蘇玉順，閔霞，盧一鳴，鞏文靜，薛燁，高大文，李志慧，劉威，李向陽，張成崗

毒品成癮可以認(rèn)為是一種慢性復(fù)發(fā)性大腦疾病，通過作用于獎賞系統(tǒng)，引起神經(jīng)遞質(zhì)釋放改變，產(chǎn)生獎賞效應(yīng)，長期刺激便會形成心理依賴，且伴隨發(fā)生焦慮、抑郁等精神心理癥狀，嚴(yán)重影響個人、家庭和社會的發(fā)展，迫切需要新思路和新的解決方案[1-2]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，人體內(nèi)實際上包含兩套基因組：一套是人體自身的基因組即“第一基因組”；另一套則是與人體共生微生物的基因組即“第二基因組”，以腸道菌群基因組為主。人體實際上是由這兩套基因組共同組成和控制的復(fù)合生命體。人體幾乎所有的生命過程，都與這兩套基因組的交叉對話密切相關(guān)[3]。大量研究顯示，腸道菌群可通過腸道與大腦之間的“腸腦軸”直接或間接調(diào)控宿主的心理和行為[4-7]，而口服膳食纖維、植物多糖和植物寡糖等益生元可誘導(dǎo)腸道菌群中的有益菌增殖，抑制有害菌增殖[8-9]。腸道中的益生菌可以將植物多糖分解為短鏈脂肪酸(short-chain fatty acids，SCFA)，而SCFA 則具有顯著的抗炎、抗腫瘤作用[10]。本實驗室前期在大量研究基礎(chǔ)上提出“菌心說”學(xué)說，認(rèn)為人體饑餓信號來源于腸道菌群繁殖過程中對碳源需求的新觀點，已得到越來越多的證據(jù)支持[11-16]。當(dāng)滿足腸道菌群的碳源需求后，人體饑餓感和進(jìn)食需求得到顯著緩解，就能夠進(jìn)入到僅靠消耗自身能量即可維持生理需求的禁食狀態(tài)。為此，本實驗室結(jié)合益生元干預(yù)技術(shù)和傳統(tǒng)“辟谷”理論形成了柔性辟谷技術(shù)，即通過口服由膳食纖維、植物多糖等組成的柔性辟谷飲料滿足每日腸道菌群的正常需求，在7～14天內(nèi)不攝入任何營養(yǎng)物質(zhì)，保證足量飲水，完全依靠消耗自身能量(主要是脂肪成分)維持正常生活，結(jié)束后逐漸恢復(fù)正常飲食。該技術(shù)在減少人體自身過剩能量的同時，可糾正人體對于食物的過度需求，并可改善腸道菌群狀況。本研究將該技術(shù)應(yīng)用于強制隔離戒毒所戒毒人員，以研究柔性辟谷對強戒人員精神心理狀況、毒品心理渴求以及腸道菌群的影響。

1 對象與方法

1.1 志愿者招募與篩選

入組標(biāo)準(zhǔn)：①體質(zhì)量指數(shù)(body mass index，BMI)在22～28 kg/m2之間；②進(jìn)入戒毒所半年以內(nèi)；③戒毒愿望相對強烈，且配合程度較高。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)歷重大疾病或手術(shù)；②存在精神障礙或智力障礙；③自我感覺無法堅持，依從性差；④出現(xiàn)過嚴(yán)重低血壓；⑤正在感冒、發(fā)炎等身體不適。

對某市強制隔離戒毒所七大隊150名(男性)強制戒毒人員進(jìn)行問卷調(diào)查，根據(jù)問卷反饋信息按照以上入組標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)篩選出30名強戒人員，作為志愿者參加本研究。30名強戒人員均無生理戒斷反應(yīng)(已經(jīng)過了生理脫毒期)，年齡為39.07±8.45歲，BMI為23.50±2.44 kg/m2。僅吸過海洛因的共16人，僅吸過冰毒的共8人，吸過海洛因和冰毒的共6人。從第一次吸毒至參加本研究，最短時長2年，最長23年。復(fù)吸次數(shù)為2.10±1.30次，均有戒后復(fù)吸經(jīng)歷。

