周露陽(yáng) 吳代武 高敏敏 何 杰 孫 飛 郁 濃 葉元土蔡春芳 吳 萍 唐 峰 浦琴華 任勝杰

(1. 蘇州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院, 蘇州 215123; 2. 浙江豐宇海洋生物制品有限公司, 舟山 316000;3. 浙江一星實(shí)業(yè)股份有限公司, 海鹽 314300)

中國(guó)水產(chǎn)飼料產(chǎn)量從1980年的1.1×109kg發(fā)展到2014年的1.97×1011kg, 增長(zhǎng)了179倍[1], 而近年來(lái)全球魚(yú)粉等產(chǎn)品總量則基本維持在4.5×109—5.0×109kg左右(FAO, 2016)。全球漁獲量的35%被用來(lái)作為生產(chǎn)魚(yú)粉[2]。飼料總量在逐年增長(zhǎng), 而魚(yú)粉生產(chǎn)量基本不變, 導(dǎo)致魚(yú)粉供給不足的矛盾日益突出。水產(chǎn)飼料工業(yè)后續(xù)發(fā)展受到全球蛋白資源不足的限制。如何提高海洋捕撈魚(yú)類作為飼料產(chǎn)品的利用效率,在人工配合飼料中降低魚(yú)粉的使用量, 尋找新型的魚(yú)粉替代物就是一個(gè)重要的研究課題。這類工作的重大意義在于, 既可以減輕對(duì)海洋魚(yú)類資源的捕撈壓力, 實(shí)現(xiàn)漁業(yè)資源的可持續(xù)發(fā)展, 又因?yàn)轱暳现恤~(yú)粉用量的減少而降低人工配合飼料的成本。

利用海洋捕撈漁獲物開(kāi)發(fā)新型的蛋白質(zhì)原料尤其是酶解蛋白質(zhì)原料等日益受到關(guān)注。酶解魚(yú)漿是以海洋捕撈的小雜魚(yú)全魚(yú)為原料, 絞碎后加入外源性的蛋白酶或利用原料中自身的酶, 經(jīng)過(guò)酶解、減壓濃縮制作成水分含量為42%—46%的漿狀產(chǎn)品。魚(yú)溶漿是魚(yú)粉生產(chǎn)過(guò)程中的副產(chǎn)物, 海洋捕撈的漁獲物經(jīng)過(guò)蒸煮后進(jìn)行壓榨, 得到壓榨液和壓榨餅(固形物), 壓榨餅經(jīng)過(guò)蒸汽管道烘干后得到脫脂的蒸汽魚(yú)粉。壓榨液經(jīng)過(guò)油水分離后得到初級(jí)魚(yú)油和液體部分(中國(guó)魚(yú)粉生產(chǎn)者稱為“魚(yú)湯”), 液體部分經(jīng)過(guò)減壓、加溫濃縮, 得到含水量為70%左右的魚(yú)溶漿。在早期的魚(yú)粉生產(chǎn)中, 魚(yú)溶漿被返回到壓榨餅, 一起經(jīng)過(guò)蒸汽管道烘干后, 得到返漿的魚(yú)粉, 即半脫脂蒸汽魚(yú)粉?，F(xiàn)在, 把這類魚(yú)溶漿進(jìn)一步減壓、加溫濃縮至水分含量為55%左右, 即為本試驗(yàn)所使用的魚(yú)溶漿[3]。近年來(lái), 一些魚(yú)粉生產(chǎn)企業(yè)以這類魚(yú)溶漿為原料, 采用酶解生產(chǎn)工藝, 加入木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶等蛋白質(zhì)水解酶, 在50—55℃酶解3—5h, 得到本試驗(yàn)中使用的酶解魚(yú)溶漿。酶解魚(yú)漿和酶解魚(yú)溶漿都稱為海洋生物水解蛋白。

海洋生物水解蛋白相對(duì)于魚(yú)粉擁有更多溶解于水的蛋白質(zhì)、小肽和游離氨基酸等。海洋水解蛋白直接應(yīng)用于飼料中可有效保持魚(yú)蛋白水解物新鮮度和魚(yú)體特殊活性成分, 這在部分海水魚(yú)類,尤其是肉食性魚(yú)類中已得到初步的應(yīng)用, 并取得良好的養(yǎng)殖效果。其主要特點(diǎn)是維護(hù)原料魚(yú)體蛋白質(zhì)和油脂新鮮度、保持海水魚(yú)類原料對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物生長(zhǎng)的優(yōu)勢(shì)[4]。

FIFO值是評(píng)價(jià)漁業(yè)捕撈的野生魚(yú)轉(zhuǎn)化為養(yǎng)殖魚(yú)、蝦效率的實(shí)用性評(píng)價(jià)指標(biāo)[5]。海洋蛋白源對(duì)魚(yú)粉的替代可以有效地減小FIFO指數(shù), 特別是在肉食性魚(yú)類飼料中, 例如鮭(Salmo salar)(從1995—2006,FIFO從7.5下降到4.9)、鱒(Salmo playtcephalus)(從6.0下降到3.4)。隨著水產(chǎn)飼料技術(shù)的發(fā)展, FIFO值會(huì)隨著魚(yú)粉和魚(yú)油在水產(chǎn)飼料配方中添加量的減少而下降[6]。

黃顙魚(yú)(Pelteobagrus fulvidraco)隸屬鯰形目、鲿科、黃顙魚(yú)屬。因?yàn)辄S顙魚(yú)的市場(chǎng)價(jià)格高, 養(yǎng)殖黃顙魚(yú)可以獲得更高的經(jīng)濟(jì)效益, 黃顙魚(yú)在中國(guó)很多地區(qū)都有養(yǎng)殖、養(yǎng)殖量也逐年增長(zhǎng)。目前的黃顙魚(yú)配合飼料中還主要以蒸汽魚(yú)粉作為主要蛋白質(zhì)原料, 其使用量一般為28%—35%。鑒于海洋水解蛋白部分替代魚(yú)粉獲得良好的養(yǎng)殖效果, 而在無(wú)魚(yú)粉日糧中直接添加海洋水解蛋白的研究還很少。本試驗(yàn)以黃顙魚(yú)為試驗(yàn)對(duì)象, 以蒸汽魚(yú)粉為對(duì)照, 比較研究魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)漿對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)速度、飼料效率的影響, 探討這類新型水解蛋白原料取代魚(yú)粉的可行性及其在水產(chǎn)飼料中的養(yǎng)殖效果、添加量。

