王首帆 徐宜厚 徐愛琴 朱立宏 秦宗碧 邱百怡

摘要 目的：探析復(fù)方黃芩“水膜”濕敷治療急性濕疹的療效及其機(jī)制。方法：選取2014年9月至2016年9月武漢市中醫(yī)醫(yī)院皮膚科收治的急性濕疹患者60例，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組和觀察組，每組30例，2組均口服氯苯那敏作為基礎(chǔ)治療;對(duì)照組為基礎(chǔ)治療加曲咪新乳膏治療;觀察組為基礎(chǔ)治療加復(fù)方黃芩“水膜”濕敷。評(píng)估急性濕疹皮損嚴(yán)重程度和瘙癢程度，同時(shí)采用流式細(xì)胞儀檢測自然殺傷細(xì)胞（NK），酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測白細(xì)胞介素-2（IL-2）、可溶性白細(xì)胞介素2受體（sIL-2R）和5-羥色胺（5-HT）的表達(dá)情況。結(jié)果：治療后2組皮損積分和皮損面積均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且觀察組皮損積分和皮損面積低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后2組瘙癢積分均有明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且觀察組瘙癢積分低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后2組NK、IL-2均有明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且觀察組NK、IL-2高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后2組5-羥色胺和sIL-2R均有明顯下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且觀察組5-羥色胺和sIL-2R均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：復(fù)方黃芩“水膜”能有效改善急性濕疹患者臨床皮損和瘙癢等癥狀，其機(jī)制可能與改善患者細(xì)胞免疫功能和降低致癢因子5-羥色胺有關(guān)。

關(guān)鍵詞 復(fù)方黃芩“水膜”濕敷;急性濕疹;療效;機(jī)制

Abstract Objective：To observe the curative effects of wet dressing of scutellaria baicalensis “water film” on acute eczema and explore the therapeutic mechanism. Methods：A total of 60 cases of patients， who were admitted to Wuhan Traditional Chinese Medicine Hospital from 2014 September to 2016 September in dermatology department， were randomly divided into control group and observation group， with 30 cases in each group. Both two groups were given chlorpheniramine as basic treatment. The control group was treated on the basis of the observation group with Triamicinolone Acetonide Acetate and Miconazole Nitrate Neomycin Sulfate Cream. The observation group was treated with wet dressing of scutellaria baicalensis “water film” on the basis of the basic treatment. The acute eczema severity of skin lesions and pruritus was evaluated， and flow cytometry was used to detect natural killer cells （NK）， enzyme linked immunosorbent assay （ELISA） detection of interleukin-2 （IL-2） and soluble interleukin 2 receptor （sIL-2R） and five hydroxytryptamine （5-HT） expression.Results：After treatment， the lesions and lesion areas of two groups were significantly decreased （P<0.05）， and the skin lesions and lesion areas in the observation group were lower than those in the control group （P<0.05）. After treatment， the itching scores of two groups were significantly lower （P<0.05）， and the itch score of the observation group was lower than that of the control group （P<0.05）. After treatment， NK and IL-2 of the two groups increased significantly （P<0.05）， and the NK and IL-2 in observation group were higher than the control group （P<0.05）. After treatment， 5-HT and sIL-2R of the two groups were significantly lower （P<0.05）， and 5-HT and sIL-2R of the observation group were lower than the control group （P<0.05）. Conclusion：Wet dressing of scutellaria baicalensis “water film” treatment can effectively improve the clinical skin lesions and pruritus of patients with acute eczema， and its mechanism may be related to the improvement of cellular immune function and the reduction of itching factor 5-HT.

Key Words Wet dressing of scutellaria baicalensis “water film”; Acute eczema; Curative effects; Mechanism

中圖分類號(hào)：R242;R758.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.06.034

