李勁　駱仲榆　陳劉鎮(zhèn)　林沛基

[摘要] 目的 探討慢性乙型肝炎病毒感染患者血清白細(xì)胞介素-33（IL-33）及其受體可溶性生長(zhǎng)刺激表達(dá)基因2蛋白（sST2）與單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）表達(dá)水平變化，并分析其臨床意義。 方法 選取2017年1月～2018年1月廣東省東莞市人民醫(yī)院收治的105例慢性乙型肝炎病毒感染患者作為觀察組，其中單純慢性乙肝患者67例（慢性乙肝組），合并肝衰竭38例（肝衰竭組），同期選擇50名無(wú)肝臟疾病的健康志愿者作為對(duì)照組。分別測(cè)定各組血清IL-33、sST2以及MCP-1水平，并根據(jù)Ishak病理評(píng)分對(duì)慢性乙肝組患者的肝纖維化程度進(jìn)行評(píng)定，比較不同肝纖維化程度患者的上述指標(biāo)表達(dá)情況。 結(jié)果 慢性乙肝組與肝衰竭組的IL-33、sST2與MCP-1水平均明顯高于對(duì)照組，且肝衰竭組的IL-33、sST2與MCP-1表達(dá)水平明顯高于慢性乙肝組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。與輕度肝纖維化組比較，中度肝纖維化組、重度肝纖維化組和肝硬化組的IL-33、sST2與MCP-1均升高，且重度肝纖維化組和肝硬化組IL-33、sST2與MCP-1水平高于中度肝纖維化組，肝硬化組IL-33、sST2與MCP-1水平高于重度肝纖維化組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。經(jīng)Pearson相關(guān)分析顯示，慢性乙肝組患者IL-33、sST2與MCP-1與Ishak評(píng)分呈正相關(guān)（r = 0.573、0.728、0.654，P < 0.05）。 結(jié)論 血清IL-33、sST2與MCP-1對(duì)慢性乙型肝炎病毒感染及其病情加重有評(píng)估預(yù)測(cè)作用，對(duì)患者開展血清指標(biāo)檢驗(yàn)有助于疾病診斷與預(yù)后評(píng)估。

[關(guān)鍵詞] 慢性乙型肝炎病毒;可溶性生長(zhǎng)刺激表達(dá)基因2蛋白;單核細(xì)胞趨化蛋白-1;白細(xì)胞介素-33

[中圖分類號(hào)] R575.1? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-7210（2019）06（b）-0125-04

Changes of serum IL-33， sST2 and MCP-1 levels in patients with chronic hepatitis B virus infection and its clinical significance

LI Jin1? ?LUO Zhongyu1? ?CHEN Liuzhen2? ?LIN Peiji1

1.Department of Infectious Diseases， Dongguan People′s Hospital， Guangdong Province， Dongguan? ?523000， China; 2.Medical Department， Dongguan People′s Hospital， Guangdong Province， Dongguan? ?523000， China

[Abstract] Objective To investigate the changes of serum levels of interleukin-33 （IL-33） and its receptor soluble growth STimulation expressed gene 2 （sST2） and monocyte chemotactic protein-1 （MCP-1） in patients with chronic hepatitis B virus infection， and to analyze their clinical significance. Methods One hundred and five patients with chronic hepatitis B virus infection in Dongguan People′s Hospital from January 2017 to January 2018 were selected as the observation group， including 67 patients with simple chronic hepatitis B （chronic hepatitis B group）， 38 patients with hepatic failure （hepatic failure group）， and 50 healthy volunteers without liver diseases were selected as the control group. Serum levels of IL-33， sST2 and MCP-1 were measured in each group， and the degree of hepatic fibrosis in chronic hepatitis B group was assessed according to Ishak pathological score. The expression of the above indicators in patients with different degrees of hepatic fibrosis was compared. Results The levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in chronic hepatitis B group and hepatic failure group were significantly higher than those in control group， and the expression of IL-33， sST2 and MCP-1 in hepatic failure group was significantly higher than those in chronic hepatitis B group （P < 0.05）. Compared with mild hepatic fibrosis group， the levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in moderate hepatic fibrosis group， severe hepatic fibrosis group and cirrhosis group increased， and the levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in severe hepatic fibrosis group and cirrhosis group were higher than those in moderate hepatic fibrosis group， while the levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in cirrhosis group were higher than those in severe hepatic fibrosis group， the differences were statistically significant （P < 0.05）. Pearson correlation analysis showed that IL-33， sST2 and MCP-1 was positively correlated with Ishak score in patients with chronic hepatitis B （r = 0.573， 0.728， 0.654， P < 0.05）. Conclusion Serum IL-33， sST2 and MCP-1 can evaluate and predict chronic hepatitis B virus infection and the aggravation of the disease. The test of serological indexes for the patients is helpful for disease diagnosis and prognosis evaluation.