1 材料與方法

1.1 飼料原料

魚(yú)粉為秘魯生產(chǎn)的日本級(jí)蒸汽紅魚(yú)粉, 其原料魚(yú)種類主要為秘魯鳀(Peruvian anchovy)。酶解魚(yú)漿為以新鮮或冰凍的海洋捕撈的雜魚(yú)(整魚(yú))為原料, 機(jī)械打漿(顆粒細(xì)度80—100目)后轉(zhuǎn)入容積為10000 L的酶解反應(yīng)釜中, 加入工業(yè)蛋白酶(木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶混合物)在55℃酶解5h, 之后轉(zhuǎn)入另一個(gè)反應(yīng)釜中加熱至95℃ 1h(滅活蛋白質(zhì)酶、微生物), 減壓蒸餾(70℃—80℃)濃縮到水分含量45%—50%的膏狀物。魚(yú)溶漿是海洋捕撈的雜魚(yú)經(jīng)過(guò)蒸煮后進(jìn)行壓榨, 得到壓榨液和壓榨餅(固形物),壓榨液經(jīng)過(guò)油水分離后得到初級(jí)魚(yú)油和液體部分,液體部分經(jīng)過(guò)減壓、加溫濃縮, 得到含水量為70%左右的魚(yú)溶漿。魚(yú)溶漿再經(jīng)過(guò)酶解得到酶解魚(yú)溶漿。酶解魚(yú)漿、酶解魚(yú)溶漿和魚(yú)溶漿均為浙江省舟山豐宇生物有限公司生產(chǎn)的商業(yè)化產(chǎn)品。

魚(yú)溶漿(SW)、酶解魚(yú)溶漿(SWH)、酶解魚(yú)漿(FPH)和魚(yú)粉(FM)的營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1, 采用氨基酸分析測(cè)定不同樣本水解氨基酸、游離氨基酸組成,結(jié)果見(jiàn)表2。由表1和表2可知, SW、SWH和FPH的酸溶蛋白含量、肽含量和游離氨基酸含量顯著高于FM(P＜0.05)。SW、SWH和FPH的酸溶蛋白含量分別為FM組的10.45、16.42和12.95倍, 肽含量分別為FM組的10.37、15.55和9.88倍, 游離氨基酸含量分別為FM組的11.13、23.44和37.96倍。不同分子量肽的含量在不同樣本間也有很大的差異。用excel對(duì)SW、SWH和FPH的水解氨基酸組成與FM的水解氨基酸組成做correlation相關(guān)性分析(表2)發(fā)現(xiàn)SW、SWH和FPH的水解氨基酸成分與FM的水解氨基酸成分相關(guān)系數(shù)分別為0.9959、0.9964和0.9985, 具有很強(qiáng)的相關(guān)性。

1.2 試驗(yàn)日糧配方與飼料制備

按照等氮、等脂肪、等磷要求進(jìn)行黃顙魚(yú)試驗(yàn)日糧的配方設(shè)計(jì), 配方見(jiàn)表3。以日糧中含28.0%的日本級(jí)秘魯魚(yú)粉(FM)為對(duì)照組, 按照魚(yú)粉蛋白質(zhì)量的15%、30%和45%分別設(shè)計(jì)3個(gè)劑量梯度, 分別得到含SW4.1%、8.1%和12.2%, 含SWH4.2%、8.5%和12.7%, 含F(xiàn)PH 4.1%、8.2%和12.0%(以含水量10%計(jì)算樣品占配方中的百分比)共9個(gè)試驗(yàn)日糧。

在試驗(yàn)配方中, 以混合油脂(魚(yú)油∶磷脂油∶豆油=1∶1∶2)平衡試驗(yàn)日糧中脂肪含量, 以磷酸二氫鈣平衡各試驗(yàn)配方總磷含量, 以米糠粕保持試驗(yàn)日糧原料的配方比例平衡。在3個(gè)梯度的日糧中, 大豆?jié)饪s蛋白、棉籽蛋白、雞肉粉(美國(guó)Tyson)按照一定比例變化, 以保持各試驗(yàn)組日糧的氨基酸平衡性。玉米蛋白粉作為黃顙魚(yú)日糧蛋白質(zhì)和色素來(lái)源而在配方中保持一致。

原料粉碎后過(guò)60目篩, 按照表3的配方進(jìn)行日糧原料的配合。各類原料用混合機(jī)混合均勻后, 用華祥牌HKj200制粒機(jī)加工成制成直徑1.5 mm, 長(zhǎng)3—5 mm的顆粒飼料。顆粒飼料采用自然風(fēng)干的方式風(fēng)干, 在-20 ℃密封保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 原料營(yíng)養(yǎng)成分表(g/100 g, 干物質(zhì)基礎(chǔ))Tab. 1 Chemical compositions of ingredient (g/100 g, dry matter)

1.3 日糧游離氨基酸

由表4可知, 9個(gè)試驗(yàn)組的游離氨基酸含量顯著高于魚(yú)粉對(duì)照組。在試驗(yàn)組中隨著添加梯度的升高游離氨基酸的含量也升高。

1.4 試驗(yàn)魚(yú)與養(yǎng)殖管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)在浙江一星集團(tuán)的養(yǎng)殖基地池塘網(wǎng)箱中進(jìn)行。在面積為40 m×60 m的池塘中設(shè)置試驗(yàn)網(wǎng)箱(規(guī)格為長(zhǎng)1.5 m×寬1.5 m×深2.0 m)30個(gè), 以海鹽縣長(zhǎng)山河河水為水源。池塘中設(shè)置2套增氧機(jī)系統(tǒng), 在池塘中心位置設(shè)置1臺(tái)1.5 kW的葉輪式增氧機(jī), 另設(shè)置1臺(tái)2.2 kW、連接若干微孔增氧盤的鼓風(fēng)機(jī), 微孔增氧盤(直徑20 mm、材料為納米曝氣管)設(shè)置與網(wǎng)箱底部, 投喂前使用網(wǎng)箱底部微孔增氧1h, 其余時(shí)間一直使用葉輪式增氧。投喂期間關(guān)閉增氧設(shè)備。

試驗(yàn)用黃顙魚(yú)(共3000尾)幼魚(yú)購(gòu)自浙江省湖州農(nóng)業(yè)合作社, 以對(duì)照組日糧, 每天投喂3次(5:30—7:00、12:00—13:30、18:00—20:00)馴養(yǎng)2周。選取規(guī)格整齊的平均質(zhì)量為(18.68±0.10) g黃顙魚(yú)種1350尾,0.3%食鹽溶液浸泡15min消毒后, 隨機(jī)分成10組, 每組設(shè)3個(gè)重復(fù)(n=3), 共30個(gè)試驗(yàn)單元(網(wǎng)箱), 每個(gè)網(wǎng)箱投放45尾黃顙魚(yú)。

各組試驗(yàn)日糧日投喂量為試驗(yàn)魚(yú)體重的3%—5%, 日投喂3次(5:30—7:00、12:00—13:30、18:00—20:00), 三餐日糧的投喂比例為2∶2∶3。每10天估算1次魚(yú)體增重量, 調(diào)整試驗(yàn)日糧投喂量, 正式投喂60d。

每天6:00和18:00測(cè)試并記錄水溫, 試驗(yàn)期間水溫25.5—34.4℃。每5天測(cè)定水下30 cm的水質(zhì)指標(biāo),試驗(yàn)期間水體溶解氧濃度＞7.0 mg/L, pH 8.0—8.4,氨氮濃度＜0.10 mg/L, 亞硝酸鹽濃度＜0.005 mg/L,硫化物濃度＜0.05 mg/L。

