呂祎彤，羅琨映，麻燕琴，張 嵐，何婷婷

(西北民族大學(xué) 化工學(xué)院，甘肅 蘭州 730124)

多花素馨(Jasminum polyanthum Franch)為木犀科(Oleaceae)素馨屬(Jasminum)植物[1]，又名素興花、雞爪花、狗牙花。多花素馨主產(chǎn)于中國(guó)四川、貴州、云南等地[2]，其氣味芳香，有舒肝解郁、行氣止痛、生津益氣、養(yǎng)肝明目、排毒養(yǎng)顏及健胃消積之功效[3]。

1 儀器與材料

1.1 儀器

紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(SPECORD-50型，美國(guó)安捷倫公司)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(RE-52AA，上海亞榮生化儀器廠)、超聲清洗儀(SK8200LH，上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司)。

1.2 材料

多花素馨(購(gòu)自安國(guó)市涵博堂中藥材銷售有限公司)，鹽酸小檗堿對(duì)照品(上海源葉生物科技有限公司)1-萘胺(上海展云化工有限公司)，無(wú)水對(duì)氨基苯磺酸(上海中秦化學(xué)試劑有限公司)，N-1-萘乙二胺鹽酸鹽(天津光復(fù)精細(xì)化工研究所)，二甲胺(天津光復(fù)精細(xì)化工研究所)，其他均為國(guó)產(chǎn)市售分析純。

2 方法

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

精密稱取鹽酸小檗堿對(duì)照品0.0050g，用適量鹽酸-甲醇溶液(1∶/100)溶解至25mL容量瓶中，待完全溶解后定容，搖勻，配置成濃度為0.2000mg/mL的鹽酸小檗堿對(duì)照品貯備液。將對(duì)照品貯備液分別稀釋成濃度為0.0010mg/mL、0.0020mg/mL、0.0040mg/mL、0.0060mg/mL、0.0080mg/mL、0.0100mg/mL、0.0200mg/mL的溶液，在358nm出測(cè)各溶液的吸光度。

2.2 多花素馨總生物堿的提取

精密稱取多花素馨0.5000g，按料液比為1∶30的比例加入體積分?jǐn)?shù)為85%的乙醇，超聲提取45min后，在70℃的條件下水浴提取90min，得到多花素馨總生物堿的提取液。

2.3 模擬胃液的制備

模擬胃液A：稱取2gNaCl，加去離子水溶解，加入7mL濃鹽酸，加去離子水定容至1000mL。

2.4 亞硝酸鹽清除率的測(cè)定-鹽酸萘乙二胺法[4]

取5支25mL比色管加入模擬胃液A10mL，37℃下水浴10min后取出，分別加入濃度為0.0004mg/mL、0.0008mg/mL、0.0012mg/mL、0.0016mg/mL、0.0020mg/mL的樣液2.0mL，加入5ug/mL的亞硝酸鈉溶液2mL，分別37℃下水浴30min取出，立即加入0.4%對(duì)氨基苯磺酸2mL混勻，靜置3～5min后分別加入1mL 0.2%的鹽酸萘乙二胺溶液，加蒸餾水至刻度混勻，靜置15min，在538nm下測(cè)吸光度A1，以去離子水代替亞硝酸鈉做空白對(duì)照試驗(yàn)測(cè)吸光度A01，以去離子水代替生物堿溶液做空白對(duì)照試驗(yàn)測(cè)吸光度A02，亞硝酸鹽清除率(%)=(A02+A01-A1)/A02。

2.5 亞硝胺阻斷能力測(cè)定[5]

取5支25mL比色管加入模擬胃液A10mL，37℃下水浴10min后取出加入濃度為0.0004mg/mL、0.0008mg/mL、0.0012mg/mL、0.0016mg/mL、0.0020mg/mL的樣液2mL，再加入1mmol/mL二甲胺溶液1mL，1mmol/mLNaNO21mL，蒸餾水稀釋至刻度， 37℃下水浴1h，移液管移取1mL上述溶液加入到試管中，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%的Na2CO3溶液0.5mL,于紫外分析儀上照15min,取出后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.0%對(duì)氨基苯磺酸1.5mL，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%α-萘胺1.5mL，去離子水0.5mL，搖勻靜置15min，在波長(zhǎng)525nm波長(zhǎng)下測(cè)吸光度A1，以去離子水代替亞硝酸鈉做空白對(duì)照試驗(yàn)測(cè)吸光度A01，以去離子水代替生物堿溶液做空白對(duì)照試驗(yàn)測(cè)吸光度A02，亞硝胺阻斷率(%)=(A02+A01- A1)/A02。

3 結(jié)果與討論

3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y = 60.883X- 0.0039，R2= 0.9999(n=7)，鹽酸小檗堿在0.0010～0.0200mg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

3.2 亞硝酸鹽清除率結(jié)果

圖1 亞硝酸鹽清除率結(jié)果

由圖1可知，在濃度范圍為0.0004～0.0020mg/mL時(shí)，濃度為0.0016mg/mL時(shí)，多花素馨生物堿，維生素C在模擬胃液A條件下對(duì)亞硝酸鹽清除率達(dá)到最大，并且在模擬胃液A中多花素馨總生物堿對(duì)亞硝酸鹽清除能力稍弱于維生素C。

3.3 阻斷亞硝胺合成結(jié)果

由圖2可知，在濃度范圍為0.0004～0.0020mg/mL時(shí)，濃度為0.0012mg/mL時(shí)，多花素馨總生物堿在模擬胃液A中對(duì)亞硝胺阻斷能力最大，濃度為0.0016mg/mL時(shí)，維生素 C在模擬胃液A中對(duì)亞硝胺合成阻斷能力最大。

圖2 阻斷亞硝胺合成結(jié)果

[1] 張正付,邊寶林,田秀峰.素馨屬植物化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J].中國(guó)中藥雜志,2004,29(12):1209-1212.

[2] 林善遠(yuǎn).素馨花藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].世界中醫(yī)藥,2013,8(6):667-668.

[3] 羅塞塞,郝婷,趙桂琴.素馨花總環(huán)烯醚萜苷的大孔樹(shù)脂富集純化工藝優(yōu)選[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2013,19(15):13-16.

[4] 梁英躍,傅 亮,孫穎鶯,等.模擬胃液條件下紅豆多肽清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成的研究[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2010,36(4):40-44.

[5] 呂 娜,任利江.模擬胃酸條件下冬棗和青棗清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成的比較研究[J].毒理學(xué)雜志,2016,30(5):378-380.