1.2 試驗設(shè)計

1.2.1 試驗材料柔性辟谷固體飲料30盒(每人1盒)，每盒21袋，每袋10 g，由北京云醫(yī)國際科技有限公司提供，主要成分為膳食纖維和植物多糖，陰涼干燥處保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 研究方法組織30名志愿者進(jìn)行為期7天的柔性辟谷(在此期間集中管理)，7天之內(nèi)每日飯時各服用一袋柔性辟谷飲料止餓(伴水送服)，除此之外不吃其他任何食物，保證足量飲水(3～5 L)。經(jīng)過實驗室前期嚴(yán)格的臨床數(shù)據(jù)檢驗(前期在天津市寶坻區(qū)人民醫(yī)院進(jìn)行臨床研究時通過倫理學(xué)認(rèn)證)，該方法具備安全性和可行性[17]。

1.2.3 觀察指標(biāo)心理學(xué)量表：將癥狀自評量表(symptom checklist-90，SCL-90)、焦慮自評量表(self-rating anxiety scale，SAS)、意志力自評量表(由陳會昌于1985年編制，經(jīng)北京師范大學(xué)研究人員修訂)、毒品渴求量表作為心理狀況測評工具。SCL-90從多個方面初步評價強戒人員的精神心理癥狀。SAS進(jìn)一步評價可能存在的焦慮癥狀，包括干預(yù)前已經(jīng)存在的焦慮癥狀和柔性辟谷過程中產(chǎn)生的焦慮情緒。意志力量表評價自我心理韌性水平。毒品渴求量表為漢化改編的OCDUS(Obsessive Compulsive Drug Use Scale，共13 個條目)量表[18-19]。根據(jù)研究需要，將原量表中的“海洛因”全部更名為“毒品”，以評價強戒人員(包括海洛因成癮、冰毒成癮和混吸的情況)對毒品的心理渴求狀況。

腸道菌群16S r DNA 測序：采集志愿者糞便樣品，使用試劑盒[由天根生化科技(北京)有限公司提供]提取菌群DNA 后，送往華大基因公司進(jìn)一步處理并完成16S r DNA 測序。

在柔性辟谷前后，對志愿者分別進(jìn)行兩次心理學(xué)量表測評，測評時間為干預(yù)前和干預(yù)結(jié)束后。便樣采集時間為干預(yù)前、干預(yù)后和恢復(fù)飲食一周后，根據(jù)每名志愿者留樣實際情況，要求在1～2天內(nèi)留樣完畢，-80℃冰箱保存。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，研究方法為每位志愿者在柔性辟谷技術(shù)干預(yù)前后自身對照，統(tǒng)計學(xué)分析方法為配對樣本t檢驗和Wilcoxon秩和檢驗、雙側(cè)檢驗，均按α=0.05設(shè)置顯著性檢驗標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

研究初期共納入30例干預(yù)對象，在研究進(jìn)行期間共有5人在第3天時因無法堅持主動退出，其余25人均完成為期7天的柔性辟谷干預(yù)。由于個別志愿者在量表填寫過程中不仔細(xì)，個別量表題目作答有遺漏，此量表即視為作廢。兩次量表有一次作廢，即將此志愿者量表結(jié)果從對應(yīng)量表統(tǒng)計分析中剔除。最終回收22人SCL-90數(shù)據(jù)有效，24人SAS數(shù)據(jù)有效，25人意志力量表數(shù)據(jù)有效，25人毒品渴求量表數(shù)據(jù)有效。共完整收集22人干預(yù)前、干預(yù)后和恢復(fù)飲食一周后三個時間點糞便樣本，另外3人由于個人身體原因，單次便樣未能及時留取，不納入統(tǒng)計分析。

2.1 干預(yù)前后SCL-90得分變化

對柔性辟谷前后SCL-90總均分、陽性項目均分和各因子分進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，柔性辟谷對強戒人員的SCL-90總均分、陽性項目均分和各因子分影響差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 柔性辟谷前后SCL-90量表總均分、陽性項目均分及各因子分變化 n=22