1.5 樣品采集

在試驗(yàn)開(kāi)始時(shí), 隨機(jī)抽取黃顙魚(yú)6尾, 作為初始樣本進(jìn)行全魚(yú)常規(guī)體成分分析。養(yǎng)殖60d后, 停食24h進(jìn)行試驗(yàn)采樣: (1)對(duì)每個(gè)網(wǎng)箱黃顙魚(yú)進(jìn)行稱重,計(jì)數(shù), 用于計(jì)算成活率、特定生長(zhǎng)率和飼料系數(shù)。(2)從每個(gè)網(wǎng)箱隨機(jī)抽取3尾魚(yú)保留全魚(yú)樣品, 用于進(jìn)行常規(guī)體成分測(cè)定。(3)從每個(gè)網(wǎng)箱隨機(jī)取10尾魚(yú), 以1 mL的無(wú)菌注射器自尾柄靜脈采血, 將血樣置于2 mL Eppendorf管中室溫靜置3h, 隨后用離心機(jī)在室溫條件下3500 r/min離心10min。每尾黃顙魚(yú)取血清0.2 mL混合分裝于0.5 mL Eppendorf管中,每個(gè)網(wǎng)箱的血樣作為1個(gè)樣品, 用液氮速凍后于-50℃冰箱保存待測(cè), 用于血清游離氨基酸和其他成分的分析。

1.6 樣品分析方法

采用低溫冷凍干燥法(LGJ-18B型冷凍干燥機(jī),北京四環(huán)科學(xué)儀器有限公司)干燥至恒重用于測(cè)定水分含量。所有樣品蛋白質(zhì)采用凱氏定氮法(GB 5009.5-2010; 所用消化儀: LNK 87 型, 江蘇省宜興市科教儀器研究所)測(cè)定; 脂肪含量用石油醚索氏抽提法(GB/T14772-2008; 所用儀器: KN 520型, 濟(jì)南阿爾瓦儀器有限公司)測(cè)定; 用馬弗爐(GB 5009.4—2010; 8-10TP型, 上?；厶﹥x器制造有限公司)測(cè)定灰分; 采用分光光度法(ISO 6491-1998;L2S型, 上海儀電有限公司)測(cè)定原料和日糧總磷的含量。

游離氨基酸測(cè)定方法: (1)原料游離氨基酸, 日糧游離氨基酸測(cè)定: 取1 g樣品, 加5 mL 5%磺基水楊酸, 渦旋3min充分混勻后, 12000 r /min、4℃離心10min, 取上清液, 沉淀用5%磺基水楊酸 5 mL再次清洗離心, 合并上清液即為提取液; (2)血清游離氨基酸: 取黃顙魚(yú)血清0.4 mL, 加入5%磺基水楊酸0.8 mL, 渦旋3min充分混勻, 4℃靜置12h, 12000 r /min、4℃離心10min, 取上清液為提取液。提取液過(guò)0.45 μm水系微孔濾膜, 用(S-433D型, 德國(guó)Sykam有限公司)氨基酸分析儀分離測(cè)定。

水解氨基酸測(cè)定方法: 取0.1 g樣品, 加入6 mol/L HCl(0.1%苯酚m/v)10 mL, 110℃水解24h, 定容至100 mL, 取部分樣品真空干燥, 以0.02 mol/L HCl等體積溶解即為提取液。提取液過(guò)0.45 μm水系微孔濾膜, 用(S-433D, 德國(guó)Sykam有限公司)氨基酸分析儀分離測(cè)定。

表2 原料水解氨基酸、游離氨基酸成分表(干物質(zhì)基礎(chǔ), g/100 g)Tab. 2 Composition of hydrolyzed amino acids and free amino acids of raw material (dry matter, g/100 g)

2 結(jié)果

2.1 黃顙魚(yú)生長(zhǎng)速度和飼料效率

在池塘網(wǎng)箱中經(jīng)過(guò)60d的養(yǎng)殖試驗(yàn), 得到10個(gè)試驗(yàn)組黃顙魚(yú)生長(zhǎng)速度和飼料效率的結(jié)果(表5)。

由表5可知: 10個(gè)試驗(yàn)組的黃顙魚(yú)成活率為94.81%—100%, 各處理組間無(wú)顯著差異(P＞0.05)。表明SW、SWH和FPH完全替代魚(yú)粉后, 沒(méi)有對(duì)黃顙魚(yú)的成活率造成影響。

以SGR代表黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)速度, 以FM組為對(duì)照, SW的3個(gè)試驗(yàn)組中SW15、SW30和SW45的SGR相對(duì)FM組分別下降12.64%、9.89%和20.33%,差異顯著(P＜0.05), SWH和FPH試驗(yàn)組中SWH15和SWH45相對(duì)于FM組分別下降了8.79%和14.84%,FPH15和FPH45分別下降13.18%和15.38%, 差異顯著(P＜0.05)。而SWH30和FPH30的SGR與FM組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。結(jié)果表明, 在黃顙魚(yú)日糧中,8.5%的SWH和8.2%FPH完全替代28.0%的魚(yú)粉對(duì)黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)速度無(wú)顯著影響(P＜0.05)。

SW組的SGR與SWH和FPH組的比較, 同等添加量下SWH和FPH組的SGR顯著高于SW組(P＜0.05)。在同等添加梯度下的SWH和FPH組的SGR沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)。結(jié)果表明同等添加量的酶解魚(yú)溶漿和酶解魚(yú)漿對(duì)黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)效果優(yōu)于魚(yú)溶漿。

以FCR表示日糧利用效率,FCR變化規(guī)律與SGR相反。以FM為對(duì)照, 添加SW的3個(gè)試驗(yàn)組FCR升高18.79%—44.85%, 差異顯著(P＜0.05);SWH45和SWH15分別比對(duì)照組高27.88%和16.97%, 差異顯著(P＜0.05), SWH30與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P＞0.05); FPH45和FPH15分別比對(duì)照組高29.70%和30.30%, 差異顯著(P＜0.05), FPH30與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

在3種蛋白源試驗(yàn)組中, 添加量從15%升到45%, 試驗(yàn)黃顙魚(yú)的SGR都是先增加后降低,FCR先降低后增加, 呈現(xiàn)二次函數(shù)關(guān)系。

表3 試驗(yàn)日糧配方及化學(xué)組成(干物質(zhì)基礎(chǔ))Tab. 3 Formulation and proximate analysis of the experimental diets (dry matter)

將SW、SWH和FPH組飼料中游離氨基酸含量與黃顙魚(yú)SGR的關(guān)系作圖(圖1)。由圖1可知: 隨著游離氨基酸含量的增加,SGR變化趨勢(shì)表現(xiàn)為先增加后降低。這說(shuō)明飼料中少量過(guò)低或者過(guò)量的游離氨基酸含量都不利于試驗(yàn)黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)。

表4 日糧游離氨基酸含量(干物質(zhì)基礎(chǔ))Tab. 4 Contents of free amino acids in feed (dry matter)

圖1 飼料游離氨基酸含量與SGR的關(guān)系(n=3)Fig. 1 The relationship between free amino acid content of feed and SGR (n=3)

