張雨佳, 凌 云, 張 元, 張 峰*

(1.中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院食品安全研究所, 北京 100176; 2.國家癌癥中心, 國家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心, 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院腫瘤醫(yī)院藥劑科, 北京 100021)

雙酚A(bisphenol A, BPA)是聚碳酸酯、環(huán)氧樹脂等多種高分子材料的重要組成成分,添加BPA作為功能單體的聚碳酸酯材料具有無色透明、輕巧耐用和防沖擊等特性[1],因而廣泛用于生產(chǎn)嬰兒奶瓶、玩具和醫(yī)療設(shè)備,而環(huán)氧樹脂則常被用作食品罐頭、嬰兒奶粉罐、飲料紙盒的襯里[2]。在工業(yè)合成過程中,不完全的聚合反應(yīng)可能導(dǎo)致BPA單體殘留,進(jìn)而遷移到食品中[3]。BPA的廣泛生產(chǎn)使用以及代謝和遷移特性導(dǎo)致生態(tài)環(huán)境中的土壤、水、沉積物等介質(zhì)均受到不同程度的BPA污染。研究表明,BPA作為一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,具有抗雄激素和類雌激素效應(yīng)[4],可影響體內(nèi)正常新陳代謝,引發(fā)某些生殖性疾病和代謝性疾病的產(chǎn)生[2,5]。BPA能夠引起細(xì)胞DNA損傷和染色體異常,對遺傳物質(zhì)、免疫系統(tǒng)等均具有明顯的毒性[6],長期攝入可引發(fā)人體生殖系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)受損,對嬰幼兒危害更大[7]。

考慮到BPA對環(huán)境的污染和對人體較大的危害性,各個國家和地區(qū)相應(yīng)出臺一系列法規(guī),嚴(yán)格控制BPA的添加和使用。歐盟成員國規(guī)定自2011年3月1日起禁止使用含BPA的塑料生產(chǎn)嬰兒奶瓶,2011年6月1日起禁止進(jìn)口此類塑料嬰兒奶瓶。美國、加拿大、澳大利亞、新西蘭等國家和地區(qū)均已立法,禁止和限制BPA的添加和使用[8]。生產(chǎn)商尋找雙酚類似物替代BPA,然而研究表明,其他雙酚類物質(zhì)如雙酚B、雙酚C等同樣存在潛在危害[9,10]?；谏鲜鲆蛩?開發(fā)食品和環(huán)境樣品中雙酚類物質(zhì)的精準(zhǔn)檢測方法十分必要。然而食品和環(huán)境樣品基質(zhì)組成較為復(fù)雜,在含量較低的情況下直接利用常規(guī)儀器檢測方法很難檢出,常需結(jié)合多種提取、富集的前處理技術(shù)和高靈敏度的儀器分析方法進(jìn)行檢測。

目前關(guān)于雙酚類化合物的樣品前處理技術(shù)主要有液液萃取(liquid-liquid extraction, LLE)、分散液液微萃取(dispersive liquid-liquid microextraction, DLLME)、微波輔助萃取(microwave-assisted extraction, MAE)、固相萃取(solid phase extraction, SPE)、基質(zhì)分散固相萃取(matrix solid-phase dispersion, MSPD)、QuEChERS等,常用檢測方法有液相色譜-紫外分析法(liquid chromatography-ultraviolet, LC-UV)、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)、氣相色譜法(gas chromatography, GC)、氣相色譜-質(zhì)譜法(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)、毛細(xì)管電泳法(capillary electrophoresis, CE)、酶聯(lián)免疫吸附測定法(enzyme-linked immunosorbent assays, ELISA)、生物傳感器法等。本文介紹食品及環(huán)境樣品中雙酚類物質(zhì)的前處理和儀器分析方法研究進(jìn)展,為后續(xù)開發(fā)新型雙酚類物質(zhì)提取、凈化和檢測方法,實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)、快速、高效測定提供參考。

1 樣品前處理技術(shù)

