曹莞婷,范一宏,呂 賓

曹莞婷,范一宏,呂賓,浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化科 浙江省杭州市 310006

核心提要: 腸道菌群的結(jié)構(gòu)及功能變化是炎癥性腸病(inflammatory bowel disease,IBD)發(fā)病機制中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),并隨IBD疾病進展變化.腸道菌群預(yù)測模型在IBD診斷上具有較高特異度和敏感度.基于IBD腸道菌群特征性變化,聯(lián)合多項檢查,有助于 IBD鑒別診斷、評估疾病嚴重程度及明確腸外表現(xiàn).

0 引言

炎癥性腸病(inflammatory bowel disease,IBD)是由免疫、遺傳、環(huán)境三因素共同作用所致的消化道慢性非特異性炎癥疾病,目前主要包括潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)、克羅恩病(Crohn's disease,CD)及未定型腸炎(indeterminate colitis,IC).雖然IBD的發(fā)病機制尚未明確,但是腸道微生物(Enteric Microorganism)在IBD的發(fā)生發(fā)展中的關(guān)鍵作用已達共識,IBD患者腸道微生態(tài)(intestinal microecology)失衡,誘導(dǎo)異常免疫反應(yīng),破壞腸道穩(wěn)態(tài),最終致使腸黏膜屏障完整性缺失,臨床上主要癥狀為腹痛、腹瀉、黏液血便等,部分患者伴消瘦、貧血等.臨床研究認為臨床表現(xiàn)結(jié)合內(nèi)鏡下表現(xiàn)、影像學(xué)及病理學(xué)結(jié)果,并排除其他腸道疾病后,有助于IBD診斷,但是仍缺乏金標準.血清生物標記物的介入為IBD診斷提供了新依據(jù),其中以聯(lián)合檢測pANCA和ASCA最為常用,但因其敏感性和特異性不高,限制了臨床診斷價值[1].近年來,針對腸道微生物的研究已從疾病與腸道微生態(tài)相關(guān)性分析向因果關(guān)系及機制探討邁進,多項科學(xué)前沿報道腸道微生物可作為疾病診斷的新型標記物.本文擬綜述近年來腸道菌群在IBD診斷方面的研究進展.

1 IBD患者腸道微生物特征性變化

腸道微生態(tài)改變是IBD病變特征之一.通過宏基因組測序?qū)θ梭w腸道微生物的研究證實99%的微生物基因來自于細菌,可分為共生菌及致病菌,當(dāng)共生菌與致病菌動態(tài)平衡遭到破壞即誘發(fā)腸道菌群失衡[2].超過大約90%的人由四大類菌群組成,其中厚壁菌門與擬桿菌門占主導(dǎo),另有變形菌門及放線菌門.相對于健康人群及其他功能性胃腸道疾病,IBD患者中腸道微生態(tài)失衡更為嚴重,伴隨菌群多樣性及豐度下降、菌群結(jié)構(gòu)的改變、不穩(wěn)定的菌群等情況.目前一致性認為IBD患者腸道菌群組成變化以厚壁菌門減少和變形菌門增加為主,而擬桿菌門和放線菌門的變化尚未達成共識,其中IBD患者腸道菌群多樣性下降與厚壁菌門中的柔嫩梭菌屬變化密切相關(guān)[3].同時對比IBD患者和非IBD患者糞便菌群研究發(fā)現(xiàn)擬桿菌目、瘤胃球菌科、梭菌目、類丹毒菌科、雙歧桿菌科提示IBD患病呈低風(fēng)險,腸桿菌科、毛螺菌科、普氏菌屬提示IBD患病呈高風(fēng)險[4].除腸道共生菌整體性變化外,部分致病菌感染亦是IBD疾病觸發(fā)及病情演變的關(guān)鍵因素.相較于其他致病菌,IBD患者最常見艱難梭菌感染,長期感染艱難梭菌的IBD患者,其疾病進程更迅速且病情發(fā)展更嚴重.活動性IBD除艱難梭菌感染外,重疊其他腸道細菌性感染率有3.6%(2%-9%),彎曲桿菌、黏附侵襲性大腸桿菌、沙門氏菌、鳥分歧桿菌亞種副結(jié)核等致病菌在IBD患者的腸道活檢組織、糞便樣本中有很高的陽性檢出率[5].雖然腸道真菌在腸道微生物群中比例較小,但是在IBD患者中真菌群落相較于健康人群結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,多樣性增加,腸黏膜定植密度升高[6].研究將IBD患者糞便微生物群與健康對照組比較發(fā)現(xiàn),前者擔(dān)子菌門與子囊菌門的比例增加,并伴促炎真菌白色念珠菌豐度增加及抗炎真菌酵母菌豐度減少[7].腸道病毒數(shù)量為細菌的10倍[8],最為重要的是噬菌體,它具有嚴格的宿主特異性,以活菌為宿主,同時賦予宿主菌生物學(xué)性狀的遺傳物質(zhì).臨床研究發(fā)現(xiàn)相對于健康人群,IBD患者中有尾噬菌體目豐度增加,其中與IBD存在相關(guān)性的主要為乳球菌屬噬菌體、乳桿菌屬噬菌體、梭菌屬噬菌體、腸球菌屬噬菌體及鏈球菌屬噬菌體[9].另一項研究證實IBD患者柔嫩梭菌群少于健康人,其中4種柔嫩梭菌群相關(guān)噬菌體在IBD患者中豐度增加,并可能進一步減少IBD體內(nèi)的柔嫩梭菌群[10].事實上基于噬菌體對細菌的依存性,未來針對IBD相關(guān)特異性噬菌體的研究可以聚焦于IBD特征性變化的腸道細菌分類群中,充分利用基因組測序等技術(shù)對微生物群測序菌株的原發(fā)性噬菌體進行檢測,進一步完善腸道病毒宏基因組的研究.

