梁 旭，李 雁，李 昕

（1．北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院急診科，北京 100700；2．北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院教育處，北京 100700）

急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）是由多種病因如感染、創(chuàng)傷等導(dǎo)致的以進(jìn)行性呼吸困難、頑固性低血氧癥和肺組織水腫為主要特征的臨床常見急危重癥[1]。ARDS的西醫(yī)治療目前以保護(hù)性機(jī)械通氣、限制性液體管理等支持治療和控制原發(fā)病為主。Meta分析研究表明[2]，中西醫(yī)結(jié)合治療ARDS在降低病死率等方面優(yōu)勢(shì)明顯，中藥復(fù)方具有多靶點(diǎn)治療疾病的特點(diǎn)，對(duì)ARDS的防治具有廣闊的應(yīng)用前景。

根據(jù)臨床表現(xiàn)，ARDS可歸屬于中醫(yī)暴喘、肺衰等病的范疇。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為肺氣虛損，毒瘀互阻，進(jìn)而導(dǎo)致肺氣衰敗是ARDS的關(guān)鍵病機(jī)[3]。課題組在前期工作中采用國(guó)家級(jí)名老中醫(yī)杜懷棠教授經(jīng)驗(yàn)方益氣化瘀解毒方對(duì)ARDS模型大鼠進(jìn)行干預(yù)[4－6]，可顯著減輕大鼠肺組織損傷程度，提高肺系數(shù)及肺通透指數(shù)，并可明顯下調(diào)炎癥因子及關(guān)鍵炎癥蛋白的表達(dá)，其具體的作用機(jī)制有待進(jìn)一步闡明。

本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)原理，應(yīng)用整合藥理學(xué)平臺(tái)[7]（TCMIP，http：//www．tcmip．cn/，中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院）對(duì)課題組前期有效方益氣化瘀解毒方中的益氣－解毒藥對(duì)——黃芪－金銀花進(jìn)行研究，構(gòu)建其干預(yù)ARDS作用機(jī)制的“中藥－成分－靶標(biāo)－通路”復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)，為該復(fù)方治療ARDS的分子機(jī)制深入研究和進(jìn)一步明確ARDS的發(fā)病機(jī)制提供科學(xué)依據(jù)。

1 數(shù)據(jù)來(lái)源與方法

1.1 黃芪－金銀花化學(xué)成分收集 TCMIP依據(jù)《中國(guó)藥典》（2015年版），收錄了400余味常用中藥材信息[7]。在其中藥信息設(shè)定界面對(duì)“黃芪”、“金銀花”進(jìn)行檢索并收集其所有化學(xué)成分，建立黃芪－金銀花化學(xué)成分信息數(shù)據(jù)庫(kù)。

1.2 ARDS疾病候選靶標(biāo)收集 在整合藥理學(xué)平臺(tái)疾病靶標(biāo)信息數(shù)據(jù)檢索界面，以急性呼吸窘迫綜合征的英文縮寫“ARDS”作為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索，可收集到疾病靶標(biāo)數(shù)據(jù)庫(kù)中目前已知的ARDS治療靶點(diǎn)，作為“黃芪－金銀花”藥對(duì)的候選治療靶標(biāo)，靶標(biāo)信息主要包括治療“ARDS”藥物的名稱、療效、臨床應(yīng)用、作用靶標(biāo)的基因及蛋白質(zhì)等相關(guān)信息。

1.3 靶標(biāo)預(yù)測(cè) 通過(guò)在中藥靶標(biāo)預(yù)測(cè)界面選取相似性分?jǐn)?shù)≥0．8的所有藥物靶標(biāo)作為“黃芪－金銀花”藥對(duì)的潛在作用靶標(biāo)，建立藥物候選靶標(biāo)信息數(shù)據(jù)庫(kù)。TCMIP平臺(tái)利用OpenBabel軟件對(duì)中藥成分進(jìn)行二維結(jié)構(gòu)相似性檢索，并采用Tanimoto系數(shù)定義的相似度計(jì)量方法，通過(guò)與食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）上市藥物進(jìn)行化學(xué)結(jié)構(gòu)相似性比對(duì)[8－9]。