1.1 液液萃取

LLE操作簡單、適用性廣,是從固體和液體樣品中分離雙酚廣泛應(yīng)用的技術(shù),常用萃取溶劑為乙酸乙酯、氯仿或二氯甲烷[11]。為了保證雙酚類物質(zhì)的完全提取,一般需要重復(fù)進(jìn)行,溶劑總消耗量(包括重復(fù)提取和洗滌)在40 mL至300 mL之間,萃取時間從10 min到120 min不等。萃取溶劑的選擇性有限,在儀器分析之前需要先凈化,以免降低儀器分析性能。對于食品中雙酚濃度較低的,需要先蒸發(fā)溶劑濃縮后再檢測。錢鐳等[12]建立了食用油中壬基酚和BPA的LC-MS測定方法,樣品經(jīng)乙酸乙酯-環(huán)己烷溶解,凝膠色譜(GPC)凈化后進(jìn)行檢測。壬基酚和BPA的回收率在85.1%～112.5%之間,檢出限均為1 μg/kg。曲雙雙等[13]在測定嬰幼兒配方奶粉中的壬基酚和BPA時,用乙酸乙酯-環(huán)己烷作為萃取溶劑除去脂類雜質(zhì),回收率為81.3%～109.8%,檢出限為1 μg/kg。LLE根據(jù)目標(biāo)物在萃取劑兩相中的溶解程度差異實(shí)現(xiàn)分離,無需復(fù)雜前處理設(shè)備,但有機(jī)溶劑使用量較大,易造成環(huán)境污染。

1.2 分散液液微萃取

DLLME能夠?qū)崿F(xiàn)樣品的快速萃取富集。萃取劑在分散劑作用下于樣品溶液中形成分散的細(xì)小液滴,增大了萃取劑和分析物的接觸面積,使分析物在樣品溶液及萃取劑之間快速達(dá)到分配平衡[14]。該方法有機(jī)溶劑用量少,富集倍數(shù)高,適用于食品及環(huán)境樣品中的污染物提取。Seyed[15]建立了基于生物吸附的DLLME技術(shù)從水樣中提取BPA,在水樣中加入甲醇作為分散溶劑,硝酸纖維素生物表面活性劑作為提取溶劑,渦旋離心,膠體相用于微萃取進(jìn)行HPLC分析,水樣中BPA的回收率為98.0%～103.3%。Rezaee等[16]以氯仿為萃取劑,丙酮為分散劑,建立了水樣中BPA的DLLME方法,該方法處理樣品僅用時3 min,效率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于未添加分散劑的液液微萃取法,回收率(93.4%～98.2%)較為滿意,可用于河水和自來水中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的含量測定。

1.3 微波輔助萃取

MAE可以通過微波處理并分離基質(zhì)中的成分來提高萃取效率,縮短提取時間和試劑用量[17]。利用微波直接加熱溶液,與傳統(tǒng)加熱技術(shù)相比,提取時間更短(從20 h到25 min),溶劑體積更小(從200 mL到20 mL)。薛鳴等[18]將粉碎后的罐裝食品加入正己烷溶液置于微波萃取儀中,105 ℃條件下處理20 min,之后加入乙腈進(jìn)行萃取,利用固相萃取柱凈化。方法比較了皂化提取、超聲提取和MAE后,得出MAE萃取方法下雙酚類環(huán)氧衍生物含量最高,回收率70.46%～103.44%。Liu等[19]利用MAE法提取河水沉積物中BPA,方法以甲醇為提取劑,在110 ℃條件下處理15 min,采用硅膠柱凈化,經(jīng)乙酸乙酯和正己烷(體積比為4∶6)混合液洗脫,經(jīng)GC-MS分析測定目標(biāo)物含量。經(jīng)驗(yàn)證,該方法穩(wěn)定性良好,回收率高于73%。MAE優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)參數(shù)較為簡單,與傳統(tǒng)的萃取技術(shù)相比,最突出的優(yōu)點(diǎn)在于溶劑用量少,快速,可同時測定多個樣品,因而廣泛用于環(huán)境中有機(jī)污染物的檢測。

