李明凱,詹浩煉,吳靈飛

李明凱,詹浩煉,吳靈飛,汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科廣東省汕頭市 515041

核心提要: 本文就長(zhǎng)鏈非編碼RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)生長(zhǎng)阻滯特異性轉(zhuǎn)錄因子5(growth arrestspecial transcript 5,GAS5)在腫瘤中的研究進(jìn)展作一綜述.GAS5通過一系列復(fù)雜的機(jī)制參與多種腫瘤發(fā)生、進(jìn)展、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及化療耐藥的調(diào)控,該lncRNAs有可能成為腫瘤防治的新型靶標(biāo).

0 引言

近年,長(zhǎng)鏈非編碼RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)在腫瘤中的作用受到廣泛關(guān)注.有證據(jù)顯示,lncRNAs參與了細(xì)胞多種生命活動(dòng)并與腫瘤的發(fā)生及進(jìn)展密切相關(guān),本文結(jié)合國(guó)內(nèi)外最新報(bào)道,對(duì)lncRNA生長(zhǎng)阻滯特異性轉(zhuǎn)錄因子5(growth arrest-special transcript 5,GAS5)在各類腫瘤中的表達(dá)及作用作一綜述.

1 LncRNA

LncRNA是一類長(zhǎng)度在200 nt以上的非編碼RNA,一般分為反義長(zhǎng)非編碼RNA、內(nèi)含子非編碼RNA、基因間長(zhǎng)非編碼RNA、啟動(dòng)子相關(guān)長(zhǎng)非編碼RNA、非翻譯區(qū)長(zhǎng)非編碼RNA等5類,定位于細(xì)胞核或胞漿,具有明顯的時(shí)空特異性和組織特異性表達(dá)特點(diǎn).LncRNA通過與相關(guān)蛋白、DNA或RNA結(jié)合,主要以誘餌型(Decoyarchetype),信號(hào)型(Signalarchetype),指導(dǎo)型(Guidearchetype)及支架型(Scaffold-archetype)四種方式在表觀遺傳水平、轉(zhuǎn)錄水平及轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控靶基因的表達(dá)[1,2].LncRNAs在腫瘤中的作用是近年生命科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn).證據(jù)顯示,lncRNAs參與細(xì)胞多種生命活動(dòng),如X染色體沉默、基因組印記、轉(zhuǎn)錄調(diào)控以及核內(nèi)運(yùn)輸?shù)戎匾{(diào)控過程,并與腫瘤的發(fā)生及進(jìn)展密切相關(guān)[3].