2.2 SW、SWH和FPH的FIFO值

根據(jù)日糧中海洋蛋白源的添加比例計(jì)算日糧中FM、SW、SWH和FPH的FIFO值(表6)。

由表6可知, 試驗(yàn)組的FIFO值均低于FM組。這說(shuō)明在黃顙魚(yú)日糧中, 使用SW、SWH和FPH完全替代魚(yú)粉, 可以顯著降低FIFO值。與FM組的FIFO值相比, SW30、SWH30和FPH30的FIFO值僅為0.67、0.61和0.60, 降低67.67%—70.15%(P＜0.05)。這表明在相同養(yǎng)殖效果的條件下, 使用適量的SW、SWH和FPH可以顯著降低試驗(yàn)黃顙魚(yú)的FIFO值, 實(shí)現(xiàn)對(duì)海洋生物蛋白資源的節(jié)約效果。

2.3 SW、SWH和FPH對(duì)黃顙魚(yú)血液指標(biāo)的影響

由表7可知, 代表肝胰臟健康的指標(biāo): (1)與FM組比較, 谷草轉(zhuǎn)氨酶含量在SW和SW45組中顯著高于FM組(P＜0.05), SW30和SW15與FM組無(wú)顯著差異(P＞0.05); 在SWH試驗(yàn)組中SWH30與FM組無(wú)顯著差異(P＞0.05), SWH45和SWH15顯著高于FM組(P＜0.05); FPH的3個(gè)組與FM組都沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)。(2)FM、SWH30、FPH30和SW30的谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量顯著低于其他試驗(yàn)組(P＜0.05), 各梯度之間有先上升后下降的趨勢(shì)。(3)FPH15的總膽紅素含量相對(duì)對(duì)照組顯著降低(P＜0.05), 其他試驗(yàn)組與FM組無(wú)顯著差異(P＞0.05)。代表血清營(yíng)養(yǎng)素的指標(biāo): (1)在總蛋白含量中, SWH30與FM組沒(méi)有顯著差異(P＞0.05), 其他各組相對(duì)FM組總蛋白含量都有降低, 其中FPH45和FPH15最低。(2)在葡萄糖含量中SHW45相對(duì)FM組顯著降低(P＜0.05), 其他各組與FM組無(wú)顯著差異(P＞0.05), 其中FPH15的葡萄糖含量最高, SWH45的葡萄糖含量最低。(3)在膽固醇含量中, 所有試驗(yàn)組相對(duì)FM組都有降低, 其中SW15最低; FM、SW30和SWH45的甘油三酯含量最高, SWH45、SW15以及FPH三個(gè)試驗(yàn)組相對(duì)FM組顯著降低(P＜0.05)。

3 0長(zhǎng)2.4 3 a b 0.0 3 H 4 5.0 4 a 1 8.6 7±/體1 0 0.0 0±0.0±0 n r a t i o 4 6.0 2±F P.0 4 c d 1.5 4±0.1 2 a b量.0 6 a b 2.1 4±0.2 6 c d 1.3 8體×0.0 5 2.5 7 H 3 0 6 c e e d c o n v e r s i o 1.5 5±0.0 1.3 4 c 1 0 0 0 9±±0 2±F P 9 8.5 8 a b 1.7 9 1 8.6 F, %)=±0 a y s; F質(zhì)2.3 0 a b 5 4.6 6±滿b e r o f d (C 0.0 1 2.1 1±0.1 1 c d 2.1 5±0.2 H 1 5 1.3 7±0.0 7 a.6 1±度3.8 5.0 1±.5 6±e i g h t, t i s t h e n F P 4 c d 1.6 9質(zhì); 肥u m加9 5 1 8 1.2 4 a b 4 8.0 5 a 0.1 0增S W ±0量體0±1.2 8 H 4 5 1 8.6 5±/魚(yú)量9 9.2 6±1.4 0 4 7.3消i n i t i a l w耗1.5 5±0.0 5 a b 1.5 8±0.0)料0.5 8 c 2.5 7.0 2 d 1 b c 1.6 6±0.0(n=3 H 3 4 c 0)=0.0 6 4 a 飼3 a b 1.5 6±0.0 C R 1 8.6 5±1 b c 1.8 1±0 S W 9 8.5 2±(F e i g h t, t h e.3 0±率系0.1 0 1.2 8料H 1 5 1.6 6±0.2效1.9 3±0.4用.8 3±.2 6±數(shù)e a n w 2.4 4 b c 5 5利1.4 4±0.0 1 8; 飼e n d m.6 4±糧S W 養(yǎng)數(shù)9 9 5 0日天和飼度2.5 7 g t h 3 9 b c 1.4 5±0.1 4 a 3 b c 2.3 9±0.3 3 d 3.7 0 a重0.0 5速c±0.0 7 a b終u l a, W t, W 0 r e s p e c t i v e l y i n d i c a t e t h e 2±4 5長(zhǎng)1 8.6均生S W 5±c e a n d f e e d e f f i c i e n c y o f y e l l o w c a t f i s h, t為4 4.5 4±始魚(yú)9 8.5 1.4 7初o d y l e n a s s / b 顙a n t h p e r f o r m 、0.1 2 5 黃2.2 1 b 3.4 0 1.5 1±0.0 8 b c 1.5 8±0.0 7 c 3 0重o d y m 2.1 4±0.3 0 c d 1.9 6±0.1均6±表1 8.6 9±9 4.8 1±末G r o w S W 3.7 9 a b 5 0.3 1.6 4±0.0表f o r m 示, W t、W 0分T a b. 5 0.0 2 2.2 2別1.5 9±0 1 5, %9 7.7 8±)=r (C F 1 8.6 5±4 8.6 1±.1 4 a b c S W 0 0×b中o n d i t i o n f a c t o 3 a 5 5.6 7±0.0 6 6±1.6 5±0.0 1.7 2±0.0 8 d 2±1.2 2 c 2.5 7 e i g h t (g)1 8.6 F M 1 0 0×(l n W t -l n W 0)/t; 式1.8 2±0.0 4 d) =(l n W t -l n W 0) /t; i n t h e 1 0 a i n; C/d 0×e i g h t g 1 0 R, %R/d)=e i g h t (g), %S G n f a c t o r R (%)(S G R F C e a n w p t i o e a n w S u r v i v a l (%)9 8.5 I n d e x n / f i s h w i t i o I n i t i a l m F i n a l m 數(shù)標(biāo)C o n d 系n s u m料率率長(zhǎng)長(zhǎng)率指生c o 度生p e c i f i c g r o w t h r a t e (S G飼重活定定重: 特t e: S 滿F e e d 特均肥成均末注N o )=初C R(F