1.4 固相萃取

SPE技術(shù)集分離、凈化、富集于一體,具有萃取效率高、使用范圍廣等特點(diǎn)。SPE與LLE相比具有更高的的選擇性、更低的溶劑消耗量[20]。SPE主要有兩種樣品凈化手段,一種是直接吸附樣品中的目標(biāo)物,使其與雜質(zhì)分離,之后將目標(biāo)物洗脫,達(dá)到分離和富集的效果;另一種是吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì),直接將目標(biāo)物洗脫富集[21]。常見檢測雙酚類物質(zhì)的SPE吸附劑包括C18、N-丙基乙二胺(PSA)、N-乙烯吡咯烷酮與二乙烯基苯混合物(HLB)、弗羅里硅土等,為產(chǎn)生更好的凈化效果,可將SPE小柱單個或多個串聯(lián)結(jié)合使用。寧文吉等[22]建立了測定塑料瓶裝乳酸飲料中的BPA含量的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法,樣品去除脂肪和蛋白質(zhì)之后,采用HLB柱凈化,隨后上機(jī)檢測,當(dāng)取樣量為10 g時,方法檢出限為0.001 μg/kg,回收率在100.9%～107.5%之間。張品等[23]利用在線SPE結(jié)合UPLC-MS/MS的方法測定乳制品中4種內(nèi)分泌干擾物,用X-Bridge C8柱進(jìn)行富集,隨后上機(jī)檢測,結(jié)果表明液態(tài)奶和奶粉中BPA的定量限分別為0.5 μg/kg和1.0 μg/kg,該結(jié)果低于歐洲和丹麥機(jī)構(gòu)推薦的安全限值5 μg/kg,達(dá)到法規(guī)要求。利用SPE技術(shù)提取凈化樣品,其提取效率高,回收率高,試劑消耗少,符合現(xiàn)代化檢測要求,是目前應(yīng)用最廣泛的樣品前處理技術(shù)。

1.5 固相微萃取

SPME技術(shù)以SPE為基礎(chǔ),在石英玻璃纖維上涂布固定相(高分子涂層或吸附劑)作為吸附介質(zhì),對樣品中的有機(jī)分子進(jìn)行萃取和富集。其裝置集采樣、萃取、濃縮、進(jìn)樣于一體,大大加快了分析檢測的速度,克服了傳統(tǒng)固相萃取先解吸后進(jìn)樣的缺點(diǎn),極大地簡化了樣品預(yù)處理過程,操作時間短,樣品量小,無需萃取溶劑,選擇性高[24]。Amayreh等[25]研究電增強(qiáng)固相微萃取技術(shù)在鄰苯二甲酸酯、雙酚類及海水樣品測定中的應(yīng)用,優(yōu)化了影響萃取時間、應(yīng)用潛力和強(qiáng)度的各種實(shí)驗(yàn)條件,有利于提高目標(biāo)分析物的萃取效率。樣品置于容量瓶中磁力攪拌,SPME纖維和金屬絲混入樣品中,加直流電,攪動20 min,進(jìn)GC-MS分析。測定海水樣品中BPA回收率為73.9%～87.1%。Kirschner等[26]將可再生硅藻土作為薄層吸附材料,96孔酶標(biāo)板作為萃取裝置,建立了高通量HPLC方法分析環(huán)境水樣中的BPA,樣品預(yù)處理僅用2.8 min,檢出限為8 μg/L,有效提高了樣品處理效率,縮短分析時間。