[Key words] Chronic hepatitis B virus; Soluble growth STimulation expressed gene 2; Monocyte chemotactic protein-1; Interleukin-33

目前，乙型肝炎病毒感染仍是我國(guó)公共衛(wèi)生事業(yè)重點(diǎn)關(guān)注的問題，根據(jù)統(tǒng)計(jì)我國(guó)約有乙型肝炎感染者1.5億，感染者人數(shù)眾多，且是演變?yōu)楦斡不淖钪饕騕1]。目前，對(duì)于肝硬化的發(fā)病機(jī)制仍未完全明確，相關(guān)研究表明，炎癥損傷、纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化等在肝硬化發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用[2-3]。白細(xì)胞介素-33（IL-33）是新近發(fā)現(xiàn)的具備多類生物效應(yīng)的細(xì)胞因子，可溶性生長(zhǎng)刺激表達(dá)基因2蛋白（sST2）是IL-33的重要受體[4]。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)IL-33與sST2結(jié)合后可以介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，啟動(dòng)一系列炎性變化過程[5];單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）為CC趨化因子家族成員之一，在人體發(fā)生炎性反應(yīng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)異常表達(dá)[6]。本研究分析了上述三種因子對(duì)人體肝組織炎癥的評(píng)估作用，選擇慢性乙型肝炎病毒感染患者為分析對(duì)象，旨在提出新的肝組織炎癥血清學(xué)指標(biāo)?，F(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取廣東省東莞市人民醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）2017年1月～2018年1月收治的105例慢性乙型肝炎病毒感染患者為觀察組，其中單純慢性乙肝患者67例（慢性乙肝組），合并肝衰竭患者38例（肝衰竭組）。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015年版）》[7]中關(guān)于慢性乙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，以及《肝衰竭診治指南（2012年版）》[8]中關(guān)于肝衰竭的診斷標(biāo)準(zhǔn);②患者經(jīng)乙型肝炎病毒-DNA檢測(cè)確診為乙型肝炎病毒感染;③未進(jìn)行抗病毒治療;④慢性乙肝患者接受肝組織穿刺活檢，病歷資料完整;⑤患者及其家屬知情本研究并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他肝臟疾病;②合并其他病原體感染;③先天性免疫異常患者。慢性乙肝組67例，男37例，女30例;年齡22～61歲，平均（37.81±13.66）歲。肝衰竭組38例，男22例，女16例;年齡24～64歲，平均（38.29±13.84）歲。同時(shí)選擇無(wú)肝臟疾病的健康志愿者50名為對(duì)照組，男28名，女22名;年齡24～63歲，平均（38.34±14.52）歲。各組受檢者年齡、性別等基線資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。本研究已獲我院倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 血清學(xué)檢查? 檢驗(yàn)前1 d對(duì)受檢者進(jìn)行健康教育，檢驗(yàn)當(dāng)日于清晨采集所有受檢者的空腹靜脈血，置入離心機(jī)，以3500 r/min、離心半徑8 cm離心處理7 min后獲得血清標(biāo)本，再分別采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定IL-33、sST2與MCP-1水平。江蘇江萊生物科技有限公司提供的IL-33與可溶性ST2 ELISA試劑盒（生產(chǎn)批號(hào)：20161121），上海江萊生物科技有限公司提供的MCP-1 ELISA試劑盒（生產(chǎn)批號(hào)：20160724），根據(jù)產(chǎn)品指示說明書完成檢驗(yàn)，測(cè)定上述指標(biāo)的具體表達(dá)。

