李 琦 綜述，徐 佳，溫 雪，尚曉泓 審校

(中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100091)

前列腺癌是最常見(jiàn)的癌癥，也是美國(guó)男性癌癥中導(dǎo)致死亡的第二大原因。在中國(guó)，隨著壽命的延長(zhǎng)、環(huán)境的改變和診斷技術(shù)的改進(jìn)，前列腺癌的發(fā)病率逐漸升高，目前，前列腺癌已成為國(guó)內(nèi)泌尿生殖系統(tǒng)的首要癌癥[1]。傳統(tǒng)上對(duì)前列腺癌的研究集中于影響蛋白質(zhì)組的基因組和表觀遺傳學(xué)的改變，但在過(guò)去10年中，越來(lái)越多的研究證明前列腺癌的發(fā)生依賴于大量非編碼RNA的改變[2]。

微小RNA(miRNAs)是一類較小的(20～25個(gè)核苷酸)進(jìn)化保守的非編碼RNA，通過(guò)序列依賴的識(shí)別機(jī)制對(duì)轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行調(diào)控[3]。miRNAs在細(xì)胞生物學(xué)過(guò)程的調(diào)控中發(fā)揮著關(guān)鍵作用[4]，參與了包括前列腺癌在內(nèi)的各種人類惡性腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展[5]。miRNAs作為前列腺癌生物標(biāo)志物的潛在效用引起了人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注，本文主要介紹近幾年發(fā)現(xiàn)的對(duì)前列腺癌發(fā)生和發(fā)展有貢獻(xiàn)的miRNAs及其靶點(diǎn)，包括其在細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移和侵襲、細(xì)胞周期和凋亡、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)、前列腺癌腫瘤干細(xì)胞(PCSC)等中的作用及機(jī)制。

1 影響前列腺癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移和侵襲

近幾年，miRNA在腫瘤中的生物學(xué)意義作用方面引起了人們的廣泛關(guān)注，目前已有大量實(shí)驗(yàn)證明，miRNAs對(duì)前列腺腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲具有抑制或促進(jìn)作用。

CHI等[6]收集了20位前列腺癌患者的腫瘤組織和腫瘤鄰近組織，對(duì)腫瘤蛋白D52(TPD52L2)和microRNA-503(miR-503)分子之間的相互作用進(jìn)行預(yù)測(cè)，并分別用陰性對(duì)照、miR-503模擬物、miR-503抑制劑轉(zhuǎn)染DU145細(xì)胞，采用RT-RNA和Western blot法檢測(cè)miR-503和TPD52L2 mRNA的水平及TPD52L2蛋白的表達(dá)水平，用Transwell和MTT分析前列腺細(xì)胞的遷移和增殖能力，以此來(lái)探討miR-503在前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá)及其對(duì)前列腺癌的作用和作用機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)前列腺癌組織中TPD52L2表達(dá)增加而miR-503表達(dá)降低；TargetScan將TPD52L2的3′非翻譯區(qū)(3′UTR)鑒定為miR-503的直接靶標(biāo)；與空白組和陰性對(duì)照組相比，轉(zhuǎn)染miR-503模擬物的DU145細(xì)胞中miR-503的表達(dá)顯著增加，TPD52L2 mRNA和蛋白水平顯著降低，遷移細(xì)胞數(shù)量顯著減少，吸光度顯著降低，這些結(jié)果表明miR-503的過(guò)表達(dá)抑制了TPD52L2的轉(zhuǎn)錄翻譯和DU145細(xì)胞的遷移和增殖能力。