2.2 干預(yù)前后焦慮自評量表(SAS)和意志力量表得分變化

對柔性辟谷前后SAS和意志力量表得分進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果顯示，柔性辟谷并未對強戒人員的焦慮狀況和意志力產(chǎn)生顯著影響(P＞0.05)。見表2。

表2 柔性辟谷前后SAS和意志力量表變化

2.3 干預(yù)前后毒品渴求量表得分變化

2.3.1 總體分析對柔性辟谷前后毒品渴求量表得分進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，毒品渴求量表總均分和“渴求頻率”干預(yù)后顯著下降(P＜0.05)，“毒品影響”和“毒品失控”干預(yù)后有下降趨勢，但變化不顯著(P＞0.05)，說明經(jīng)過柔性辟谷強戒人員的毒品心理渴求得到初步改善。見表3。

表3 柔性辟谷前后毒品渴求量表變化 n=25

2.3.2 分組分析根據(jù)強戒人員信息，將完成7天干預(yù)的25名強戒人員中只吸過一種毒品的20名強戒人員分為海洛因組(15人)和冰毒組(5人)。柔性辟谷干預(yù)7天后，海洛因組總均分和“毒品影響”顯著下降(P＜0.05)，“渴求頻率”和“毒品失控”變化不顯著(P＞0.05)；冰毒組總均分、“毒品影響”、“渴求頻率”和“毒品失控”變化均不顯著(P＞0.05)。以上結(jié)果表明，7天的柔性辟谷干預(yù)對海洛因成癮強戒人員作用相對比較明顯，而對冰毒成癮強戒人員改善作用并不顯著。見表4及表5。

表4 柔性辟谷前后海洛因組毒品渴求量表變化 n=15

表5 柔性辟谷前后冰毒組毒品渴求量表變化 n=5

2.4 腸道菌群16S r DNA測序

2.4.1 腸道菌群多樣性指數(shù)通過計算腸道菌群多樣性指數(shù)(Alpha多樣性)Chao和Shannon，分別分析強戒人員柔性辟谷干預(yù)前、干預(yù)后和恢復(fù)飲食一周后腸道菌群豐富度(richness)和多樣性(diversity)變化情況。Chao和Shannon 值越大，豐富度和多樣性越高。干預(yù)前和干預(yù)后比較，Chao和Shannon指數(shù)未發(fā)生顯著改變(P＞0.05)，恢復(fù)飲食一周后比干預(yù)前Chao 和Shannon 指數(shù)顯著升高(P ＜0.001)，表明相比干預(yù)前，柔性辟谷結(jié)束恢復(fù)飲食一周后，強戒人員腸道菌群豐富度和多樣性都得到顯著提高。見圖1。

圖1 柔性辟谷前后腸道菌群多樣性指數(shù)變化(n=22)

2.4.2 干預(yù)前后腸道菌群種屬變化在97%相似水平下對腸道菌群16S r DNA 檢測獲得的OTU 進(jìn)行生物信息學(xué)分析。在菌門分類水平上，Actinobacteria、Bacteroidetes、Firmicutes、Proteobacteria 為強戒人員腸道菌群中的主要構(gòu)成菌門。柔性辟谷干預(yù)后，Actinobacteria 和Firmicutes 相對豐度未見顯著改變，恢復(fù)飲食一周后兩個菌門相對豐度均下降(P=0.02，P=0.001)。Bacteroidetes相對豐度干預(yù)后和恢復(fù)飲食一周后均比干預(yù)前顯著升高(P＜0.001)。Proteobacteria 相對豐度干預(yù)后和恢復(fù)飲食一周后變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。在屬分類水平，強戒人員腸道菌群中的主要構(gòu)成菌屬為Alistipes、Bacteroides、Bifidobacterium、Blautia、Collinsella、Coprococcus、Cronobacter、Dorea、Erwinia、Faecalibacterium、Flavonifractor、Incertae_Sedis、Oscillospira、Parabacteroides、Roseburia、Ruminococcus、Subdoligranulum。其中Alistipes、Bacteroides、Parabacteroides三個菌屬相對豐度干預(yù)后和恢復(fù)飲食一周后均比干預(yù)前顯著升高(P ＜0.05)，Blautia、Collinsella、Dorea 三個菌屬相對豐度干預(yù)后和恢復(fù)飲食一周后均比干預(yù)前顯著下降(P＜0.05)。相比干預(yù)前，F(xiàn)aecalibacterium 和Oscillospira 兩菌屬相對豐度干預(yù)后顯著升高(P＜0.05)，恢復(fù)飲食一周后變化不顯著(P＞0.05)；Cronobacter、Incertae_Sedis、Roseburia、Ruminococcus四個菌屬相對豐度干預(yù)后顯著下降(P ＜0.05)，恢復(fù)飲食一周后變化不顯著(P＞0.05)。其余菌屬相對豐度干預(yù)后和恢復(fù)飲食一周后變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表6及表7。