1.2.2 肝組織活檢? 所有慢性乙肝患者進(jìn)行肝臟穿刺組織活檢，應(yīng)用活檢針在B超引導(dǎo)下進(jìn)行肝臟穿刺，取至少2 cm肝臟組織，由病理學(xué)醫(yī)師制片，蘇木精-伊紅染色，參照Ishak評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[9]對(duì)慢性乙肝組患者的肝臟纖維化進(jìn)行判定，Ishak評(píng)分為0～6分，其中0分表示未見纖維化;1～2分表示部分匯管區(qū)纖維組織增生，有或無(wú)短纖維間隔形成（輕度肝纖維化）;3～4分表示大部分匯管區(qū)纖維組織增生，匯管區(qū)間的橋狀纖維間隔明顯或匯管區(qū)-中央靜脈纖維隔形成（中度肝纖維化）;5分表示匯管區(qū)間的橋狀纖維間隔或匯管區(qū)-中央靜脈纖維隔明顯，偶見結(jié)節(jié)形成（重度肝纖維化）;6分表示肝硬化。根據(jù)判定結(jié)果，將慢性乙肝組患者進(jìn)一步分為輕度肝纖維化組（13例）、中度肝纖維化組（14例）、重度肝纖維化組（14例）、肝硬化組（26例）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)處理采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，應(yīng)用t檢驗(yàn)，多組間計(jì)量資料比較采用單因素方差分析。計(jì)數(shù)資料應(yīng)用χ2檢驗(yàn)，應(yīng)用Pearson相關(guān)分析分析相關(guān)性。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組受檢者的IL-33、sST2與MCP-1比較

慢性乙肝組與肝衰竭組的IL-33、sST2與MCP-1水平均明顯高于對(duì)照組，并且肝衰竭組的IL-33、sST2與MCP-1表達(dá)水平明顯高于慢性乙肝組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表1。

2.2 慢性乙肝組中不同肝纖維化程度患者的IL-33、sST2與MCP-1比較

與輕度肝纖維化組比較，中度肝纖維化組、重度肝纖維化組和肝硬化組的IL-33、sST2與MCP-1均升高，且重度肝纖維化組和肝硬化組IL-33、sST2與MCP-1水平高于中度肝纖維化組，肝硬化組IL-33、sST2與MCP-1水平高于重度肝纖維化組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表2。

2.3 慢性乙肝組患者IL-33、sST2、MCP-1與Ishak評(píng)分的相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson相關(guān)分析顯示，慢性乙肝組患者IL-33、sST2與MCP-1與Ishak評(píng)分呈正相關(guān)（r = 0.573、0.728、0.654，P < 0.05）。見圖1。

3 討論

慢性乙型肝炎病毒的變異性與異源性均較為嚴(yán)重，機(jī)體發(fā)生慢性乙型肝炎病毒感染后，病毒會(huì)在體內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間存在，并促使病情不斷進(jìn)展，加重肝纖維化，誘發(fā)肝硬化甚至惡性腫瘤[10]?，F(xiàn)階段研究已證實(shí)人類感染病毒后并不會(huì)形成肝部的直接損傷，而由于感染而引發(fā)的免疫反應(yīng)過程為其肝部損傷的重要原因，機(jī)體免疫失衡是疾病的主要發(fā)生機(jī)制，其中免疫細(xì)胞因子對(duì)疾病發(fā)生、進(jìn)展及預(yù)后均形成影響作用[11-12]。目前，臨床評(píng)定肝纖維化程度主要采用病理組織活檢方法，但該種檢驗(yàn)方式具備一定的有創(chuàng)性，容易對(duì)患者形成臨床風(fēng)險(xiǎn)[13]。近年臨床影像學(xué)技術(shù)也不斷發(fā)展，部分醫(yī)院針對(duì)患者開展瞬時(shí)彈性成像檢查，雖能在避免穿刺創(chuàng)傷的基礎(chǔ)上了解患者的肝臟損傷程度，但其影響因素較多，導(dǎo)致診斷評(píng)估作用有所限制[14]。近年來(lái)，不斷有研究分析慢性乙型肝炎病毒感染患者的血清學(xué)指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)部分免疫學(xué)因子在疾病發(fā)生與進(jìn)展過程中均發(fā)揮著影響作用。

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