GUAN等[7]發(fā)現(xiàn)去勢(shì)抵抗性前列腺癌(CRPC)組織比雄激素依賴性前列腺癌(ADPC)組織miR-744的表達(dá)水平更高，且CRPC細(xì)胞(DU145和PC3細(xì)胞株)和雄激素非依賴性前列腺癌(AIPC)細(xì)胞(LNCaP-AI)中miR-744表達(dá)水平顯著高于ADPC細(xì)胞(LNCaP)，并且miR-744的表達(dá)水平與CRPC患者的生存呈負(fù)相關(guān)。該研究將抗miR-744寡核苷酸或抗NC寡核苷酸、miR-NC、miR-744模擬物轉(zhuǎn)染到PC3、Du145和LNCaP-AI細(xì)胞中，通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)與抗NC寡核苷酸相比，抗miR-744寡核苷酸明顯抑制PC3，DU145和LNCaP-AI細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲；相應(yīng)地，與miR-NC轉(zhuǎn)染相比，miR-744模擬物的過(guò)表達(dá)顯著增強(qiáng)了LNCaP細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲。通過(guò)基因表達(dá)陣列，途徑富集分析和Western blot，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)miR-744通過(guò)靶向作用于Wnt/β-catenin信號(hào)傳導(dǎo)的多個(gè)負(fù)調(diào)節(jié)物(包括SFRP1、GSK3β、TLE3和NKD1)顯著激活Wnt/β-catenin途徑。在分子水平上，發(fā)現(xiàn) NKD1是miR-744的主要功能靶標(biāo)。因此，該研究表明miR-744可能通過(guò)Wnt/β-catenin信號(hào)通路促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲。

ZHANG等[8]比較了LNCaP、DU145、PC-3和RWPE-1細(xì)胞系中miR-30c的表達(dá)水平并研究了miR-30c的過(guò)表達(dá)對(duì)細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響以及用Western blot分析了miR-30c對(duì)KRAS的影響。結(jié)果顯示與LNCaP、DU145和RWPE-1細(xì)胞系相比，PC-3細(xì)胞系中miR-30c的表達(dá)顯著降低。 miR-30c在PC-3中的過(guò)度表達(dá)抑制了腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲。此外，與陰性對(duì)照組相比，miR-30c過(guò)表達(dá)細(xì)胞系中KRAS蛋白表達(dá)水平明顯下調(diào)，表明miR-30c的過(guò)表達(dá)可能導(dǎo)致KRAS蛋白水平下調(diào)，從而抑制前列腺癌細(xì)胞系增殖、遷移和侵襲。

2 干擾前列腺癌細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡

細(xì)胞增殖的快慢是由完成一個(gè)細(xì)胞周期的時(shí)間長(zhǎng)短決定的。整個(gè)細(xì)胞周期分為G1、S、G2和M4期，而G1期則是整個(gè)細(xì)胞周期長(zhǎng)短的關(guān)鍵。大量實(shí)驗(yàn)證明miRNAs主要通過(guò)調(diào)節(jié)G0/G1細(xì)胞群和靶向調(diào)控相關(guān)基因和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平影響腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期并最終誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的。

HUANG等[9]對(duì)前列腺癌組織中選擇性剪接因子/剪接因子2(ASF/SF2)的表達(dá)水平和ASF/SF2是否為miR-30c的直接靶基因進(jìn)行了研究，并用miR-30c模擬物轉(zhuǎn)染前列腺癌細(xì)胞系后檢測(cè)miR-30c對(duì)前列腺癌細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)與健康組織比較，前列腺癌組織表現(xiàn)出更高水平的ASF/SF2，并揭示了miR-30c與ASF/SF2基因的3′非編碼區(qū)靶向結(jié)合，從而下調(diào)ASF/SF2蛋白的表達(dá)。同時(shí)該研究還發(fā)現(xiàn)ASF/SF2降低引起細(xì)胞增殖的減少與細(xì)胞周期停滯相關(guān)，且miR-30c過(guò)表達(dá)的細(xì)胞中凋亡細(xì)胞的百分比顯著增加，表明 miR-30c通過(guò)下調(diào)ASF/SF2誘導(dǎo)前列腺癌細(xì)胞周期停滯和細(xì)胞凋亡。

COLDEN等[10]分析了miR-466對(duì)前列腺癌細(xì)胞周期和凋亡的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)與對(duì)照miRNA相比，miR-466可誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移性前列腺癌PC3和DU145細(xì)胞中G0/G1細(xì)胞周期停滯和細(xì)胞凋亡；并進(jìn)一步證明miR-466通過(guò)直接靶向RUNX2并減弱其已知介導(dǎo)前列腺癌骨轉(zhuǎn)移的下游靶基因來(lái)部分發(fā)揮這些作用。

3 調(diào)節(jié)前列腺癌的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)

EMT是一種多步驟的變化，其中上皮細(xì)胞特征喪失并且獲得間充質(zhì)表型。EMT使癌細(xì)胞具有轉(zhuǎn)移、侵襲性和干細(xì)胞的惡性特性。miRNAs通過(guò)調(diào)節(jié)EMT相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子、上皮和間質(zhì)基因或關(guān)鍵信號(hào)通路來(lái)調(diào)節(jié)EMT[11]。在前列腺癌中，報(bào)道了多種調(diào)節(jié)EMT的miRNAs，如miR-145、miR-200家族、miR-205等[12]。