為樣同H 4 5 F P 1 2 0.0.3 5 3 9.3 2 1 5 7±1 4 7 a b±0.0 7 c 2 1 1 6值-4 9.2 5 1.0 2出m e r c i a l f i s h o t a l f i s h y i e l d(粉g c o m漿.5 e a l, 2 2 2魚(yú))產(chǎn)i s h o u t: T H 3 0 F P 8 2.0 3 6 8.5 7 4.2 1 4 6 0±6 0.4 c 0.6 0±0.0 1 b-7 0.1 5解酶0 4 a b 2 4、g; 3. F蝦g/1 0 0 0.0 2 a解±0漿F P 酶4 1 H 1 5 1 8 4.3 2 2.5.0 7 3 7.1 0.3 4-8 3.0 8±1設(shè), 假3 c 粉H 4 5 S W 1 2 7.0 5 7 0.8 2 2 8 3.1 1.0 7±0.0-4 6.7 7 2 2 2.5 g魚(yú)r o d u c t i o n e f f i c i e n c y o f f i s h m a l p l y s i s (m e a l) i s 2魚(yú)y d r o)0 2 1 2 8±5 5.8 a b 2 1 6 1生9 0 b c 2 4 8 9±2 6.1 c粉H 3 S W 8 5.0 2.0可1 5 2 8.1 0.6 1±0.0 1 b 9.6 5(f i s h i n/f i s h o u t r a t e, n=3-6魚(yú)0 0 g活1 0 3 8.0 5 a t h e c u r r e n t i n t e r n a t i o n H 1 5.0, 每±2 t o±0 h y d r o l y s i s, f i s h p r o t e i n h平值4 2 S W 1 8 8.8 7 5 5.1 2 2 8 8 0.3 3 F I F O -8 3.5 8水t e i n c c o r d i n g p p r o產(chǎn)生顙0 c 粉魚(yú)4 5魚(yú)際S W 9 3.3 0 4±1 6 7 a 6 黃國(guó)1 2 2.0 i e t a r y; 2. A f y e l l o w c a t f i s h 5 4 8.3-4 5.2 7 1.1 0±0.1 2 1表?yè)?jù)o f d. 根v a l u e o; 2 7 0 a b 2 0.0 5 b t i o n量m p 3 0產(chǎn)糧F I F O S W 8 1.0 4.0 3 6 1 4 5 6.2 2 1 8 8±1 0.6 7±0 6.6 7-6日T a b. 6耗t h a t t h e y i e l d v a l u e o f s h r i m e d驗(yàn)試量1 5 S W 4 1.0 1 8 4.3 2 2 5 1±1 1 4 a b c 7 3 7.1±0.0 2 a 0.3 3-8 3.5 8元總e a s s u m行活平出d y, w×3個(gè)產(chǎn)糧試消單魚(yú)F M 2 8 0.0 5 8.4 0.0 0 3 3.7日元0 5±5 4.8 c 2 5 2.0 1±0.0 4 d 1 2 5 0行o f f i s h d i e t *3 p a r a l l e l t e s t u n i t c o n s u e a l t o f g/1 0 0 0 g單平h e r e f o r e, i n t h i s s t u F i s h i n/f i s h o u t f i s h. T O=e a m o u n i e t g c a l c u l a t i o n b e p r o d u c e d b y 1 0 0 0 g. F U s e r a t i o i n d i e t驗(yàn)w i t h f i s h m的F i s h o l a t e d i n t h e D 活量g)T h)量I F計(jì)g/1 0 0 0 I n d e x a r e d e n t s.; 4魚(yú)=魚(yú)o u t g 2比e r i m 例魚(yú)u t: 3標(biāo)指的f o r m的用活u l a (g/1 0 0 0(g/1 0 0 0 g F i s h i n g 1 C o m p F i s h i s h i n =F i s h i n/f i s h o u t較i s h i n值算0 g; 3. 活個(gè)比使計(jì)2 2 2.5 g N o 組g r o u p (%)算量: 1. F中/1 0 0料中粉注3 p a r a l l e l e x p糧l i v i n g f i s h c a l c u日飼魚(yú)與t e: 1.F m e a l c a n f r o m

上述結(jié)果表明, 過(guò)高添加量的SW、SWH和FPH會(huì)使試驗(yàn)黃顙魚(yú)的谷草轉(zhuǎn)氨酶活性升高, 過(guò)高或者過(guò)低添加SW、SWH和FPH都會(huì)使谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性升高。SW、SWH和FPH能降低試驗(yàn)黃顙魚(yú)的膽固醇和甘油三脂含量。這說(shuō)明在試驗(yàn)日糧中過(guò)高或者過(guò)低添加SW、SWH和FPH會(huì)對(duì)試驗(yàn)黃顙魚(yú)的健康造成不利影響。而適量添加SW、SWH和FPH不會(huì)對(duì)黃顙魚(yú)的健康造成不利影響。

2.4 SW、SWH和FPH對(duì)黃顙魚(yú)體成分的影響

由表8可知: 各試驗(yàn)組黃顙魚(yú)的水分沒(méi)有顯著差異(P＞0.05); FM組的蛋白含量最高, SW組, 以及FPH中的FPH45和FPH15顯著低于FM組(P＜0.05);FPH15的脂肪含量顯著低于對(duì)照組(P＜0.05), 其他各組與對(duì)照組沒(méi)有顯著差異(P＞0.05); SW45和SWH15組的灰分顯著高于對(duì)照組(P＜0.05), 其他各組與對(duì)照組相比沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)。

上述結(jié)果表明在日糧中過(guò)高或者過(guò)低添加SW、SWH和FPH會(huì)降低試驗(yàn)黃顙魚(yú)的蛋白質(zhì)含量。添加8.5%的SWH和8.2%的FPH對(duì)黃顙魚(yú)的體成分沒(méi)有顯著影響。

3 討論

生命起源于海洋, 海洋捕撈的漁獲物生產(chǎn)的飼料原料如魚(yú)粉可能含有水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)成分, 酶解魚(yú)溶漿和酶解魚(yú)漿是以海洋捕撈漁獲物為原料生產(chǎn)的新型蛋白質(zhì)原料。本試驗(yàn)將少量海洋水解蛋白配合陸生動(dòng)物蛋白和植物蛋白與魚(yú)粉做對(duì)比試驗(yàn), 探討這類新型蛋白質(zhì)原料替代魚(yú)粉, 節(jié)約海洋魚(yú)粉資源, 降低飼料成本的目的。

3.1 在黃顙魚(yú)日糧中8.5%的SWH和8.2%的FPH可完全替代28.0%的魚(yú)粉

本試驗(yàn)得到的重要結(jié)果是: 在黃顙魚(yú)日糧中,以8.5%的SWH和8.2%的FPH(干物質(zhì))可完全替代28.0%的魚(yú)粉, 而前者的蛋白質(zhì)量?jī)H為后者的30%。這個(gè)結(jié)果顯示, SWH、FPH與FM相比較, 已經(jīng)超越了蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的作用(其蛋白質(zhì)量?jī)H為魚(yú)粉蛋白質(zhì)量的30%), SWH和FPH中的活性物質(zhì)對(duì)黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)、代謝等產(chǎn)生了更大的生理作用。

