鄭海波 彭小雨 吳智勇 傅俊惠

【摘要】 目的 研究食管癌組織和癌旁正常組織中Ki67、TS、CerbB-2的表達(dá)水平及其對手術(shù)療效和預(yù)后的影響。方法 44例食管癌切除術(shù)患者， 采用免疫組化檢測食管癌組織和癌旁正常組織的Ki67、胸苷酸合成酶（TS）、CerbB-2水平， 分析食管癌組織和癌旁正常組織Ki67、TS、CerbB-2表達(dá)水平的特征及臨床病理免疫組化因素對食管癌術(shù)后5年生存率的影響。結(jié)果 癌組織Ki67陽性率為95.5%（42/44）， 其中強(qiáng)陽性率為52.3%（23/44）;癌旁正常組織Ki67陽性率為2.3%（1/44）。癌組織TS陽性率為72.7%（32/44）;癌旁正常組織TS陽性率為27.3%（12/44）。癌組織CerbB-2陽性率為11.4%（5/44）;癌旁正常組織CerbB-2陽性率為2.3%（1/44）。癌組織Ki67陽性率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于癌旁正常組織， TS差別較小， CerbB-2無論癌組織或癌旁正常組織大多為陰性。隨訪至2018年4月底， 全部患者無失訪， 死亡27例， 生存17例， 1、3、5年生存率分別為86.4%（38/44）、54.5%（24/44）、45.5%（20/44）。區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性患者術(shù)后5年生存率高于陽性患者， 癌組織非Ki67強(qiáng)陽性表達(dá)患者5年生存率高于Ki67強(qiáng)陽性表達(dá)患者， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性、癌組織Ki67強(qiáng)陽性表達(dá)影響患者術(shù)后5年生存率。結(jié)論 Ki67水平越高， 腫瘤組織生長越活躍， 術(shù)后更容易出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。對Ki67高表達(dá)及合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者應(yīng)該給予更積極的輔助放化療。TS、CerbB-2水平對個體化治療指導(dǎo)和預(yù)后判斷沒有明確意義。

【關(guān)鍵詞】 食管癌; Ki67;胸苷酸合成酶;CerbB-2 ;療效;預(yù)后

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.05.004

采用以手術(shù)為主， 聯(lián)合放療化療的綜合治療方法是提高食管癌治療效果的發(fā)展趨勢， 但是手術(shù)前后放療化療的總體效果提高并不令人滿意。哪些患者能夠從以術(shù)前為主的綜合治療中獲益， 以及如何篩選特異性指標(biāo)用以指導(dǎo)個體化治療成為目前食管癌及其他一些惡性腫瘤的研究熱點(diǎn)[1]。選擇2010年8月～2013年12月本院采用免疫組化檢測44例食管癌切除術(shù)后腫瘤標(biāo)本中腫瘤和癌旁組織的Ki67、TS、CerbB-2水平， 隨訪至2018年4月底， 試圖分析其與食管癌綜合治療效果的相關(guān)性， 初步評估這些指標(biāo)在指導(dǎo)個體化治療的臨床意義?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇2010年8月～2013年12月于本院行食管癌切除術(shù)患者44例作為研究對象， 其中男35例， 女9例;年齡32～76歲， 平均年齡56歲;根治切除術(shù)39例， 姑息切除5例;TNM分期Ⅰ期2例， Ⅱ期17例， Ⅲa期25例;術(shù)后放療11例， 術(shù)后復(fù)發(fā)放療3例;患者病理類型均為鱗狀細(xì)胞癌， 淺肌層2例， 深肌層6例， 肌層外36例;術(shù)后病理證實(shí)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌23例（52.3%）。

1. 2 取材及免疫組化染色方法 手術(shù)標(biāo)本取材取腫瘤組織和食管殘端正常黏膜組織， 免疫組SP檢測試劑盒， DAB顯色試劑盒， 均購自福建邁新生物技術(shù)公司。試劑盒Ki67、CerbB-2、TS均為鼠抗人單抗， 邁新公司提供的陽性片作為陽性對照。免疫組化染色步驟嚴(yán)格按照說明書操作。