漿細(xì)胞瘤變異易位1(PVT1)是一種新型長(zhǎng)鏈非編碼RNA，已被證明在許多腫瘤細(xì)胞中上調(diào)，并且越來(lái)越多的證據(jù)表明PVT1可以調(diào)控許多癌癥相關(guān)的細(xì)胞過(guò)程[13]。CHANG等[14]采用生物信息學(xué)分析，Western blot等技術(shù)研究了PVT1在前列腺癌中的作用及其機(jī)制。該研究表明PVT1通過(guò)海綿效應(yīng)作用于miRNA-186-5p并正向調(diào)節(jié)Twist1(一種與EMT相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子)，從而促進(jìn)EMT，進(jìn)而促進(jìn)前列腺癌的轉(zhuǎn)移和侵襲作用。因此，PVT1/miR-186/Twist1調(diào)控軸可能是前列腺癌的一種新的治療靶點(diǎn)。

GURURAJAN等[15]為研究miR-154*和miR-379在前列腺癌EMT中的作用，在間充質(zhì)型ARCaPM 前列腺癌細(xì)胞中引入了shRNA以產(chǎn)生miR-154*敲低(ARCaPM-154*i)或miR-379敲低(ARCaPM-379i)細(xì)胞，并使用scrambled shRNA產(chǎn)生對(duì)照shRNA載體(ARCaPM-C)。通過(guò)qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn)，與ARCaPM-C相比，在ARCaPM-154*i和ARCaPM-379i細(xì)胞中檢測(cè)到miR-154*和miR-379的表達(dá)降低，并且ARCaPM-154*i細(xì)胞中STAG2的表達(dá)水平顯著增加。此外，該實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)miR-154 *或miR-379進(jìn)行抑制后，間充質(zhì)ARCaPM細(xì)胞可逆轉(zhuǎn)為上皮表型，并伴隨ARCaPM-154 *和ARCaPM-379i細(xì)胞中上皮標(biāo)志物E-鈣黏著蛋白的上調(diào)。由此可證明DLK1-DIO3簇的miR-154 *和miR-379通過(guò)下調(diào)STAG2促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞發(fā)生EMT。

WANG等[16]為驗(yàn)證miR-802是否可以調(diào)節(jié)前列腺癌細(xì)胞中的EMT，通過(guò)分析評(píng)估常見(jiàn)的EMT標(biāo)志物，發(fā)現(xiàn)與轉(zhuǎn)染對(duì)照miRNA的細(xì)胞比較，miR-802模擬物轉(zhuǎn)染的DU145細(xì)胞中間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物(波形蛋白和N-鈣黏蛋白)表達(dá)水平降低；上皮細(xì)胞標(biāo)志物(E-鈣黏蛋白)表達(dá)水平升高。此外，熒光素酶活性分析將Flot2鑒定為miR-802在前列腺癌細(xì)胞中的直接靶標(biāo)， miR-802高表達(dá)可降低Flot2的表達(dá)水平，從而抑制前列腺癌細(xì)胞發(fā)生EMT。

4 調(diào)節(jié)前列腺癌腫瘤干細(xì)胞(CSCs)，抑制前列腺腫瘤發(fā)生

CSCs是腫瘤塊中癌癥細(xì)胞亞群的一個(gè)子集，并被認(rèn)為是腫瘤發(fā)生，抗癌治療耐藥，復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的原因[17]。據(jù)報(bào)道，miRNA是調(diào)控PCSCs干細(xì)胞的關(guān)鍵因子。異常表達(dá)的miRNA可能導(dǎo)致與CSCs功能相關(guān)的特定信號(hào)通路失調(diào)如TGF-β、Wnt/β-連環(huán)蛋白和MAPK途徑。因此，鑒定調(diào)節(jié)CSC特性的特定miRNAs將有助于擴(kuò)大對(duì)前列腺癌分子發(fā)病機(jī)制的理解，并為前列腺癌治療設(shè)計(jì)更好的策略[18]。

