金 釗，夏孟蛟，鄭 川，嚴(yán) 然，由鳳鳴△

(1. 成都中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，成都 610075； 2. 成都中醫(yī)藥大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，成都 610075；3. 成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，成都 610075)

自噬作為細(xì)胞分解代謝的主要途徑，可影響細(xì)胞及其周?chē)h(huán)境組成，微環(huán)境變化又可影響自噬，細(xì)胞因周?chē)h(huán)境變化而誘導(dǎo)發(fā)生的自噬稱(chēng)為微環(huán)境性自噬[1]。最新研究表明，微環(huán)境性自噬促進(jìn)腫瘤發(fā)展[2]。腫瘤微環(huán)境屬于中醫(yī)“痰濁”范疇，痰濁是津液代謝異常的病理產(chǎn)物[3]，提示津液與自噬、腫瘤微環(huán)境關(guān)系密切。中醫(yī)藥調(diào)控腫瘤細(xì)胞自噬、調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境的機(jī)制研究眾多，但尚未將二者結(jié)合闡發(fā)，故通過(guò)探析“津液-腫瘤微環(huán)境-微環(huán)境性自噬”的關(guān)聯(lián)性，或可為中醫(yī)藥抗腫瘤提供新方向。

1 自噬是津液氣化的微觀生物行為

1.1 津液-氣化-自噬

津液是機(jī)體的生命物質(zhì)基礎(chǔ)，其化生、運(yùn)行、排泄賴(lài)于氣化。氣化正常則津液暢行，氣血充盛；氣化失調(diào)則津液滯澀，久而成積，或停聚成濕，或變質(zhì)化痰成瘀。痰瘀是腫瘤的主要病理產(chǎn)物，痰瘀膠結(jié)成毒，恣意生長(zhǎng)流注，又構(gòu)成了利于腫瘤生長(zhǎng)侵襲的內(nèi)環(huán)境。

研究發(fā)現(xiàn)，津液代謝異常導(dǎo)致痰濁、瘀血等實(shí)質(zhì)是病理性生化物質(zhì)在體內(nèi)的堆積，需要通過(guò)自噬加以降解[4-5]。自噬可通過(guò)降解細(xì)胞質(zhì)內(nèi)受損蛋白或細(xì)胞器，將細(xì)胞內(nèi)錯(cuò)誤折疊的蛋白及受損亞細(xì)胞器進(jìn)行“自我消化”[6]，補(bǔ)充能量供細(xì)胞正常生命活動(dòng)，維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。這與氣化激發(fā)和協(xié)調(diào)機(jī)體津液與氣血等有形與無(wú)形之間相互變換、清除內(nèi)生實(shí)邪、維持陰陽(yáng)平衡的機(jī)制相一致，即自噬是津液氣化的微觀生物行為。

1.2 自噬的“太過(guò)不及”

氣化是機(jī)體中各物質(zhì)代謝、能量轉(zhuǎn)換及生理功能等生命活動(dòng)的驅(qū)動(dòng)力[7]。氣化不足則津液代謝緩慢，津停成痰、氣滯成瘀、痰挾瘀血遂成窠囊，促腫瘤發(fā)生；氣化亢進(jìn)則津液代謝過(guò)速，能量過(guò)用亦可致虛，機(jī)體陰陽(yáng)不相順接，津液裹挾邪毒四散流注，促腫瘤發(fā)展。自噬是津液氣化功能的微觀生物行為，作為細(xì)胞重要的生存機(jī)制，自噬“太過(guò)不及”可導(dǎo)致機(jī)體紊亂，研究證實(shí)自噬水平的異常與腫瘤發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切。

自噬的“不及”導(dǎo)致機(jī)體清除受損細(xì)胞或轉(zhuǎn)化細(xì)胞功能降低，破損或衰老細(xì)胞器、錯(cuò)誤合成或折疊錯(cuò)誤的蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)片段等過(guò)多沉積是腫瘤發(fā)生的重要原因[8]；自噬的“太過(guò)”為生存在營(yíng)養(yǎng)缺失、低氧、酸性、炎性等惡劣環(huán)境的腫瘤細(xì)胞提供能量，在受到放化療打擊時(shí)，腫瘤利用自噬“太過(guò)”產(chǎn)生放化療抵抗，得以生存、復(fù)發(fā)乃至轉(zhuǎn)移[9]。因此，自噬的“太過(guò)不及”實(shí)質(zhì)是津液氣化微觀生物行為的異常改變。

2 自噬“不及”與腫瘤發(fā)生

2.1 自噬“不及”與腫瘤微環(huán)境

腫瘤在生成的多步驟過(guò)程中逐漸構(gòu)建的內(nèi)環(huán)境可對(duì)細(xì)胞進(jìn)行重編程，其形成的微環(huán)境是促進(jìn)癌毒轉(zhuǎn)化、驅(qū)動(dòng)腫瘤發(fā)生的關(guān)鍵因素，亦是腫瘤賴(lài)以生存的土壤[10]，自噬“不及”與腫瘤微環(huán)境形成密切相關(guān)。