2 LncRNAGAS5的發(fā)現(xiàn)和作用機(jī)制

GAS5屬于lncRNA家族一員,最早由Schneider等于1988年在鼠NIH3T3纖維原細(xì)胞中因細(xì)胞生長(zhǎng)停滯后其表達(dá)增加而被發(fā)現(xiàn)[4],目前認(rèn)為與腫瘤生長(zhǎng)[5],血管重塑,炎癥反應(yīng)等多種生物行為相關(guān)[6].在人體內(nèi),GAS5位于1號(hào)染色體長(zhǎng)臂2區(qū)5帶,全長(zhǎng)4087 bp,由12個(gè)外顯子及11個(gè)內(nèi)含子組成,其中外顯子雖然有較短的開放閱讀框,但不具有編碼蛋白質(zhì)的能力.內(nèi)含子能編碼10個(gè)C/D框小核仁RNA(sno RNAs),是sno RNAs的宿主基因.GAS5除編碼lncRNA外,還編碼小核仁RNA(snoRNA),microRNA(miRNA)和PIWI相互作用的RNA(piRNAs).由于在7號(hào)外顯子上存在可供選擇的5'端供體拼接位點(diǎn),所以GAS5可通過剪切、拼接產(chǎn)生兩種成熟形式的lncRNA: GAS5a和GAS5b,其中GAS5b被認(rèn)為是其主要轉(zhuǎn)錄物.LncRNA GAS5的1號(hào)外顯子上有5'-TOP序列,該序列以胞嘧啶為起始,其生物學(xué)特征由5'-末端寡嘧啶RNA所決定.其轉(zhuǎn)錄受雷帕霉素(mTOR)信號(hào)通路及無義介導(dǎo)的mRNA降解通路(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)調(diào)控.LncRNA GAS5表達(dá)水平在生長(zhǎng)抑制(如饑餓狀態(tài)下)細(xì)胞中有轉(zhuǎn)錄后積聚現(xiàn)象.人剪接GAS5的開放閱讀框很小,它的終止密碼子存在外顯子中,其轉(zhuǎn)錄子通過NMD途徑進(jìn)行翻譯.在快速生長(zhǎng)的細(xì)胞,mTOR活性增加,5'-TOP RNA的活躍翻譯促使GAS5 轉(zhuǎn)錄子通過NMD途徑迅速降解,細(xì)胞內(nèi)GAS5水平下降.相反,當(dāng)細(xì)胞處于營(yíng)養(yǎng)缺失而生長(zhǎng)抑制時(shí),mTOR活性降低,GAS5小開放閱讀框翻譯受阻,抑制其翻譯使得通過NMD降解的GAS5減少,導(dǎo)致GAS5集聚而水平升高[5].此外,GAS5的表達(dá)亦受表觀遺傳調(diào)控,其啟動(dòng)子區(qū)域因高甲基化而呈低表達(dá)[7].

文獻(xiàn)報(bào)道,GAS5主要通過三種形式參與細(xì)胞生物學(xué)行為的調(diào)控: (1)GAS5作為誘餌與具有轉(zhuǎn)錄功能的調(diào)節(jié)蛋白如轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,通過“滴定”的方式調(diào)節(jié)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄激活或抑制.如GAS5可折疊成一個(gè)次級(jí)RNA結(jié)構(gòu),暴露出一個(gè)類似糖皮質(zhì)激素受體結(jié)合元件的序列,通過與糖皮質(zhì)激素受體的DNA結(jié)構(gòu)域結(jié)合而抑制糖皮質(zhì)激素介導(dǎo)的生理功能[5].Tani等[8]在人腎上皮細(xì)胞HEK293T中研究證實(shí)GAS5可通過競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合糖皮質(zhì)激素受體而影響糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的蛋白激酶及其下游信號(hào)分子cIAP、SGK1的表達(dá)[8],并參與細(xì)胞增殖、離子通道以及細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)控.(2)GAS5亦可作為miRNA或剪切因子的誘餌,模擬分子海綿的吸附作用,通過靶向結(jié)合miRNA而負(fù)性調(diào)控miRNA下游靶基因的表達(dá).Gu等[9]通過計(jì)算機(jī)軟件分析出GAS5存在miR-23a的靶向結(jié)合位點(diǎn),通過RIP及雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證了GAS5與miR-23a的直接結(jié)合.在乳腺癌MDAMB-231細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)GAS5可通過海綿樣吸附作用降低胞內(nèi)miR-23a水平,促使ATG3表達(dá)及自噬活化并抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng).(3)GAS5參與基因轉(zhuǎn)譯的調(diào)控.Kim等[10]報(bào)道,GAS5可負(fù)性調(diào)節(jié)eIF4E下游靶基因c-Myc的翻譯,其機(jī)制與GAS5 lncRNA與c-Myc RNA直接結(jié)合、抑制c-Myc進(jìn)入多聚核糖體有關(guān).LncRNA GAS5在腫瘤中的表達(dá)及具體調(diào)控機(jī)制見表1.

