龐新華 檀小輝 韋麗君 梁芳 張繼 呂平 程琴 黃秋偉 周全光
摘要:【目的】利用SRAP分子標(biāo)記分析35份甘蔗種質(zhì)的遺傳多樣性,并構(gòu)建其DNA指紋圖譜,為甘蔗種質(zhì)資源的分子鑒定提供技術(shù)支持?!痉椒ā恳詻稣嵯盗校?6份)為主的35個(gè)甘蔗品種(系)為供試材料,利用SRAP分子標(biāo)記的8條正向引物和14條反向引物隨機(jī)組成112對(duì)引物組合,從中篩選出核心引物對(duì)35份甘蔗材料進(jìn)行遺傳多樣性分析,并利用POPGENE 1.32計(jì)算各材料間的Nei’s遺傳相似系數(shù),使用Ntsyspc 2.1 UPGMA方法進(jìn)行聚類(lèi)分析,并構(gòu)建DNA指紋圖譜?!窘Y(jié)果】從112對(duì)引物組合中篩選出4對(duì)核心引物組合(Me3/Em8、Me4/Em8、Me5/Em8和Me6/Em2),利用其從35份甘蔗材料中共擴(kuò)增出102條條帶,平均每對(duì)引物的擴(kuò)增條帶數(shù)、多態(tài)性條帶數(shù)和多態(tài)性比率分別為25.5條、21條和81.20%,各引物組合擴(kuò)增的條帶數(shù)為21~30條,多態(tài)性比率為61.90%~96.55%。根據(jù)Nei’s遺傳相似系數(shù),在遺傳相似系數(shù)為0.751時(shí),可將35份甘蔗材料分為五大類(lèi),26個(gè)涼蔗系列品種(系)(除涼蔗07-54外)均歸在I類(lèi)和II類(lèi),說(shuō)明涼蔗系列的親緣關(guān)系較近;桂糖73-167和農(nóng)墾2號(hào)分別被單獨(dú)歸為一類(lèi),說(shuō)明這兩個(gè)品種(系)間及與其他品種(系)間的親緣關(guān)系較遠(yuǎn);I類(lèi)中除涼蔗系列之外,還包括粵糖91-976和ROC16,說(shuō)明這兩個(gè)品種(系)有可能是I類(lèi)中涼蔗系列的雜交親本或存在血緣關(guān)系;II類(lèi)中除涼蔗系列外,還包括B8、ROC22、ROC24和ROC10,說(shuō)明這4個(gè)品種(系)的親緣關(guān)系較近,ROC系列可能存在II類(lèi)中涼蔗系列的親本。利用這4對(duì)核心引物組合構(gòu)建的DNA指紋圖譜均可將35份甘蔗材料鑒別開(kāi)?!窘Y(jié)論】35份甘蔗材料的遺傳多樣性豐富,構(gòu)建的DNA指紋圖譜可用于甘蔗品種(系)鑒定。
關(guān)鍵詞: 甘蔗;SRAP分子標(biāo)記;遺傳多樣性;DNA指紋圖譜
中圖分類(lèi)號(hào): S566.102.4 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號(hào):2095-1191(2019)06-1157-08
Abstract:【Objective】The genetic diversity of 35 sugarcane germplasm resources was analyzed by SRAP molecular marker, and 35 fingerprints of sugarcane germplasm were constructed to provide technical support for molecular identification of sugarcane germplasm resources. 【Method】The 35 sugarcane varieties(lines) from Liangzhe series(26 varieties) were used as materials. A total of 112 primer pairs which were randomly formed by 8 forward primers and 14 reverse pri-mers of SRAP molecular markers were obtained. Core primers were selected from the above primers to? analyze the genetic diversity of 35 sugarcane materials, and POPGENE 1.32 was used to calculate the Nei’s genetic similarity coefficient between the tested varieties. Cluster analysis was performed using Ntsyspc 2.1 UPGMA method, and DNA fingerprint map was constructed. 