2 IBD鑒別診斷與腸道菌群

2.1 IBD與功能性腸病鑒別 排除其他腸道疾病是IBD診斷的關(guān)鍵因素之一,特別是當(dāng)遇到非典型臨床表現(xiàn)的IBD患者,鑒別診斷更為重要.誤診容易導(dǎo)致IBD診斷延遲,影響IBD及時治療.IBD需要鑒別功能性腸病,尤其是腸易激綜合征(irritable bowel system,IBS).腸鏡檢查是鑒別的重要依據(jù)之一,但作為侵入性檢查方式,一般不作高頻使用.定期監(jiān)測血沉、C反應(yīng)蛋白及糞鈣衛(wèi)蛋白常作為IBS患者篩查IBD的工具.盡管如此,每年仍有約10%的IBD患者被誤診為腸易激綜合征,其中3%的患者誤診時間長達5年甚至更久[11].IBS和IBD的鑒別難點在于臨床癥狀重疊,IBD患者前驅(qū)期可出現(xiàn)IBS樣癥狀并維持數(shù)年.研究表明,即使在緩解期,實驗室及腸鏡檢查無炎癥表現(xiàn),仍有59.7%的CD患者和36.8%UC患者并發(fā)IBS樣癥狀[12].腸道微生態(tài)失衡是IBS和IBD的共性特征,而腸道微生物群的個性變化可能成為IBD和IBS鑒別的新工具.腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D)患者存在糞便菌群失衡,與健康人群比較,IBS-D主要改變是菌群豐度減少,而不是菌群多樣性下降,其中以厚壁菌門豐度減少和擬桿菌門豐度增加為特征[13].另一項針對IBS-D患者和UC患者的黏膜相關(guān)菌群差異性研究發(fā)現(xiàn),IBS-D和UC的共性特征是黏膜相關(guān)細菌總數(shù)及大腸桿菌、梭菌屬、擬桿菌屬數(shù)量顯著上升,而UC患者菌群的特征性變化是黏膜細菌總數(shù)多于IBS-D患者伴乳桿菌屬的豐度下降;同時IBS-D與UC的黏膜相關(guān)細菌定植不同,前者定植于黏膜表面及附近的黏蛋白層中,而后者的大腸桿菌、擬桿菌屬定植于固有層[14].相較于IBS,IBD腸道菌群紊亂更為嚴重,除菌群豐度變化,并存在菌群多樣性改變,此外由于IBD病變部位突破黏膜層,部分腸道菌群定植部位更深,常位于黏膜層以下.