3 GAS5與腫瘤的相關(guān)性研究

研究表明,LncRNA GAS5在大多數(shù)腫瘤如前列腺癌、腎細(xì)胞癌、卵巢癌、宮頸癌、骨肉瘤等中呈低表達(dá),作為抑癌基因參與腫瘤發(fā)生、進(jìn)展的調(diào)控[33-37],但隨著研究的深入,也有學(xué)者報(bào)告GAS5在某些腫瘤如食管癌、肝癌中呈高表達(dá),GAS5通過抑制凋亡扮演致癌基因角色[18,23],這種看似矛盾的結(jié)果說明了GAS5調(diào)控機(jī)制的復(fù)雜性,可能與腫瘤亞型、不同實(shí)驗(yàn)方法及細(xì)胞株生物學(xué)背景差異有關(guān).總之,越來越多的證據(jù)表明GAS5與腫瘤易感性[23]、發(fā)生、發(fā)展、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[11]及化療耐藥[15]密切相關(guān),LncRNA GAS5有望成為潛在的腫瘤生物學(xué)標(biāo)記物及治療靶點(diǎn).

表1 LncRNA GAS5在各種腫瘤中的表達(dá)及可能機(jī)制

3.1 GAS5與神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤 Liu等[11]檢測(cè)10例正常人腦組織及32例神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中GAS5的表達(dá)水平,結(jié)果顯示在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87、U251中GAS5表達(dá)水平明顯低于正常腦組織.在U251細(xì)胞中過表達(dá)GAS5可使細(xì)胞周期阻滯于G1期的比例提高約10%,表明GAS5可抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng).裸鼠實(shí)驗(yàn)證實(shí),過表達(dá)GAS5可使神經(jīng)膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)減慢約50%,而干擾GAS5的表達(dá)則產(chǎn)生完全相反的效果,提示GAS5在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中扮演著抑癌基因角色.

研究表明GAS5的基因多態(tài)性與神經(jīng)膠質(zhì)瘤易感性有關(guān).Yuan等[41]通過404位神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者及820位健康中國(guó)人對(duì)比分析,證實(shí)GAS5啟動(dòng)子區(qū)5 bp插入/缺失多態(tài)位點(diǎn)rs145204276的Del/Del基因型比Ins/Ins基因型和Ins/Del基因型患神經(jīng)膠質(zhì)瘤的風(fēng)險(xiǎn)提高71%,作者認(rèn)為若檢測(cè)出GAS5多態(tài)位點(diǎn)rs145204276為Del/Del基因型,便應(yīng)及時(shí)告知患者遠(yuǎn)離放射線等致癌環(huán)境并加強(qiáng)隨訪.Zhao等[12]發(fā)現(xiàn)GAS5可通過“海綿樣”作用吸附miR-222,誘導(dǎo)腫瘤抑制因子Bcl-2修飾因子(bmf)和Plexin C1的表達(dá)從而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng).體外裸鼠實(shí)驗(yàn)亦證實(shí)過表達(dá)GAS5且敲除miR-222后裸鼠體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)減緩且總體生存期延長(zhǎng),認(rèn)為GAS5聯(lián)合miR-222有望成為神經(jīng)膠質(zhì)瘤治療的新靶點(diǎn).Shen等[42]隨訪106名神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者血清GAS5表達(dá)量,結(jié)果表明GAS5表達(dá)量越高患者2年生存率及總無病生存率越高,提示GAS5可作為膠質(zhì)瘤病人的預(yù)后指標(biāo).

3.2 GAS5與頭頸部腫瘤 Guo等[43]檢測(cè)212名甲狀腺癌及61名甲狀腺良性腫瘤患者中GAS5表達(dá),結(jié)果顯示甲狀腺癌細(xì)胞中GAS5呈低表達(dá),且GAS5表達(dá)量與甲狀腺癌病人TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān).LncRNA表達(dá)量越低病人預(yù)后越差.在一項(xiàng)評(píng)估GAS5單核苷酸多態(tài)性對(duì)接受放化療的鼻咽癌患者療效和毒性研究中,Guo等[44]證實(shí)GAS5基因單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)rs2067079 CT陽性的鼻咽癌患者放化療后出現(xiàn)嚴(yán)重骨髓抑制及中性粒細(xì)胞減少風(fēng)險(xiǎn)增加;而GAS5單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)rs6790具有基因效應(yīng),rs6790 GG型、rs6790 GA型及rs6790 AA型三組患者放化療后出現(xiàn)骨髓抑制的風(fēng)險(xiǎn)逐漸減少,作者認(rèn)為GAS5基因多態(tài)性位點(diǎn)rs2067079和rs6790可作為評(píng)估鼻咽癌放化療后發(fā)生骨髓抑制風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)指標(biāo).

