宋 波,何 燦,文國琴

(西華師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,四川 南充 637000)

隨著人們生活水平提高，與此同時(shí)消費(fèi)觀念也在發(fā)生轉(zhuǎn)變，人們在日常生活中使用的洗手產(chǎn)品，已經(jīng)不僅局限于肥皂和香皂了，使用洗手液的人數(shù)逐漸變多。因?yàn)榉试砗拖阍碛泻芏嗳秉c(diǎn)，如在使用時(shí)很大可能會從手中掉落，而且氣候的變換會影響使用如夏天香皂會變軟。最主要的是它們會沾上手上的臟東西，很容易出現(xiàn)交叉感染。相對而言洗手液就具有一些優(yōu)勢，洗手液大多都是液體，通過擠壓瓶體泵頭取量，這樣的方式不僅很方便控制用量而且避免了細(xì)菌的交叉感染問題[1]。洗手液的最基礎(chǔ)的作用就是清潔雙手還在一定程度上保護(hù)了手部皮膚，通過在市場的觀察，我們可以發(fā)現(xiàn)，市場上售賣的洗手液種類較多，品牌數(shù)量可達(dá)數(shù)十種，這讓消費(fèi)者在挑選時(shí)存在一定困惑。同時(shí)也能發(fā)現(xiàn)大多數(shù)的洗手液品牌都標(biāo)明具有抗菌、抑菌作用，殺菌類洗手液不僅有清潔皮膚的作用，同時(shí)有抗菌、抑菌的效果，具有廣泛的市場前景。

現(xiàn)在社會更注重生活品質(zhì)的提高，消費(fèi)者以前大多數(shù)都是使用肥皂和香皂作為洗手產(chǎn)品，現(xiàn)在的消費(fèi)者則喜歡使用洗手液這種新型的產(chǎn)品，除了對洗手液要求具有基本的清潔功能外，消費(fèi)者也往往期待有其他的一些功能。商家也推出了多種類型的洗手液，洗手液按功能大致分為三種：一是普通洗手液，起到清潔去污的作用；二是特殊洗手液，具有一定清潔及抗菌、抑菌等功能；三是重油污洗手液，用于工業(yè)類油污( 例如機(jī)油、汽油、黃油、柴油等) 和頑固污漬的清洗[2]。本次實(shí)驗(yàn)的對象就是特殊類的洗手液，就是實(shí)驗(yàn)觀察具有抑菌作用的洗手液具體的效果如何。面對眾多品牌，消費(fèi)者不知道如何選擇，針對洗手液的抑菌效果，本實(shí)驗(yàn)檢測和比較了3種常見洗手液的抑菌效果，可以幫助消費(fèi)者們們更好的地選擇一些品牌的洗手液。

1 材料與方法

1.1 材料

3種市售品牌洗手液，分別為藍(lán)月亮、優(yōu)頌、威露士。

1.2 供試菌種

大腸桿菌、金黃色葡萄球菌，取自西華師范大學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)室。

1.3 儀器與試劑

電子分析天平、無菌操作臺、移液槍、高壓蒸汽滅菌鍋、恒溫培養(yǎng)箱、分光光度計(jì)等。

牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、蒸餾水。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 圓形濾紙片的制備

用直徑為8mm的圓形打孔器制備多個(gè)圓形濾紙片，完成后放入培養(yǎng)皿，并用報(bào)紙保好然后121℃高壓蒸汽滅菌30min[3-4]。

1.4.2 菌液制備圖

從已經(jīng)生長好的菌種斜面上挑取少量的菌種移植至另一新鮮斜面培養(yǎng)基上，將新接種細(xì)菌的斜面試管放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，備用。待長出細(xì)菌后，將兩種供試菌進(jìn)行活化,用適量無菌水稀釋制成菌懸液，備用。測OD值，使OD保持在0.25左右。

1.4.3 涂布平板

用移液槍吸取0.1mL已經(jīng)制備好的菌懸液至牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基的表面中央。，用涂布器將菌液均勻的涂布在培養(yǎng)基的表面，使菌液分布均勻靜置幾分鐘備用[5]。

1.4.4 樣品的稀釋

用無菌水對3種洗手液進(jìn)行稀釋處理，稀釋濃度為100%原液、80%稀釋液及60%的稀釋液。

1.4.5 濾紙片法測定抑菌效果

將大小相同直徑為8mm的圓形濾紙片浸入相應(yīng)濃度的洗手液中，然后將濾紙片放入已經(jīng)涂布有大腸桿菌和金黃色葡萄桿菌的平板中央，在培養(yǎng)皿蓋上貼上標(biāo)簽，做好標(biāo)記。將培養(yǎng)皿倒置放入恒溫培養(yǎng)箱中于37℃培養(yǎng)24小時(shí)后用游標(biāo)卡尺測量抑菌圈的直徑。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度的樣品對細(xì)菌的抑菌效果