CHANG等[18]研究了人類前列腺癌細(xì)胞系和非致瘤性前列腺上皮細(xì)胞系中miR-7的表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-7在前列腺癌細(xì)胞系中顯著下調(diào)。這暗示了其對(duì)前列腺癌潛在的抑制作用。該研究又進(jìn)一步檢測(cè)了CD44+CD133+和CD44-CD133-亞群中干細(xì)胞因子的表達(dá)水平，以此探究CD44+CD133+亞群在前列腺癌中是否具有CSC特征及miR-7發(fā)揮作用的具體機(jī)制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CD44+CD133+細(xì)胞中干細(xì)胞因子的表達(dá)水平顯著高于CD44-CD133-亞群，miR-7的表達(dá)水平顯著低于CD44-CD133-亞群，這表明CD44+CD133+具有PCSC特性并且miR-7與PCSC的干性密切相關(guān)。此外該研究通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因證明，miR-7通過(guò)抑制關(guān)鍵干細(xì)胞因子KLF4來(lái)消除PCSC的干細(xì)胞從而抑制前列腺腫瘤發(fā)生，并且miR-7對(duì)PCSCs干細(xì)胞的抑制作用在異種移植物中可持續(xù)數(shù)代。

JIN等[19]研究證明，通過(guò)寡核苷酸轉(zhuǎn)染的miR-128過(guò)表達(dá)可抑制體內(nèi)異種移植瘤的增殖、侵襲和癌細(xì)胞克隆，并且其表達(dá)水平與前列腺癌細(xì)胞的致瘤潛力反向相關(guān)。他們進(jìn)一步篩選了miR-128的潛在靶標(biāo)并發(fā)現(xiàn)miR-128的過(guò)表達(dá)以細(xì)胞類型依賴性方式降低了包括Bmi-1、Nanog、TGFBR1和EGFR在內(nèi)的前列腺癌細(xì)胞中的致癌和干細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)水平：在PC3細(xì)胞中，miR-128顯著降低NANOG和TGFBR1水平；而在PPC-1細(xì)胞中miR-128降低了E2F3 mRNA水平；在DU145細(xì)胞中miR-128減弱了除EGFR外的所有分子的mRNA水平。所有這些基因都與維持腫瘤干細(xì)胞特性有關(guān)，通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因分析發(fā)現(xiàn)，BMI-1為miR-128的直接靶標(biāo)。這些數(shù)據(jù)表明，miR-128通過(guò)抑制BMI-1的表達(dá)而削弱PCSC特性進(jìn)而抑制前列腺癌的發(fā)生。

LIU等[20]檢測(cè)了miR-1993a-3p對(duì)PCSC特性的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)與陰性對(duì)照相比，用miR-199a-3p轉(zhuǎn)染的純化的CD44+DU145細(xì)胞、PC3和LACP9細(xì)胞中均表現(xiàn)出顯著降低的克隆效率，表明miR-199a-3p可能在體外抑制PCSC的自我更新，起到負(fù)向調(diào)節(jié)的作用。他們進(jìn)一步證明了miR-199a-3p過(guò)表達(dá)減少了CD44+前列腺癌細(xì)胞的腫瘤起始能力及來(lái)自本體前列腺癌細(xì)胞的腫瘤再生,并發(fā)現(xiàn)miR-199a-3p可靶向作用于干細(xì)胞相關(guān)和促有絲分裂分子CD44、c-MYC、細(xì)胞周期蛋白D1(CCND1)和EGFR，從而抑制PCSC的擴(kuò)增和致瘤能力。

5 在前列腺癌化療藥耐藥中的機(jī)制和作用

紫杉烷類(如多西他賽)已被證明在前列腺癌等腫瘤疾病中是一類具有細(xì)胞毒性的化療藥物[21]。雖然紫杉烷能提高晚期前列腺癌的存活率，但其藥物耐藥性的發(fā)展仍不可避免，患者的病情最終會(huì)發(fā)生進(jìn)展，因此,只能獲得有限的治療。在前列腺癌中存在多種多西他賽耐藥機(jī)制：不利的腫瘤微環(huán)境、藥物外排泵、微觀結(jié)構(gòu)和(或)功能的改變以及凋亡缺陷(如Bcl-2的上調(diào)或PTEN/PI3K/mTOR途徑的激活和MAPK/ERK途徑的激活)[22]。