【Result】A total of 102 bands were amplified from 35 tested sugarcane materials by the four pairs of core primer combinations(Me3/Em8, Me4/Em8, Me5/Em8 and Me6/Em2) selected from 112 pairs of primers. The average amplified bands per pair of primers was 25.5, polymorphic bands were 21 and average percentage of polymorphic bands per pair of primers was 81.20%. The bands amplified of each combination ranged from 21 to 30, percentage of polymorphism was 61.90%-96.55%. According to Nei’s genetic similarity coefficient, when the genetic similarity coefficient was 0.751, the sugarcane germplasms could be divided into five categories. Among the 26 Liangzhe series varieties(lines), apart from Liangzhe 07-54, the rest materials were in category I or category II. It indicated that the genetic relationship of Liangzhe series were close. Guitang 73-167 and Nongken 2 were in each category by their own, indicating these two varie-ties(lines) had far genetic relationship with others. In category I, besides Liangzhe series, there were Yuetang 91-976 and ROC16, which showed that the two varieties might be hybrid parents of Liangzhe series in this category or had gene-tic relationship. In category II, besides Liangzhe series, there were B8, ROC22, ROC24 and ROC10, indicating the four varieties(lines) had close relationship,? and there might be parents of Liangzhe series in ROC series. The DNA fingerprint map by the four core primer combinations could identified the 35 sugarcane materials. 【Conclusion】The genetic diversity of 35 sugarcane germplasms is rich, and the construction of DNA fingerprint map provides a theoretical basis for the identification of sugarcane varieties(lines).
Key words: sugarcane; SRAP molecular marker; genetic diversity; DNA fingerprint map
0 引言
