趙坤生 時(shí) 倩 李秀昌
1.山東第一醫(yī)科大學(xué)(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院),山東 泰安 271016; 2.山東第一醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院,山東 泰安 271000
葡萄籽系葡萄科葡萄屬葡萄 (VitisviniferaL.)的種子。葡萄作為世界上最古老的樹種之一[1],原產(chǎn)于西亞,分布在世界各地,約95%集中在北半球[2]。我國的葡萄種植面積和年產(chǎn)量一直雄踞世界第一,主要集中在新疆、山東、河北、河南和遼寧等地區(qū)種植。葡萄的根部發(fā)達(dá),可以適應(yīng)各種土壤。枝條細(xì)長而柔軟,果實(shí)形態(tài)各異,大致呈卵圓形。每粒果實(shí)中含有0~4粒種子不等。果皮有黑色、紅色、粉紅色及綠色等。成熟葡萄的葡萄糖含量高達(dá)20%左右。葡萄中含有較多的果酸,能促進(jìn)胃腸消化,有健胃健脾之功效。葡萄還含有豐富的礦物質(zhì),如鈣、鐵、鉀、磷等,以及多種維生素,如B1、B2、B6、維生素C和維生素P及多種氨基酸等[3]。葡萄含有豐富的微量元素和營養(yǎng)成分,亦因此享有植物中“水果之王”的美譽(yù)。近些年來經(jīng)過不斷的研究,發(fā)現(xiàn)葡萄籽不僅營養(yǎng)價(jià)值高,而且藥用價(jià)值也十分突出,其所含有的多酚類化合物原花青素 (procyanidin或proanthocyanidin,PC)具有強(qiáng)抗氧化、清除自由基、降低血脂、保護(hù)心血管和抗腫瘤等作用。本文綜述了目前關(guān)于葡萄籽在藥效學(xué)成分和藥理作用方面的相關(guān)研究。
萬本屹等[4]研究表明葡萄籽含有豐富的多酚類化合物(polyphenols),PC便是其中一種,其化學(xué)成分主要是黃酮類物質(zhì)。PC由不同量的黃烷醇單體黃酮類聚合而成,基本上是通過(+)-兒茶素、(-)-表兒茶素單體聚合而獲得的化合物。該化合物中單體的數(shù)量越多,聚合度越高,其活性相應(yīng)的也就越高。在各類PC中,二聚體占多數(shù),是最重要的一類。
許申鴻等[5]利用氨基酸分析儀,采用HCL水解法測定了葡萄籽中17種氨基酸含量,發(fā)現(xiàn)含量最高的是谷氨酸,為2.20 mg/100 mg,其次是甘氨酸,含量為0.84 mg/100 mg,其余依次分別為天門冬氨酸(0.63 mg/100 mg)、亮氨酸(0.60 mg/100 mg)、精氨酸(0.53 mg/100 mg)、纈氨酸(0.51 mg/100 mg)、丙氨酸(0.42 mg/100 mg)、絲氨酸(0.40 mg/100 mg)、異亮氨酸(0.36 mg/100 mg)、苯丙氨酸(0.34 mg/100 mg)、蘇氨酸(0.26 mg/100 mg)、組氨酸(0.20 mg/100 mg)、賴氨酸(0.18 mg/100 mg)、酪氨酸(0.17 mg/100 mg)、脯氨酸(0.11 mg/100 mg)、蛋氨酸(0.01 mg/100 mg)、胱氨酸(0.00 mg/100 mg)。據(jù)計(jì)算,葡萄籽中所含的必需氨基酸約占葡萄籽中氨基酸總量的1/3。
許申鴻等[5]采用分光光度計(jì),通過ICP(電感偶合等離子體發(fā)射光譜儀)法測定出了13種礦物質(zhì),其含量由大到小排序?yàn)椋篈l(13.290 mg/g)>Cu(8.526 mg/g)>Zn(8.126 mg/g)>Sr(5.584 mg/g)>Si(4.771 mg/g)>Li(4.480 mg/g)>K(2.769 mg/g)>Ca(2.414 mg/g)>P(2.199 mg/g)>Mg(0.878 mg/g)>Fe(0.293 mg/g)>Na(0.200 mg/g)>Mn(0.033 mg/g)。