3.3 GAS5與呼吸系統(tǒng)腫瘤 研究表明,lncRNA GAS5在非小細(xì)胞型肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中可吸附miR-135b而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖并增強(qiáng)腫瘤對(duì)放療的敏感性,敲除GAS5則可促進(jìn)NSCLC生長(zhǎng)[16].在NSCLC細(xì)胞對(duì)順鉑(Cisplatin,DDP)耐藥的研究中,Cao等[15]證實(shí)NSCLC耐藥株miR-21呈高表達(dá)而抑癌基因PTEN低表達(dá).GAS5可通過結(jié)合miR-21而上調(diào)PTEN,使肺癌患者對(duì)DDP化療敏感性提高.血清中GAS5低表達(dá)及miR-21高表達(dá)還與患者不良預(yù)后有關(guān),促進(jìn)GAS5表達(dá)有望提高NSCLC患者放化療的敏感性并取得更高的遠(yuǎn)期生存率.

3.4 GAS5與乳腺癌 Arshi等[45]檢測(cè)23例乳腺癌患者腫瘤組織及15例正常乳腺組織中GAS5表達(dá),結(jié)果顯示GAS5在各個(gè)年齡段腫瘤組織中的表達(dá)均低于正常乳腺組織,而且越年輕的患者腫瘤組織中GAS5表達(dá)量越低,預(yù)后越差.Pickard等[46]發(fā)現(xiàn)干擾乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和T-47D中的GAS5表達(dá)后,細(xì)胞凋亡減少.多元回歸分析顯示,在細(xì)胞損傷因素如紫外線、5-Fu刺激下,乳腺癌細(xì)胞內(nèi)GAS5水平與細(xì)胞凋亡程度呈正相關(guān),與細(xì)胞生長(zhǎng)活性呈負(fù)相關(guān).過表達(dá)GAS5可促進(jìn)三陰性乳腺癌細(xì)胞及雌激素受體陽性癌細(xì)胞凋亡,提示GAS5在乳腺癌發(fā)生及進(jìn)展過程中起抑癌作用.

Li等[17]在曲妥珠單抗(trastuzumab)耐藥的乳腺癌SKBR-3/Tr細(xì)胞及乳腺癌組織中通過lncRNA微陣列分析發(fā)現(xiàn)GAS5呈低表達(dá).GAS5通過“分子海綿”吸附miR-21,上調(diào)抑癌基因PTEN(miR-21的內(nèi)源靶標(biāo))的表達(dá)而抑制乳腺癌進(jìn)展.作者證實(shí)乳腺癌患者mTOR活化與GAS5減少有關(guān).使用mTOR抑制劑提高lncRNA GAS5水平有助于加速激素受體陽性腫瘤細(xì)胞的凋亡[47].Esmatabadi等[48]研究表明外源性細(xì)胞毒藥物如姜黃素(Curcumin,DNC)亦可上調(diào)GAS5的表達(dá)并提高療效,而沉默GAS5則降低了姜黃素的化療效果,表明GAS5參與化療耐藥的調(diào)控.