1. 3 免疫組化評分 Ki67陽性表達(dá)定位于腫瘤細(xì)胞核， 呈棕黃色顆粒。CerbB-2蛋白陽性表達(dá)定位于細(xì)胞質(zhì)， 呈棕黃色或深黃色， 兩者都是按陽性細(xì)胞所占百分比及著色深淺判定結(jié)果。計(jì)算陽性細(xì)胞百分比， 分為4級， 強(qiáng)陽性+++（>50%）， 陽性++（25%～50%）， 弱陽性+（10%～25%）， 陰性-（<10%）。TS結(jié)果判定：胞漿胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒+， 深棕色顆粒++， 深黃色顆粒+++。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 食管癌組織和癌旁正常組織Ki67、TS、CerbB-2表達(dá)水平的特征 癌組織Ki67陽性率為95.5%（42/44）， 其中強(qiáng)陽性率為52.3%（23/44）;癌旁正常組織Ki67陽性率為2.3%（1/44）。癌組織TS陽性率為72.7%（32/44）;癌旁正常組織TS陽性率為27.3%（12/44）。癌組織CerbB-2陽性率為11.4%（5/44）;癌旁正常組織CerbB-2陽性率為2.3%（1/44）。癌組織Ki67陽性率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于癌旁正常組織， TS差別較小， CerbB-2無論癌組織或癌旁正常組織大多為陰性。

2. 2 臨床病理免疫組化因素對食管癌術(shù)后5年生存率的影響分析 隨訪至2018年4月底， 全部患者無失訪， 死亡27例， 生存17例， 1、3、5年生存率分別為86.4%（38/44）、54.5%（24/44）、45.5%（20/44）。區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性患者術(shù)后5年生存率高于陽性患者， 癌組織非Ki67強(qiáng)陽性表達(dá)患者5年生存率高于Ki67強(qiáng)陽性表達(dá)患者， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。不同性別、浸潤深度、肉眼根治術(shù)、TS表達(dá)、CerbB-2表達(dá)患者5年生存率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性、癌組織Ki67強(qiáng)陽性表達(dá)影響患者術(shù)后5年生存率。

3 討論

3. 1 術(shù)后檢測癌組織中Ki67表達(dá)水平的臨床價值 目前有較多報道采用免疫組化檢測腫瘤各種標(biāo)記來預(yù)測腫瘤的惡性行為及對各種治療的敏感度 [2-5]， 其中以腫瘤組織的Ki67水平判斷放療敏感度方面應(yīng)用較廣。Ki67是在細(xì)胞增殖周期G1、S、M、G2期出現(xiàn)的核抗原， 以M期最高， 其表達(dá)的高低反映了細(xì)胞增殖狀態(tài)， 因?yàn)榉派渚€對增殖期細(xì)胞殺傷力較大， 細(xì)胞增殖活性越強(qiáng)， 放療的敏感性可能越強(qiáng)。因此， Ki67在食管鱗癌組織中的表達(dá)程度可能作為判斷該腫瘤放療敏感性的指標(biāo)之一， 是食管癌個體化治療方案選擇的重要參考。但是， Ki67水平越高， 腫瘤組織生長越活躍， 容易出現(xiàn)脈管癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、雙灶癌， 術(shù)后更容易出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移等。若早期出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移， 局部療效并未帶來實(shí)際益處， 本組術(shù)后病理證實(shí)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者占52.3%， Ki67強(qiáng)陽性占52.3%， 說明放療療效除了可以參考放療敏感指標(biāo)Ki67水平外， TMN分期情況仍然是最重要的參考依據(jù)。在預(yù)后方面， Ki67強(qiáng)陽性患者5年生存率更差， 本組資料顯示， 是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和是否Ki67強(qiáng)陽性對術(shù)后5年生存率的有顯著影響性， 而不同性別、浸潤深度、肉眼根治術(shù)、TS表達(dá)、CerbB-2表達(dá)患者5年生存率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。手術(shù)后， 對腫瘤Ki67水平高患者及同時合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者應(yīng)該給予更積極的輔助放療、化療。

