習(xí) 靜 雷世鑫 連喜院 李秀成 脫鳴富 李宏科 溫小龍

1 甘肅醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，甘肅省平?jīng)鍪?744000； 2 甘肅醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院

B族鏈球菌(Group B streptococcus,GBS)為兼性厭氧的G+鏈球菌，正常寄居于陰道和直腸，正常女性帶菌率為30%～35%[1]，屬于條件致病菌，因妊娠期女性免疫功能降低，致使GBS乘虛而入，通過尿路逆行感染，引起圍生期孕婦發(fā)生子宮內(nèi)膜炎、絨毛膜羊膜炎等宮內(nèi)感染，易發(fā)早產(chǎn)[2]、胎膜早破、產(chǎn)褥感染等嚴(yán)重并發(fā)癥[3]，新生兒出生時(shí)亦可經(jīng)產(chǎn)道感染引發(fā)嚴(yán)重的侵襲性疾病[4]，如敗血癥、肺炎、腦膜炎及呼吸衰竭等[5]。因此，GBS在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)中占有重要的地位，而我國(guó)僅建議將GBS篩查作為一個(gè)備選項(xiàng)目，且目前缺乏大樣本、多中心的系統(tǒng)研究，國(guó)際上對(duì)GBS感染治療尚存在較大的爭(zhēng)議。本研究采用熒光PCR法[6]檢測(cè)隴東地區(qū)圍生期GBS感染情況，并對(duì)帶菌者進(jìn)行抗生素預(yù)防性治療，旨在探討該地區(qū)GBS感染現(xiàn)狀及感控的對(duì)策，為臨床診斷及治療提供可靠的依據(jù)，確保母嬰安全。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2016年8月—2018年8月產(chǎn)科門診及院部行孕前檢查的1 612例孕婦，妊娠34～37周，平均年齡(28.75±2.01)歲。受檢者在取樣前1周內(nèi)未使用任何抗生素，取樣部位未使用過栓劑和洗液。受檢者對(duì)研究?jī)?nèi)容知情并簽署知情同意書，且該項(xiàng)目經(jīng)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批。

1.2 標(biāo)本采集 先擦去生殖道內(nèi)過多的分泌物，用無菌滌綸拭子取生殖道下1/3處的分泌物，再將該拭子小心插入肛門，取直腸分泌物，確保該拭子上同時(shí)取得生殖道分泌物和直腸分泌物。將采集好的無菌拭子放回?zé)o菌拭子套管中，密閉送檢，并于24h內(nèi)盡快檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)方法 采用PCR擴(kuò)增及熒光標(biāo)記探針，檢測(cè)標(biāo)本中GBS特定基因[7]。所需試劑和操作方法按照GBS核酸檢測(cè)試劑盒(泰普生物科學(xué)有限公司)進(jìn)行。具體步驟包括：(1)試劑準(zhǔn)備；(2)樣本處理：首先將標(biāo)本加入清洗液中制成標(biāo)本懸浮液，然后通過反復(fù)加入清洗液、13 000r/min離心、重懸等步驟提取核酸待測(cè)樣品及制備陰陽對(duì)照品，最后將制備好的待測(cè)樣品和對(duì)照品加入PCR反應(yīng)管中；(3)PCR擴(kuò)增：每個(gè)PCR反應(yīng)管中分裝45μl PCRmix液，5μl待測(cè)樣品或?qū)φ掌?，將?zhǔn)備好的PCR管放置于PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增；然后利用儀器配套軟件進(jìn)行自動(dòng)分析，得到各樣品Ct值，最后進(jìn)行結(jié)果分析。

1.4 分組及治療方法 (1)將GBS陽性的126例作為研究組Ⅰ，選擇126例陰性者為對(duì)照組Ⅰ；(2)將愿意接受治療的70例GBS感染者作為研究組Ⅱ，未接受治療的56例為對(duì)照組Ⅱ。對(duì)研究組Ⅱ的孕婦臨產(chǎn)前6～8h或胎膜早破時(shí)給予敏感抗生素，首選青霉素800萬單位(哈藥集團(tuán)，H23021439)，靜脈滴注；對(duì)于青霉素過敏者給予克林霉素600mg(安徽省先鋒制藥有限公司，H20123009)，靜脈滴注[8]；對(duì)照組Ⅰ及對(duì)照組Ⅱ不做特殊處理。

1.5 觀察指標(biāo) 觀察對(duì)比各組孕婦在胎膜早破、產(chǎn)褥感染、產(chǎn)后出血及新生兒敗血癥、新生兒肺炎、新生兒腦膜炎等方面是否存在差異。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料經(jīng)χ2檢驗(yàn)，以率(%)表示，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 隴東地區(qū)圍生期孕婦GBS感染情況 受檢1 612例孕婦標(biāo)本中檢出GBS陽性126例，陽性率為7.8%。

