鄭學(xué)斌，陶春衛(wèi)，王安民

（1.合肥職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程學(xué)院，安徽 巢湖 238000；2.北京菲迪飼料科技有限責(zé)任公司，北京 100085；3.上海鑫上潤(rùn)生物科技有限公司，上海 201605）

草魚是我國(guó)淡水養(yǎng)殖的主要養(yǎng)殖品種之一，與青魚、鰱魚、鳙魚并稱為我國(guó)“四大家魚”，廣泛分布于我國(guó)南北水域，年產(chǎn)量400多萬(wàn)t。目前草魚已成為全球產(chǎn)量和消費(fèi)量最大的魚類之一[1]。傳統(tǒng)的養(yǎng)殖方式在提高動(dòng)物生長(zhǎng)、生產(chǎn)性能和飼料轉(zhuǎn)化率的同時(shí)，也伴隨著抗生素、化學(xué)藥物等的超量使用，導(dǎo)致耐藥菌株增加、藥物殘留、環(huán)境污染加重等一系列問(wèn)題，存在著嚴(yán)重的安全隱患。因此，大力推廣安全、高效、促生長(zhǎng)的綠色飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中替代抗生素、化學(xué)藥品等的應(yīng)用，成為解決水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中存在問(wèn)題的有效途徑。

植物提取物是植物源提取物的核心成分，是一類芳香、揮發(fā)性化合物的混合物，植物原料常據(jù)其芳香特征來(lái)加以區(qū)分。植物提取物類飼料添加劑被認(rèn)定為“安全、高效、穩(wěn)定、可控”的飼料添加劑，在綠色環(huán)保安全動(dòng)物食品生產(chǎn)和飼料加工過(guò)程將占據(jù)主導(dǎo)地位[2-3]。

在植物精油中，最具代表性的是牛至油，是從天然植物牛至中提取的精油，具有獨(dú)特的抗菌機(jī)理和抗氧化性能，同時(shí)其活性成分能刺激消化道感受器，激活消化道酶的活性，促進(jìn)消化，提高飼料轉(zhuǎn)化率，而且無(wú)任何藥物殘留，不產(chǎn)生耐藥性，是一種理想的飼用抗菌劑[4-6]。然而，普通的植物精油性能不穩(wěn)定，易揮發(fā)，易氧化，這些制約其在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用。高效、綠色添加劑產(chǎn)品牛至香酚，以下稱“凈力安”，通過(guò)科技手段，采用微膠囊包被技術(shù)，將植物精油成分——香芹酚、百里香酚按照最佳配比進(jìn)行包被，降低其揮發(fā)性和氧化性，增強(qiáng)其穩(wěn)定性，目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中，并取得非常好的使用效果[7-10]。本試驗(yàn)研究了在飼料中添加不同劑量的“凈力安”后，對(duì)草魚成活率、餌料系數(shù)、特定生長(zhǎng)率等指標(biāo)的影響，為“凈力安”在水產(chǎn)生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 植物精油添加劑牛至香酚（凈力安）

“凈力安”由北京菲迪飼料科技有限責(zé)任公司提供，主要成分為香芹酚和百里香酚。

1.1.2 試驗(yàn)魚

草魚從宿遷駱馬湖養(yǎng)殖廠購(gòu)買，初始體重1 300尾·kg-1。

1.1.3 試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)魚平均體重10 g前飼喂基礎(chǔ)日糧一，平均體重10 g后飼喂基礎(chǔ)日糧二，試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧的配比和主要營(yíng)養(yǎng)成分見表1，草魚基礎(chǔ)日糧由上海鑫上潤(rùn)生物科技有限公司提供。

表1 飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平%

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)所用魚塘面積共計(jì)10萬(wàn)m2，采用單因素對(duì)比試驗(yàn)設(shè)計(jì)，共分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，其中Ⅰ組為對(duì)照組，飼養(yǎng)面積為20 000 m2，日糧中不添加“凈力安”，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組為試驗(yàn)組，每個(gè)試驗(yàn)組飼養(yǎng)面積為26 667 m2，日糧中“凈力安”的添加量分別為150、200、250 mg·kg-1。4組飼養(yǎng)密度相同，即草魚6尾·m2-1。試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案見表2。