1.6 基質(zhì)固相分散萃取

MSPD非常適合提取固體、半固體或高黏性食品和生物基質(zhì)。將樣品與吸附劑混合,然后用少量溶劑清洗,或在洗脫前將分散劑吸附劑材料裝填在固相萃取小柱中?；|(zhì)固相分散萃取結(jié)構(gòu)簡單,用途廣泛,可以一步完成萃取和凈化,大大縮短了分析時間和溶劑消耗[27,28]。邵兵等[29]利用此法從雞蛋和牛奶中同時提取BPA、壬基酚和辛基酚,樣品與C18粉末混合,用10 mL乙醇洗脫,洗脫液蒸發(fā)至干,剩余部分重新溶解在二氯甲烷-正己烷中,用氨基丙基固相萃取法去除樣品中的脂質(zhì),之后進(jìn)行LC-MS/MS測定。結(jié)果表明,BPA的檢出限約為0.10 μg/kg,平均回收率為82%～91%。蔡言紅等[30]利用磁性竹炭為吸附劑的基質(zhì)固相分散萃取法結(jié)合HPLC測定水中雙酚S的含量。水樣調(diào)整pH至4,加入2.5 g氯化鈉和自制的磁性竹炭30 mg,旋渦振蕩使雙酚S吸附于磁性竹炭,丟棄水相,再加入甲醇振蕩使雙酚S解吸并溶于甲醇中,所得溶液以Spherigel C18色譜柱進(jìn)行分離和紫外檢測。結(jié)果表明,雙酚S檢出限為0.05 μg/L,回收率為90.6%,可以滿足對水樣中雙酚S定性定量檢測的需求。MSPD簡化了樣品均勻化、提取凈化等過程,試劑消耗量少,耗時短,回收率高。

1.7 QuEChERS

QuEChERS因具有快速(quick)、簡單(easy)、經(jīng)濟(jì)(cheap)、有效(effective)、穩(wěn)定(rugged)、安全(safe)的特點(diǎn)而得名。該技術(shù)是由乙腈萃取分配和分散固液萃取過程組成的一種前處理方法,常用于檢測農(nóng)藥、獸藥、真菌毒素、持久性有機(jī)污染物殘留[31]。QuEChERS方法大大簡化了操作步驟,有效避免了復(fù)雜樣品前處理過程中目標(biāo)物的損失,具有回收率高、可分析樣品種類廣、溶劑用量小、提取時間短等顯著特點(diǎn)[32]。QuEChERS常與溶劑提取相結(jié)合共同用于前處理過程,于紫玲等[33]建立了同時測定水產(chǎn)品中四溴雙酚A和六溴環(huán)十二烷的UPLC-MS/MS方法。樣品前處理采用QuEChERS方法,均質(zhì)生物樣品用水分散后加乙腈提取,經(jīng)C18分散固相萃取凈化。該方法測得平均回收率為74.0%～121%,四溴雙酚A和六溴環(huán)十二烷的檢出限分別為0.04～0.16 μg/kg和0.12～0.55 μg/kg。

綜上可知,DLLME與傳統(tǒng)的LLE法相比具有許多固有的優(yōu)點(diǎn),比如操作簡單、溶劑消耗量低、濃縮倍數(shù)高、易實(shí)現(xiàn)自動化,在樣品制備方面具有很大的潛力。在眾多的樣品制備技術(shù)中,SPE因其快速、自動化、高富集因子和高選擇性等優(yōu)點(diǎn)被認(rèn)為是應(yīng)用最廣泛的技術(shù)。與LLE相比,SPE使用較少量的毒性溶劑,但仍然需要大量的有機(jī)溶劑和一次性萃取小柱。MSPD可減少樣品和吸附劑用量,擴(kuò)大吸附劑的容量,避免萃取柱堵塞。萃取和預(yù)濃縮過程中依然需要消耗有機(jī)試劑,所以在選擇有機(jī)試劑時,盡可能選擇毒性較小的離子液體試劑代替有機(jī)溶劑,在預(yù)處理方法上降低環(huán)境污染,保護(hù)人體健康。

2 檢測方法

2.1 液相色譜法

LC-UV具有分析速度快、線性范圍寬的特點(diǎn),常用于分析極性強(qiáng)、揮發(fā)性低、穩(wěn)定性差的化合物[34]。雙酚類化合物含有酚羥基,屬于中等極性,沸點(diǎn)較高,因此適用于HPLC分析。UV線性范圍寬、重現(xiàn)性好,但靈敏度較低,僅依據(jù)保留時間定性,可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果[35]。王延翠等[36]建立了在線SPE-HPLC同時測定水樣中BPA和BPS的新方法。水樣經(jīng)過濾,用C18柱在線富集,用Spherigel C18柱分析,紫外檢測波長為323 nm。BPA和BPS線性關(guān)系良好,回收率為90%～98%,檢出限分別為0.017 μg/L和0.028 μg/L,適用于環(huán)境水樣中BPA和BPS的同時測定。