WANG等[23]為研究miR-375在多西紫杉醇耐藥中的作用，使用pre-miRNA 慢病毒載體轉(zhuǎn)染miR-375，并考察了外源性過(guò)表達(dá)miR-375對(duì)兩種前列腺癌細(xì)胞株DU145和PC-3細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。同時(shí)，為確定過(guò)度表達(dá)的miR-375對(duì)體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)和化療耐藥的影響，將miR-375過(guò)度表達(dá)的前列腺癌細(xì)胞注入裸鼠皮下。結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-375在前列腺癌的增殖中發(fā)揮了雙重作用，雖然miR-375過(guò)表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)抑制和細(xì)胞凋亡，但miR-375升高也顯著降低了細(xì)胞對(duì)多西他賽治療的敏感性。為進(jìn)一步明確耐藥機(jī)制，該研究用miR-375模擬物轉(zhuǎn)染前列腺癌細(xì)胞系，并對(duì)SEC23A和YAP1 mRNA的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)SEC23A和YAP1 mRNA表達(dá)顯著降低。可見(jiàn)miR-375通過(guò)調(diào)控SEC23A和YAP1表達(dá)，影響了對(duì)多西他賽化療耐藥性的發(fā)展。因此，miR-375或其靶基因SEC23A或YAP1可作為潛在的生物標(biāo)志物用于在mCRPC階段化療和(或)治療的靶點(diǎn)，以克服化療耐藥性。

SHI等[24]測(cè)定了多西他賽耐藥PC3細(xì)胞中miRNAs的表達(dá)并用實(shí)時(shí)PCR技術(shù)對(duì)陣列結(jié)果進(jìn)行了驗(yàn)證。結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-21在PC3R細(xì)胞中上調(diào)。在PC3野生型細(xì)胞中，miR-21的異位表達(dá)增強(qiáng)了多西他賽的耐藥性，而在PC3R細(xì)胞中使用miR-21抑制劑使細(xì)胞miR-21沉默后導(dǎo)致細(xì)胞對(duì)多西他賽敏感。此外，還發(fā)現(xiàn)miR-21可以直接下調(diào)PDCD4的表達(dá)。PDCD4表達(dá)的沉默增加了PC3細(xì)胞的細(xì)胞活力和對(duì)多西他賽的抗性，這表明PDCD4是miR-21誘導(dǎo)多西他賽化學(xué)抗性的功能靶點(diǎn)?？梢?jiàn)miR-21有助于PC3細(xì)胞對(duì)多西他賽的抵抗，靶向作用于miR-21可減弱前列腺癌對(duì)多西他賽的耐藥性。

長(zhǎng)鏈非編碼RNA CASC2作為miR-183的競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA具有腫瘤抑制作用，而Sprouty2(SPRY2)是RTK信號(hào)的關(guān)鍵拮抗劑，也可用作腫瘤抑制劑。GAO等[25]研究發(fā)現(xiàn)在前列腺癌組織及細(xì)胞系中CASC2和SPRY2的表達(dá)水平均有所下調(diào)，而CASC2和SPRY2的過(guò)度表達(dá)可以達(dá)到抑制前列腺癌細(xì)胞增殖，促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)前列腺癌細(xì)胞對(duì)多西他賽敏感性的效果，而miRNA-183可降低SPRY2的表達(dá)，進(jìn)而部分減弱多西他賽對(duì)前列腺癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性。通過(guò)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，CASC2對(duì)SPRY2的表達(dá)具有正向調(diào)控作用，CASC2可直接靶向作用于miR-183，同時(shí)結(jié)合SPRY2的3′UTR，并通過(guò)SPRY2的表達(dá)抑制其下游胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)信號(hào)傳導(dǎo)通路的激活。由此可見(jiàn)，CASC2與SPRY2競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合miR-183以拯救SPRY2在前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá)，從而通過(guò)SPRY2下游ERK信號(hào)傳導(dǎo)途徑增強(qiáng)前列腺癌細(xì)胞對(duì)多西他賽的敏感性。