2.2 IBD與器質(zhì)性腸病鑒別 除功能性腸病外,IBD需與器質(zhì)性腸病鑒別.(1)結(jié)直腸癌(colon rectum cancer,CRC)是IBD病情進展中常見腸道并發(fā)癥,可能與免疫抑制劑、生物制劑治療有關(guān).IBD患者結(jié)直腸癌發(fā)生始于不典型增生,不典型增生指上皮異乎常態(tài)的改變,可分為無不典型增生、疑似不典型增生、低級別不典型增生和高度不典型增生.其中疑似不典型增生是鑒別的關(guān)鍵點,它可分為兩類,一是與炎癥相關(guān)的再生變化,二是上皮的不典型增生.而要區(qū)分這兩種病變,通常采取積極的藥物治療以控制炎癥以及內(nèi)鏡監(jiān)測.長期內(nèi)鏡涉及患者依從性問題,對不可見的不典型增生檢出率較低.近年來基于結(jié)直腸癌的腸道微生物研究發(fā)現(xiàn),菌群可能是結(jié)直腸癌潛在的診斷標記物.Dai等[15]發(fā)現(xiàn)脆弱擬桿菌、具核梭桿菌、不解糖卟啉單胞菌、微小小單胞菌、中間普雷沃菌、芬氏別樣桿菌、食氨基酸熱厭氧弧菌等7個菌種在CRC中富集,可區(qū)分CRC患者和健康對照,AUC為0.80(結(jié)合臨床信息可提升至0.88).Xie等[16]研究發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸腺瘤、早期CRC、晚期CRC患者的具核梭桿菌相對豐度逐步顯著上升,利用具核梭桿菌作為標記物,在CRC診斷方面比糞便隱血、癌胚抗原等檢測方法更為有效.因此將菌群標記物與內(nèi)鏡監(jiān)測、實驗室檢查、影像學(xué)檢查等結(jié)合有助于提高臨床CRC診斷能力.(2)腸結(jié)核(Intestinal Tuberculosis,ITB)和CD的臨床和內(nèi)鏡癥狀存在較大的重疊,缺乏相對特異的指標鑒別這兩種疾病[17].CD和ITB均可出現(xiàn)肉芽腫,前者為非干酪樣,后者為干酪樣肉芽腫和抗酸桿菌染色陽性,但是內(nèi)鏡下活檢發(fā)現(xiàn)肉芽腫的幾率較低.雖然結(jié)核桿菌培養(yǎng)、抗體檢測和結(jié)核桿菌DNA檢測等血清學(xué)檢查雖然特異性較高,但是敏感性差,僅20%-50%的結(jié)核桿菌感染者可呈陽性反應(yīng).ITB中腸道菌群失衡已得到證實,Luo等[18]研究發(fā)現(xiàn)TB患者糞便菌群中厚壁菌門的普氏菌屬和毛螺菌屬較健康人群顯著降低.另有兩項小樣本臨床研究檢測CD和ITB患者糞便菌群,結(jié)果證實 CD和ITB患者均存在腸道菌群紊亂,相較于CD患者,ITB患者糞便擬桿菌顯著增多伴大腸桿菌顯著減少[19,20].提示擬桿菌和大腸桿菌數(shù)量變化可能對二者具有鑒別診斷價值,但尚缺乏定量指標.事實上,將腸道菌群特征性變化與臨床、內(nèi)鏡及病理相結(jié)合,可能有助于ITB和CD的鑒別診斷.

2.3 CD與UC鑒別 明確IBD診斷后,需進行CD和UC的鑒別.相較于UC,CD的內(nèi)鏡表現(xiàn)更為多樣性,同一病變腸段中可有多種病變形式存在,早期病變類似于UC,可能有彌漫性糜爛、出血、淺表潰瘍,因此當(dāng)早期CD病變局限于結(jié)腸時,與UC鑒別困難,極易誤診.但隨病變進展,CD內(nèi)鏡特征性表現(xiàn): 縱行潰瘍、鵝卵石樣增生、管腔狹窄等均會出現(xiàn).在IBD病變早期鑒別CD和UC,有利于控制病情進展,但由于缺乏金標準,需要將內(nèi)鏡檢查、實驗室檢查、影像學(xué)檢查相結(jié)合,而實驗室檢查中的血清和糞便是研究重點.血清學(xué)檢查中發(fā)現(xiàn)兩種新的抗腸道微生物抗體anti-L和anti-C,它們可用于IBD診斷的評估,聯(lián)合ASCA和pANCAs有助于區(qū)分CD和UC[21].抗腸道微生物抗體的變化是CD和UC腸道微生態(tài)失衡的間接證據(jù),而糞便檢測可以更為直觀的了解患者腸道微生物群落結(jié)構(gòu)、種類和數(shù)量.Pascal等[22]研究共納入四個國家(西班牙、比利時、英國和德國)的2045個非IBD和IBD糞便樣品,發(fā)現(xiàn)CD患者較UC患者腸道菌群失衡更嚴重,存在菌群多樣性下降、菌群結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定及8種不同的菌群標記物(柔嫩梭菌群、消化鏈球菌科、Anaerostipes、甲烷短桿菌、柯林斯菌屬、梭桿菌屬、Christensenellaceae和埃希氏桿菌屬,最后兩種在克羅恩患者中觀察到最多)三大特征,基于上述特征診斷鑒別CD和UC,靈敏度達80%,特異度分別達91%.Zhou等[23]研究同樣基于腸道菌群建立IBD診斷預(yù)測模型,對CD和UC患者的預(yù)測準確率分別為87.5%和79.1%.