1.4 蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用信息（PPI） TCMIP整合了HAPPI、InAct、HPRD、Reactome、OPHID、MINT、PDZBase、DIP等數(shù)據(jù)庫(kù)中蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用信息。通過(guò)該平臺(tái)的PPI數(shù)據(jù)庫(kù)，可獲得“黃芪－金銀花”藥對(duì)作用的潛在靶標(biāo)與ARDS疾病靶標(biāo)之間的PPI。

1.5 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建與分析 通過(guò)網(wǎng)絡(luò)分析，計(jì)算“黃芪－金銀花”藥對(duì)潛在靶標(biāo)與治療ARDS的疾病靶標(biāo)之間的PPI信息網(wǎng)絡(luò)特征值，以節(jié)點(diǎn)連接度（degree）的2倍中位數(shù)為卡值，選取中藥靶標(biāo)－疾病靶標(biāo)互作網(wǎng)絡(luò)的核心節(jié)點(diǎn)；在此基礎(chǔ)上，以節(jié)點(diǎn)連接度、節(jié)點(diǎn)緊密度和節(jié)點(diǎn)介度的中位數(shù)為卡值，選取同時(shí)滿足3個(gè)卡值的節(jié)點(diǎn)為“黃芪－金銀花”藥對(duì)潛在靶標(biāo)－ARDS疾病靶標(biāo)相互作用網(wǎng)絡(luò)的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)[10]。通過(guò)基因功能和通路的富集分析，挖掘分析“黃芪－金銀花”藥對(duì)治療ARDS關(guān)鍵網(wǎng)絡(luò)靶標(biāo)及其對(duì)應(yīng)的活性成分，并構(gòu)建“中藥－核心成分－關(guān)鍵靶標(biāo)－主要通路”的網(wǎng)絡(luò)通路圖，進(jìn)一步明確中藥干預(yù)ARDS的分子作用機(jī)制。

1.6 關(guān)鍵靶標(biāo)分析及通路富集 TCMIP整合基因本體數(shù)據(jù)庫(kù)GO（geneontology，http：//www．geneontology．org/）和KEGG通路數(shù)據(jù)庫(kù)（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，http：//www．kegg．jp）資源，可直接提取靶標(biāo)基因或蛋白質(zhì)的分子功能、細(xì)胞內(nèi)定位及其所參與的生物學(xué)反應(yīng)和通路，對(duì)“黃芪－金銀花”藥對(duì)干預(yù)ARDS的關(guān)鍵作用靶標(biāo)進(jìn)行基因功能和通路富集分析，并以P降序的方式將GO和KEGG計(jì)算分析的結(jié)果排列顯示。

2 結(jié)果

2.1“ 黃芪－金銀花”藥對(duì)化學(xué)成分靶標(biāo)預(yù)測(cè)及分析 通過(guò)TCMIP數(shù)據(jù)庫(kù)共收集得到黃芪化合物成分29個(gè)，主要為黃芪皂苷類和黃芪多糖類；金銀花化合物成分47個(gè)，主要為忍冬皂苷、金銀花黃酮、金銀花縮醛苷類。針對(duì)上述成分，共預(yù)測(cè)出黃芪的潛在作用靶標(biāo)1 273個(gè)，金銀花的潛在作用靶標(biāo)537個(gè)，經(jīng)相似性分?jǐn)?shù)≥0．8篩選后，得到黃芪預(yù)測(cè)靶標(biāo)185個(gè)，金銀花預(yù)測(cè)靶標(biāo)38個(gè)，兩者共有的靶標(biāo)21個(gè)，提示黃芪和金銀花在共性靶標(biāo)之間存在潛在的疊加作用。

對(duì)“黃芪－金銀花”藥對(duì)候選靶標(biāo)進(jìn)行基因分析，取P排名前20得到候選靶標(biāo)具有的基因功能信息見表1，可見其功能涉及突觸后膜電位的調(diào)節(jié)、電壓門控鈉離子通道的活動(dòng)、離子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的調(diào)節(jié)、肉堿代謝過(guò)程、線粒體功能調(diào)節(jié)、AV節(jié)點(diǎn)細(xì)胞動(dòng)作電位、感官知覺及痛覺等。對(duì)“黃芪－金銀花”候選靶標(biāo)進(jìn)行通路富集分析，取P排名前20得到候選靶標(biāo)參與的通路信息見表2，可見涉及通路主要有PPAR信號(hào)通路、過(guò)氧化物酶體、循環(huán)系統(tǒng)、半乳糖代謝、輔因子和維生素的代謝、內(nèi)分泌系統(tǒng)、心肌細(xì)胞腎上腺素能信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、脂質(zhì)代謝、不飽和脂肪酸的生物合成、α－亞麻酸代謝等。

