(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，山東 青島 266000)

乳腺癌是臨床常見的惡性腫瘤之一，若未能及時(shí)發(fā)現(xiàn)和治療很容易引起死亡[1]。近年來，有研究認(rèn)為，長鏈非編碼RNA HOX轉(zhuǎn)錄反義RNA(HOTAIR)的表達(dá)異?？赡軙?huì)引起乳腺癌的發(fā)生與發(fā)展[2]。為此，本研究針對(duì)HOTAIR在乳腺癌組織中的表達(dá)水平及意義進(jìn)行研究。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年5月-2018年5月本院收治的28例乳腺癌患者，均經(jīng)手術(shù)切除后行病理確診。取其癌組織以及癌旁組織，置于零下80℃中保存。全部患者的樣本在術(shù)前均未接受放療以及化療處理。

1.2方法 采用實(shí)時(shí)定量PCR的方法測(cè)量乳腺癌癌旁組織、癌組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中HOTAIR的表達(dá)水平，具體如下：從轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者手術(shù)中獲取實(shí)體瘤樣本，經(jīng)組織勻漿后提取RNA和蛋白，按照標(biāo)準(zhǔn)的方法將凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，將貼壁培養(yǎng)的MCF-7乳腺癌細(xì)胞置于含有胰島素(40 U/200 ml)、青霉素(100 U/ml)、鏈霉素(100 U/ml) 和10%小牛血清的RPMI 1640 培養(yǎng)基中，在37℃含5% CO2的環(huán)境中培養(yǎng)。細(xì)胞初始濃度為1×104/cm2，每2～3 d 更換培養(yǎng)液。RNA提取及定量PCR：用RNA提取試劑盒從保存的備用癌組織中提取總RNA，用反轉(zhuǎn)錄試劑盒將提取的總RNA反轉(zhuǎn)錄為互補(bǔ)cDNA，反應(yīng)體系體積為20μl，反應(yīng)條件：51℃ 2 min，96℃ 10 min預(yù)變性，循環(huán)40次；96℃10 s變性，60℃持續(xù) 30 s退火，以GAPDH作為內(nèi)參，計(jì)算相對(duì)mRNA表達(dá)水平。

2 結(jié)果

癌旁組織中HOTAIR為(0.79±0.14)，轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中為(1.00±0.13)，癌組織中為(1.04±0.13)。三者HOTAIR比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=29.27，P<0.01)，兩兩比較顯示：轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)及癌組織中HOTAIR的表達(dá)水平明顯高于癌旁組織(q=8.52,10.03；P<0.05)。

3 討論

近年來，有研究指出HOTAIR出現(xiàn)了比較高的表達(dá)方式時(shí)能夠?qū)δ[瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的表達(dá)產(chǎn)生非常強(qiáng)的抑制作用，同時(shí)還能夠幫助增加腫瘤細(xì)胞的惡性程度，從而導(dǎo)致腫瘤的形成，加快了腫瘤的發(fā)生與發(fā)展[3]。有臨床資料顯示，在針對(duì)98例原發(fā)性乳腺癌患者進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，HOTAIR能夠在雌激素受體陽性者中呈現(xiàn)出預(yù)測(cè)乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)轉(zhuǎn)移的獨(dú)立生物學(xué)標(biāo)志之一[4]。HOTAIR不僅能夠在乳腺癌組織中呈現(xiàn)出異常升高的表達(dá)水平，同時(shí)還能夠存在于其他腫瘤組織中，并表現(xiàn)出異常升高的水平，包括了直腸癌、鼻咽癌、肝癌等，另外，HOTAIR的表達(dá)水平也與腫瘤的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)以及預(yù)后等具有明確的相關(guān)性。本研究結(jié)果顯示，乳腺癌癌組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中HOTAIR的表達(dá)水平相比無明顯差異，但都高于癌旁組織。

總之，HOTAIR的表達(dá)水平在乳腺癌癌組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中表現(xiàn)出了比較高的水平，體現(xiàn)出了該指標(biāo)的高表達(dá)能夠與乳腺癌的增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)。