急性濕疹（Acute Eczema）是一種具有起病急為特點(diǎn)的伴有皮膚損傷如紅斑、滲出等并伴劇烈瘙癢癥狀的常見炎性皮膚病，急性濕疹的發(fā)病率和復(fù)發(fā)率均較高，人體各個(gè)部位可出現(xiàn)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)性皮損，因此急性濕疹患者多存在不同程度的免疫功能紊亂[1-4]。自然殺傷細(xì)胞（NK）屬于免疫淋巴樣細(xì)胞，在生理情況下NK能夠行使免疫監(jiān)督的功能同時(shí)具有抗感染免疫的功效，而白細(xì)胞介素-2（IL-2）的表達(dá)對(duì)NK的細(xì)胞活性具有重要的影響力，當(dāng)IL-2減少時(shí)，NK細(xì)胞活性降低，可溶性白細(xì)胞介素-2受體（sIL-2R）升高抑制IL-2表達(dá);而急性濕疹多出現(xiàn)瘙癢癥狀，可能與5-羥色胺（5-HT）、組胺等致敏物質(zhì)的分泌增多有關(guān)，致局部毛細(xì)血管擴(kuò)張而引起瘙癢癥狀[5-6]。我們臨床上使用復(fù)方黃芩“水膜”濕敷治療急性濕疹，患者反映甚好，現(xiàn)進(jìn)行科學(xué)規(guī)范的臨床研究對(duì)復(fù)方黃芩“水膜”濕敷治療急性濕疹進(jìn)行臨床療效觀察和相關(guān)機(jī)制探析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年9月至2016年9月于武漢市中醫(yī)醫(yī)院皮膚科收治的患者共60例，根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組和觀察組，每組30例。觀察組中男16例，女14例，年齡14～60歲，平均年齡（34.4±5.36）歲。病程1～15 d，平均年齡（4.2±1.1）d;對(duì)照組中男17例，女13例，年齡15～61歲，平均年齡（35.1±6.04）歲。病程1～16 d，平均病程（4.7±1.5）d。2組患者的年齡、性別、病程等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照《臨床皮膚病學(xué)》中急性濕疹的診斷標(biāo)準(zhǔn)，如起病急、病程短，皮損可能涉及頭面部、軀干和四肢等;中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：符合《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》制定的濕熱證型急性濕疹的中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)，其中急性濕疹濕熱證的臨床表現(xiàn)為發(fā)病急，皮損鮮紅、灼熱等顯著，且皮損處因癢難忍抓撓而糜爛、滲出，或伴有心煩口渴、便干尿黃、舌紅苔黃或黃膩、脈滑數(shù)[7-8]。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)

1）符合本研究急性濕疹的中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn);2）年齡14～61歲患者;3）無藥物過敏史，且近2周未內(nèi)服類固醇激素或外用皮質(zhì)激素的患者;4）無其他重大臟器病變并簽署知情同意書者。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn)

1）不符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)和納入標(biāo)準(zhǔn)者，或符合診斷納入標(biāo)準(zhǔn)的妊娠和哺乳期婦女;2）年齡在14歲以下，61歲以上者;3）近2周內(nèi)服類固醇激素或外用皮質(zhì)激素的患者;4）不接受本研究治療方案，并拒絕簽署知情同意書者。

1.5 脫落與剔除標(biāo)準(zhǔn)

1）發(fā)生過敏現(xiàn)象或者出現(xiàn)其他嚴(yán)重并發(fā)癥者;2）治療期間因其他因素?zé)o法繼續(xù)完成本研究者;3）本研究中途患者及家屬提出異議要求退出者。

1.6 治療方法

1.6.1 基礎(chǔ)治療 口服氯苯那敏（廣東順峰藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H44023442），4 mg/次，3次/d。

1.6.2 對(duì)照組 基礎(chǔ)治療和用曲咪新乳膏（廣州白云山制藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H44024380）涂抹于急性濕疹皮損處，2次/d，療程2周。

1.6.3 觀察組 基礎(chǔ)治療加復(fù)方黃芩“水膜”濕敷，復(fù)方黃芩“水膜”由黃芩30 g、虎杖25 g、苦參6 g、穿心蓮25 g和十大功勞25 g組成，加入400 mL水，浸泡30 min，煎煮得100 mL濃縮液，取3層無菌紗布浸入藥液約5 min，待紗布充分吸收復(fù)方黃芩藥液后將紗布覆蓋于急性濕疹皮損處，形成“水膜”，10 min/次，2次/d，療程2周。

1.7 觀察指標(biāo)