張國治等[6]使用GC-MS(氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀)法測定出了葡萄籽中脂肪酸的種類組成及含量。葡萄籽中含有的脂肪酸種類多達(dá)42種,其中不飽和脂肪酸含量占絕大部分,約占72.55%,必需脂肪酸——亞油酸的含量也非常高,超過了60%。
陳仁[7]經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)葡萄籽含有豐富的維生素,VE和VK含量極高,分別達(dá)到了54.0 mg/kg、45.0 mg/kg,VA和VD含量也分別達(dá)到了12~13.5 mg/kg、6.0 mg/kg。
周建設(shè)等[8]采用雙盲對(duì)照法通過臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí),服用PC膠囊(葡萄籽提取物)的實(shí)驗(yàn)組過氧化脂質(zhì)(MDA)含量與對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)前比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),平均下降百分率(9.6±15.9)%與對(duì)照組(-1.8±11.0)%比較差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),證明PC具有很強(qiáng)的抗氧化能力。孫蕓等[9]也通過研究證實(shí),在亞油酸及脂質(zhì)體體系中的PC具有很強(qiáng)的抗氧化能力。PC具有比VC和VE更高的抗氧化活性,并與二者呈現(xiàn)出顯著的協(xié)同增強(qiáng)效應(yīng)。PC也具有明顯高于VC、VE清除DPPH·自由基的能力,半抑制濃度分別為:PC 1.8 μg/mL、VC2.5 μg/mL、VE6.3 μg/mL。PC清除O2-·的能力接近于VC卻顯著高于VE,半抑制濃度分別為:PC 15.4 μg/mL、VC14.5 μg/mL、VE177 μg/mL。
閆少芳等[10]通過實(shí)驗(yàn)研究表明,PC可降低高脂大鼠血清中TC、TG、LDL-C及肝臟膽固醇、甘油三酯水平,并能增加高脂大鼠血清中卵磷脂脂蛋白脂酰轉(zhuǎn)移酶的活性,有助于加速膽固醇的逆轉(zhuǎn)運(yùn),從而促進(jìn)膽固醇的肝臟代謝。它還可以增加高脂大鼠體內(nèi)總膽汁酸的排泄,從而對(duì)膽固醇的體外排出也起到間接促進(jìn)作用。該研究為PC降低人體血脂提供了進(jìn)一步的理論基礎(chǔ)。
Tomaru等[11]通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),膳食補(bǔ)充PC能劑量依賴性地有效預(yù)防糖尿病患病小鼠高血糖的發(fā)生,這表明PC對(duì)穩(wěn)定2型糖尿病血糖也有積極作用。Pesta等[12]和Stepien等[13]研究發(fā)現(xiàn),代謝紊亂如肥胖、胰島素抵抗、脂肪肝、2型糖尿病、高脂血癥等都存在著活性氧(ROS)剩余、脂質(zhì)過氧化反應(yīng)以及MAPK和JNK信號(hào)傳導(dǎo)的異常改變?;加写x紊亂的病人如糖尿病患者血清中經(jīng)常有異常的氧化應(yīng)激(OS)標(biāo)志物[14]。在2型糖尿病細(xì)胞模型中,葡萄糖誘導(dǎo)產(chǎn)生ROS累積及OS可造成心肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞損害[15-16]。El-Alfy等[17]已證實(shí),PC可通過增加胰腺谷胱甘肽以及減少胰腺脂質(zhì)過氧化和亞硝酸鹽水平來顯著改善2型糖尿病造成的各種組織損害。由此可見,PC在防治2型糖尿病及其并發(fā)癥方面發(fā)揮著極其重要的作用。