海洋水解蛋白直接應(yīng)用于飼料中可有效保持魚(yú)蛋白水解物新鮮度和魚(yú)體特殊活性成分, 這在部分海水魚(yú)類, 尤其是肉食性魚(yú)類中已得到初步的應(yīng)用, 并取得良好的養(yǎng)殖效果。其主要特點(diǎn)是維護(hù)原料魚(yú)體蛋白質(zhì)和油脂新鮮度、保持海水魚(yú)類原料對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物生長(zhǎng)的優(yōu)勢(shì)[4]。已有研究表明, 在日糧中添加適量的海洋水解蛋白可提高魚(yú)類生長(zhǎng)速度和存活率[7,8], 減少病害[9,10], 增強(qiáng)消化酶活性[11,12],促進(jìn)氮的吸收[13], 誘導(dǎo)非特異性免疫[14,15]。這些生理學(xué)效應(yīng)的產(chǎn)生主要認(rèn)為是因?yàn)楹Ｑ蟮鞍自春胸S富的水溶性蛋白質(zhì)、小肽以及游離氨基酸, 以及一些可能存在的未知成分。例如, ?；撬崾莿?dòng)物體內(nèi)廣泛存在的有機(jī)酸, 對(duì)腸道發(fā)育、促進(jìn)生長(zhǎng)有重要的作用[16,17]; 游離氨基酸, 特別是Glu、Ala、Pro、Leu和Tau等味覺(jué)相關(guān)的氨基酸, 具有刺激食欲的作用[18,19]。本試驗(yàn)的試驗(yàn)材料魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)溶漿和酶解魚(yú)漿的物質(zhì)組成比例見(jiàn)表1游離和水解氨基酸含量見(jiàn)表2, 與魚(yú)粉比較魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)溶漿和酶解魚(yú)漿的酸溶蛋白含量分別為魚(yú)粉的10.45、16.42和12.95倍; 肽含量分別為魚(yú)粉組的10.37、15.55和9.88倍; 游離氨基酸含量分別為魚(yú)粉的11.13、23.44和37.96倍; ?；撬岷糠謩e為魚(yú)粉的117、119和156倍。樣本中氨基酸模式與魚(yú)粉比較,相關(guān)系數(shù)分別為0.9959、0.9964和0.9985, 沒(méi)有顯著性的差異。這個(gè)結(jié)果顯示, 雖然氨基酸模式?jīng)]有顯著性的差異, 但魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)漿較魚(yú)粉含有更多的酸溶蛋白、肽、游離氨基酸、?；撬岬? 甚至含有我們目前未知的物質(zhì)類型?？梢哉J(rèn)為, 與魚(yú)粉比較, 魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)溶漿和酶解魚(yú)漿含有更多的可消化蛋白、肽和氨基酸, 也含有更多的生物活性物質(zhì)如牛磺酸、小肽等, 這些活性物質(zhì)在無(wú)魚(yú)粉日糧中提供水產(chǎn)所需要的特殊成分, 這些成分在飼料誘食性、促進(jìn)生長(zhǎng)、維護(hù)魚(yú)體生理健康等方面應(yīng)該具有很大的生理作用, 因此, 這類酶解魚(yú)蛋白原料應(yīng)該具有比魚(yú)粉更好的養(yǎng)殖效果。在Tang等[20]對(duì)大黃魚(yú)(Pseudosciaena croceaR.)的研究結(jié)果顯示: 在65%的魚(yú)粉日糧中用酶解魚(yú)漿替代5%、10%和15%的魚(yú)粉, 試驗(yàn)組日糧帶來(lái)的游離氨基酸使大黃魚(yú)生長(zhǎng)加快, 免疫力提升。Espe等[21]在49%的魚(yú)粉日糧中添加5%的酶解魚(yú)漿, 大西洋鮭魚(yú)(Salmo salarL.) 生長(zhǎng)顯著升高。Hevroy等[22]在對(duì)大西洋鮭的研究中發(fā)現(xiàn): 日糧中缺乏酶解魚(yú)漿, 大西洋鮭魚(yú)生長(zhǎng)降低, 酶解魚(yú)漿水平升高, 生長(zhǎng)狀態(tài)逐漸恢復(fù)。Khosravi等[23]在對(duì)紅鯛和牙鲆的研究結(jié)果顯示: 在日糧中添加2%酶解蝦漿和酶解魚(yú)漿有利于提高紅稠(Pagrus major)和牙鲆(Parallichthys olivaceus)生長(zhǎng), 增強(qiáng)非特異性免疫。在本試驗(yàn)中, SW、SWH和FPH的水溶性蛋白質(zhì)、小肽以及游離氨基酸顯著高于FM組, 利用海洋水解蛋白的優(yōu)勢(shì)配合陸生動(dòng)物蛋白和植物蛋白與魚(yú)粉做對(duì)比試驗(yàn)發(fā)現(xiàn): 8.5%的SWH和8.2%的FPH與28%的FM組的黃顙魚(yú)生長(zhǎng)和存活率沒(méi)有顯著差異, 表明這個(gè)添加量與28%的魚(yú)粉對(duì)黃顙魚(yú)具有同等生長(zhǎng)效果, 充分顯示出酶解魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)漿的產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)。

c 5 H 4 1.0 7 2.9 9 a 1.9 9 a b 0.4 9 a b F P.0 2±3 2 0.1 5 a b 5 0.7 3±0.7 2 b c 3 1.6 4±0.1 9 a b 1 3.9 5±0 H 3 F P 3.7 0.4 4±3 2.2 5±5 3.0 4±3 3 0.1 5 a b 1 3.5 1±5 H 1 F P 3.7 8.2 0±0.3 8 a 3.2 8 c 3.5 4 b c 3 5.7 7±.3 0±0.7 9 a b 1 3 3 4.7 0±3)5 H 4 2.5 1 a t t e r) (n=S W .1 9±3 4 4.1 8 a b 5 0 3.8 1 a b 5 1.4 5±0.9 4 a b 1 3 3 4 w c a t f i s h (d r y m 0.8 4±).6 2±質(zhì)H 3 1.4 4基礎(chǔ)0.8 4 a物S W(干3 3.6 7±2 7.9 7±1 3.4 6±響e l l o影的分5 H 1 3.2 6 1.3 8 a b 5 3.7 6±0.8 5 a b c 0.3 9 b成體p o s i t i o n o f y S W魚(yú).3 7±3 4.1 3±5 3.5 5±3 1.2 4±1 4顙黃對(duì)H o n b o d y c o m F P 4 5 S W 1.0 0 7±1.8 1 a 1±2.4 1 a 1.0 7 b 0±0.8 0 a b 1 4.4和P H 3 1.6 5 0.7 2 7.5 2±H d F S W a n W H W、3 0 2.1 6 1.2 3 a 3.8 6 a b c 8 S W, S f f e c t s o f S S W表.5 8±3 1.2 7±5 0 3.5 4 b c 3 1 0.4 9 a b 1 3.1 4±.5 3±1 5 2.9 0 2.5 5 a S W T a b. 8 E 3 5.6 6±5 0.3 3±1 3.6 8±a t t e r (%)3 2.8 9±F M 1.1 5 0.8 7 b 3.1 7 a b 3 5.0 7±0.7 9 a 5 6.0 3±2 9.9 8±1 2.6 7±I n d e x r o t e i n (%)e p標(biāo)D r y m A s h (%)指C r u d C r u d e f a t (%)分質(zhì)質(zhì)肪灰物白脂干蛋