1.2.2 飼養(yǎng)與管理

2018年5月25日投苗，進(jìn)行馴食，馴食成功后按“定時(shí)、定量、定質(zhì)、定位、定人”五定投飼法進(jìn)行投喂。日投飼3次，投餌率根據(jù)季節(jié)水溫而定，掌握在2%～4%，每周調(diào)整1次投餌量，并根據(jù)天氣、水溫、水質(zhì)、魚攝食等情況靈活調(diào)整投喂量。5～6月，注換水1次·10 d-1；7～8月，注換水1次·周-1；9～10月，注換水1次·15 d。并根據(jù)水質(zhì)變動(dòng)情況，隨時(shí)加注水。正常情況，增氧機(jī)晴天中午開機(jī)2 h，陰雨天氣隨時(shí)開機(jī)，防止泛塘事故發(fā)生。2018年11月10日試驗(yàn)結(jié)束。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)及分析方法

試驗(yàn)過(guò)程中，如果發(fā)現(xiàn)病魚或死魚，隨機(jī)取樣進(jìn)行解剖，分析魚的病因。

本試驗(yàn)主要測(cè)定指標(biāo)為成活率、特定生長(zhǎng)率、餌料系數(shù)，計(jì)算公式見式1～3。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件One Way ANOVA進(jìn)行方差分析，采用Duncan's法進(jìn)行多重比較，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

在草魚日糧中添加不同水平“凈力安”對(duì)草魚的成活率、特定生長(zhǎng)率、餌料系數(shù)指標(biāo)影響見表3。

表2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

表3 不同水平“凈力安”對(duì)草魚成活率、特定生長(zhǎng)率、餌料系數(shù)的影響

2.1 不同水平“凈力安”對(duì)草魚成活率的影響

不同水平“凈力安”對(duì)草魚成活率的影響見表3。

從表3中可以看到，在草魚日糧中添加“凈力安”能夠提高草魚的成活率。其中，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組成活率分別高于對(duì)照組15.83%、23.82%、24.33%，且差異顯著（P＜0.05）；Ⅲ和Ⅳ組成活率分別高于Ⅱ組7.99%、8.50%，且差異顯著（P＜0.05）；Ⅳ組成活率高于Ⅲ組，差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 不同水平“凈力安”對(duì)草魚餌料系數(shù)的影響

不同水平“凈力安”對(duì)草魚餌料系數(shù)的影響見表3。

從表3中可以看到，在草魚日糧中添加“凈力安”能夠降低草魚的餌料系數(shù)。其中，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組餌料系數(shù)分別低于對(duì)照組0.09、0.16、0.17，且差異顯著（P＜0.05）；Ⅲ和Ⅳ組餌料系數(shù)分別低于Ⅱ組0.07、0.08，且差異顯著（P＜0.05）；Ⅳ組餌料系數(shù)低于Ⅲ組，差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 不同水平“凈力安”對(duì)草魚特定生長(zhǎng)率的影響

由表3可知，在草魚日糧中添加“凈力安”能夠提高草魚的特定生長(zhǎng)率。其中，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組特定生長(zhǎng)率分別高于對(duì)照組0.13、0.29、0.30%·d-1，且差異顯著（P＜0.05）；Ⅲ、Ⅳ組特定生長(zhǎng)率分別低于Ⅱ組0.16、0.17% ·d-1，且差異顯著（P＜0.05）；Ⅲ、Ⅳ組特定生長(zhǎng)率相同，差異不顯著（P＞0.05）。