【研究意義】我國(guó)甘蔗育種工作始于20世紀(jì)50年代,目前已選育出大量高產(chǎn)、高糖等品質(zhì)優(yōu)良的新品種(系)(鄧海華和張瓊,2006;王澤平等,2012)。甘蔗種質(zhì)遺傳多樣性越來(lái)越豐富,僅靠表型性狀對(duì)品種進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定,難度很大。已有研究發(fā)現(xiàn),利用分子標(biāo)記技術(shù)可有效分析甘蔗種質(zhì)的遺傳多樣性及快速準(zhǔn)確地鑒定品種特性,從而對(duì)甘蔗種質(zhì)資源進(jìn)行有效保護(hù)(劉新龍等,2010;朱專(zhuān)為,2018)。其中,SRAP分子標(biāo)記具有重復(fù)性好、多態(tài)性高、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),已廣泛用于遺傳多樣性分析、遺傳圖譜構(gòu)建、親緣關(guān)系鑒定等(Li and Quiros,2001;廖詩(shī)童等,2012;石悅等,2018;石秀蘭等,2018;周兆禧等,2018)。因此,利用SRAP分子標(biāo)記進(jìn)行甘蔗品種(品系)的遺傳多樣性分析及其指紋數(shù)據(jù)圖譜構(gòu)建,對(duì)甘蔗種質(zhì)的保存保護(hù)、鑒定和創(chuàng)新利用具有重要意義?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前,利用SRAP分子標(biāo)記進(jìn)行植物遺傳多樣性分析的研究已有大量報(bào)道。班騫等(2018)利用SSR和SRAP分子標(biāo)記構(gòu)建14個(gè)苦荬菜品種(系)的DNA指紋圖譜,結(jié)果表明,苦荬菜的遺傳多樣性較豐富,構(gòu)建的DNA指紋圖譜可區(qū)分供試各品種(系)。陳倩倩等(2018)利用SRAP和EST-SSR分子標(biāo)記對(duì)10份香椿種質(zhì)進(jìn)行遺傳多樣性分析,結(jié)果表明,在遺傳相似系數(shù)0.85774時(shí)10份香椿分為三大類(lèi),遺傳多樣性較豐富。李永平等(2018)利用SRAP分子標(biāo)記對(duì)44個(gè)芥菜品種進(jìn)行遺傳多樣性分析,結(jié)果表明,在遺傳相似系數(shù)為0.67時(shí)可將其分為四大類(lèi),聚類(lèi)結(jié)果與形態(tài)學(xué)分類(lèi)結(jié)果相吻合。王曉燚等(2018)利用SRAP和SSR分子標(biāo)記構(gòu)建了2個(gè)杏扁品種龍王帽和優(yōu)一的分子連鎖圖,獲得132個(gè)SRAP分子標(biāo)記和17個(gè)SSR分子標(biāo)記,構(gòu)建了兩個(gè)親本的遺傳連鎖圖譜。王少銘等(2018)利用SRAP和ISSR分子標(biāo)記進(jìn)行48份薄荷種質(zhì)的遺傳多樣性及親緣關(guān)系分析,結(jié)果表明,薄荷種質(zhì)的遺傳多樣性豐富,但種內(nèi)遺傳變異較小;在遺傳相似系數(shù)為0.73處,48份薄荷種質(zhì)分為五大類(lèi),主要由品種差異決定,受地域影響較小,與形態(tài)標(biāo)記分類(lèi)相吻合。曾紹貴等(2018)將形態(tài)指標(biāo)和SRAP分子標(biāo)記相結(jié)合對(duì)地理來(lái)源不同的100份朝天椒種質(zhì)進(jìn)行遺傳多樣性分析,結(jié)果表明,SRAP聚類(lèi)結(jié)果與品種地理來(lái)源相吻合,地理來(lái)源相鄰的品種遺傳多樣性相似。朱靜嫻等(2018)利用SRAP分子標(biāo)記對(duì)國(guó)內(nèi)外的大球蓋菇菌株進(jìn)行遺傳多樣性分析,結(jié)果表明,在遺傳相似系數(shù)為0.84處,23株菌株可分為三大類(lèi)群,遺傳多樣性豐富,利用SRAP分子標(biāo)記能鑒別區(qū)分各菌株,并得出菌株間親緣關(guān)系。周兆禧等(2018)研究發(fā)現(xiàn),只有通過(guò)SRAP和ISSR分子標(biāo)記才能鑒別區(qū)分69份紅毛丹種質(zhì),并利用篩選出的引物成功構(gòu)建樂(lè)紅毛丹種質(zhì)的DNA指紋圖譜。但利用SRAP分子標(biāo)記對(duì)甘蔗種質(zhì)遺傳多樣性分析的研究較少,廖詩(shī)童等(2012)利用SRAP分子標(biāo)記對(duì)35個(gè)不同耐寒甘蔗品種的的遺傳多樣性進(jìn)行分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)SRAP分子標(biāo)記對(duì)耐寒性較差的甘蔗品種(系)聚類(lèi)效果較好。呂平等(2016)將巴西甘蔗DNA導(dǎo)入桂熱甘蔗03-75品系,利用SRAP分子標(biāo)記分析發(fā)現(xiàn)受體甘蔗03-75中帶有供體甘蔗的特異條帶?!颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】至今,鮮見(jiàn)基于SRAP分子標(biāo)記進(jìn)行甘蔗遺傳多樣性分析、DNA指紋圖譜構(gòu)建及種質(zhì)鑒定等方面的研究報(bào)道?!緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】以涼蔗系列品種(系)為主的35份甘蔗種質(zhì)為材料,采用SRAP分子標(biāo)記探討其遺傳多樣性及親緣關(guān)系,并構(gòu)建DNA指紋圖譜,為參試甘蔗品種(系)的鑒定、保護(hù)及開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1. 1 試驗(yàn)材料