2.2“ 黃芪－金銀花”藥對(duì)治療ARDS的核心靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò) 通過(guò)TCMIP的PPI相互作用數(shù)據(jù)庫(kù)，構(gòu)建“黃芪－金銀花”藥對(duì)的潛在靶標(biāo)與疾病靶標(biāo)相互作用網(wǎng)絡(luò)。根據(jù)條件篩選出關(guān)鍵靶標(biāo)659個(gè)，根據(jù)degree排序顯示排名前100的靶點(diǎn)，得到黃芪－金銀花治療ARDS的候選靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)，見圖1，其中已知治療ARDS的直接靶標(biāo)（known disease target）78個(gè)，潛在藥物靶標(biāo)（putative drug target）3個(gè)，共同靶標(biāo)（common target）2個(gè)。圖中節(jié)點(diǎn)的大小與degree成正比關(guān)系，同時(shí)根據(jù)比較圖中節(jié)點(diǎn)介度大小，發(fā)現(xiàn)TSC1、NSDHL、GRB2、MYC、MAP2K等關(guān)鍵靶標(biāo)介度值明顯大于其他靶標(biāo)，在網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮重要作用。

以上關(guān)鍵靶標(biāo)中，部分已知靶標(biāo)如：甾醇－4－α－羧酸鹽3－脫氫脫羧酶（NSDHL）主要與3－β－羥基－δ5－甾體脫氫酶活性、小分子代謝過(guò)程、迷路層血管發(fā)育等相關(guān)；外周血質(zhì)膜蛋白（CASK）功能主要涉及ATP結(jié)合、蛋白質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸激酶活性、鳥苷酸激酶活性、細(xì)胞黏附、RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)節(jié)、GMP代謝過(guò)程、突觸傳遞、神經(jīng)遞質(zhì)分泌的正調(diào)節(jié)等；雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶1A（DYRK1A）功能主要與蛋白激酶活性、ATP結(jié)合、tau蛋白結(jié)合、mRNA剪接的負(fù)調(diào)節(jié)、有絲分裂細(xì)胞周期的正調(diào)節(jié)、蛋白質(zhì)磷酸化、DNA損傷反應(yīng)的負(fù)調(diào)節(jié)等相關(guān)；磷脂酰肌醇3－激酶調(diào)節(jié)亞基α（PIK3R1）功能主要涉及1－磷脂酰肌醇－3－激酶調(diào)節(jié)劑活性、蛋白磷酸酶結(jié)合、ErbB－3類受體結(jié)合、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、Fc－γ受體信號(hào)通路、轉(zhuǎn)錄的正向調(diào)節(jié)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體信號(hào)通路、外源性凋亡信號(hào)通路、凝血功能、腫瘤壞死因子產(chǎn)生的正調(diào)節(jié)、Fc－epsilon受體信號(hào)通路、白細(xì)胞遷移、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體信號(hào)通路、T細(xì)胞受體信號(hào)通路；雙特異性絲裂原活化蛋白激酶激酶1（MAP2K1）主要與MAP激酶活性、ATP結(jié)合、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素TRK受體信號(hào)通路、基因表達(dá)的正調(diào)節(jié)、Toll樣受體信號(hào)通路、調(diào)節(jié)應(yīng)激激活的絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）級(jí)聯(lián)反應(yīng)、ERK1和ERK2級(jí)聯(lián)反應(yīng)、Ras蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、小GTP酶介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、先天免疫應(yīng)答、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體信號(hào)通路、Fc－epsilon受體信號(hào)通路、細(xì)胞遷移的正調(diào)節(jié)、RNA聚合酶II啟動(dòng)子、上皮細(xì)胞增殖參與肺形態(tài)發(fā)生、對(duì)氧化應(yīng)激的反應(yīng)等功能相關(guān)；RAC－α絲氨