3 分析與討論

3.1 “凈力安”具有廣譜抗菌作用，有效殺滅病菌提高動(dòng)物成活率

“凈力安”的主要成分是香芹酚和百里香酚，具有廣譜抗菌作用，對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌都有作用，同時(shí)也具有抗真菌、殺死一些寄生蟲和濾過(guò)性病毒，也具有抗氧化和防腐作用，通過(guò)在飼料中添加可以使動(dòng)物抵抗外來(lái)病菌入侵，調(diào)節(jié)體內(nèi)腸道細(xì)菌平衡，最終整體提高抗病能力[11-12]。牛至油損壞病原微生物細(xì)胞的內(nèi)外物質(zhì)交換與平衡，導(dǎo)致病原微生物細(xì)胞膜通透性發(fā)生變化，細(xì)胞內(nèi)容物流失。另外破壞病原微生物細(xì)胞正常的代謝機(jī)能，進(jìn)入病原微生物細(xì)胞內(nèi)的活性成分，通過(guò)改變細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的膜性結(jié)構(gòu)，使一些重要細(xì)胞器如線粒體喪失生理功能[13-14]。劉振洲等試驗(yàn)結(jié)果表明，香芹酚對(duì)大腸桿菌和豬鏈球菌呈現(xiàn)較強(qiáng)的抗菌活性，百里酚對(duì)大腸桿菌和豬鏈球菌也有一定的抑制作用[15]。Chun等試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，牛至油中的酚類物質(zhì)對(duì)幽門螺旋菌有明顯的抗菌活性[16]。

本試驗(yàn)中，通過(guò)對(duì)各試驗(yàn)組中病魚或死魚進(jìn)行解剖發(fā)現(xiàn)，“凈力安”表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗病、殺菌作用，在草魚日糧中添加不同水平的“凈力安”，均能明顯的降低草魚腸炎病和爛鰓病的發(fā)病率，顯著提高草魚的成活率（P＜0.05），且當(dāng)添加量達(dá)到200 g·t-1時(shí)，獲得最佳的成活率水平。

3.2 “凈力安”能夠提高動(dòng)物飼料轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)

牛至油可以促進(jìn)腸道有益菌生長(zhǎng)，抑止有害菌生長(zhǎng)，顯著提高腸道中有益微生物的數(shù)量，有效抑制大腸桿菌的生長(zhǎng)繁殖，保護(hù)腸道微生態(tài)平衡，促進(jìn)生長(zhǎng)[17-19]。在養(yǎng)殖過(guò)程中，牛至香酚能夠刺激動(dòng)物食欲，通過(guò)信息反饋系統(tǒng)有效激活消化酶活性，加強(qiáng)腸道中消化酶的分泌，使食糜的黏稠度發(fā)生變化，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率，增加動(dòng)物日增重量，提高動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量，降低料肉比和餌料系數(shù)，改善動(dòng)物生長(zhǎng)性能[20-22]。胡驍飛等將牛至油100 mg·kg-1加到肉雞日糧中，與日糧中添加維吉尼亞霉素15 mg·kg-1對(duì)照，試驗(yàn)結(jié)果表明，牛至油能降低采食量，提高飼料轉(zhuǎn)化率[23]。黃國(guó)清等發(fā)現(xiàn)，牛至油減少肉仔雞空腸和盲腸大腸桿菌的數(shù)目，提高乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)目，調(diào)整肉雞腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)，提高機(jī)體抗病能力[24]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在草魚日糧中添加不同水平的“凈力安”，能夠顯著降低草魚的餌料系數(shù)（P＜0.05），顯著提高草魚的特定生長(zhǎng)率（P＜0.05），當(dāng)添加量達(dá)到200 g·t-1時(shí)，達(dá)到最佳效果。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)研究了不同水平“凈力安”對(duì)草魚生長(zhǎng)性能的影響，結(jié)果表明，“凈力安”具有很強(qiáng)的抗菌、殺菌作用，不但具有能夠顯著提高草魚的成活率（P＜0.05），顯著提高草魚的特定生長(zhǎng)率（P＜0.05），顯著降低草魚的餌料系數(shù)（P＜0.05），且“凈力安”在草魚中的最佳添加水平為200 g·t-1。

目前，飼料添加劑的開發(fā)利用進(jìn)入一個(gè)嶄新的階段，開發(fā)安全性高的飼料添加劑，替代原有的抗生素及化學(xué)制劑將是發(fā)展的必然趨勢(shì)，而“凈力安”以其綠色、安全、無(wú)污染、無(wú)殘留、不產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)而引起人們的廣泛關(guān)注，具有極為廣闊的發(fā)展前景。