圖1 濃度為60%、80%、100%的威露士對大腸桿菌的抑制效果

圖2 濃度為60%、80%、100%的威露士對金黃色葡萄球菌的抑菌效果

如圖1所示為三種濃度威露士洗手液對大腸桿菌的抑菌效果。如圖2所示是三種濃度威露士洗手液對金黃色葡萄球菌的抑菌效果。我們能看出隨著濃度的增大，抑菌圈的直徑越大，這說明濃度越大，威露士洗手液的抑菌作用越強(qiáng)。

通過對比發(fā)現(xiàn)，隨著濃度的增大，金黃色葡萄球菌的抑菌效果變化更明顯。由兩圖可知培養(yǎng)基上濾紙片周圍均產(chǎn)生抑菌圈，抑菌圈的大小不同，表明濃度為60%、80%、100%的威露士洗手液對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均具有抑菌作用且抑菌效果不同。

圖3 濃度為60%、80%、100%的藍(lán)月亮洗手液對大腸桿菌的抑制效果圖

圖4 濃度為60%、80%、100%的藍(lán)月亮洗手液對金黃色葡萄球菌的抑菌效果

如圖3所示從左到右依次為藍(lán)月亮洗手液濃度為60%、80%、100%時(shí)對大腸桿菌的抑菌效果。由圖4可知從左到右依次是藍(lán)月亮洗手液濃度為60%、80%、100%時(shí)對金黃色葡萄球菌的抑菌效果。由兩圖可知培養(yǎng)基上濾紙片周圍均產(chǎn)生抑菌圈，抑菌圈的大小不同，表明濃度為60%、80%、100%的藍(lán)月亮洗手液對大腸桿菌具有抑菌作用，對金黃色葡萄球菌也有抑菌作用，兩者的抑菌效果不同。

圖5 濃度為60%、80%、100%的優(yōu)頌洗手液對大腸桿菌的抑制效果圖

圖6 濃度為60%、80%、100%的優(yōu)頌洗手液對金黃色葡萄球菌的抑制效果圖

如圖5所示從左到右依次為優(yōu)頌洗手液濃度為60%、80%、100%對大腸桿菌的抑菌效果。由圖6可知從左到右依次是優(yōu)頌洗手液濃度為60%、80%、100%對金黃色葡萄球菌的抑菌效果。由兩圖可知培養(yǎng)基上濾紙片周圍均產(chǎn)生抑菌圈，抑菌圈的大小不同，表明濃度為60%、80%、100%的優(yōu)頌洗手液對大腸桿菌具有抑菌作用，對金黃色葡萄球菌也有抑菌作用，兩者的抑菌效果不同。

2.2 不同濃度的洗手液產(chǎn)生的抑菌圈大小比較

表1 三種濃度威露士洗手液的抑菌圈直徑

由表1可知，威猛先生洗手液濃度分別為60%、80%、100%時(shí)，對大腸桿菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑依次是20mm、21mm、22mm；對金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑依次是18mm、23mm、25mm。產(chǎn)生的抑菌圈直徑越大，說明洗手液的抑菌效果越好。從表中我們可以發(fā)現(xiàn)，威猛先生洗手液的濃度越高，其對兩種細(xì)菌的抑制作用越強(qiáng)。而且，當(dāng)濃度為60%時(shí)，洗手液對大腸桿菌的抑制作用比對金黃色葡萄球菌強(qiáng)，但是當(dāng)濃度為80%和100%時(shí)，洗手液對大腸桿菌的抑制作用比金黃色葡萄球菌弱。

表2 三種濃度藍(lán)月亮洗手液的抑菌圈直徑

由表2可知，藍(lán)月亮洗手液濃度分別為60%、80%、100%時(shí)，對大腸桿菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑依次是28mm、35mm、30mm；對金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑依次是30mm、28mm、25mm。產(chǎn)生的抑菌圈直徑越大，說明洗手液的抑菌效果越好。從表中我們可以發(fā)現(xiàn)，藍(lán)月亮洗手液的濃度越高，其對金黃色葡萄球菌的抑制作用越強(qiáng)，但是對大腸桿菌的抑制作用出現(xiàn)異常，濃度為100%時(shí)的，大腸桿菌的抑菌圈直徑小于濃度為80%時(shí)的直徑。同時(shí)我們可以發(fā)現(xiàn)，當(dāng)濃度為60%時(shí)，洗手液對大腸桿菌的抑制作用比對金黃色葡萄球菌弱，但是當(dāng)濃度為80%和100%時(shí)，洗手液對大腸桿菌的抑制作用比金黃色葡萄球菌強(qiáng)。