1.7.1 急性濕疹皮損嚴(yán)重程度評(píng)估 首先檢查患者皮損形態(tài)，并根據(jù)皮損情況進(jìn)行評(píng)分，所有皮損情況分為紅斑或暗紅斑、丘疹或小水皰、糜爛、滲出和肥厚及苔蘚化等6種，每種又根據(jù)無=0分、輕度=1分、中度=2分、重度=3分進(jìn)行評(píng)分，總分0～18分，分?jǐn)?shù)越低皮損情況越好;皮損面積以患者單手掌作為記分單位，一個(gè)手掌面積約為體表總面積的1%，無皮損的皮膚記為0分，當(dāng)皮損面積≤1%記5分，介于1%～5%之間記10分，5%以上記15分。

1.7.2 急性濕疹瘙癢程度評(píng)估 此項(xiàng)積分的特殊性，由患者自評(píng)，根據(jù)患者瘙癢程度無=0分、輕度=5分、中度=10分、重度=15分進(jìn)行評(píng)分，總分0～15分，分?jǐn)?shù)越低越不癢。

1.7.3 急性濕疹機(jī)制 1）采用流式細(xì)胞儀檢測自然殺傷細(xì)胞（NK）：于治療前后檢測抽取患者外周血5 mL，根據(jù)單核細(xì)胞懸液提取步驟采用人淋巴細(xì)胞分離液提取外周單核細(xì)胞200 μL，單核細(xì)胞的細(xì)胞濃度保持在1×106個(gè)/mL，并將其種置于含有10%胎牛血清RPMI 1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)，24 h后予以培養(yǎng)瓶加入事先配制的工作液進(jìn)行細(xì)胞刺激，并置于37 ℃，5%CO2環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)4～6 h，培養(yǎng)結(jié)束后予培養(yǎng)瓶中用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗，后進(jìn)行細(xì)胞收集，再加入相應(yīng)的NK熒光素進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記，隨后將單核細(xì)胞懸液置于流式細(xì)胞儀（型號(hào)：6HT，美國Guave公司）中檢測，所有操作流程均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。2）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測：治療前后抽取空腹外周血液5 mL，將所采集血液高速離心儀離心（3 000 r/min）10 min后，將標(biāo)本分別按每次用量分裝置于-20 ℃冰箱冰凍保存。檢測時(shí)采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測定白細(xì)胞介素-2（IL-2）、可溶性IL-2受體（sIL-2R）和5-羥色胺（5-HT），ELISA檢測試劑盒均購自江蘇科晶生物有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，將預(yù)先包被IL-2、sIL-2R和5-羥色胺的微孔中依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記檢測抗體，溫育洗滌，底物TMB顯色，使用酶標(biāo)儀在450 nm波長下測定A值，計(jì)算樣品濃度。

1.8 療效判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)療效指數(shù)判定臨床療效，療效指數(shù)=[治療前（皮損形態(tài)積分+皮損面積分+瘙癢積分）-治療后（皮損形態(tài)積分+皮損面積分+瘙癢積分）]/治療前（皮損形態(tài)積分+皮損面積分+瘙癢積分）×100%;療效指數(shù)≥95%為痊愈，療效指數(shù)60%～95%之間為顯效，療效指數(shù)30%～60%之間為有效，療效指數(shù)低于30%為無效。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用（±s）表示，采用t檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者急性濕疹皮損嚴(yán)重程度比較

治療前2組皮損積分和皮損面積差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后2組皮損積分和皮損面積均有明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且觀察組皮損積分和皮損面積低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 2組患者急性濕疹瘙癢積分比較

治療前，2組瘙癢積分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后，2組瘙癢積分均有明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且觀察組瘙癢積分低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 2組患者免疫功能比較

治療前，2組NK、IL-2和sIL-2R差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后，2組NK、IL-2均有明顯上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且觀察組NK、IL-2高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;而sIL-2R低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P&lt;0.05）。見圖1。

2.4 2組患者5-羥色胺比較

治療前，2組5-羥色胺比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;治療后，2組5-羥色胺有明顯下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且觀察組5-羥色胺低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見圖2。

