魯遇 余英才 梁永紅

摘 要 目的：研究三脈菝葜醇提物及其不同極性萃取部位的抗腫瘤作用，為其抗腫瘤活性部位的篩選提供參考。方法：采用MTT法檢測不同質(zhì)量濃度的三脈菝葜醇提物及其石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水層萃取部位對人肝癌細(xì)胞株HepG2、人肺癌細(xì)胞株A549、人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和MDA-MB-231、人宮頸癌細(xì)胞株HeLa以及人卵巢癌細(xì)胞株HO-8910的增殖抑制率，并計算其半數(shù)抑制濃度（IC50）。將80只KM小鼠通過右前肢腋部皮下接種S180細(xì)胞懸液的方法復(fù)制荷瘤小鼠模型，并按體質(zhì)量隨機(jī)分為8組，即模型組（生理鹽水，每天灌胃2次），環(huán)磷酰胺（陽性藥物）組（0.025 g/kg，每天腹腔注射給藥1次），三脈菝葜醇提物高、中、低劑量組和醇提物乙酸乙酯萃取部位高、中、低劑量組（以浸膏計給藥劑量均分別為0.1、0.05、0.025 g/kg，每天灌胃2次），每組10只;各組小鼠均連續(xù)給藥14 d;末次給藥后禁食不禁水12 h，檢測各組小鼠的抑瘤率、脾指數(shù)和胸腺指數(shù)。結(jié)果：體外試驗表明，三脈菝葜及其不同極性萃取部位對6種腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用均呈現(xiàn)明顯的量-效關(guān)系。其中以醇提物乙酸乙酯萃取部位的作用最強(qiáng)，其對各腫瘤細(xì)胞的IC50在40～210 μg/mL范圍內(nèi)，對MCF-7細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞和HeLa細(xì)胞的IC50分別為70.56、83.58、44.67 μg/mL。體內(nèi)實驗表明，各給藥組小鼠的瘤質(zhì)量較模型組均顯著降低（P<0.05或P<0.01），并且三脈菝葜醇提物高劑量組和醇提物乙酸乙酯部位萃取部位高、中劑量組小鼠瘤質(zhì)量顯著低于環(huán)磷酰胺組（P<0.01）;環(huán)磷酰胺組、三脈菝葜醇提物高劑量組和醇提物乙酸乙酯萃取部位高、中劑量組小鼠脾指數(shù)較模型組顯著降低（P<0.01），環(huán)磷酰胺組小鼠胸腺指數(shù)較模型組和其余各給藥組均顯著升高（P<0.01）。結(jié)論：在4個極性部位中，三脈菝葜醇提物乙酸乙酯萃取部位的抗腫瘤效果最佳，并且免疫抑制作用較小。

關(guān)鍵詞 三脈菝葜;醇提物;不同部位;抗腫瘤;小鼠

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To study the anti-tumor effect of ethanol extract of Smilax trinervula and its different polar extract parts， and to provide reference for the screening of anti-tumor active parts. METHODS： MTT method was used to detect the inhibitory rates of different concentrations of ethanol extract of S. trinervula， its petroleum ether， ethyl acetate， n-butanol and water layer extract parts to the proliferation of human hepatocellular carcinoma cell line HepG2， human lung cancer cell line A549， human breast cancer cell line MCF-7 and MDA-MB-231， human cervical cancer cell line HeLa and human ovarian cancer cell line HO-8910. Semi-inhibitory concentration （IC50） was calculated. A total of 80 KM mice were subcutaneously inoculated with S180 cell suspension in right forelimb axilla to induce tumor-bearing mice model. The mice were randomly divided into 8 groups： e.g. model group （normal saline， twice a day， i.g.）， cyclophosphamide （positive drug） group （0.025 g/kg， once a day， i.p.）， S. trinervula ethanol extract high-dose， medium-dose and low-dose groups， ethyl acetate part of ethanol extract high-dose， medium-dose and low-dose groups （0.1， 0.05， 0.025 g/kg by extract， twice a day， i.g.）， with 10 rats in each group. The mice in each group were given medicine for consecutive 14 days. The inhibition rate， spleen index and thymus index of mice in each group were measured after fasting for 12 hours after the last administration. RESULTS： In vitro experiments showed that S. trinervula and different polar extracts inhibited the proliferation of 6 kinds of tumor cells in significant dose-effect manner， especially ethyl acetate part of ethanol extract. IC50 of it to tumor cells was 40-210 μg/mL， that of it to MCF-7， MDA-MB-231 and HeLa cells were 70.56， 83.58， 44.67 μg/mL， respectively. In vivo experiments showed that the tumor mass of mice were decreased significantly in each administrations （P<0.05 or P<0.01）， the tumor mass of mice in S. trinervula ethanol extract high-dose group， ethyl acetate part of ethanol extract high-dose and medium dose groups were significantly lower than cyclophosphamide group （P<0.01）. The spleen index of mice was decreased significantly in cyclophosphamide group， S. trinervula ethanol extract high-dose group， ethyl acetate part of ethanol extract high-dose and medium dose groups， compared with model group （P<0.01）; thymus index of mice in cyclophosphamide group was increased significantly， compared with model group and other administration groups （P<0.01）. CONCLUSIONS： The ethyl acetate part of ethanol extract of S. trinervula has the best anti-tumor effect and less immunosuppressive effect.