酸/蘇氨酸－蛋白激酶（AKT1）則與蛋白結(jié)合、磷脂酰肌醇－3，4，5－三磷酸結(jié)合、ATP結(jié)合、一氧化氮合酶調(diào)節(jié)劑活性、血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移的正調(diào)節(jié)、G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路、凋亡過(guò)程的負(fù)調(diào)節(jié)、對(duì)流體剪切應(yīng)力的響應(yīng)、蛋白激酶B信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、炎癥反應(yīng)的正調(diào)節(jié)、TRK受體信號(hào)通路、Fc－epsilon受體信號(hào)通路、血管收縮、血小板活化、自噬的負(fù)調(diào)節(jié)、JNK級(jí)聯(lián)的負(fù)調(diào)控、鈉離子轉(zhuǎn)運(yùn)正調(diào)節(jié)、mRNA穩(wěn)定性調(diào)控等生命活動(dòng)過(guò)程相關(guān)。部分已知疾病靶標(biāo)如：潛在藥物靶標(biāo)3個(gè)：鈉/鉀轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶亞基α－1（ATP1A1）功能主要與ATP結(jié)合、磷酸酶活性、ADP結(jié)合、鈉鉀離子結(jié)合相關(guān)；過(guò)氧化物酶體肉毒堿O－辛?；D(zhuǎn)移酶（CROT）功能主要涉及脂肪酸β－氧化、細(xì)胞脂質(zhì)代謝過(guò)程、輔酶A代謝過(guò)程、肉毒堿代謝等；肉堿O－棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1（CPT1A）主要與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、蛋白質(zhì)同源寡聚化、脂肪酸β－氧化、上皮細(xì)胞分化、葡萄糖代謝過(guò)程、甘油三酯代謝過(guò)程等功能相關(guān)。共同靶標(biāo)2個(gè)：葡萄糖激酶（GCK），功能主要涉及ATP結(jié)合及葡萄糖的結(jié)合；絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶D1（YWHAE），功能主要與離子通道結(jié)合、蛋白質(zhì)活性、MHCⅡ類蛋白質(zhì)復(fù)合物結(jié)合、RNA結(jié)合、ATP結(jié)合、蛋白激酶C活性等相關(guān)。急性呼吸窘迫綜合征的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，其肺損傷過(guò)程涉及多個(gè)病理環(huán)節(jié)的不同分子作用過(guò)程。上述靶標(biāo)涉及諸多生理病理分子機(jī)制，主要與ATP結(jié)合、細(xì)胞能量代謝、離子通道結(jié)合、信號(hào)因子的正負(fù)調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子調(diào)節(jié)、蛋白質(zhì)相互作用及代謝、細(xì)胞生長(zhǎng)和死亡等相關(guān)，這不僅說(shuō)明了ARDS的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，同時(shí)說(shuō)明黃芪－金銀花藥對(duì)干預(yù)ARDS的作用主要是通過(guò)對(duì)細(xì)胞物質(zhì)及能量代謝、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞生長(zhǎng)及死亡的多靶點(diǎn)、網(wǎng)絡(luò)狀的綜合調(diào)控而實(shí)現(xiàn)。

圖1 “黃芪-金銀花”藥對(duì)干預(yù)ARDS的候選靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)Fig.1 Network of Stragalus Radix and Lonicerae Japonicae Flos candidate targetsfor ARDS

2.3 “黃芪－金銀花”藥對(duì)治療ARDS關(guān)鍵靶標(biāo)的GO基因功能分析“黃芪－金銀花”藥物靶標(biāo)與疾病靶標(biāo)基因功能主要涉及蛋白質(zhì)結(jié)合、蛋白質(zhì)磷酸化、凋亡過(guò)程的負(fù)調(diào)控、血小板活化蛋白激酶活性、轉(zhuǎn)錄的正向調(diào)節(jié)、DNA模板、有絲分裂細(xì)胞周期的G2/M轉(zhuǎn)換、RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄調(diào)控的研究、藥物反應(yīng)、肽基絲氨酸磷酸化等，見表3。