6 前列腺癌診斷、治療和預(yù)后的新型標(biāo)志物

大量研究證明miRNAs在腫瘤診斷、預(yù)后和治療中具有生物標(biāo)志物的潛在用途，并將其表達(dá)水平與臨床病理參數(shù)聯(lián)系起來(lái)[26]。評(píng)估m(xù)iRNAs在前列腺癌細(xì)胞中的表達(dá)水平可用于前列腺癌的診斷、預(yù)后和進(jìn)展監(jiān)測(cè)，并且可以通過(guò)各種廣泛使用的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)(如qRT-PCR、微陣列和小RNA測(cè)序)輕松檢測(cè)和準(zhǔn)確定量，同時(shí)它們可存在于體液中[27]，不需要侵入式活檢，因此，可成為前列腺癌治療選擇和判斷預(yù)后的良好標(biāo)志物[28]。WASEEM等[29]使用miRNA微陣列芯片，對(duì)來(lái)自良性前列腺增生癥(BPH)和不同病理級(jí)別的前列腺癌組織樣品進(jìn)行了全面的miRNA分析。該研究發(fā)現(xiàn)與BPH和健康對(duì)照組相比，miR-711在前列腺癌組織中顯著下調(diào)，這與微陣列和qRT-PCR的分析結(jié)果一致。他們還發(fā)現(xiàn)miR-711的表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和前列腺癌的進(jìn)展呈負(fù)相關(guān)，這暗示該新型miR-711在前列腺癌進(jìn)展中具有腫瘤抑制作用，此外，ROC曲線分析顯示miR-711是特異度和靈敏度均較高的候選生物標(biāo)志物。

WANG等[30]通過(guò) miRNA微陣列分析比較了CRPC和ADPC差異表達(dá)的miRNA，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-4638-5p在CRPC中表達(dá)水平顯著下調(diào)并且miR-4638-5p在早期階段比在晚期疾病中的表達(dá)高出近4.7倍。在與CRPC發(fā)育密切相關(guān)的前列腺癌干細(xì)胞的單獨(dú)miRNA微陣列分析中，與未選擇的DU145細(xì)胞群相比，miR-4638-5p是最顯著下調(diào)的miRNA，具有近12.6倍的差異。另外，他們還測(cè)定了LNCaP、PC3、DU145和LNCaP C4-2B 前列腺癌細(xì)胞系中miR-4638-5p的表達(dá)水平，結(jié)果與在臨床樣品中的觀察結(jié)果一致。因此，miR-4638-5p可能會(huì)成為前列腺癌診斷和治療的新型生物標(biāo)志物。

7 結(jié) 論

前列腺癌作為男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其檢測(cè)目前主要基于血清前列腺特異性抗原生物標(biāo)志物和數(shù)字直腸檢查等手段[31]。然而，這些方法可能會(huì)造成對(duì)患者過(guò)度診斷和治療的不良后果，因此，仍然需要可用于前列腺癌檢測(cè)和預(yù)后的新型生物標(biāo)志物。近幾年，有關(guān)miRNA與前列腺癌關(guān)系的報(bào)道越來(lái)越多， miRNA幾乎參與前列腺癌所有關(guān)鍵的細(xì)胞過(guò)程[31]，如本文介紹的miR-503、miR-30c可抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，而miR-744對(duì)前列腺癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移和侵襲起促進(jìn)作用；miR-30c、miR-466可誘導(dǎo)前列腺癌細(xì)胞的細(xì)胞周期停滯和細(xì)胞凋亡；miR-186-5p、miR-154 *、miR-379可促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化，而miR-802抑制前列腺癌細(xì)胞EMT的發(fā)生；miR-7、miR-128、miR-1993a-3p對(duì)PCSC的擴(kuò)增和致瘤能力具有抑制作用；miR-375、miR-21可減弱多西他賽的化療耐藥性，而miR-183的表達(dá)則會(huì)減弱多西他賽的敏感性；miR-711、miR-4638-5p等可成為前列腺癌診斷和治療的潛在的新型生物標(biāo)志物。

miRNA與前列腺癌的相關(guān)研究盡管取得顯著的進(jìn)步，但仍然面臨很大挑戰(zhàn)。首先，miRNA通常被包裹在脂質(zhì)微泡中而免于降解，這使其對(duì)RNA酶和物理化學(xué)條件有較強(qiáng)的抵抗力，從而可能會(huì)造成生物污染[32]。其次，各研究所使用的研究設(shè)計(jì)及分析平臺(tái)等應(yīng)盡可能地減少差異，從而為臨床提供對(duì)疾病的診斷、治療及預(yù)后一致有用的信息。另外，對(duì)于miRNA與前列腺癌的相關(guān)研究多停留在研究階段，要想在臨床實(shí)踐中使用miRNA作為標(biāo)志物和治療靶標(biāo)，還需要更加深入的臨床研究。