KEYWORDS? ?Smilax trinervula; Ethanol extract; Different parts; Anti-tumor; Mice

近年來，惡性腫瘤的發(fā)病率和病死率均逐年上升，癌癥已成為我國居民的第一位死亡原因，疾病負(fù)擔(dān)沉重[1]。目前，臨床上使用的抗腫瘤藥普遍存在治療窗窄、藥品不良反應(yīng)相對較大、采用沖擊療法易導(dǎo)致過量中毒等問題[2]。而研究發(fā)現(xiàn)，一些天然藥物能夠抑制腫瘤的生長，對腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有一定的抑制效果，且對放療、化療具有“增效減毒”的作用[3]，具有較大的開發(fā)研究價值。三脈菝葜（Smilax trinervula Miq.）為菝葜科菝葜屬植物，主要分布于我國江西、浙江、福建等地，亦分布于日本[4]。菝葜屬植物以根莖入藥，具有利濕去濁、祛風(fēng)除痹、解毒散瘀的作用，常用于治療小便淋濁、帶下過多、風(fēng)濕痹痛、疔瘡癰腫等病癥[5]?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，該屬植物具有抗腫瘤[6]、防治動脈粥樣硬化[7]、抗炎[8]等多種藥理作用，民間多將三脈菝葜用于治療瘡癰腫痛。據(jù)相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，從三脈菝葜中提取獲得的數(shù)個單體成分（如薯蕷皂苷、薯蕷次苷）具有一定的體外抗腫瘤活性[9-10]，但關(guān)于三脈菝葜更多抗腫瘤活性成分的篩選和進(jìn)一步的體內(nèi)抗腫瘤作用的研究較少?；诖?，本研究采用MTT法考察三脈菝葜醇提物及其不同極性部位萃取物的對6種腫瘤細(xì)胞增殖的體外抑制效果，并考察體外抗腫瘤效果較強(qiáng)的部位對S180荷瘤小鼠的腫瘤生長抑制效果，旨在為進(jìn)一步闡明三脈菝葜的抗腫瘤活性部位及其進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。

1 材料

1.1 儀器

MK-Ⅱ型酶標(biāo)儀、3111型二氧化碳培養(yǎng)箱（美國Thermo Scientific公司）;TS100-F型倒置顯微鏡（日本Nikon公司）;RE-5205型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）;DZF-6030B型真空干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）;HHS-11-2型電熱恒溫水浴鍋（上海博迅實業(yè)有限公司）;TDZ4A-WS型低速臺式離心機(jī)（長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司）;SW-CJ-2F型潔凈工作臺（蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司）;BS124S型萬分之一天平[奧多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司]。

