA法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩種方法檢測HBsAb及HBcAb的陽性率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 165例患者經(jīng)兩種方法檢測HBV感染性標(biāo)志物的結(jié)果比較[例（%）]

2.2 低水平HBsAg檢測結(jié)果

當(dāng)HBsAg低水平檢測值為1.01～3.00 ng/ml時，兩種檢測方法檢測結(jié)果相同；當(dāng)HBsAg低水平檢測值≤1.00 ng/ml時，ELISA法檢測結(jié)果低于CLIA法。見表2。

表2 兩種方法檢測低水平HBsAg的結(jié)果比較（例）

2.3 HBsAg靈敏度檢測結(jié)果

取1.00 ng/ml HBsAg定值作為參照血清，使用陰性血清進(jìn)行倍比稀釋，分別采用CLIA法及ELISA法檢測HBsAg靈敏度，結(jié)果顯示，采用CLIA法檢出最低濃度為0.031 ng/ml，采用 ELISA 法檢出最低濃度為0.128 ng/ml。

3 討論

ELISA法是臨床上診斷乙型肝炎最傳統(tǒng)的方法，具有操作簡單、價格低、速度快等優(yōu)勢，在乙型肝炎疾病診斷、監(jiān)測及治療中具有一定的作用。但ELISA法在檢測中僅可做定性分析，無法做定量檢測，若血液標(biāo)本中的待測定物質(zhì)濃度過高，則會在鉤狀效應(yīng)下出現(xiàn)假陰性情況，并且在檢測過程中受到較多因素的影響，使得結(jié)果穩(wěn)定性降低，在臨床實(shí)際應(yīng)用中受到限制[5]。

近年來，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，CLIA法在臨床上的應(yīng)用較好地彌補(bǔ)了ELISA法無法定量檢測的不足。CLIA法是借助發(fā)光底物自身的發(fā)光強(qiáng)度直接進(jìn)行測定的分析技術(shù)，現(xiàn)已成為HBV感染性標(biāo)志物測定的重要方法[6]。本研究結(jié)果顯示，CLIA法檢測 HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBsAb及HBcAb的陽性率均高于ELISA法，分析原因?yàn)?，CLIA法采用的固相載體為順磁性微粒，其顆粒面積較大、體積較小，在檢測中具有較大的反應(yīng)面積；由于標(biāo)志物可循環(huán)利用，有效延長了檢測過程中標(biāo)志物的發(fā)光時間，同時可準(zhǔn)確地顯示HBV感染的全過程，極大地提高了病毒陽性檢出率。本研究結(jié)果顯示，CLIA法檢測HBsAg的靈敏度較高，表明采用CLIA法可盡早檢出HBsAg，特別對于急性乙型肝炎患者，快速檢出HBsAg水平利于臨床盡快展開治療。

綜上所述，與ELISA法檢測比較，CLIA法在檢測HBV病毒感染性標(biāo)志物中陽性率及靈敏度均較高，且重復(fù)性好，可有效避免低水平HBsAg出現(xiàn)的漏診及假陰性情況，較好地保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。