3.5 GAS5與消化系統(tǒng)腫瘤 Wang等[19]證實(shí)在人食管癌EC109、KYSE150、KYSE450細(xì)胞中GAS5呈低表達(dá).在86例食管癌組織中GAS5的表達(dá)水平也低于癌旁正常組織,GAS5表達(dá)量與腫瘤病理組織學(xué)分級(jí)及TNM分期有關(guān),越晚期腫瘤GAS5表達(dá)越低.而過表達(dá)GAS5則可抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng).但也有不同的報(bào)道結(jié)果.Li等[18]在四株食管癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)ECA109、EC9706二株細(xì)胞GAS5表達(dá)量高于正常食管細(xì)胞(Esophageal cell,SHEE),而另外二株TE-1、TE-3細(xì)胞GAS5表達(dá)量與SHEE無差異.在高表達(dá)GAS5的ECA109細(xì)胞中,干擾GAS5后腫瘤細(xì)胞存活率降低,遷移能力下降,Bcl-2下調(diào),細(xì)胞凋亡增加,顯示GAS5在不同的食管癌細(xì)胞株中發(fā)揮不一樣的作用.

在胃癌的研究中,Sun等[49]檢測(cè)89例胃癌及癌旁正常組織GAS5表達(dá)量,發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中GAS5呈低表達(dá),且GAS5表達(dá)越低,腫瘤進(jìn)展越快,預(yù)后越差.Li等[50]對(duì)比分析853胃癌患者及954名健康人后發(fā)現(xiàn),GAS5的rs145204276的Del/Del基因型的人患胃癌風(fēng)險(xiǎn)較Ins/Del基因型或Ins/Ins基因型的人低,胃癌患者中若GAS5的rs145204276呈Del/Del基因型,腫瘤體積較另外兩型小,而且淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的發(fā)生率明顯降低,GAS5的rs145204276的Del/Del基因型被視為胃癌的保護(hù)因素及腫瘤患者預(yù)后良好的指標(biāo),為此,GAS5的rs145204276的Ins/Del基因型或Ins/Ins基因型的人需加強(qiáng)隨訪.此外,Zhang等[7]研究結(jié)果表明GAS5的表達(dá)受表觀遺傳調(diào)控并與化療耐藥有關(guān).在阿奇霉素耐藥的胃癌組織中GAS5啟動(dòng)子區(qū)高甲基化而呈低表達(dá).采用甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-AZA-dC處理耐藥腫瘤細(xì)胞后GAS5表達(dá)上調(diào),耐藥的胃癌細(xì)胞凋亡率升高,顯示GAS5可提高胃癌細(xì)胞化療藥物敏感性.

圖1 生長(zhǎng)阻滯特異性轉(zhuǎn)錄因子5互作蛋白String分析結(jié)果.

在肝癌研究中,Tu等[51]檢測(cè)71例肝癌組織GAS5表達(dá)并與癌旁正常組織比較,結(jié)果GAS5在腫瘤組織中明顯呈低表達(dá).GAS5的表達(dá)水平與腫瘤大小及TNM分期呈負(fù)相關(guān).Kaplan－Meier生存分析表明低表達(dá)GAS5的患者預(yù)后不良.作者認(rèn)為GAS5可作為肝癌的獨(dú)立預(yù)后指標(biāo).Chang等[10]在肝癌HCCLM9、Huh7細(xì)胞研究中亦證實(shí),GAS5可升高E-鈣黏蛋白水平、減少波形蛋白合成及上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)化,從而抑制肝癌生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移.臨床肝癌患者中GAS5低表達(dá)組腫瘤惡性程度高,預(yù)后差,而GAS5高表達(dá)組患者預(yù)后較好,認(rèn)為GAS5不僅參與腫瘤生長(zhǎng)、侵襲及轉(zhuǎn)移的調(diào)控,還可作為獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo).我們課題組在肝癌HepG2細(xì)胞研究中發(fā)現(xiàn),采用短發(fā)夾RNA(shRNA)方法干擾組蛋白去甲基化酶(KDM5C)可上調(diào)GAS5表達(dá),表明HepG2細(xì)胞GAS5啟動(dòng)子區(qū)呈高甲基化狀態(tài),GAS5轉(zhuǎn)錄亦受表觀遺傳調(diào)控.此外,過表達(dá)GAS5可抑制HepG2的增殖和遷移,表明它具有抑癌功能[52].我們進(jìn)一步通過RNA pull-down及MS質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)篩選出19種GAS5相互作用蛋白,蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)分析詳見圖1,GAS5如何調(diào)控相關(guān)蛋白的表達(dá)并發(fā)揮其作用有待進(jìn)一步探討.