1.2 藥品與試劑

三脈菝葜藥材于2016年9月份采自江西省宜豐縣黃崗山墾殖場，由江西中醫(yī)藥大學(xué)黃慧蓮教授鑒定為百合科植物三脈菝葜（S. trinervula Miq.）的根莖;DMEM高糖培養(yǎng)基（美國Hyclone公司，批號：AAJ207791）;胎牛血清（浙江杭天生物科技股份有限公司，批號：20170124）;MTT（批號：303HC510）、試驗用順鉑粉末（批號：320B022，純度：≥98.5%）、胰蛋白酶-EDTA消化液（批號：20170623）、青鏈霉素混合液（100×）（批號：20170625）、二甲基亞砜（DMSO，批號：20180608）均購自北京索萊寶公司;試驗用環(huán)磷酰胺粉末（上海阿拉丁生化科技股份有限公司，批號：L1729054，純度：97%）;乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等試劑均購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，均為分析純。

1.3 動物

健康SPF級KM小鼠，♂，體質(zhì)量（20±2） g，90只，由江西中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（贛）2018-0003。小鼠購入后，SPF級標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)，飼養(yǎng)和實驗期間予以自由攝食和飲水，并觀察小鼠飲食和毛發(fā)狀況。飼養(yǎng)和實驗期間的操作符合國家科學(xué)技術(shù)部頒布的《實驗動物管理條例》[11]。

1.4 細(xì)胞株

人肝癌細(xì)胞株HepG2、人肺癌細(xì)胞株A549、人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和MDA-MB-231、人宮頸癌細(xì)胞株HeLa、人卵巢癌細(xì)胞株HO-8910以及小鼠肉瘤細(xì)胞株S180均來源于中國科學(xué)院上海細(xì)胞生物研究所細(xì)胞庫。

2 方法

2.1 三脈菝葜醇提取物及其各極性部位萃取物的制備

稱取干燥的三脈菝葜根莖14 kg，切碎，用70%乙醇加熱回流提取3次，每次1 h，過濾后合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得到三脈菝葜提取物總浸膏740 g（得率：5.286%）。取總浸膏675 g混懸于適量的蒸餾水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行萃取，減壓濃縮后分別得到三脈菝葜醇提物各部位萃取物浸膏：石油醚部位萃取部位5.5 g（得率：0.043%）、乙酸乙酯部位萃取部位65.9 g（得率：0.516%）、正丁醇萃取部位123 g（得率：0.963%）;并將余下的水液減壓濃縮，得到三脈菝葜醇提物水層部位372.2 g（得率：2.915%）。

2.2 待測樣品溶液的制備

根據(jù)預(yù)試驗結(jié)果，分別稱取三脈菝葜醇提物浸膏200 mg、醇提物石油醚萃取部位和醇提物乙酸乙酯萃取部位浸膏各50 mg、醇提物正丁醇萃取部位浸膏100 mg和水層部位浸膏200 mg，置于1 mL不同量瓶中，用DMSO溶解并定容至1 mL，得到不同質(zhì)量濃度（均以浸膏量計）的母液：三脈菝葜醇提物為200 mg/mL、醇提物石油醚萃取部位和醇提物乙酸乙酯萃取部位均為50 mg/mL、醇提物正丁醇萃取部位為100 mg/mL、醇提物水層部位為200 mg/mL。取上述母液，用0.22 μm微孔過濾器過濾后，置于4 ℃冰箱中保存，備用。臨用前，取適量溶液用完全培養(yǎng)基（含1%青鏈霉素混合液和10%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)基）稀釋到所需質(zhì)量濃度。

2.3 細(xì)胞培養(yǎng)

從-80 ℃冰箱中取出各細(xì)胞株，將凍存管置于37 ℃水浴鍋中水浴約1 min，完全解凍后，轉(zhuǎn)入含5 mL完全培養(yǎng)基的離心管中，以1 000 r/min離心3 min，棄上清液，加入6 mL完全培養(yǎng)基，置于37 ℃、含5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，復(fù)蘇后24 h更換培養(yǎng)基，之后每2～3 d對細(xì)胞進(jìn)行一次傳代，細(xì)胞傳代2次以上可用于試驗。