2.4“ 黃芪－金銀花”藥對(duì)治療ARDS的KEGG通路富集分析 根據(jù)P排序僅顯示排名前20的KEGG通路，見表4。通路富集分析結(jié)果顯示，“黃芪－金銀花”藥對(duì)治療ARDS的主要作用通路有ErbB信號(hào)通路、細(xì)胞生長(zhǎng)與死亡、FoxO信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、MAPK信號(hào)通路、甲狀腺激素信號(hào)通路、磷脂酰肌醇3－激酶（PI3K）－蛋白激酶B（AKT）信號(hào)通路、內(nèi)分泌系統(tǒng)、胰腺癌、感染性疾病、癌癥、HTLV－I感染、細(xì)胞通訊、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、Ras信號(hào)途徑、慢性粒細(xì)胞白血病、細(xì)胞周期、非小細(xì)胞肺癌、Epstein Barr病毒感染等。

圖2 “黃芪-金銀花”藥對(duì)干預(yù)ARDS“中藥-成分-靶標(biāo)-通路”多維網(wǎng)絡(luò)分析Fig.2“Traditional Chinese medicine-compound-target-pathway”multidimensinal network analysisof Stragalus Radix and Lonicerae Japonicae Flosdrug pair on ARDS

表1 “黃芪-金銀花”藥對(duì)候選靶標(biāo)具有的功能信息Tab.1 Functional information of the candidate target of Stragalus Radix and Lonicerae Japonicae Flosdrug pair

表2 “黃芪-金銀花”藥對(duì)候選靶標(biāo)參與的通路信息Tab.2 Pathway information of thecandidatetarget of Stragalus Radix and Lonicerae Japonicae Flosdrug pair

表3 “黃芪-金銀花”藥對(duì)干預(yù)ARDS關(guān)鍵靶標(biāo)基因信息功能分析Tab.3 Function analysisof key target geneinformation of Stragalus Radix and Lonicerae Japonicae Flosdrug pair on the ARDS

2.5“ 黃芪－金銀花”藥對(duì)治療ARDS的“中藥－成分－靶標(biāo)－通路”多維網(wǎng)絡(luò)分析 見圖2。通過(guò)TCMIP數(shù)據(jù)庫(kù)分析可以看出，“黃芪－金銀花”藥對(duì)干預(yù)ARDS作用主要與33個(gè)化學(xué)成分相關(guān)聯(lián)，其中黃芪成分19個(gè)，金銀花成分14個(gè)。黃芪成分以黃芪皂苷和黃芪苷為主，如黃芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ等；金銀花主要成分以金銀花苷、金銀花黃酮、忍冬次皂苷等為主。

其中，黃芪皂苷、金銀花酚酸類成分均已通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)具備減輕急性肺損傷（ALI）的藥理作用。徐旭等[11]發(fā)現(xiàn)黃芪皂苷可延長(zhǎng)電刺激大鼠頸總動(dòng)脈血栓形成的時(shí)間、抑制血小板聚集，提高前列環(huán)素（PGI2）和一氧化氮（NO）水平，降低血栓素A2（TXA2）/前列環(huán)素比例，發(fā)揮抗血栓作用；劉永琦、李金田等[12]發(fā)現(xiàn)黃芪皂苷對(duì)肺纖維化大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)具有保護(hù)作用，調(diào)節(jié)Th1/Th2型細(xì)胞因子的平衡及TNF－α含量可能是其抗肺纖維化的機(jī)理之一；張吉等[13]發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷可能通過(guò)抑制GRP78和CHOP蛋白表達(dá)調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)，從而改善急性肺損傷狀態(tài)；趙建軍等[14]發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷能上調(diào)脂多糖（LPS）致ALI大鼠肺水通道蛋白5的表達(dá)，從而減輕LPS致ALI大鼠肺炎癥損傷反應(yīng)；宋亞玲等[15]對(duì)金銀花的酚酸類化合物1～8進(jìn)行了體外抗炎活性實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)化合物1～8對(duì)LPS刺激的巨噬細(xì)胞炎癥因子均具有不同程度的抑制作用。

黃芪－金銀花藥對(duì)作用于ARDS的相關(guān)通路主要有ErbB信號(hào)通路、FoxO信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、Ras信號(hào)途徑、MAPK信號(hào)通路、PI3K－AKT信號(hào)通路、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、細(xì)胞生長(zhǎng)與死亡、內(nèi)分泌系統(tǒng)、HTLV－I感染、細(xì)胞通訊、非小細(xì)胞肺癌、甲狀腺激素信號(hào)通路、感染性疾病、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、慢性粒細(xì)胞白血病、胰腺癌、膠質(zhì)瘤、黑色素瘤、細(xì)胞周期、結(jié)直腸癌、Epstein Barr病毒感染、雌激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路等。