細(xì)胞通過(guò)增強(qiáng)氧化應(yīng)激和誘導(dǎo)DNA受損及基因表達(dá)改變而發(fā)生惡變，自噬“不及”導(dǎo)致線粒體異常累積，氧化應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng)，受損DNA和異常染色體不能被降解、轉(zhuǎn)化的細(xì)胞或癌前細(xì)胞不能被有效清除，形成一個(gè)免疫抑制微環(huán)境。該環(huán)境具有組織乏氧、酸中毒、間質(zhì)高壓形成、大量生長(zhǎng)因子和蛋白水解酶產(chǎn)生、炎性反應(yīng)等特點(diǎn)[11-12]，有利于腫瘤生長(zhǎng)、侵襲、黏附和血管生成。

研究表明，腫瘤浸潤(rùn)前沿的自噬活性較低，敏感組浸潤(rùn)前沿的自噬活性降低尤為明顯，推測(cè)自噬“不及”可起到保護(hù)腫瘤細(xì)胞免受放射線打擊的作用，通過(guò)降解放射損傷的細(xì)胞器[13]，使細(xì)胞逃避凋亡，保護(hù)腫瘤細(xì)胞對(duì)抗放射效應(yīng)，從而導(dǎo)致放療耐受。

2.2 腫瘤微環(huán)境實(shí)質(zhì)是津液代謝異常

作為津液氣化微觀生物行為的異常改變，自噬“不及”可導(dǎo)致津液化源不足、敷布失司、排泄不能，最終停積為痰濁。痰濁若注入經(jīng)絡(luò)混于血中，則如《素問(wèn)·調(diào)經(jīng)論篇》云：“孫絡(luò)水溢，則經(jīng)有留血。”氣化不足則瘀血難祛，與痰濁互化互長(zhǎng)膠結(jié)成毒。人體氣機(jī)貴乎流通暢達(dá)，痰瘀最易阻遏氣之升降出入，加劇氣化不利，久則形成氣血流通障礙、氣機(jī)升降乖戾的腫瘤微環(huán)境[14]。

痰濁可隨氣升降出入于機(jī)體，但因于痰重濁的特性及氣化不利，其常停滯于人體皮肉筋骨等處，即“痰之為物，流動(dòng)不測(cè)，故其為害，上至巔頂，下至涌泉，隨氣升降，周身內(nèi)外皆到，五臟六腑皆有”[15]。故痰濁具有多變性、流動(dòng)性、隨意性的特點(diǎn)，且易兼夾他邪，阻滯經(jīng)脈，導(dǎo)致氣滯、血瘀而變生他病。這與微環(huán)境中，腫瘤細(xì)胞和細(xì)胞間質(zhì)生成，如水解酶、組織蛋白酶等病理產(chǎn)物促進(jìn)人體腫瘤細(xì)胞的產(chǎn)生、增殖和轉(zhuǎn)移同符合契[16-17]?？芍?，腫瘤微環(huán)境的實(shí)質(zhì)是津液代謝異常。

3 自噬“太過(guò)”與腫瘤發(fā)展

3.1 自噬“太過(guò)”與微環(huán)境性自噬

微環(huán)境性自噬促進(jìn)腫瘤發(fā)展，這一過(guò)程與自噬“太過(guò)”密切相關(guān)。微環(huán)境性自噬的特點(diǎn)是在腫瘤發(fā)展不同階段，自噬的信號(hào)傳導(dǎo)是由微環(huán)境改變誘導(dǎo)發(fā)生的。Nadja Katheder、Tor Erik Rusten等[18]學(xué)者的最新前沿研究發(fā)現(xiàn)，把處于休眠狀態(tài)受到抑制的腫瘤細(xì)胞從自噬缺陷動(dòng)物身上移植到自噬活躍的機(jī)體時(shí)，會(huì)重新煥發(fā)其生長(zhǎng)活力；當(dāng)阻斷周?chē)?xì)胞中的自噬過(guò)程，或阻斷腫瘤細(xì)胞吸收氨基酸，這些腫瘤細(xì)胞則難以生長(zhǎng)，說(shuō)明變異的細(xì)胞把周?chē)＜?xì)胞作為重要營(yíng)養(yǎng)貢獻(xiàn)者，通過(guò)過(guò)度的自噬產(chǎn)生營(yíng)養(yǎng)以滿足腫瘤生長(zhǎng)。佐證了營(yíng)養(yǎng)匱乏的微環(huán)境是最強(qiáng)的自噬生理誘導(dǎo)劑，可導(dǎo)致自噬“太過(guò)”為腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)補(bǔ)充原料和提供營(yíng)養(yǎng)。

