袁銘財

（三亞市動物衛(wèi)生監(jiān)督所，海南三亞572000）

近幾年，在豬的養(yǎng)殖過程中，含抗生素添加劑大量使用，導致許多耐藥性菌株出現(xiàn)，造成相關(guān)疾病治療困難，豬機體免疫力下降和豬肉等畜產(chǎn)品中嚴重的藥物殘留，威脅著人類的健康（李林祥，2016）。抗菌肽是一類具有生物活性的小分子蛋白質(zhì)，其具有抗菌譜廣、穩(wěn)定性好、不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點（王棚，2018）。研究表明，抗菌肽是一種先天免疫的重要防御物質(zhì)，可以激活自身免疫系統(tǒng)，提高疫苗免疫效果，被廣泛應用于畜禽養(yǎng)殖業(yè)中（王莉，2017；袁威，2015）。豬藍耳病又稱為豬繁殖與呼吸綜合征，其感染率和死亡率均較高，是一種危害養(yǎng)豬業(yè)的接觸性傳染?。ê捎瘢?018）。由于藍耳病沒有有效藥物，免疫疫苗成為藍耳病防控的主要手段，臨床中由于多種原因?qū)е乱呙缧Ч焕硐耄贵w水平參差不齊，其保護率較低，應引起重視（李衛(wèi)國，2017）。許多研究表明，抗菌肽可以提高畜禽的生長生產(chǎn)性能、免疫機能。因此，本試驗在仔豬基礎(chǔ)日糧中添加不同水平的抗菌肽粗提物，旨在探討其對仔豬生長性能及藍耳病免疫抗體水平的影響，為抗菌肽粗提物臨床應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器 抗菌肽粗提物（含量≥95%）購自瑞鑫百奧生物科技（深圳）有限公司；藍耳病抗體檢測試劑盒購自西班牙海博萊公司；藍耳病滅活疫苗購自勃林格公司；ExL800型酶標儀由美國寶特公司生產(chǎn)；8道移液槍由德國Eppendorf生產(chǎn)；高速小型離心機、培養(yǎng)箱均由Thermo公司生產(chǎn)；常規(guī)的儀器及試劑由本實驗室提供。

1.2 試驗動物 （28±2）日齡、體重相近斷奶仔豬90只，由本市規(guī)?；B(yǎng)豬場提供。

1.3 試驗日糧 仔豬的基礎(chǔ)飼糧營養(yǎng)水平與配比參照NRC（1998）推薦的斷奶仔豬的營養(yǎng)需要，配合基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1，仔豬基礎(chǔ)配合飼料中不添加任何添加劑和抗生素。

1.4 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理 采用單因素設(shè)計試驗，選擇（28±2）日齡、體重相近斷奶仔豬90只隨機分成3組，每個組3個重復，每個重復10只，1組飼喂基礎(chǔ)日糧為對照組，2～3組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.25%、0.5%的抗菌肽粗提物，試驗期為30 d。每個試驗組每個重復單獨飼養(yǎng)，單獨給料，自由采食與飲水，在仔豬28日齡時，免疫2頭份的藍耳病滅活疫苗。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.5 指標測定及方法

1.5.1 生長性能測定 在試驗開始與結(jié)束對每個試驗組試驗仔豬逐個空腹稱重，在試驗期間記錄每個試驗組的耗料量，測定生長性能指標。

平均日增重/kg=（試驗末平均體重-初期平均體重）/試驗天數(shù)；

平均日采食量/kg=試驗期總耗料量/試驗天數(shù)；

料重比=平均日采食量/日增重。

1.5.2 藍耳病抗體水平檢測 在試驗結(jié)束，每個試驗組隨機挑選10頭試驗仔豬，前腔靜脈采血，離心分離血清，按照說明書用藍耳病抗體ELISA檢測試劑盒測定試驗仔豬免疫抗體水平，并計算IPRC值、合格率及變異系數(shù)。