表3 三種濃度優(yōu)頌洗手液的抑菌圈直徑

由表3可知，濃度分別為60%、80%、100%時(shí)，優(yōu)頌洗手液對大腸桿菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑依次是20mm、22mm、28mm；對金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑依次是18mm、24mm、28mm。抑菌圈直徑越大，說明洗手液的抑菌效果越好。從表中我們可以發(fā)現(xiàn)，優(yōu)頌洗手液的濃度越高，其對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用越強(qiáng)。而且，當(dāng)濃度為60%時(shí)，洗手液對大腸桿菌的抑制作用比對金黃色葡萄球菌強(qiáng)，當(dāng)濃度為80%時(shí)，洗手液對金黃色葡萄球菌的抑制作用比大腸桿菌強(qiáng)，當(dāng)濃度為100%時(shí)，洗手液對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑制效果相同。

2.3 相同濃度洗手液產(chǎn)生的抑菌圈大小比較

表4 濃度為60%時(shí)三種洗手液的抑菌圈直徑

由表4可知，當(dāng)三種洗手液濃度都為60%時(shí)，威露士、藍(lán)月亮、優(yōu)頌對大腸桿菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑從大到小依次是28mm、20mm、20mm；對金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑從大到小依次是30mm、18mm、18mm。抑菌圈直徑越大，抑菌效果越好，所以3種品牌中，藍(lán)月亮的抑菌效果最好，威露士和優(yōu)頌效果相同。

表5 濃度為80%時(shí)三種洗手液的抑菌圈直徑

由表5可知，當(dāng)三種洗手液濃度都為80%時(shí)，威露士、藍(lán)月亮、優(yōu)頌對大腸桿菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑從大到小依次是35mm、22mm、21mm；對金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑從大到小依次是28mm、24mm、23mm。抑菌圈直徑越大，抑菌效果越好，所以3種品牌中，藍(lán)月亮的抑菌效果最好，優(yōu)頌次之，威露士最差。

表6 濃度為100%時(shí)三種洗手液的抑菌圈直徑

由表6可知，當(dāng)三種洗手液濃度都為100%時(shí)，威露士、藍(lán)月亮、優(yōu)頌對大腸桿菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑從大到小依次是30mm、28mm、22mm；對金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的抑菌圈直徑從大到小依次是28mm、25mm、25mm。抑菌圈直徑越大，抑菌效果越好，所以3種品牌中，藍(lán)月亮的抑制大腸桿菌的效果最好，優(yōu)頌次之，威露士最差。優(yōu)頌抑制金黃色葡萄球菌的效果最好，威露士和藍(lán)月亮相同。

3 討論

由實(shí)驗(yàn)可知，3種洗手液都產(chǎn)生了抑菌圈，說明它們均對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌有抑制作用，其中藍(lán)月亮洗手液經(jīng)過一系列的濃度梯度的稀釋，其大腸桿菌抑菌圈直徑一直保持在最大，所以藍(lán)月亮抑制大腸桿菌效果最好，優(yōu)頌和威露士抑菌效果次之。濃度為60%和80%時(shí)，藍(lán)月亮抑制金黃色葡萄球菌的效果最好，濃度為100%時(shí)，優(yōu)頌效果最好。從總體上看，藍(lán)月亮的抑菌效果最好，優(yōu)頌次之，威露士最差。

產(chǎn)品的有效抑菌成分：藍(lán)月亮抑菌洗手液為o-苯基苯酚[6]，威露士洗手液為對氯間二甲基苯酚(PCMX)0.18%～0.22%，優(yōu)頌洗手液為對氯間二甲基苯酚0.2%～0.3%。從實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，我們發(fā)現(xiàn)三款洗手液都能產(chǎn)生抑菌圈，但抑菌圈的直徑大小不同，這可能與三種洗手液的抑菌成分有關(guān)，其中，o-苯基苯酚這一抑菌成分的效果比對氯間二甲基苯酚好一些。盡管威露士洗手液和優(yōu)頌洗手液的抑菌成分相同，都為對氯間二甲基苯酚，但它們產(chǎn)生的抑菌圈大小仍不同，原因可能是抑菌成分的濃度不同，優(yōu)頌洗手液中抑菌成分稍高。

勤洗手是控制疾病的傳播和防止感染最有效、最簡單可行的方法，對消化道傳播的疾病和經(jīng)呼吸道傳播的疾病都有良好的預(yù)防作用[7]。