供試材料為35個(gè)甘蔗品種(系),包括26個(gè)涼蔗系列品種(系),4個(gè)新臺(tái)糖系列品種(系),5個(gè)其他品種(系)(表1),均由廣西亞熱帶作物研究所廣西農(nóng)墾甘蔗研究所甘蔗種質(zhì)圃保存提供。正、反向引物(Li and Quiros,2001)(表2)委托生工生物工程(上海)股份有限公司合成。主要試劑:SDS、氯仿、異戊醇等生化試劑及DNA Marker、MIX酶等分子試劑均購(gòu)自生工生物工程(上海)股份有限公司。主要儀器設(shè)備:GEL DOCXR全自動(dòng)凝膠成像系統(tǒng)(BIO-RAD,美國(guó))、PCR儀(BIO-RAD,美國(guó))、Smart SpecTM Plus核酸蛋白含量測(cè)定儀(BIO-RAD,美國(guó))和DYY-6C雙穩(wěn)定定時(shí)電泳儀(北京六一儀器廠)。
1. 2 試驗(yàn)方法
1. 2. 1 樣品采集 在甘蔗生長(zhǎng)旺盛期分別剪取植株頂端的心葉放入自封袋,置入液氮浸泡5 min后取出,迅速放入-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1. 2. 2 甘蔗基因組DNA提取 采取改良的SDS法提取樣品基因組總DNA,用分光光度計(jì)測(cè)定DNA的濃度和純度,然后用1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA的完整性,-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1. 2. 2 SRAP-PCR擴(kuò)增及引物篩選 利用正、反向引物隨機(jī)組成112對(duì)引物組合(表2)。反應(yīng)體系:2×Taq Mix 12.5 μL,10 ng/μL DNA模板2.0 μL,10 μmol/L正、反向引物各0.5 μL,ddH2O補(bǔ)足至25.0 μL。擴(kuò)增程序:94 ℃預(yù)變性5 min;94 ℃ 1 min,35 ℃ 1 min,72 ℃ 1 min,進(jìn)行5個(gè)循環(huán);94 ℃ 1 min,50 ℃ 1 min,72 ℃ 1 min,進(jìn)行30個(gè)循環(huán);72 ℃延伸10 min。PCR產(chǎn)物用1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)(120 V恒壓電泳30 min),EB染色后觀察電泳圖譜,從112對(duì)引物組合中篩選出多態(tài)性較高、條帶清晰且穩(wěn)定的引物組合,再用6%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)(180 V恒壓電泳55 min),銀染后拍照進(jìn)一步篩選核心引物組合。
1. 3 統(tǒng)計(jì)分析
觀察電泳圖譜,在同一遷移位置上,有擴(kuò)增條帶記為“1”,無(wú)條帶記為“0”,從而構(gòu)成“0,1”矩陣。利用POPGENE 1.32計(jì)算甘蔗種質(zhì)間的Nei’s遺傳相似系數(shù),利用Ntsyspc 2.1的UPGMA方法構(gòu)建聚類(lèi)圖。根據(jù)聚類(lèi)結(jié)果,篩選出可鑒別甘蔗品種(系)的引物組合,再根據(jù)該引物組合的“0,1”矩陣,手動(dòng)構(gòu)建DNA指紋圖譜。
2 結(jié)果與分析
2. 1 SRAP引物的多態(tài)性分析結(jié)果