3 IBD疾病嚴重程度與腸道菌群

內(nèi)鏡監(jiān)測是評估IBD疾病嚴重程度的重要指標,但是具有侵入性,因此合理應(yīng)用非侵入性的生物標記物輔助疾病嚴重程度評估是近年來研究重點.隨著疾病嚴重程度的增加,IBD患者腸道菌群結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變,多樣性下降,伴有特征性菌群豐度變化[24].基于不同疾病嚴重程度分層體系,IBD患者腸道菌群的研究結(jié)果存在差異性.

3.1 CD疾病活動度分層與腸道菌群 CDAI評分傾向于評估CD患者過去7 d內(nèi)排便、腹痛、腹瀉等臨床癥狀,是近期疾病活動度的重要指標.Schaffler等[25]檢測分析26例CD患者的腸黏膜組織微生物群發(fā)現(xiàn)緩解期患者(0＜CDAI＜220)的菌群相對相似并且由擬桿菌屬(＞40%)主導(dǎo),而活動期患者(CDAI＞220)的菌群以嗜糖假單胞菌屬(25%)和黃桿菌屬(13%)為主導(dǎo)而擬桿菌屬(4%)相對豐度較低.提示不同的CDAI水平存在特征性菌群,而腸道黏膜菌群主要結(jié)構(gòu)特征性轉(zhuǎn)變表明CD的疾病活動度發(fā)生變化.糞便菌群結(jié)構(gòu)變化同樣可以用來區(qū)分活動期和緩解期CD患者.Zhou等[23]應(yīng)用CDAI對CD患者糞便菌群分層,發(fā)現(xiàn)輕度活動者糞便中鏈球菌屬豐度增加,中重度活動者糞便中變形菌門、腸球菌科豐度增加同時伴有瘤胃球菌科、梭菌目豐度降低.糞便微生物群主要代表腸腔內(nèi)的共生菌,并不等同于腸黏膜上的微生物群.Danyta等[26]研究重復(fù)收集71例CD患者糞便樣品,并依據(jù)生化及臨床參數(shù)將糞便樣品分為緩解期和活動期,應(yīng)用50個差異分類單元(OTUs)組合建立預(yù)測模型,證實能夠準確預(yù)測73%的緩解期和79%的活動期樣本,AUC為0.82,靈敏度達0.79,特異性達0.79;深入研究發(fā)現(xiàn)Alistipes桿菌、普拉梭菌、卵形擬桿菌及單形擬桿菌與緩解期樣品相關(guān),而脆弱擬桿菌與活動期樣品相關(guān).

3.2 UC疾病活動度分層與腸道菌群 UC蒙特利爾臨床分型根據(jù)大便次數(shù)、血便、體溫、血紅蛋白、血沉將疾病嚴重程度分為緩解期、輕度、中度、重度.Zhou等[23]依據(jù)蒙特利爾臨床分析對UC患者糞便菌群分層,輕度患者中擬桿菌綱和假單胞菌科,中度患者鏈球菌屬豐度增加,重度患者變形菌門和芽孢桿菌綱豐度增加.Machiels等[27]研究從細菌代謝物探討UC微生態(tài)失調(diào),結(jié)果提示產(chǎn)丁酸鹽相關(guān)菌群羅氏菌屬和普拉梭菌在UC患者中豐度下降,且與疾病活動度呈負相關(guān).Fukuda等[28]研究基于個體OTUs中的腸道微生物整體特征設(shè)定判別值(Ds),共納入149人,按活動期UC、緩解期UC、有親緣關(guān)系的健康者、非親緣關(guān)系健康者分別分為組1、2、3、4,Ds大小為組1＞組2＞組3＞組4,并且組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,推斷低Ds值預(yù)示穩(wěn)定緩解,高Ds值與UC疾病活動度相關(guān),揭示腸道菌群種類和UC的病情進展密切相關(guān).該項研究以判別分數(shù)作為生物標記物鑒別UC的疾病活動度,相對于依賴腸道微生物差異性變化的鑒別體系而言,本研究聚焦于腸道微生物整體性改變,研究結(jié)果更具科學(xué)性.