2.4 MTT法檢測三脈菝葜提取物及其不同極性萃取部位的體外抗腫瘤活性

取對數(shù)期生長期細(xì)胞，使用胰酶消化后用完全培養(yǎng)基調(diào)整混懸液中細(xì)胞密度為5×104 mL-1，按每孔100 μL的量將細(xì)胞懸液接種至96孔板中，板周圍一圈加入100 μL磷酸鹽緩沖液（PBS），以防止邊緣效應(yīng)。將細(xì)胞置于37 ℃、含5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后，吸除上清液，加入相應(yīng)的含藥培養(yǎng)基。根據(jù)預(yù)試驗結(jié)果，三脈菝葜醇提物及其不同極性萃取部位分別設(shè)定5個給藥質(zhì)量濃度（均按浸膏量計）：三脈菝葜醇提物和醇提物正丁醇萃取部位均為1 000、500、400、300、200 μg/mL，醇提物石油醚萃取部位為200、150、100、75、50 μg/mL，醇提物乙酸乙酯萃取部位為200、100、75、50、37.5 μg/mL，醇提物水層部位為2 000、1 500、1 000、500、250 μg/mL，每個質(zhì)量濃度均設(shè)5個復(fù)孔，每孔加入含藥培養(yǎng)基100 μL。并另設(shè)立陽性藥物（順鉑）對照（分別用完全培養(yǎng)基將順鉑制成質(zhì)量濃度為16、4、1、0.25、0.062 5 μg/mL的溶液，每個質(zhì)量濃度設(shè)5個復(fù)孔，每孔加入含藥培養(yǎng)基100 μL）和空白對照（每孔加入100 μL完全培養(yǎng)基，即單孔細(xì)胞不給藥，作常規(guī)培養(yǎng)）。給藥后繼續(xù)培養(yǎng)48 h，吸除上清液，每孔加入含MTT溶液（5 mg/mL）10 μL的無血清培養(yǎng)基110 μL，繼續(xù)孵育4 h后終止培養(yǎng)并吸除上清液，加入DMSO溶液100 μL，振蕩10 min，使結(jié)晶充分溶解（整個過程避光），然后使用酶標(biāo)儀于490 nm波長處測定各孔吸光度（A）值，記錄結(jié)果，按照以下公式計算細(xì)胞增殖抑制率：細(xì)胞增殖抑制率（%）=（1-A給藥孔/A空白對照孔）×100%。并使用SPSS 22.0軟件計算三脈菝葜醇提取物及其各極性萃取部位對腫瘤細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度（IC50）。

2.5 三脈菝葜醇提物及其乙酸乙酯部位對S180實體瘤小鼠的體內(nèi)抗腫瘤活性

常規(guī)操作復(fù)蘇肉瘤S180細(xì)胞，并進(jìn)行傳代培養(yǎng)至對數(shù)生長期。用生理鹽水調(diào)整細(xì)胞密度為2×107 mL-1，每只小鼠腹腔注射0.5 mL細(xì)胞懸液。飼養(yǎng)7 d后，觀察發(fā)現(xiàn)小鼠腹部膨隆如球狀，說明腹水生長旺盛。頸椎脫臼處死小鼠，無菌操作抽取腹水，生理鹽水調(diào)整小鼠腹水中S180細(xì)胞密度為2×107 mL-1。另取80只小鼠，于每只小鼠腋下接種0.2 mL腹水細(xì)胞懸液[12]復(fù)制S180實體瘤小鼠模型。24 h后，按體質(zhì)量隨機(jī)將80只小鼠隨機(jī)分為模型組（生理鹽水，20 mL/kg）、環(huán)磷酰胺（陽性藥物）組（0.025 g/kg），三脈菝葜醇提物高、中、低劑量組（0.1、0.05、0.025 g/kg，以浸膏計）和醇提物乙酸乙酯萃取部位高、中、低劑量組（0.1、0.05、0.025 g/kg，以浸膏計），每組10只。除環(huán)磷酰胺組小鼠每天腹腔注射給藥1次外，其余各組小鼠均每天灌胃2次相應(yīng)藥液/生理鹽水，各組小鼠均連續(xù)給藥14 d（參考相關(guān)文獻(xiàn)[5，13]，根據(jù)體表面積換算法和生藥量折算，三脈菝葜醇提物及其乙酸乙酯萃取部位高、中、低劑量組小鼠的給藥量分別相當(dāng)于成人日給藥25、12.5、6.25 g，與菝葜的臨床日用量10～15 g符合;環(huán)磷酰胺組小鼠給藥量亦根據(jù)成人臨床常用量折算得到），給藥期間各組小鼠自由飲食。末次給藥后，予以各組小鼠禁食處理12 h，之后處死小鼠，剝離其瘤組織和肝、脾及胸腺組織，稱質(zhì)量，計算抑瘤率和臟器（脾、胸腺）指數(shù)，計算方法如下：抑瘤率（%）=（模型組瘤質(zhì)量-給藥組瘤質(zhì)量）/模型組瘤質(zhì)量×100%;臟器（脾、胸腺）指數(shù)（%）=臟器（脾、胸腺）質(zhì)量/體質(zhì)量×100%。