1.6 數(shù)據(jù)分析 試驗結(jié)果以“平均值±標準差”表示，采用統(tǒng)計學軟件SPSS 19.0進行方差分析，以P＜0.05表示差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗菌肽粗提物對仔豬生長性能的檢測結(jié)果 由表2可知，2組試驗末重和平均日增重均高于1組，但差異性不顯著（P＞0.05），3組試驗末重和平均日增重與1組相比分別提高4.92%、7.27%（P＜0.05），2組和3組之間差異性不顯著（P＞0.05）；2組和3組平均日采食量均高于1組，但是差異性不顯著（P＞0.05）；2組料重比低于1組，差異性不顯著（P＞0.05），3組料重比與1組相比降低5.81%（P＜0.05），2組和3組之間差異性不顯著（P＞0.05）。

2.2 抗菌肽粗提物對仔豬藍耳病抗體免疫水平檢測 由表3可知，2組和3組的IPRC值與1組相比分別提高39.32%、55.70% （P＜0.05）；2組抗體水平合格率高于1組（P＞0.05），3組與1組相比提高27.98%（P＜0.05），2組和3組相比差異性不顯著（P＞0.05）；2組抗體水平變異系數(shù)低于1組（P＞0.05），3組與1組相比降低31.84% （P＜0.05），2組和3組相比差異性不顯著（P＞0.05）。

表2 抗菌肽粗提物對仔豬生長性能檢測結(jié)果

表3 抗菌肽粗提物對仔豬藍耳病抗體免疫水平檢測

3 討論

3.1 抗菌肽粗提物對仔豬生長性能的影響 王莉（2017）等研究表明，抗菌肽和β-甘露聚糖酶合用可以提高鵪鶉的生長性能。侯改鳳（2017）等報道，在飼料中添加50 mg/kg抗菌肽可以提高育肥豬生長性能。張海文（2017）等研究表明，抗菌肽可以提高LPS刺激下仔豬生長性能。本研究表明，在仔豬的基礎(chǔ)日糧中添0.5%抗菌肽提取物，與對照組相比，可以顯著提高仔豬的試驗末重和平均日增重，降低料肉比。因此證實抗菌肽提取物可以提高仔豬生長性能。其原因可能與抗菌肽粗提物含有多種生物活性小分子多肽及未知生長因子，能夠促進飼料在仔豬腸道的消化與吸收，提高飼料的利用率有關(guān)。

3.2 抗菌肽粗提物對仔豬藍耳病抗體免疫水平影響 研究表明，抗菌肽中所含的生物活性物質(zhì)是生物體天然防御系統(tǒng)的重要組成部分之一，可以有效調(diào)節(jié)機體的免疫系統(tǒng)，提高抗感染免疫，同時還可以誘導動物機體產(chǎn)生獲得性免疫（趙紅霞，2003）。抗菌肽可以促進體內(nèi)T、B淋巴細胞增殖和成熟，促進B淋巴細胞轉(zhuǎn)化為漿細胞分泌抗體，提高機體抵抗力（陳星星，2016）。本試驗結(jié)果表明，0.5%抗菌肽提取物添加組可以顯著提高藍耳病抗體IPRC值和合格率，降低變異系數(shù)。因此證明，0.5%抗菌肽提取物可以提高仔豬藍耳病疫苗免疫抗體水平，促進仔豬生長?？赡苡捎诳咕拇痔嵛锟梢杂行д{(diào)節(jié)體內(nèi)的細胞免疫及體液免疫功能，使藍耳病疫苗等抗原物質(zhì)與體內(nèi)的抗體結(jié)合，形成免疫復合物，并產(chǎn)生有效的藍耳病抗體，促進仔豬體內(nèi)的免疫應答，因此提高仔豬藍耳病疫苗免疫抗體水平。

4 小結(jié)

在仔豬基礎(chǔ)日糧中添加0.5%抗菌肽粗提物可以提高仔豬生長性能及藍耳病疫苗免疫抗體水平。