大多數(shù)雙酚有熒光吸收,而熒光檢測器(FLD)僅對有熒光吸收的物質(zhì)有響應(yīng),因此LC-FLD選擇性好,靈敏度高,常用于分析多環(huán)芳烴等痕量物質(zhì)[37,38]。宣棟樑等[39]建立了SPE-LC-FLD測定嬰幼兒奶瓶遷移出的BPA的方法,水浴浸泡后的奶瓶浸出液經(jīng)GDX-502柱固相萃取,Hypersil-ODS色譜柱分離測定,采用甲醇-水(70∶30, v/v)為流動相、在熒光激發(fā)波長為230 nm、發(fā)射波長為315 nm條件下檢測。該方法的線性范圍為0.05～5 mg/L,檢出限為0.000 2 mg/L,平均回收率為104%。

在LC-MS分析法中,質(zhì)譜檢測器利用化合物的質(zhì)荷比實(shí)現(xiàn)分離、豐度比實(shí)現(xiàn)定量,集高靈敏度和高選擇性能于一體,串聯(lián)質(zhì)譜相比于單四極桿質(zhì)譜可以提供更多的結(jié)構(gòu)信息,定性和定量能力更準(zhǔn)確,因此在復(fù)雜基質(zhì)檢測中用途更為廣泛[40]。雙酚類物質(zhì)易于失去羥基氫帶負(fù)電荷,因此一般在電噴霧離子化負(fù)反應(yīng)模式(ESI-)下掃描。龔文杰等[41]建立了環(huán)境水中四溴雙酚A的SPE-UPLC-MS/MS分析方法。水樣經(jīng)HLB小柱凈化濃縮后,Shim-pack XR-ODSII色譜柱分離,ESI-多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)模式下檢測,以保留時間以及特征離子對定性,內(nèi)標(biāo)法定量。結(jié)果四溴雙酚A在1.00～100.0 μg/L內(nèi)呈良好線性關(guān)系,方法檢出限為0.03 μg/L,定量限為0.1 μg/L,平均回收率為96.2%～105.0%。本方法分析速度快、靈敏度高,可用于環(huán)境水中四溴雙酚A的分析測定。Song等[42]建立了LC-MS法測定食品基質(zhì)中雙酚A的檢測方法,以甲醇-水從食品基質(zhì)中提取待測物,經(jīng)SPE富集,采用ESI-模式選擇反應(yīng)監(jiān)測(SRM),方法定量限為0.08～2.0 μg/L,回收率為66%～127%。Cheng等[43]建立了超高效液相色譜(UHPLC)-MS/MS測定乳制品中21種雙酚的分析方法,樣品經(jīng)QuEChERS方法提取凈化,采用UHPLC-MS/MS方法定量測定。方法定量限為0.02～5 μg/kg,回收率為88.2%～108.2%。

2.2 氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜法

GC具有選擇性好、靈敏度高、分離能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),適用于分析弱極性、低沸點(diǎn)化合物。由于雙酚類物質(zhì)沸點(diǎn)較高,常需要衍生化轉(zhuǎn)化為低沸點(diǎn)易揮發(fā)物再進(jìn)行分析[44,45]。雙酚結(jié)構(gòu)中含有酚羥基官能團(tuán),對游離的酚羥基進(jìn)行衍生化,可以提高分離度和靈敏度,改善峰形?？诉x[46]建立了加速溶劑萃取后利用GC-MS測定土壤中BPA的檢測方法。樣品采用加速溶劑萃取,經(jīng)硅膠柱凈化,以HP-5MS色譜柱,采用GC-MS全掃描和選擇離子掃描進(jìn)行分析。方法檢出限為0.01 mg/kg,平均回收率為82.5%～101.7%。該方法簡便快速,靈敏度及準(zhǔn)確度高,可用于土壤中BPA的測定。黃會等[47]建立了測定水產(chǎn)品中辛基酚、壬基酚和BPA的GPC-SPE-GC-MS法。樣品經(jīng)乙酸乙酯超聲提取,凝膠過濾-固相萃取凈化,七氟丁酸酐衍生化,進(jìn)行GC-MS分析檢測,方法檢出限為0.1 μg/kg,回收率BPA不低于81.3%,適用于水產(chǎn)品中BPA的檢測。