3. 2 術(shù)后檢測癌組織中TS和CerbB-2表達(dá)水平的臨床意義

在本組研究中， 癌組織TS陽性率高， 癌旁正常組織陽性率低。理論上組織細(xì)胞中TS水平與5-氟尿嘧啶（5-Fu）細(xì)胞毒作用呈負(fù)相關(guān)[6， 7]， 依此推測食管癌組織細(xì)胞比正常組織對化療藥5-Fu更加耐藥。檢測腫瘤組織TS水平并據(jù)此作為判斷化療敏感性的指標(biāo)， 實(shí)際意義不大。在對預(yù)后的影響方面， TS檢測水平并未有顯著性差異。CerbB-2表達(dá)在癌組織及正常組織均較低， 對食管癌的個體化治療指導(dǎo)和預(yù)后判斷價值不大。

3. 3 同時檢測食管手術(shù)標(biāo)本癌組織和癌旁正常組織腫瘤標(biāo)志物的價值 一些惡性度較高、較早及較易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者到底如何準(zhǔn)確界定其更適合手術(shù)還是非手術(shù)， 本研究試圖通過檢測癌組織和附帶檢測癌旁正常組織腫瘤標(biāo)志物， 希望發(fā)現(xiàn)一些有價值的差異。在Ki67方面， 癌組織中和癌旁正常組織的差異比較大， 反映了癌組織中和癌旁正常組織細(xì)胞增殖狀態(tài)生物學(xué)行為上的差異， 所以， 正常組織如果Ki67水平升高， 或許術(shù)后放療、化療有價值。而對檢測腫瘤組織和瘤旁TS和CerbB-2結(jié)果的分析統(tǒng)計(jì)， 則未發(fā)現(xiàn)采取同時檢測的應(yīng)用價值。

綜上所述， Ki67水平越高， 腫瘤組織生長越活躍， 術(shù)后更容易出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。對Ki67高表達(dá)及合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者應(yīng)該給予更積極的輔助放化療。TS、CerbB-2水平對個體化治療指導(dǎo)和預(yù)后判斷沒有明確意義。

參考文獻(xiàn)

[1] 王鑫， 祝淑釵. 食管癌綜合治療研究進(jìn)展. 中華放射腫瘤學(xué)雜志， 2006， 15（1）：65-67.

[2] 任金山， 吳紅芳 Ki67與食管鱗癌放療敏感性的相關(guān)研究. 中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用， 2011， 5（8）：37-38 .

[3] 黃大福， 陳德玉. EGFR， HER2預(yù)測食管鱗狀細(xì)胞癌同步放化療敏感性的價值 . 江蘇大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版）， 2009， 19（6）：519-521.

[4] 李瑞芹， 吳名耀. 食管癌放射治療的相關(guān)基因及其蛋白表達(dá)的研究進(jìn)展. 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)， 2008， 21（2）：119-121.

[5] 葛紅， 樊青霞. Caspase-3在食管鱗癌術(shù)前放療前后的表達(dá)及與放療后病理反應(yīng)的關(guān)系的研究. 臨床醫(yī)學(xué)， 2007， 27（10）：79-81.

[6] 錢小軍， 胡冰. TS酶與5-FU的關(guān)系及在消化道腫瘤個體化治療中的應(yīng)用. 安徽醫(yī)藥， 2010， 14（3）：252-254.

[7] 卓麗娟. 胸苷酸合酶與5-氟尿嘧啶耐藥的關(guān)系. 福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報， 2002， 36（2）：230-231.

[收稿日期：2018-08-10]