對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),結(jié)果從112對(duì)引物組合中篩選出多態(tài)性高、條帶清晰且穩(wěn)定的引物組合13對(duì)。圖1為部分引物組合PCR產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果。再經(jīng)非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)從13對(duì)引物組合中篩選出多態(tài)性、條帶數(shù)、穩(wěn)定性等綜合表現(xiàn)均較好的核心引物組合4對(duì),分別為Me3/Em8、Me4/Em8、Me5/Em8和Me6/Em2,用于遺傳多樣性分析及DNA指紋圖譜構(gòu)建。圖2為核心引物組合Me4/Em8 PCR產(chǎn)物的非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果。
由表3可知,4對(duì)核心引物組合從35份供試甘蔗材料中共擴(kuò)增出102條條帶,平均每對(duì)引物的擴(kuò)增條帶數(shù)、多態(tài)性條帶數(shù)和多態(tài)性比率分別為25.5條、21條和81.20%,表明甘蔗種質(zhì)的遺傳多樣性較豐富、多態(tài)性較高。各引物組合擴(kuò)增的條帶數(shù)為21~30條,其中Me4/Em8引物組合擴(kuò)增的條帶數(shù)最多,為30條,Me3/Em8引物組合擴(kuò)增的條帶最少,為21條。各引物組合擴(kuò)增出的多態(tài)性條帶數(shù)為13~28條,其中Me5/Em8引物組合擴(kuò)增的多態(tài)性條帶數(shù)最多,為28條,Me3/Em8引物組合擴(kuò)增的多態(tài)性條帶數(shù)最少,為13條。各引物組合擴(kuò)增的多態(tài)性比率為61.90%~96.55%,其中Me5/Em8引物組合的多態(tài)性比率最高,為96.55%,Me3/Em8引物組合的多態(tài)性比率最低,為61.90%。
2. 2 聚類(lèi)分析結(jié)果
根據(jù)Nei’s遺傳相似系數(shù),采用UPGMA方法對(duì)35份供試甘蔗材料進(jìn)行聚類(lèi)分析,結(jié)果如圖3所示。從圖3可看出,在遺傳相似系數(shù)為0.751時(shí),可將35份甘蔗材料分為五大類(lèi):I類(lèi)包含18份甘蔗材料,分別為涼蔗01-96、涼蔗01-123、涼蔗02-7、涼蔗02-188、涼蔗01-190、粵糖91-976、涼蔗03-7、涼蔗03-31、涼蔗03-81、涼蔗03-83、涼蔗01-204、ROC16、涼蔗02-6、涼蔗02-186、涼蔗03-23、涼蔗02-183、涼蔗05-4和涼蔗2號(hào);II類(lèi)包含13份甘蔗材料,分別為涼蔗03-75、涼蔗05-36、涼蔗07-34、涼蔗05-58、涼蔗07-48、涼蔗07-36、涼蔗07-53、B8、ROC22、ROC24、涼蔗07-45、涼蔗07-49和ROC10;III類(lèi)包含2份甘蔗材料,分別為涼蔗07-54和福農(nóng)39;IV類(lèi)僅含1份甘蔗材料,為桂糖73-167;V類(lèi)也僅含1份甘蔗材料,為農(nóng)墾2號(hào)。可見(jiàn),26份涼蔗系列甘蔗種質(zhì),除涼蔗07-54外,其余均歸在I類(lèi)和II類(lèi),說(shuō)明涼蔗系列的親緣關(guān)系較近;桂糖73-167和農(nóng)墾2號(hào)分別被單獨(dú)歸為一類(lèi),說(shuō)明這兩個(gè)品種(系)間及與其他品種(系)間的親緣關(guān)系較遠(yuǎn);I類(lèi)中除涼蔗系列外,還包括粵糖91-976和ROC16,說(shuō)明這兩個(gè)品種(系)有可能是I類(lèi)中涼蔗系列的雜交親本或存在血緣關(guān)系;II類(lèi)中除涼蔗系列外,還包括B8、ROC22、ROC24和ROC10,說(shuō)明這4個(gè)品種(系)的親緣關(guān)系較近,ROC系列可能存在II類(lèi)中涼蔗系列的親本。
2. 3 35份甘蔗材料的指紋圖譜構(gòu)建
將篩選出的4對(duì)核心引物組合用于構(gòu)建35份甘蔗材料的DNA指紋圖譜,結(jié)果發(fā)現(xiàn)這4對(duì)核心引物組合均可鑒別所有供試種質(zhì)。Me5/Em8核心引物組合構(gòu)建的DNA指紋圖譜如圖4所示。在品種鑒定時(shí),利用這4對(duì)引物組合對(duì)待檢測(cè)的甘蔗材料進(jìn)行PCR擴(kuò)增,再經(jīng)非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè),最后將該材料的多態(tài)性條帶與構(gòu)建的DNA指紋圖譜進(jìn)行對(duì)比,即可準(zhǔn)確鑒定該材料為本研究供試35份甘蔗材料中的具體品種(系)。因此,構(gòu)建的DNA指紋圖譜可對(duì)甘蔗種質(zhì)發(fā)揮一定鑒定和保護(hù)作用。
3 討論