腫瘤的酸性、免疫及炎性等微環(huán)境亦可導(dǎo)致自噬“太過(guò)”。如酸性條件下人乳腺癌細(xì)胞Atg5、BNIP3表達(dá)升高，提示細(xì)胞暴露在酸性環(huán)境時(shí)細(xì)胞自噬活性明顯增強(qiáng)，從而適應(yīng)不利環(huán)境使得腫瘤細(xì)胞得以生存；又如與腫瘤相關(guān)的成纖維細(xì)胞可激活NF-κB信號(hào)通路，誘導(dǎo)IL-6、IL-8、IL-10、干擾素γ等細(xì)胞因子驅(qū)動(dòng)細(xì)胞自噬的過(guò)度提高[19]。

3.2 微環(huán)境性自噬是津液代謝異常漸進(jìn)過(guò)程

微環(huán)境性自噬是腫瘤細(xì)胞應(yīng)對(duì)“惡劣”環(huán)境的生存機(jī)制，腫瘤微環(huán)境的實(shí)質(zhì)是津液代謝異常，津液代謝異常的漸進(jìn)過(guò)程與微環(huán)境性自噬始終亦步亦趨。初始階段，自噬“不及”導(dǎo)致津液代謝失常產(chǎn)生的廢物內(nèi)阻于細(xì)胞間質(zhì)，導(dǎo)致氣滯、瘀血等邪氣相搏結(jié)形成利于腫瘤生存發(fā)展的微環(huán)境。隨著津液代謝異常的暗中掣肘，痰濁、瘀血、氣滯互相膠結(jié)形成癌腫，加劇機(jī)體津液、氣化障礙，逐漸構(gòu)成免疫抑制微環(huán)境。在這一發(fā)展過(guò)程中，營(yíng)養(yǎng)匱乏、乏氧、炎性、酸性等環(huán)境變化愈演愈烈，導(dǎo)致自噬機(jī)制被腫瘤細(xì)胞“利用”，上調(diào)外界營(yíng)養(yǎng)的供給或者通過(guò)改變微環(huán)境對(duì)營(yíng)養(yǎng)進(jìn)行循環(huán)利用，為腫瘤發(fā)展供能[20]。

圖1顯示，隨著津液代謝失調(diào)的加重，自噬活性逐漸增強(qiáng)，促進(jìn)腫瘤的發(fā)展侵襲。因此，微環(huán)境性自噬促進(jìn)腫瘤發(fā)展的實(shí)質(zhì)是津液代謝異常的漸進(jìn)過(guò)程。

圖1 津液代謝異常與自噬“太過(guò)不及”

4 中醫(yī)藥干預(yù)津液代謝調(diào)控腫瘤細(xì)胞自噬

自噬是機(jī)體對(duì)正虛邪實(shí)作出“自我調(diào)節(jié)”的方式，其本身的“太過(guò)不及”同樣是重要的致病原因，一定范圍及程度上的自噬可保護(hù)細(xì)胞，但超過(guò)此范疇的自噬則作用相反，即所謂“過(guò)猶不及”。自噬的“太過(guò)不及”是津液氣化功能微觀生物行為的異常改變，腫瘤微環(huán)境的實(shí)質(zhì)是津液代謝異常，微環(huán)境性自噬是津液代謝異常的漸進(jìn)過(guò)程。因此，宣暢氣化、調(diào)理氣機(jī)可糾偏扶正自噬水平，益津溫液、豁痰解毒可協(xié)整機(jī)體虛實(shí)環(huán)境，增強(qiáng)胞體內(nèi)過(guò)多積聚受損細(xì)胞器的“自我清除”，減緩腫瘤發(fā)展侵襲轉(zhuǎn)移速度及耐藥抵抗。故以中醫(yī)藥干預(yù)津液代謝調(diào)控自噬“太過(guò)不及”，穩(wěn)定一種量效關(guān)系，是調(diào)整機(jī)體陰陽(yáng)平衡、防治腫瘤的重要方法。

4.1 調(diào)氣為先，以和為期

津液的運(yùn)化有賴(lài)于氣的溫煦、推動(dòng)，脾氣轉(zhuǎn)運(yùn)正常，則上養(yǎng)肺氣以通調(diào)水道，下入腎助蒸發(fā)開(kāi)合。風(fēng)藥具有辛、溫、升、散特性，可發(fā)揮調(diào)氣益津、升陽(yáng)溫液的作用。其通過(guò)宣透肺氣、升降脾胃之氣、疏肝膽之氣、鼓舞腎氣等平調(diào)人體正氣陰陽(yáng)，促進(jìn)津液的正常敷布運(yùn)轉(zhuǎn)，發(fā)揮滋潤(rùn)濡養(yǎng)之功[21-22]。如補(bǔ)中益氣湯以升麻、柴胡等藥物，取“苦平味之薄者，陰中之陽(yáng)，引脾胃中陽(yáng)氣行于陽(yáng)道及諸經(jīng)，升發(fā)陰陽(yáng)之氣，以滋春氣之和”之用[25]。研究證實(shí)，升麻中環(huán)菠蘿蜜烷型三萜類(lèi)化合物SM308可誘導(dǎo)HepG2/ADM細(xì)胞自噬流損傷，其機(jī)制與營(yíng)養(yǎng)匱乏的微環(huán)境中mTOR被抑制，激活自噬相關(guān)蛋白如Atg13、ULK1、ULK2表達(dá)有關(guān)[23-24]。