其中，ErbB受體酪氨酸激酶（RTK）家族[16]可調(diào)節(jié)多種生物反應(yīng)，包括細(xì)胞增殖、分化、活動(dòng)，RTK家族成員之一表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR，也稱為ErbB－1或HER1）[17]可誘導(dǎo)受體同源二聚體和異二聚體的形成以及內(nèi)在激酶結(jié)構(gòu)域的激活，導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)尾部?jī)?nèi)特定酪氨酸殘基（pY）的磷酸化，含有pY肽的信號(hào)效應(yīng)子被募集到活化受體即可誘導(dǎo)各種信號(hào)傳導(dǎo)途徑。PI3K信號(hào)通路可被大多數(shù)ErbB直接或間接激活。

表4 “黃芪-金銀花”藥對(duì)干預(yù)ARDS關(guān)鍵靶標(biāo)通路信息Tab.4 Key target pathway information of Stragalus Radix and Lonicerae Japonicae Flosdrug pair on the ARDS

FoxO信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期控制、葡萄糖代謝、抗氧化應(yīng)激等細(xì)胞生理過(guò)程中特定基因的表達(dá)。FoxO蛋白的中心調(diào)節(jié)機(jī)制與PI3K下游的Akt/PKB的磷酸化相關(guān)[18－19]。

絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路[20]與細(xì)胞增殖、分化和遷移相關(guān)。MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路具有復(fù)雜性和多樣性，MAPK相關(guān)蛋白分子包括Jun氨基末端激酶（JK1/2/3）、p38蛋白、ERK5和細(xì)胞外信號(hào)相關(guān)激酶（ERK），可由特異性MAPKK激活；MAPK途徑是所有ErbB受體下游的共同靶標(biāo)，同時(shí)MAPK通路可通過(guò)G蛋白等分子與PI3K通路相聯(lián)通[21]。

PI3K－Akt信號(hào)傳導(dǎo)通路可被多種類型的細(xì)胞刺激或毒性損傷激活，主要與細(xì)胞轉(zhuǎn)錄、翻譯、增殖、生長(zhǎng)和存活等相關(guān)，PIP3可作為第二信使激活A(yù)kt，活化的Akt可以通過(guò)磷酸化參與細(xì)胞凋亡、蛋白質(zhì)合成與代謝等細(xì)胞周期過(guò)程[22]。

通過(guò)對(duì)“黃芪－金銀花”藥對(duì)“中藥－成分－靶標(biāo)－通路”多維網(wǎng)絡(luò)分析，發(fā)現(xiàn)該藥對(duì)成分在干預(yù)ARDS中發(fā)揮了重要作用，預(yù)測(cè)結(jié)果中如減輕炎癥反應(yīng)、保護(hù)肺血管內(nèi)皮細(xì)胞及抗細(xì)胞凋亡等分子機(jī)制與課題組前期實(shí)驗(yàn)結(jié)論具有較高重合性[4－6]。本研究為益氣化瘀解毒方治療ARDS進(jìn)一步的機(jī)制研究提供了可能依據(jù)和新的思路，同時(shí)為中藥復(fù)方中關(guān)鍵藥對(duì)干預(yù)疾病的機(jī)制研究提供了研究模式參考。

3 結(jié)論

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)基于“疾病—基因—靶點(diǎn)—藥物”相互作用網(wǎng)絡(luò)，其注重整體性和動(dòng)態(tài)性的特點(diǎn)，與中藥復(fù)方注重多組分配伍、多靶點(diǎn)干預(yù)及系統(tǒng)調(diào)控的思想不謀而合[23]。本研究表明，“黃芪－金銀花”藥對(duì)可通過(guò)多靶點(diǎn)、多途徑干預(yù)ARDS，為其進(jìn)一步的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)分析和防治作用機(jī)制研究提供了依據(jù)。

本研究是基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)原理的綜合數(shù)據(jù)分析，具體分子通路機(jī)制及物質(zhì)基礎(chǔ)將通過(guò)進(jìn)一步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證，望本研究能夠?yàn)閺?fù)方核心藥對(duì)的研究及ARDS的臨床治療提供參考。