2.2 各組不良妊娠結(jié)局對(duì)比 (1)GBS陽性研究組Ⅰ與對(duì)照組Ⅰ相比較，產(chǎn)褥感染及新生兒腦膜炎發(fā)生率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；兩組間胎膜早破、產(chǎn)后出血、新生兒敗血癥、新生兒肺炎發(fā)生率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1；(2)接受抗生素治療的研究組Ⅱ與未接受抗生素治療的對(duì)照組Ⅱ，產(chǎn)褥感染及新生兒腦膜炎發(fā)生率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；但胎膜早破、產(chǎn)后出血、新生兒敗血癥、新生兒肺炎發(fā)生率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表1 GBS陽性組與陰性組不良妊娠結(jié)局比較[n(%)]

表2 治療組與未治療組不良妊娠結(jié)局比較[n(%)]

3 討論

20世紀(jì)70年代以來GBS感染已成為歐美及其他國(guó)家母嬰感染的主要致病菌之一[9]，是誘發(fā)胎膜早破[10]、產(chǎn)褥感染[11]、產(chǎn)后出血等嚴(yán)重并發(fā)癥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，且可導(dǎo)致新生兒感染，如新生兒敗血癥、新生兒肺炎及腦膜炎等疾病，有較高的致死風(fēng)險(xiǎn)[12]，給社會(huì)及家庭帶來嚴(yán)重的危害。

目前，國(guó)內(nèi)已有多地區(qū)進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查，但孕婦與新生兒均為特殊人群，GBS定植率有一定的差別[13]，可能與研究者的取材方法和檢測(cè)方法均有關(guān)，且目前尚無GBS篩查及防治的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。GBS檢測(cè)方法主要有細(xì)菌培養(yǎng)法、抗原抗體檢測(cè)法、核酸探針檢測(cè)及聚合酶鏈反應(yīng)等[14]，其中細(xì)菌培養(yǎng)是GBS確診的指標(biāo)，但孕婦生殖道存在多種細(xì)菌，致使該法敏感度低，易造成GBS漏檢且檢測(cè)周期長(zhǎng)。本研究運(yùn)用PCR技術(shù)結(jié)合熒光標(biāo)記探針的分子診斷方法進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示隴東地區(qū)圍生期孕婦GBS感染病率為7.8%，同上海(3.7%)、南京(8.3%)、合肥(6.8%)等地區(qū)相比，感染率接近甚至略低，可能與該地區(qū)相對(duì)落后的經(jīng)濟(jì)條件及教育水平有關(guān)，許多孕婦無產(chǎn)前檢查的理念，造成一部分GBS感染者流失，從而影響了GBS的檢出率。已有研究報(bào)道，孕婦受教育程度及居住環(huán)境等與GBS感染相關(guān)[15]。

近年來GBS所致圍生期感染越來越多，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并預(yù)防治療GBS感染，降低母嬰感染率，是亟須產(chǎn)科、新生兒科及相關(guān)醫(yī)務(wù)人員共同重視的問題，其防控對(duì)策應(yīng)結(jié)合患者自身因素及地區(qū)特點(diǎn)等進(jìn)行制定。(1)在隴東地區(qū)現(xiàn)有的條件下，為保證母嬰健康，降低母嬰GBS感染，進(jìn)一步加強(qiáng)感染防控，須積極采取優(yōu)生優(yōu)育宣傳，加強(qiáng)婚前醫(yī)學(xué)檢查和孕婦孕期保??；(2)對(duì)圍生期GBS感染，及時(shí)有效地檢查并預(yù)防治療，可有效改善母嬰結(jié)局，提高患者的治愈率，為家庭及社會(huì)降低經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)；(3)早期抗生素的合理使用亦能有效控制GBS感染[16]，本研究遵循抗生素使用原則，選擇臨產(chǎn)或胎膜早破時(shí)予以治療[17]，結(jié)果顯示GBS感染抗生素治療組與未治療組間相比較，胎膜早破、產(chǎn)后出血、新生兒敗血癥、新生兒肺炎發(fā)生率顯著降低。

總之，GBS感染可引起一系列不良妊娠結(jié)局，為此必須采取積極的措施，對(duì)圍生期孕婦進(jìn)行全面篩查分析，包括其年齡、體重、孕齡及感染因素等，并根據(jù)以上制定的預(yù)防措施及時(shí)有效地感控GBS感染，減少不良妊娠結(jié)局的發(fā)生，提升人口素質(zhì)，為隴東地區(qū)廣大婦女兒童的健康帶來福音。