風(fēng)藥除能行氣助陽(yáng)外，針對(duì)腫瘤微環(huán)境中的主要病理產(chǎn)物，如痰濁、血瘀、濕毒等阻礙氣機(jī)運(yùn)行導(dǎo)致局部病變的情況，在補(bǔ)氣、補(bǔ)陽(yáng)藥物中少佐風(fēng)藥，發(fā)揮其助陽(yáng)增效的功用，取同氣相引之意，有效地糾正氣化生不足的病理狀態(tài)[25]。因此，風(fēng)藥既可從整體起效，調(diào)節(jié)氣機(jī)、扶陽(yáng)助氣，亦可從局部入手，開(kāi)郁散積，和其不和。

4.2 益津溫液，豁痰解毒

“津”質(zhì)地稀薄，充滿動(dòng)力且流而不散，當(dāng)以“益津”為先；“液”質(zhì)地濃稠，富含營(yíng)養(yǎng)散而不流，則以“溫液”為要。故遣藥組方需兼顧溫、散、行、和。痰濁是津停液凝、不歸正化的病理產(chǎn)物，其軟爛黏膩，狀如“瘀泥”，瘀泥內(nèi)藏枯枝敗葉、腐物臟污，如同痰濁兼夾濕濁、瘀血成毒；瘀泥阻滯于道路，如痰濁阻滯于機(jī)體，氣化不暢，血運(yùn)舉步維艱，日久化瘀，勾結(jié)成毒。對(duì)于痰毒的治療，若見(jiàn)痰化痰、遇毒解毒，一味采用寒涼解毒的攻伐之品，則治標(biāo)不治本，久則傷正愈甚[26]。

須知津液易于停滯，須溫散方行；瘀泥沾黏難去，需日曬通風(fēng)方除；痰毒膠結(jié)纏綿，需豁痰解毒方通?！盎怼蹦送ㄟ_(dá)之意，意在給予邪以出路，其通達(dá)之法，包括行氣助陽(yáng)、氣行則痰除，化陰除弊、濕去則痰孤，消積散邪，邪祛則毒解。

如益氣解毒方中人參、黃芪等可通過(guò)上調(diào)ATG16L1、LC3表達(dá)，增強(qiáng)腸上皮細(xì)胞自噬功能，表明調(diào)控自噬有利于干預(yù)濁毒所致疾病的預(yù)后轉(zhuǎn)歸[27-28]。利水消腫的豬苓、薏苡仁等藥理研究表明，豬苓多糖能作用于Colon26細(xì)胞，下調(diào)TGF-β1的分泌，對(duì)IL-2Ra等的表達(dá)具有抑制作用，發(fā)揮調(diào)節(jié)腫瘤炎性微環(huán)境的效果；薏苡仁油能影響人胰腺癌Bx PC-3細(xì)胞的生長(zhǎng)周期，下調(diào)BFGF、VEGF的表達(dá)，從而抑制腫瘤微環(huán)境中血管的生成[29]，說(shuō)明益津溫液、豁痰解毒法的代表方藥臨床應(yīng)用廣泛，在干預(yù)微環(huán)境、調(diào)控腫瘤自噬的層面效果確切。

5 結(jié)束語(yǔ)

微環(huán)境性自噬是促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素，其病理過(guò)程屬于津液代謝異常的漸進(jìn)發(fā)展。將中醫(yī)藥作為干預(yù)腫瘤細(xì)胞自噬的重要手段，打破傳統(tǒng)針對(duì)腫瘤細(xì)胞本身殺傷治療疾病的思維屏障，突破性地將津液與微環(huán)境性自噬作為研究重點(diǎn)，將中醫(yī)的辨證觀、整體觀與現(xiàn)代腫瘤微環(huán)境、細(xì)胞自噬的理念有機(jī)結(jié)合，為腫瘤研究和治療提供思維借鑒，更好地豐富腫瘤的中醫(yī)藥臨證手段和治未病研究。因此，把中醫(yī)藥干預(yù)津液代謝調(diào)控腫瘤細(xì)胞自噬作為治療腫瘤的新靶點(diǎn)，其前景值得期待。