2.3 酶聯(lián)免疫吸附測定法

ELISA已廣泛應(yīng)用于食品分析中,用于檢測和定量蛋白質(zhì)、酶、維生素和其他自然存在的物質(zhì),也用于測定食品污染物,如微生物、細(xì)菌毒素、霉菌毒素、殺蟲劑、合成代謝激素和獸藥。該方法易于實(shí)施,具有良好的敏感性和特異性,無需昂貴的設(shè)備。ELISA測定主要取決于免疫原和產(chǎn)生的抗體類型[48]。BPA為小分子,本身不能啟動免疫反應(yīng),需要與蛋白質(zhì)結(jié)合形成完整的抗原。Feng等[49]建立了一種基于直接半抗原包被模式的間接競爭ELISA方法,用于檢測自來水和海水中的BPA。該方法有別于傳統(tǒng)方法,采用包被抗原的模式,大大提高了檢測的靈敏度,檢出限可達(dá)0.27 ng/mL,添加回收率為70%～142%。梁嘉藝等[50]對HPLC與ELISA分別測定水中BPA含量的方法進(jìn)行了比較,檢測結(jié)果得出兩種方法均具有良好的相關(guān)性,HPLC的相關(guān)系數(shù)為0.998 7, ELISA的相關(guān)系數(shù)為0.985 8,二者均滿足檢測要求,ELISA可用于樣品初篩與初步評估,而HPLC用于精準(zhǔn)確證。

2.4 毛細(xì)管電泳法

離子的電泳遷移率不同,在電場中移動的速度也不一樣。CE以高壓電場為驅(qū)動力,以毛細(xì)管為分離通道,依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離[51]。CE的優(yōu)點(diǎn)是操作簡單,試樣量少,分離效率高,成本較低,但在遷移時間的重現(xiàn)性、進(jìn)樣準(zhǔn)確性和檢測靈敏度方面,比LC法稍遜。高芳芳等[52]在毛細(xì)管電泳的膠束電動色譜模式下,利用壓力輔助電動進(jìn)樣方式在線富集測定水樣中4種酚類雌激素。對進(jìn)樣電壓、進(jìn)樣時間等因素進(jìn)行了考察,并與傳統(tǒng)的壓力進(jìn)行比較。結(jié)果表明,在優(yōu)化條件下(-9 kV, 2.1 kPa, 0.4 min), 4種酚類物質(zhì)在7 min內(nèi)基線分離,檢出限為0.007 1～0.017 mg/L,回收率為75.6%～110.1%,該方法不需要其他試劑,只需對電泳儀的參數(shù)進(jìn)行適當(dāng)優(yōu)化即可實(shí)現(xiàn)分析物的在線富集,方法快速簡便,自動化程度高。

2.5 生物傳感器法

生物傳感器是一種對生物物質(zhì)敏感并將其濃度轉(zhuǎn)換為電信號進(jìn)行檢測的儀器,該方法專一性強(qiáng),分析速度快,準(zhǔn)確度高,易實(shí)現(xiàn)自動化。但這種方法中酶標(biāo)物質(zhì)容易失活,費(fèi)時且重現(xiàn)性較差。顧翔源等[53]采用檸檬酸還原法合成銀納米粒子并修飾核酸適配體,BPA與核酸適配體結(jié)合發(fā)生變構(gòu)效應(yīng)使其產(chǎn)生銀納米粒子聚集,其特征峰以及顏色發(fā)生變化,研究體系特定波長吸光度比值A(chǔ)608/A418與BPA濃度的變化關(guān)系。該比色法在0.5～50 ng/mL呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,湖水樣品中檢出限為0.3 ng/mL。Rahman等[54]基于阻抗測定原理研制了BPA的無標(biāo)記免疫傳感器。同樣采用BPA的結(jié)構(gòu)類似物雙酚酸偶聯(lián)BSA作為抗原制備了抗BPA多克隆抗體,并固定化于傳感器表面。當(dāng)血漿中BPA與抗體在傳感器表面相互作用時,可引起微小的質(zhì)量和阻抗變化,從而實(shí)現(xiàn)對BPA的靈敏檢測。該方法對BPA的檢出限為0.3 ng/mL,線性范圍為1～100 ng/mL。