有趣的是,Tao等[23]在肝癌Sk-Hep-1,BEL-7404,Huh7細(xì)胞研究中發(fā)現(xiàn),GAS5過表達(dá)可促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng),而siRNA干擾GAS5可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡,顯示GAS5在某些肝癌細(xì)胞株中具有致癌作用.對(duì)中國(guó)人群GAS5啟動(dòng)子區(qū)域中rs145204276多態(tài)性與肝癌易感性進(jìn)行Logistic回歸分析,證實(shí)rs145204276的del/del基因型(等位基因缺失)患者GAS5表達(dá)水平較高,患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)較ins/ins型和ins/del型高;采用焦磷酸測(cè)序顯示rs145204276的基因型與GAS5啟動(dòng)子區(qū)的甲基化狀態(tài)亦有關(guān),顯示表觀遺傳機(jī)制在GAS5的表達(dá)中發(fā)揮作用.

Gao等[27]在胰腺癌PANC-1、BxPC-3細(xì)胞中證實(shí)GAS5表達(dá)下調(diào),而miR-181c-5p表達(dá)上調(diào).過表達(dá)GAS5明顯抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),而敲低GAS5顯示出相反的結(jié)果.進(jìn)一步探討其機(jī)制,發(fā)現(xiàn)miR-181c-5p可通過抑制Hippo信號(hào)通路促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞耐藥.GAS5通過負(fù)性調(diào)節(jié)miR-181c-5p,活化Hippo通路而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),增加耐藥細(xì)胞對(duì)吉西他濱和5-FU的化療敏感性.

在53例結(jié)腸癌的研究中,Yang等[53]的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明GAS5在腫瘤組織中呈低表達(dá),GAS5的表達(dá)水平與腫瘤大小及TNM分期呈負(fù)相關(guān).GAS5水平越低,患者預(yù)后越差.在體外實(shí)驗(yàn)中,結(jié)腸癌HCT-116、SW480細(xì)胞過表達(dá)GAS5后,細(xì)胞周期阻滯于G0/G1的比例提高了約20%,細(xì)胞增殖能力下降,集落數(shù)明顯減少;而干擾GAS5后細(xì)胞增殖能力增強(qiáng),顯示GAS5在結(jié)腸癌中發(fā)揮抑癌作用.

3.6 GAS5與泌尿系腫瘤 Wang等[31]在膀胱癌T24和EJ細(xì)胞研究中證實(shí),過表達(dá)GAS5能與E2F4直接作用并招募E2F4至EZH2啟動(dòng)子區(qū),抑制EZH2表達(dá)并通過活化caspase-3促進(jìn)細(xì)胞凋亡.Zhang等[54]對(duì)82例膀胱癌患者進(jìn)行研究,qRT-PCR結(jié)果顯示腫瘤組織中GAS5表達(dá)量明顯低于正常組織且與腫瘤病理分級(jí)相關(guān).該課題組還發(fā)現(xiàn)在膀胱癌J82和T24細(xì)胞中過表達(dá)lncRNA GAS5可抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)并降低化療耐藥,顯示GAS5作為化療增敏劑的潛在價(jià)值.

GAS5還與腎細(xì)胞癌的發(fā)生及進(jìn)展有關(guān).過表達(dá)GAS5在腎細(xì)胞癌中起抑癌作用[55],GAS5通過分子海綿吸附miR-21,上調(diào)miR-21下游靶基因SOX5的表達(dá)而增強(qiáng)腎細(xì)胞癌對(duì)索拉非尼的敏感性[34].