H 4 5 6 a b 8 a b 8 a b c 6 a F P 3.2 a b 4.7±0.5 8 a b c d 3.4 0 a 2 5.3 3±1 2.4 0±3 2 5.8 7±0.0 c d 4.5 4±1.1.0 6 a b 0.5 7±0.0.9 3 b c 6.4 7±0.3 0 H 3 1 4.8 a .2 1 a c 1.7 4 a b.4 1 a b.9 3 a F P 2 4 0.0±3.5 1 a b c d 8.3 3±3±0 0.5 3 3 4.6 0±±1 8.5 3±0 5.5 6±1 6.2 0 5 H 1 0 a 5 c 6 a b c 2 a F P 1 6.5 a 2 4 0.0±1 4.3 3±0.6 8 a 3 2.2 7±8.9 0±1.8 4.7 2±0.4 5.7 7±0.1±0.2 1 a b 0.5 0±0.0 c生b i o c h e m i c a l i n d i c e s o f y e l l o w c a t f i s h (n=3)5 H 4.0 d 4.0 4 d 1 9 2 0.6 7±0.8 4 a b 1.7 0 c d 3 5.0 3±±0.2 1 a S W ±1.3 4 b c d±0.7 5 a.0 6 a b 0.7 0±0.1 7 a b 0.6 3 5.2 0 6.0 3 5.9 5±0.4 9 c d 5.8 3 0 H 3 4 5.7 a b c d 3 3 1.0±8.1 7±0.1 5 a b c 8.4 7±1.2 7 b響影S W 2.0 0 b c 3 7.0 2.7 c d 2 7 8.3±3±的9.6 7±2.0 8 a標(biāo)指化.5 2 a b c.2 6 a b c.4 9 a清2.8 9 b c d魚(yú)n s e r u m H 1 5血S W c d 1 8.6.2 c d 3 0 8.0±7±1.4 5 a b 3 6.1 0 a b 0.6 7±0 0±7.9 0±0 5.6 7±0 0 a b 4.6 9±0顙原m a t e r i a l s o黃c 對(duì)3 a b 4 b料4 5 2 6 6.1 1 a b S W 3.7±.3 3±種0.7 0±0.0.5 0±.5 7 b c 6.5 7±1.5.8 5 b c 4.4 7±0.3 3 1.9 9 a b 9.1 3±0.6 7 三1 6 3 3 f f e c t s o f t h r e e k i n d s o f r a w表3 0.1 2 b S W 6 2.8 a b c 2 6 3.3±3.2 1 a b c 0.4 7 a b c±0.0 0 c d 1 1.6 7±8.4 3±0±0 4.9 4 5 a b 7.0 3 1.5 0 a b 3 3.8 7±±0 T a b. 7 E 1 5.9 a b c 1 3 1 0 3 a b 0.7 7 9 a b c 6 a S W 5.0±2 7 2.0 0 a b 2 0.0 0±0.7 3±0.2.6 3±3 3 4.2 7±0.1 7.2 0±1.9 c 3 0.7 a b.0 6 b±0 1.7 1 d .5 3 b c 7.6 0±1.3±1.9 1 d±0.3 2 b±1 F M 2 6 4.3±1 1.0 0±0.7 7 3 8.4 0±8.6 3 6.7 0 9.1 3)o l/L )T (U/L)/L T-B i l (μ m I n d e x o l/L )m o l/L)A S T (U/L)A L (g (m m o l/L)(m標(biāo)酶酶T P U (m m O L T G指氨白G L轉(zhuǎn)氨素蛋糖C H 酯草轉(zhuǎn)紅總萄醇三谷丙油谷膽固總葡膽甘

本試驗(yàn)結(jié)果表明, 從生長(zhǎng)速度和飼料系數(shù)作為評(píng)價(jià)指標(biāo), 黃顙魚(yú)日糧中8.5%的酶解魚(yú)溶漿和8.2%的酶解魚(yú)漿(干物質(zhì))可完全替代28.0%的魚(yú)粉。那么, 這個(gè)條件對(duì)黃顙魚(yú)的生理健康是否會(huì)產(chǎn)生不良影響呢?

首先從黃顙魚(yú)的體組成來(lái)看(表8), 黃顙魚(yú)日糧中8.5%的酶解魚(yú)溶漿和8.2%的酶解魚(yú)漿完全替代28.0%的魚(yú)粉, 試驗(yàn)黃顙魚(yú)的蛋白、脂肪和灰分含量沒(méi)有顯著差異。這說(shuō)明用8.5%的酶解魚(yú)溶漿和8.2%的酶解魚(yú)漿完全替代魚(yú)粉沒(méi)有對(duì)黃顙魚(yú)魚(yú)體造成不利影響。其次, 血液成分是魚(yú)體營(yíng)養(yǎng)和生理健康的重要反應(yīng), 血液參數(shù)是評(píng)價(jià)魚(yú)體生理和健康的重要指標(biāo)。谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)是氨基酸代謝過(guò)程中兩個(gè)重要的氨基轉(zhuǎn)移酶。ALT主要在催化α-酮戊二酸與天冬氨酸生成谷氨酸與草酰乙酸的反應(yīng)過(guò)程中起氨基轉(zhuǎn)移作用,而AST主要在催化α-酮戊二酸與丙氨酸生成谷氨酸與丙酮酸的反應(yīng)過(guò)程中起氨基轉(zhuǎn)移作用。當(dāng)動(dòng)物的生理機(jī)能處于正常情況下, ALT和AST主要存在于細(xì)胞內(nèi), 而血清中的活性很低。在各組織器官中,以心肌細(xì)胞和肝細(xì)胞內(nèi)的活性最高。但是當(dāng)這些組織細(xì)胞受損時(shí), 可能有大量的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶從細(xì)胞內(nèi)逸出進(jìn)入血液, 使血清中的這兩種轉(zhuǎn)氨酶活性升高, 因此通常根據(jù)血清中這兩種轉(zhuǎn)氨酶活性的變化判斷肝臟等組織器官的功能狀況, 這是目前評(píng)定肝臟健康與否的最具特異性和最廣泛應(yīng)用的指標(biāo)[24]。Tapiasalazar等[25]的研究發(fā)現(xiàn)在飼料中過(guò)量的生物胺會(huì)使藍(lán)蝦(Litopenaeus stylirostris)血清中的AST和ALT含量上升, 對(duì)蝦的健康產(chǎn)生了不利影響。在本試驗(yàn)中高添加量的魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)溶漿和酶解魚(yú)漿可能帶來(lái)過(guò)量的生物胺使試驗(yàn)黃顙魚(yú)的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性升高, 對(duì)試驗(yàn)黃顙魚(yú)的健康產(chǎn)生了不利影響。Khosravi等[26]在對(duì)紅鯛的研究中發(fā)現(xiàn): 在低魚(yú)粉日糧中添加魚(yú)蛋白水解物有利于降低試驗(yàn)魚(yú)體的膽固醇水平, 因?yàn)橹参锏鞍讜?huì)導(dǎo)致糞便中膽汁酸排泄增加從而降低膽固醇。由以上結(jié)果可知: 黃顙魚(yú)日糧中8.5%的酶解魚(yú)溶漿和8.2%的酶解魚(yú)漿完全替代28.0%的魚(yú)粉對(duì)黃顙魚(yú)的生理健康沒(méi)有造成不良影響。