2.6 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。數(shù)據(jù)用x±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用t檢驗。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 三脈菝葜醇提物及其不同極性萃取部位對6種腫瘤細(xì)胞的體外增殖抑制作用測定結(jié)果

三脈菝葜醇提物及其不極性萃取部位對6種腫瘤細(xì)胞的抑制作用均呈現(xiàn)明顯的量-效關(guān)系。其中以三脈菝葜醇提物乙酸乙酯萃取部位對腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用最強(qiáng)，對各腫瘤細(xì)胞的IC50在40～210 μg/mL之間，其對MCF-7細(xì)胞的IC50為70.56 μg/mL，對MDA-MB-231細(xì)胞的IC50為83.58 μg/mL，對HeLa細(xì)胞的IC50為44.67 μg/mL，這提示三脈菝葜的抗腫瘤有效成分可能集中在醇提物乙酸乙酯萃取部位。但與傳統(tǒng)的抗腫瘤藥物順鉑相比，三脈菝葜醇提物及其各極性萃取部位對6種腫瘤細(xì)胞的IC50均較高。三脈菝葜醇提物及其不同極性萃取部位對腫瘤細(xì)胞的增殖抑制率測定結(jié)果見表1，IC50測定結(jié)果見表2。

3.2 三脈菝葜醇提物及其乙酸乙酯萃取部位對S180荷瘤小鼠的抑瘤作用測定結(jié)果

3.2.1 三脈菝葜醇提物及其乙酸乙酯萃取部位對S180荷瘤小鼠腫瘤生長的影響 三脈菝葜醇提物提物及其乙酸乙酯萃取部位對S180荷瘤小鼠腫瘤生長具有較強(qiáng)的抑制效果，且具有一定的量-效關(guān)系。與模型組比較，各給藥組小鼠的瘤質(zhì)量均不同程度降低，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）;與環(huán)磷酰胺組比較，三脈菝葜醇取物高劑量組和三脈菝葜醇提物乙酸乙酯萃取部位高、中劑量組小鼠瘤質(zhì)量降低更為明顯（P<0.01），抑瘤率均在85%以上。各組小鼠的瘤質(zhì)量及抑瘤率測定結(jié)果見表3。

3.2.2 三脈菝葜醇提物及其乙酸乙酯萃取部位對S180荷瘤小鼠臟器指數(shù)的影響 與模型組比較，環(huán)磷酰胺組、三脈菝葜醇提物高劑量組和三脈菝葜醇提物乙酸乙酯萃取部位高、中劑量組小鼠的脾指數(shù)均顯著降低（P<0.01），且環(huán)磷酰胺組小鼠胸腺指數(shù)也顯著降低（P<0.01），而其余給藥組上述指標(biāo)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;與環(huán)磷酰胺組比較，三脈菝葜醇提物中、低劑量組和醇提物乙酸乙酯萃取部位低劑量組小鼠的脾指數(shù)顯著升高（P<0.05或P<0.01），三脈菝葜各給藥組小鼠的胸腺指數(shù)均顯著升高（P<0.01）。以上結(jié)果提示，三脈菝葜較環(huán)磷酰胺具有較小的免疫抑制作用。各組小鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù)測定結(jié)果見表4。

