鄒立君, 楊 莎, 吳娟娟, 楊昆忠
(1.江西中醫(yī)藥高等??茖W(xué)校藥學(xué)系,江西撫州 344000;2.江西南昌市環(huán)境科學(xué)研究院有限公司,江西南昌 330038)
蓮花白鵝具有遺傳性能穩(wěn)定、生產(chǎn)性能良好、耐粗飼、覓食力強(qiáng)、肉嫩味美、屠宰率高、抗逆性強(qiáng)等多種優(yōu)點(diǎn);中草藥為我國(guó)天然的藥用植物,具有營(yíng)養(yǎng)與防病雙重作用,中草藥可通過(guò)多個(gè)途徑調(diào)節(jié)體內(nèi)免疫系統(tǒng),提高動(dòng)物機(jī)體的特異性和非特異性免疫機(jī)能,具有毒副作用小、無(wú)耐藥性和殘留等優(yōu)點(diǎn),另外,還可促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、減少應(yīng)激和腹瀉,因此被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中 (張召興等,2018;習(xí)男,2014)。本試驗(yàn)將復(fù)方中草藥利用現(xiàn)代的超微粉碎技術(shù)制成超微粉,以不同水平添加到肉鵝的基礎(chǔ)日糧中,探討其對(duì)肉鵝生長(zhǎng)性能和免疫機(jī)能的影響,為復(fù)方中草藥超微粉研發(fā)及在養(yǎng)鵝業(yè)中的臨床應(yīng)用提供參考依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料 金銀花、黃芪、甘草、紫錐菊、菟絲子等由江西中醫(yī)藥高等??茖W(xué)校藥學(xué)系提供;小型的高速離心機(jī)、全自動(dòng)酶標(biāo)儀均由德國(guó)Eppendorf公司生產(chǎn);禽免疫球蛋白IgG、IgA、IL-2 ELISA Kit試劑盒由伊萊瑞特生物科技有限公司生產(chǎn);禽流感H5抗原、標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清由中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所生產(chǎn);采血管、采血針、離心管、PBS等常規(guī)試劑及儀器由本實(shí)驗(yàn)室提供。
1.2 復(fù)方中草藥配比與超微粉制備 復(fù)方中草藥包括黃芪4份、紫錐菊4份、甘草4份、菟絲子2份、金銀花2份,將復(fù)方中草藥在烘干箱烘干,用普通粉碎機(jī)粉碎、過(guò)篩,再用超微粉碎機(jī)粉碎、過(guò)篩,將復(fù)方中草藥超微粉進(jìn)行粒徑檢測(cè),使之符合復(fù)方中草藥超微粉粒徑范圍,再進(jìn)行試驗(yàn)。
1.3 基礎(chǔ)日糧 參照NRC(1994)推薦的肉鵝營(yíng)養(yǎng)需要,配制基礎(chǔ)日糧(見(jiàn)表1),在肉鵝基礎(chǔ)日糧配制過(guò)程中不添加任何中草藥制劑。
1.4 試驗(yàn)動(dòng)物及設(shè)計(jì) 試驗(yàn)采用單因素設(shè)計(jì),選擇體重相近的28日齡蓮花白鵝360只(撫州規(guī)?;徎ㄈ怡Z養(yǎng)殖示范基地提供),隨機(jī)分成4組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30只,1組為空白對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)2~4組在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.5%、1.0%、1.5%的復(fù)方中草藥超微粉制劑,試驗(yàn)期為21 d。每個(gè)試驗(yàn)組自由采食和飲水。按常規(guī)的飼養(yǎng)方式進(jìn)行飼養(yǎng)和免疫接種。
表1 日糧組成與營(yíng)養(yǎng)水平
1.5 指標(biāo)測(cè)定及方法
1.5.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)的測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束后,各試驗(yàn)組停飼12 h,自由飲水,逐個(gè)空腹稱重,并計(jì)算試驗(yàn)期間的平均日增重 (ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。
1.5.2 免疫指標(biāo)的測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束時(shí),每個(gè)組隨機(jī)抽取15只試驗(yàn)肉鵝,翅靜脈采血,用離心機(jī)分離血清,按照ELISA Kit試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定血清中IgG、IgA、IL-2的含量,用血凝抑制試驗(yàn)測(cè)定禽流感抗體效價(jià)水平。