3.2 過(guò)低或過(guò)高添加量的SW、SWH和FPH會(huì)造成試驗(yàn)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)降低

從本試驗(yàn)結(jié)果看, 魚(yú)蛋白水解物不是添加越多越好, 在日糧中有適宜添加量。那么, 是什么因素導(dǎo)致過(guò)低、或過(guò)高添加量的酶解魚(yú)蛋白原料對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)造成不良影響呢? 目前, 對(duì)于同類研究中較多地關(guān)注日糧中游離氨基酸總量, 有研究認(rèn)為過(guò)高的游離氨基酸總量會(huì)造成水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)速度下降。Espe等[27]在對(duì)大西洋鮭魚(yú)的研究中發(fā)現(xiàn): 在日糧中過(guò)量的游離氨基酸對(duì)鮭魚(yú)的生長(zhǎng)產(chǎn)生的不利影響, 其主要原因是魚(yú)體對(duì)日糧游離氨基酸的吸收與對(duì)日糧水解氨基酸的吸收時(shí)間不同步, 游離氨基酸過(guò)早吸收會(huì)導(dǎo)致日糧總氨基酸吸收不平衡。因此, 過(guò)高水解度的酶解魚(yú)漿因?yàn)橛坞x氨基酸含量高而致使魚(yú)體對(duì)日糧蛋白質(zhì)利用率降低; 同時(shí),Cudennec等[28]在對(duì)從藍(lán)鱈(Micromesistius poutassou)中提取魚(yú)蛋白水解物體內(nèi)和體外試驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn), 過(guò)高的游離氨基酸具有飽食作用, 會(huì)降低動(dòng)物攝食。在本試驗(yàn)中, 日糧游離氨基酸含量在不同日糧中的含量見(jiàn)表4, 我們依據(jù)日糧中游離氨基酸含量(不包括魚(yú)粉組)與黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)速度SGR作圖得到圖1, 從圖1可以直觀地發(fā)現(xiàn), 隨著日糧中游離氨基酸含量的增加試驗(yàn)組黃顙魚(yú)的SGR先增加后減少, 即過(guò)高或過(guò)低的日糧游離氨基酸含量均會(huì)導(dǎo)致SGR降低。這個(gè)結(jié)果表明, 日糧游離氨基酸含量有一個(gè)適宜的值, 在日糧中添加8.5%的酶解魚(yú)溶漿和8.2%的酶解魚(yú)漿帶來(lái)的游離氨基酸含量就是本試驗(yàn)中的最佳適宜值。另外, 主要蛋白質(zhì)原料、日糧中肽的分子量大小、含量對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)也是具有重大影響的。Kousoulaki等[29]在對(duì)大西洋鮭魚(yú)的研究中發(fā)現(xiàn), 鮭生長(zhǎng)受到酶解魚(yú)蛋白分子大小的影響, 在低魚(yú)粉日糧中添加5%不同分子量的魚(yú)漿, 鮭生長(zhǎng)最優(yōu)時(shí)水溶蛋白分子量＞10 kD, 大于或小于這個(gè)范圍生長(zhǎng)均有所降低, 當(dāng)小肽的分子量＜1000 Da,游離氨基酸(＜100 Da)約為90%時(shí), 生長(zhǎng)最差, 這意味著高游離氨基酸不利于魚(yú)體生長(zhǎng)。

至于日糧中游離氨基酸含量如何影響?zhàn)B殖動(dòng)物生長(zhǎng)速度的問(wèn)題, 我們還在從轉(zhuǎn)錄組的基因差異表達(dá)、涉及氨基酸吸收轉(zhuǎn)運(yùn)的基因表達(dá)等方面進(jìn)行研究, 將另文發(fā)表。

3.3 酶解魚(yú)溶漿的生長(zhǎng)效果為優(yōu)于魚(yú)溶漿

魚(yú)溶漿經(jīng)過(guò)酶解后游離氨基酸含量顯著增加,肽段分布也有顯著變化。小分子肽段含量增加, 大分子肽段含量減少。Cai等[30]在對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)的研究中發(fā)現(xiàn): 用不同分子量的魚(yú)蛋白水解物替代40%的魚(yú)粉, 發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)超濾后的魚(yú)蛋白水解物比沒(méi)有經(jīng)過(guò)超濾的魚(yú)蛋白水解生長(zhǎng)效果好。Carvalho等[31]在對(duì)鯉 (Cyprinus carpio) 的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn), 可溶性蛋白和肽段的分子量大小影響鯉魚(yú)幼體的生長(zhǎng)。Wu等[32]在對(duì)黃顙魚(yú)的研究中也發(fā)現(xiàn), 魚(yú)溶漿經(jīng)過(guò)酶解后小分子肽段含量增加, 有利于黃顙魚(yú)的吸收,從而有利于黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)[32]。在本試驗(yàn)中, 由表1可知魚(yú)溶漿經(jīng)過(guò)酶解后酸溶蛋白含量顯著增加。在本試驗(yàn)中, SW、SWH和FPH的肽含量顯著高于FM組, 肽鏈分布也有很大的差異, 其中SW組中＞10000 Da、180—500 Da和＜180 Da的肽鏈含量最多, 分別占19.41%、23.58%和28.46%; SWH中1000—2000 Da、500—1000 Da、180—500 Da、＜180 Da含量肽鏈含量最多, 分別占12.46%、13.9%、32.55%和23.86%; FPH中500—1000 Da、180—500 Da、＜180 Da的肽鏈含量最多, 分別占10.59%、36%和49.05%。游離氨基酸含量也顯著增加, Glu、Ala、Pro、Leu和Tau等味覺(jué)相關(guān)的氨基酸也顯著增加(表4)。肽鏈分布和游離氨基酸含量的變化可能是造成酶解魚(yú)溶漿生長(zhǎng)效果優(yōu)于魚(yú)溶漿的主要原因。

因此, 關(guān)于酶解魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)漿新型產(chǎn)品的研發(fā)需要重點(diǎn)關(guān)注酶解條件的控制, 酶解條件控制的關(guān)鍵點(diǎn)是產(chǎn)物中的有效的、適宜分子量的肽種類和含量。酶解魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)漿產(chǎn)品質(zhì)量控制指標(biāo)可以是酸溶蛋白質(zhì)含量、肽含量越高效果越好, 而游離氨基酸總量控制在較低水平。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下, 黃顙魚(yú)日糧中8.5%添加量的酶解魚(yú)溶漿(干物質(zhì))、8.2%添加量的酶解魚(yú)漿(干物質(zhì))可以完全替代28%魚(yú)粉, 而相應(yīng)的FIFO值分別比魚(yú)粉組降低了69.95%、70.15%。酶解魚(yú)溶漿對(duì)黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)效果優(yōu)于魚(yú)溶漿。日糧中過(guò)高、或過(guò)低添加量的魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)溶漿、酶解魚(yú)漿都會(huì)導(dǎo)致黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)速度和飼料效率下降, 日糧中過(guò)高的游離氨基酸對(duì)黃顙魚(yú)的生長(zhǎng)速度和飼料系數(shù)造成了不良影響。