2.6 超臨界流體色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(SFC-MS/MS)

超臨界流體色譜(SFC)[55]是一種新型分離技術(shù),它是氣相色譜和液相色譜的結(jié)合。超臨界流體在超過溫度和壓力臨界點(diǎn)時,液相和氣相之間的界限消失,因此該物質(zhì)同時具備氣體和液體的高擴(kuò)散性和低黏度,有利于快速分離分析[56]。使用壓縮CO2作為主要流動相,加入少量有機(jī)試劑作為改性劑,增大流動相的極性,擴(kuò)大分析物范圍,兼具正向色譜的選擇性和反相色譜的易用性,并且更加綠色環(huán)保。SFC-MS/MS[57,58]在色譜的基礎(chǔ)上連接質(zhì)譜檢測器,將僅依靠保留時間定性的色譜分離檢測發(fā)展到依靠三重四極桿質(zhì)譜檢測器定性定量,提高了分析的準(zhǔn)確性和靈敏度,減少有機(jī)試劑消耗,方法綠色環(huán)保[59]。本課題組Zhang等[60]開發(fā)了一種基于SFC-MS/MS同時測定聚碳酸酯中17種雙酚類物質(zhì)的方法,采用CO2作為主要流動相添加甲醇為改性劑,17種雙酚在DIOL色譜柱,11.72 MPa背壓下可在9 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)分離測定?；厥章蕿?1.8%～114.5%,定量限為0.5～2.5 μg/kg。該方法靈敏度高,峰形良好,可用于同時測定聚碳酸酯中多種雙酚類化合物。

綜上所述，這些分析方法對雙酚檢測的選擇性和精密度均較好。HPLC是分析食品樣品中較為普遍的方法。LC-MS/MS是最常使用的分析方法,利用LC高效分離、MS準(zhǔn)確定量的能力可實(shí)現(xiàn)有機(jī)污染物精準(zhǔn)高效的檢測。生物傳感器法具有快速、高效、低成本、操作簡便的特點(diǎn),可實(shí)現(xiàn)連續(xù)動態(tài)監(jiān)測。ELISA屬于快速檢測方法,具有快速、靈敏、特異性強(qiáng)的特點(diǎn),可在短時間內(nèi)鑒別樣品。在大批量樣本現(xiàn)場檢測中,可利用ELISA進(jìn)行初篩,陽性樣品利用實(shí)驗(yàn)室質(zhì)譜進(jìn)一步定量檢測。SFC-MS/MS法可用作UPLC-MS/MS的新型替代方法測定雙酚類物質(zhì),方法快速可靠,綠色環(huán)保,或成為未來雙酚儀器分析檢測發(fā)展方向。

3 結(jié)論

雙酚類物質(zhì)在食品和環(huán)境介質(zhì)中廣泛存在,若長期暴露在雙酚污染的環(huán)境中,即使是低濃度,人體健康也會受到威脅,因此對食品和環(huán)境中雙酚含量進(jìn)行監(jiān)測和評估具有重要意義。由于食品及環(huán)境樣品的基質(zhì)較為復(fù)雜,分析前需結(jié)合不同程度的樣品前處理以除去基質(zhì)干擾,對目標(biāo)物進(jìn)行有效的提取分離凈化。目前常用SPE、SPME、MSPD、QuEChERS等富集凈化技術(shù),同時依靠LC-UV、LC-MS/MS、生物傳感器、CE等檢測方法實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確定量分析?？紤]到雙酚在日常生活中的危害性較強(qiáng),建立高效、快速和靈敏的定性定量分析方法具有重要意義,雙酚檢測技術(shù)未來的研究方向要圍繞簡化樣品預(yù)處理過程和開發(fā)高效便捷的檢測方法展開。