3.7 GAS5與婦科腫瘤 Cao等[56]檢測(cè)102例人宮頸癌組織及癌旁正常組織GAS5表達(dá)量后發(fā)現(xiàn),腫瘤組織中l(wèi)ncRNA GAS5呈低表達(dá),離體及在體實(shí)驗(yàn)均證實(shí)GAS5可抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移.Kaplan-Meier生存分析和log-rank試驗(yàn)結(jié)果表明低表達(dá)GAS5的宮頸癌患者總體生存時(shí)間更短,Cox回歸分析顯示,GAS5表達(dá)水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及FIGO分期一樣,均可作為疾病的獨(dú)立預(yù)后指標(biāo).GAS5還參與宮頸癌化療耐藥的調(diào)控.Wen等[36]證實(shí)過表達(dá)GAS5通過直接靶向降低miR-21而增強(qiáng)宮頸癌SiHa細(xì)胞對(duì)鉑類化療藥物的敏感性.

Li等[57]在卵巢癌研究中證實(shí)腫瘤組織中GAS5表達(dá)明顯減少,且GAS5水平降低的程度與腫瘤體積、侵襲深度、TNM分期呈反比.GAS5水平越低其無病生存率及總生存率越短.將具有穩(wěn)定表達(dá)GAS5的SKOV3細(xì)胞注射到裸鼠中可抑制卵巢癌細(xì)胞增殖,其機(jī)制與調(diào)節(jié)細(xì)胞周期蛋白D1,p21和凋亡蛋白酶激活因子1的表達(dá)有關(guān).

3.8 GAS5與血液系統(tǒng)腫瘤 Dousti等[40]從人類基因組學(xué)數(shù)據(jù)庫中找出189種已知的和彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)有關(guān)的lncRNA,將它們輸入cBioPortal數(shù)據(jù)庫進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析,結(jié)果顯示40個(gè)DLBCL患者中83%存在lncRNA表達(dá)異常,其中l(wèi)ncRNA GAS5表達(dá)異常的發(fā)生率最高.運(yùn)用NPInter數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn)GAS5可靶向結(jié)合并負(fù)性調(diào)控癌基因膜聯(lián)蛋白A2(Annexin A2)的表達(dá),而細(xì)胞內(nèi)游離的AnnexinA2的高水平與多種血液腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移有關(guān),顯示GAS5通過抑制Annexin A2發(fā)揮抗癌作用.

4 結(jié)論

腫瘤發(fā)生的分子機(jī)制是復(fù)雜的生物學(xué)過程,可能涉及逐步積累基因突變、基因組不穩(wěn)定性、表觀遺傳變化及蛋白質(zhì)編碼和非編碼基因的異常表達(dá).LncRNA GAS5的研究為我們理解生物體內(nèi)蛋白質(zhì)翻譯過程的調(diào)控以及腫瘤發(fā)生、進(jìn)展提供了全新的視覺.臨床上,靶向lncRNA作為新的診斷生物標(biāo)志物和治療方法還將需要更廣泛深入地研究.盡管如此,微創(chuàng)性、病人的依從性和有效性亦應(yīng)一并考慮.目前,有研究表明腫瘤患者多種lncRNA包括GAS5均可在外泌體中進(jìn)行檢測(cè)并可同步反映其體內(nèi)的變化.因此,通過外泌體來動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)體內(nèi)GAS5水平變化應(yīng)有廣闊前景[58].相信隨著高通量測(cè)序、基因芯片等基因工程技術(shù)的進(jìn)步以及臨床指標(biāo)大數(shù)據(jù)的相關(guān)性研究,GAS5作為癌癥治療的靶點(diǎn)及新型腫瘤分子指標(biāo)將在腫瘤防治中發(fā)揮重要作用.