本研究從112對(duì)引物組合中篩選出多態(tài)性、條帶數(shù)、穩(wěn)定性等綜合表現(xiàn)較好的4對(duì)核心引物組合,平均每對(duì)引物擴(kuò)增的條帶數(shù)為25.5條,多態(tài)性比率為81.20%,與廖詩(shī)童等(2012)的研究結(jié)果相似,但高于賀爾奇等(2016)在果蔗中用毛細(xì)管電泳篩選出的引物多態(tài)性比率,其原因可能是瓊脂糖凝膠電泳和非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳雙重篩選出的引物多態(tài)性較毛細(xì)管電泳篩選得到的引物多態(tài)性更豐富,也高于苦荬菜(班騫,2018)、芥菜(李永平等,2018)、薄荷(王少銘等,2018)、酸豆(張永強(qiáng)等,2018)和紅毛丹(周兆禧等,2018)等物種SRAP分子標(biāo)記引物的多態(tài)性比率,說(shuō)明與其他物種相比,SRAP分子標(biāo)記可能更適合于開(kāi)展甘蔗的遺傳多樣性分析和DNA指紋數(shù)據(jù)圖譜構(gòu)建等相關(guān)研究,但仍需進(jìn)一步驗(yàn)證。
本研究聚類(lèi)分析結(jié)果顯示,在遺傳相似系數(shù)為0.751處可將35份甘蔗材料分為五大類(lèi),其中,除涼蔗07-54外,涼蔗系列甘蔗種質(zhì)歸到I類(lèi)和II類(lèi),表明涼蔗系列的親緣關(guān)系較近;除涼蔗系列外,I類(lèi)中還有粵糖91-976和ROC16,II類(lèi)中還包括B8、ROC22、ROC24和ROC10,經(jīng)進(jìn)一步調(diào)查發(fā)現(xiàn),這些品種是部分涼蔗系列品種(系)的雜交親本,親緣關(guān)系較近,但第III類(lèi)、第IV類(lèi)和第V類(lèi)的甘蔗材料間及與其他品種(系)間的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。
長(zhǎng)期以來(lái),我國(guó)農(nóng)作物種質(zhì)資源生產(chǎn)尚不規(guī)范,主要以植物的外部性狀鑒別不同作物品種,盡管簡(jiǎn)單直觀,但不同植物品種在不同環(huán)境甚至同一品種在同一環(huán)境均可能會(huì)表現(xiàn)不同性狀,在鑒別時(shí)易出現(xiàn)錯(cuò)誤,加之一些作物品種間相似度很高,尤其是甘蔗品種(系),有時(shí)可能來(lái)源于同一雜交親本,依靠表型特征進(jìn)行鑒定錯(cuò)誤率較高,最終造成引種混亂或品種造假現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生。隨著分子生物學(xué)的不斷發(fā)展,越來(lái)越多的研究者開(kāi)始從分子水平研究品種鑒定的方法。從DNA水平上對(duì)品種進(jìn)行鑒定具有快速準(zhǔn)確、不受環(huán)境影響等諸多優(yōu)點(diǎn),DNA指紋圖譜技術(shù)也應(yīng)運(yùn)而生,在植物新品種(系)資源的鑒定上,將農(nóng)藝性狀觀測(cè)與分子標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合,可得到更全面、更可靠的結(jié)果。SRAP分子標(biāo)記在作物種質(zhì)資源鑒定及DNA指紋圖譜構(gòu)建中已得到廣泛應(yīng)用。徐宗大等(2011)、劉君等(2012)、唐源江等(2015)、石秀蘭等(2018)、張安世等(2018)分別利用SRAP分子標(biāo)記構(gòu)建了玫瑰、狗牙根、國(guó)蘭、牧草、獼猴桃等植物的DNA指紋圖譜,均可對(duì)以上植物進(jìn)行準(zhǔn)確地品種鑒定。本研究利用Me4/Em8、Me5/Em8、Me6/Em2和Me3/Em8等4對(duì)核心引物組合構(gòu)建的DNA指紋圖譜均可把35份甘蔗材料完全鑒別開(kāi),說(shuō)明這4對(duì)核心引物是涼蔗系列鑒別的關(guān)鍵核心引物,可有效分析出其親緣關(guān)系,可用于甘蔗種質(zhì)的知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)。
4 結(jié)論
35份供試甘蔗材料的遺傳多樣性豐富,構(gòu)建的DNA指紋圖譜可用于甘蔗品種(系)鑒定。
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(責(zé)任編輯 陳 燕)
南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)2019年6期