4 討論

本研究采用MTT法，考察了三脈菝葜醇提物及其不極性萃取部位對人肝癌細(xì)胞株HepG2、人肺癌細(xì)胞株A549、人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7、MDA-MB-231、人宮頸癌細(xì)胞株HeLa和人卵巢癌細(xì)胞株HO-8910在內(nèi)的共計6種腫瘤細(xì)胞株的增殖抑制作用，初步篩選了三脈菝葜醇提物的抗腫瘤活性部位。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三脈菝葜醇提物乙酸乙酯萃取部位的細(xì)胞增殖抑制效果最強(qiáng)，呈現(xiàn)明顯的量-效關(guān)系，并且三脈菝葜醇提物乙酸乙酯萃取部位對人乳腺癌細(xì)胞MCF-7（IC50為70.56 μg/mL）、MDA- MB-231（83.58 μg/mL）和人宮頸癌細(xì)胞HeLa（44.67? ? ? ?μg/mL）的體外增殖表現(xiàn)出較好的抑制效果，這提示三脈菝葜抗腫瘤活性成分可能集中在三脈菝葜乙酸乙酯萃取部位。結(jié)合相關(guān)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三脈菝葜與菝葜科其他屬植物的抗腫瘤活性部位相一致，但三脈菝葜醇提物乙酸乙酯萃取部位對腫瘤細(xì)胞的抑制效果強(qiáng)于菝葜科其他屬植物的乙酸乙酯萃取部位（IC50大多在100～300 μg/mL之間）[14-16]。順鉑屬于細(xì)胞周期的非特異性藥物，具有細(xì)胞毒性，可抑制腫瘤細(xì)胞DNA復(fù)制過程，并損傷其細(xì)胞膜上的結(jié)構(gòu)，有較強(qiáng)的廣譜抗腫瘤作用。在本研究中，三脈菝葜醇提物及其不同極性萃取部位對6種腫瘤細(xì)胞的IC50均較順鉑高，這與本研究中所用樣品為粗提物有一定關(guān)系，三脈菝葜中體外抗腫瘤效果更強(qiáng)的成分有待進(jìn)一步分離提純。

根據(jù)體外細(xì)胞試驗結(jié)果，本研究進(jìn)一步選取三脈菝葜醇提物及其乙酸乙酯萃取部位進(jìn)行體內(nèi)抗腫瘤實驗，觀察其對S180荷瘤小鼠腫瘤生長的抑制效果。結(jié)果表明，在0.2 g/kg日給藥劑量下的三脈菝葜醇提物及其乙酸乙酯部位萃取部位，以及在0.1 g/kg日給藥劑量下的醇提物乙酸乙酯部位萃取部位對S180荷瘤小鼠腫瘤生長的抑制作用均較強(qiáng)，抑瘤率均在85%以上，均強(qiáng)于0.025 g/kg日劑量下的環(huán)磷酰胺。另外，環(huán)磷酰胺雖具有廣譜的抗腫瘤作用，在臨床上廣泛使用，但同時其具有較為明顯的免疫抑制作用。臟器指數(shù)反映的是其中淋巴細(xì)胞增殖的水平，是一個相對直觀的免疫抑制指標(biāo)[8]。在本研究中，可見給藥后環(huán)磷酰胺組小鼠的脾指數(shù)、胸腺指數(shù)均顯著降低，而三脈菝葜醇提物中、低劑量組及三脈菝葜醇提物乙酸乙酯萃取部低劑量組小鼠較環(huán)磷酰胺組小鼠的脾指數(shù)顯著升高，三脈菝葜醇提物及其乙酸乙酯萃取部位各劑量組較環(huán)磷酰胺組小鼠的胸腺指數(shù)亦顯著升高，這提示三脈菝葜醇提物及其乙酸乙酯萃取部位與環(huán)磷酰胺相比，對小鼠的免疫抑制作用較小，毒副作用相對較低。

綜上所述，三脈菝葜醇提物乙酸乙酯萃取部位具有較強(qiáng)的抗腫瘤效果，三脈菝葜的抗腫瘤活性成分可能集中在該萃取部位。本研究通過體內(nèi)、外抗腫瘤研究結(jié)果表明了三脈菝葜對腫瘤具有抑制作用，并初步篩選了其抗腫瘤活性部位，但關(guān)于其具體的抑瘤成分和作用機(jī)制還需要進(jìn)一步明確。

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（收稿日期：2019-05-18 修回日期：2019-08-01）

（編輯：林 靜）