3 討論

縱觀古今文獻(xiàn)未見濕疹的病名，由條文記載對(duì)應(yīng)臨床癥狀可得濕疹屬于中醫(yī)學(xué)“浸淫瘡”“廯”和“繡球風(fēng)”等的范疇。清代《醫(yī)宗金鑒》對(duì)急性濕疹的病因病機(jī)做了精煉的概括和總結(jié)：由“心火脾濕受風(fēng)而成”體虛之本;急性濕疹病因病機(jī)在標(biāo)由“濕熱內(nèi)搏，滯于膚腠，外為風(fēng)乘，不得宣通”;濕熱內(nèi)結(jié)，氣血失暢，心火旺盛，脾虛生濕，心火旺而耗血傷陰，脾虛，脾失健運(yùn)，濕熱內(nèi)蘊(yùn)而血燥風(fēng)動(dòng)，不能及時(shí)滋養(yǎng)肌膚;又外感風(fēng)濕熱邪，心主血脈，血熱偏虛，濕熱淫邪內(nèi)外相搏，肌膚侵淫而發(fā)瘡，因此治以清熱燥濕，涼血化瘀。復(fù)方黃芩以黃芩30 g、虎杖25 g、穿心蓮25 g和十大功勞25 g組方而成，黃芩藥性苦下清熱燥濕，藥性寒以涼血解毒是以為君藥，現(xiàn)代藥理學(xué)也表明黃芩中主要化學(xué)物質(zhì)黃酮類化合物具有抗炎抑制組胺釋放，抑制變態(tài)反應(yīng)，提高巨噬細(xì)胞和NK的功能作用[9-11];穿心蓮清熱解毒、消腫止痛，助黃芩清熱瀉火之功;虎杖清熱解毒，散瘀定痛，對(duì)癰腫瘡毒的療效顯著;十大功勞清熱補(bǔ)虛，標(biāo)本兼治，使?jié)駸岫救ザ粋?。本研究結(jié)果顯示復(fù)方黃芩“水膜”濕敷急性濕疹皮損處能有效改善其皮損癥狀、皮損面積和瘙癢程度，為探析其療效機(jī)制，我們做了進(jìn)一步研究。

急性濕疹的發(fā)病屬于遲發(fā)型超敏反應(yīng)，在這一變態(tài)反應(yīng)類型中，細(xì)胞的免疫活性發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)中，作為免疫調(diào)節(jié)淋巴因子的IL-2對(duì)淋巴樣細(xì)胞NK具有調(diào)節(jié)作用，能夠增強(qiáng)NK的活性，增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能;而在人體中為了維持內(nèi)環(huán)境的平衡狀態(tài)，有免疫促進(jìn)物IL-2的存在就必須有能有與之抗衡的免疫抑制物存在，這一物質(zhì)即為sIL-2R，它通過與IL-2結(jié)合降低人體內(nèi)IL-2水平而形成一個(gè)負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，進(jìn)而控制NK的活性，保證其穩(wěn)定的免疫監(jiān)督效應(yīng)，實(shí)現(xiàn)其抗感染免疫功能;在病理狀態(tài)下，sIL-2R分泌過高，過度抑制IL-2的分泌，使T細(xì)胞的增殖受到抑制，進(jìn)而降低了NK活性，導(dǎo)致患者免疫功能低下，病情延綿難愈，反復(fù)發(fā)病等情況[12-16]。本研究結(jié)果顯示，復(fù)方黃芩“水膜”濕敷促進(jìn)NK、IL-2的表達(dá)，上調(diào)程度高于對(duì)照組;而抑制sIL-2R的表達(dá)。

本研究中結(jié)果顯示復(fù)方黃芩“水膜”濕敷能降低急性濕疹患者的瘙癢程度，而引起瘙癢這一癥狀的機(jī)制，中醫(yī)認(rèn)為是濕熱、風(fēng)邪所致;現(xiàn)代醫(yī)學(xué)則主張由于各種疾病引起的外在刺激皮膚神經(jīng)末梢[17-18]，反饋調(diào)節(jié)刺激5-羥色胺和組胺等致敏物質(zhì)被肥大細(xì)胞釋放[19]，擴(kuò)張毛細(xì)血管，增強(qiáng)皮膚的通透性，引起局部瘙癢的癥狀。本研究結(jié)果顯示復(fù)方黃芩“水膜”濕敷急性濕疹患者降低5-羥色胺的表達(dá)，可能是其瘙癢改善的機(jī)制。這一結(jié)果與黃芩降低毛細(xì)血管通透性，止癢的結(jié)果相似。由此，復(fù)方黃芩“水膜”能有效改善急性濕疹患者臨床皮損和瘙癢等癥狀，其機(jī)制可能與改善患者細(xì)胞免疫功能和降低致癢因子5-羥色胺有關(guān)。

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（2017-07-26收稿 責(zé)任編輯：楊覺雄）