OS被認(rèn)為是心血管疾病如動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、心衰及介入術(shù)后再狹窄必不可缺的發(fā)病機(jī)理[18-19]。ROS破壞心肌鈣穩(wěn)態(tài),造成各種信號(hào)通路及基因表達(dá)級(jí)聯(lián)反應(yīng)異常,進(jìn)而導(dǎo)致心律失常和心肌結(jié)構(gòu)重塑[20]。由ROS引發(fā)的脂質(zhì)過氧化作用貫穿于動(dòng)脈粥樣硬化的整個(gè)過程,對(duì)其發(fā)生和發(fā)展均起到促進(jìn)作用[21]。醋酸去氧皮質(zhì)酮鹽通過增加p38 MAPK和JNK1/2磷酸化可促進(jìn)高血壓、心血管重塑及心功能不全的進(jìn)展。相反,PC可以通過抑制ROS基因和p38 MAPK通路激活降低高血壓并改善心血管重塑及心功能[22]。與此同時(shí),PC不僅能夠改善心血管病損害,而且能夠降低心血管疾病高血壓、高血脂、過氧化等危險(xiǎn)因素[23]。因此,PC在心血管疾病的防治中處于重要地位。
Gao等[24]通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究顯示,PC治療組中MDA-MB-231細(xì)胞生存活性48 h內(nèi)下降了9%~19%(P<0.05),72 h內(nèi)下降了30%~41%(P<0.05),MCF-7PC細(xì)胞生存活性48 h內(nèi)下降了13%~35%(P<0.05),72 h內(nèi)下降了28%~44%(P<0.05)。從而證實(shí)了PC可通過抑制MDA-MB-231及MCF-7對(duì)人乳腺癌細(xì)胞活性起到明顯抑制效應(yīng)。Katiyar等[25]通過實(shí)驗(yàn)研究表明,膳食補(bǔ)充PC組小鼠有效地預(yù)防了紫外線輻射誘導(dǎo)的非黑色素瘤皮膚癌的發(fā)生,其機(jī)制可能是通過增強(qiáng)損傷的控制免疫敏感性的DNA依賴活性的修復(fù)造成的。
Savickiene等[26]通過實(shí)驗(yàn)證實(shí),PC能選擇性地靶向作用于口腔病原菌微生物——革蘭陰性菌,如牙齦卟啉單胞菌,并且對(duì)諸如唾液鏈球菌等有益共生菌無殺傷作用。由于PC的抗菌作用比較溫和,且具有多項(xiàng)靶向作用,所以PC并無產(chǎn)生耐藥性的風(fēng)險(xiǎn)。因此PC被視為一種極好的治療口腔疾病及其它感染的備選方案,是一種非常有前景的天然抗菌物質(zhì)。
劉協(xié)等[27]通過實(shí)驗(yàn)研究表明,PC可以顯著延長小鼠的負(fù)重游泳時(shí)長,減輕小鼠疲勞。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)后小鼠體內(nèi)血清乳酸水平下降,肝細(xì)胞糖原含量增加,因此其抗疲勞作用可能是通過PC對(duì)自由基的清除并保護(hù)由自由基引起的組織過氧化損傷來實(shí)現(xiàn)的。Nair等[28]研究表明,PC可以抑制單核細(xì)胞中HIV-1病毒的活性,抑制其表達(dá)和復(fù)制,其機(jī)制為PC能劑量依賴性地顯著降低多種趨化受體如CCR2b、CCR3、CCR5等的表達(dá),這對(duì)HIV的防治具有一定意義。此外,PC對(duì)紫外線輻射、衰老、潰瘍和免疫排斥等也有抵抗抑制作用。
簡言之,葡萄籽含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)和藥效學(xué)成分,具有很高的營養(yǎng)和藥用價(jià)值。藥理學(xué)研究表明PC具有多種藥理作用,其在抗氧化、降血脂、防治糖尿病、保護(hù)心血管及抗腫瘤等方面發(fā)揮著重要作用,尤為值得關(guān)注。因此,PC的應(yīng)用前景也是十分廣泛的。盡管目前對(duì)于葡萄籽某些方面的研究取得了一定成果,但是迄今為止對(duì)于葡萄籽的藥效學(xué)成分、功效及其作用機(jī)理尚不十分明確。因此,有必要對(duì)葡萄籽的藥效成分及藥理作用進(jìn)一步研究,明確其有效成分,闡明作用機(jī)制,充分挖掘其使用價(jià)值,使其更好地造福人類。