1.6 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較,以P<0.05表示差異顯著性。
2.1 復(fù)方中草藥超微粉對(duì)肉鵝生長(zhǎng)性能的影響由表2可知,試驗(yàn)2、3、4組的平均日采食量均高于 1組,但差異不顯著(P > 0.05);試驗(yàn) 3、4組平均日增重較1組分別提高13.01%、9.63%(P<0.05);2組高于 1組但是差異性不顯著 (P>0.05),試驗(yàn) 2、3、4 組之間差異不顯著(P > 0.05);試驗(yàn)3、4組料重比均低于1組,分別降低7.05%、6.30%(P<0.05);2組低于1組但是差異性不顯著 (P>0.05),試驗(yàn)2、3、4組之間差異性不顯著(P > 0.05)。
表2 復(fù)方中草藥超微粉對(duì)肉鵝生長(zhǎng)性能測(cè)定結(jié)果
2.2 復(fù)方中草藥超微粉對(duì)肉鵝免疫機(jī)能的影響由表3可知,試驗(yàn)3、4組血清中的IgG含量較1組分別提高 38.18%、35.9%(P < 0.05),2組高于 1組但是差異性不顯著(P > 0.05),試驗(yàn) 2、3、4 組之間差異不顯著 (P>0.05);試驗(yàn)2、3、4組血清中的IgA和IL-2含量均高于1組,但是差異不顯著(P>0.05);試驗(yàn)3、4組的AI抗體效價(jià)滴度均高于1組, 分別提高 21.32%、19.11%(P<0.05),2組高于1組但是差異性不顯著(P>0.05),試驗(yàn)2、3、4組之間差異不顯著(P > 0.05)。
表3 復(fù)方中草藥超微粉對(duì)肉鵝免疫指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果
3.1 復(fù)方中草藥超微粉對(duì)肉鵝生長(zhǎng)性能的影響杜海江(2016)研究表明,在日糧中添加復(fù)方中草藥超微粉能顯著提高斷奶仔豬的日增重,降低料肉比。姚維平等(2016)報(bào)道,在日糧中添加1.0%紫錐菊可以提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),試驗(yàn)2、3、4組肉鵝的平均日采食量均高于1組(P>0.05),試驗(yàn)3、4組平均日增重和料肉比顯著高于1組(P<0.05)。其原因可能是復(fù)方中草藥經(jīng)過(guò)超微粉碎后,可提高其在動(dòng)物體內(nèi)的生物利用率和藥效,減少相關(guān)疾病的發(fā)生,從而促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng),提高生產(chǎn)性能。
3.2 復(fù)方中草藥超微粉對(duì)肉鵝免疫機(jī)能的影響免疫球蛋白是誘導(dǎo)動(dòng)物機(jī)體體液免疫的主導(dǎo)效應(yīng)分子,IgG由脾臟和淋巴組織中的漿細(xì)胞產(chǎn)生,是介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體,IgA以黏膜免疫為主,含有多種抗體活性(張召興,2017)。IL-2是主要的細(xì)胞因子,可促進(jìn)T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞的分化成熟,激活這些細(xì)胞的生物活性,增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫(李蘊(yùn)玉等,2018)。因此,IgG、IgA和細(xì)胞因子IL-2在動(dòng)物免疫中發(fā)揮非常重要的作用。禽流感抗體效價(jià)是反映機(jī)體禽流感免疫狀態(tài)的指標(biāo),同時(shí)也表明動(dòng)物體對(duì)疫病的抵抗力(葛文華等,2018)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),試驗(yàn)2、3、4組肉鵝血清中的IgA和IL-2含量均高于1組,但差異性不顯著(P > 0.05),試驗(yàn) 3、4組血清中的IgG含量和AI抗體效價(jià)滴度均顯著高于1組 (P<0.05)。其原因可能是復(fù)方中草藥超微粉中的有效成分可以促進(jìn)脾臟和淋巴組織中的漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體和細(xì)胞因子IL-2,提高機(jī)體免疫機(jī)能,同時(shí)可以提高肉鵝禽流感抗體效價(jià)水平,從而提高抗病能力。
日糧中添加1.0%復(fù)方中草藥超微粉制劑可以提高肉鵝生長(zhǎng)性能和免疫機(jī)能。