表6 柔性辟谷前后腸道菌群門分類水平各菌門相對豐度變化

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)強戒人員可完成7 天柔性辟谷干預(yù)，且不會對強戒人員整體精神心理狀態(tài)造成明顯影響。強戒人員總體焦慮癥狀處于正常水平，干預(yù)前后焦慮癥狀和意志力無明顯改變，干預(yù)后強戒人員的毒品心理渴求狀態(tài)有明顯下降趨勢，海洛因組比冰毒組更加明顯，而且在恢復(fù)飲食一周后，強戒人員腸道菌群豐富度和多樣性明顯提升，不同分類水平種屬構(gòu)成改變，說明該技術(shù)可以幫助強戒人員調(diào)整腸道菌群組成結(jié)構(gòu)。

表7 柔性辟谷前后腸道菌群屬分類水平各菌屬相對豐度變化

成癮性藥物通過刺激大腦VTA-NAc(中腦腹側(cè)被蓋區(qū)-伏隔核)部位，促進(jìn)多巴胺能系統(tǒng)釋放多巴胺產(chǎn)生獎賞效應(yīng)，形成生理和心理依賴，是藥物成癮形成的關(guān)鍵[20]。不僅藥物成癮，飲食失控(導(dǎo)致肥胖等疾病)過程也與VTA-NAc多巴胺釋放增多有關(guān)[21]。不同的飲食模式如高熱量飲食、地中海飲食、低熱量飲食、素食等可誘導(dǎo)腸道菌群組成的異常改變，同時也會反過來影響宿主能量代謝水平改變[22-26]。長期吸毒人員腸道粘膜屏障功能顯著受損，存在腸道通透性增加、腸道菌群易位且組成結(jié)構(gòu)改變等情況[27-28]。使用抗生素抑制可卡因依賴小鼠腸道菌群后，小鼠對可卡因的覓求活動顯著增加，表明腸道菌群會影響藥物成癮的行為反應(yīng)從而與毒品成癮密切相關(guān)[29]。無論是食物還是藥物，對人菌共生系統(tǒng)而言都屬于外來物質(zhì)，如果攝入控制在有限范圍內(nèi)，人菌平衡體系能夠及時通過系統(tǒng)內(nèi)部調(diào)節(jié)減弱或消除不良影響，否則就會導(dǎo)致人菌失衡。食物攝入過多可導(dǎo)致肥胖等一系列慢性代謝疾?。凰幬锸褂眠^多則會導(dǎo)致藥物急性或慢性中毒反應(yīng)，成癮只是藥物毒性反應(yīng)中的一種。柔性辟谷用于毒品成癮人員有可能從兩方面減輕其對毒品的依賴性：一方面通過禁食狀態(tài)抑制成癮人員大腦中與毒品成癮相同的食物興奮神經(jīng)通路；另一方面通過益生元改善成癮人員腸道菌群紊亂狀況，從而減弱毒品渴求反應(yīng)。后續(xù)將通過擴(kuò)大樣本量和增加相關(guān)生理指標(biāo)等進(jìn)一步完善該研究，為協(xié)助戒毒人員提高戒毒效率、早日回歸社會提供幫助。