3.3 CD疾病行為與腸道菌群 與UC不同的是,CD患者在腸道病變進展中更容易出現(xiàn)穿透、狹窄、瘺管等疾病行為,提示疾病行為是CD疾病嚴重程度評估的重要環(huán)節(jié).CD蒙特利爾分型納入疾病行為分型,即定義無穿透無狹窄為B1、狹窄為B2、穿透為B3、瘺管為P,應(yīng)用該分型對成人CD患者糞便菌群分層研究發(fā)現(xiàn),CD-B2患者腸桿菌科及假單胞菌科豐度增加,CD-B3患者氣單胞菌科豐度增加,CD-P患者腸桿菌科及假單胞菌科豐度增加[23].兒童CD患者的疾病進展相對于成人更快,疾病亞型迅速發(fā)展為復(fù)雜的疾病行為,如腸梗阻、腸穿透、腸狹窄、瘺管等[28,29].針對新發(fā)兒童CD患者糞便菌群研究發(fā)現(xiàn)羅氏菌屬、瘤胃球菌屬與狹窄行為相關(guān),柯林斯菌屬與穿透行為相關(guān),韋榮氏菌屬在回腸中增加[30].

3.4 糞鈣衛(wèi)蛋白與腸道菌群 探討腸道菌群與IBD病變相關(guān)的生物標記物的關(guān)系也可以間接反映IBD的疾病嚴重程度.糞鈣衛(wèi)蛋白作為非侵入性的生物標記物可以反應(yīng)腸道炎癥,臨床上常用來監(jiān)測IBD疾病活動度.Kolho等[31]前瞻性研究共納入68例IBD兒童患者,發(fā)現(xiàn)糞鈣衛(wèi)蛋白表達水平逐漸提高,糞便微生物也隨之而變,主要與總體微生物豐度、產(chǎn)丁酸鹽菌群豐度及革蘭氏陽性菌(梭菌屬Ⅳ及ⅪVa)豐度下降相關(guān);同時證實一組由9種不同細菌分類群組成的生物標記物可以預(yù)測IBD的鈣衛(wèi)蛋白水平,ROC曲線下面積AUC = 0.85,說明該組生物標記物具有較好的預(yù)測價值[31].

4 IBD腸外表現(xiàn)與腸道菌群

4.1 原發(fā)性硬化性膽管炎 原發(fā)性硬化性膽管炎(primary sclerosing cholangitis,PSC)是慢性膽汁淤積性疾病,膽汁在體內(nèi)存在肝腸循環(huán),腸-肝軸與PSC的發(fā)病密切相關(guān).60%至80%的PSC患者存在IBD,伴隨的結(jié)腸疾病通常被歸類為UC,但也被認為是一種獨特的表型,被稱為PSC-IBD[32-34].相對于健康人群,PSC患者韋榮氏球菌屬豐度更高[35].與單純IBD患者比較,PSC-IBD患者中與膽汁酸相關(guān)的特異性微生物群種類及數(shù)量變化顯著,腸道菌群中瘤胃球菌屬與梭桿菌屬豐度顯著增加[36].無論IBD病變進展如何,在PSC患者中羅氏菌屬、腸球菌屬、鏈球菌屬、韋榮氏球菌屬及其他三個屬豐度增加,Adlercreutzia屬及普氏菌屬豐度降低,而UC患者中Akkermansia屬、Butyricicoccus屬和梭菌屬及羅氏菌屬豐度降低,提示上述菌群標記物可明顯區(qū)分IBD表型中的PSC-IBD和UC[37].

4.2 脊柱關(guān)節(jié)炎 脊柱關(guān)節(jié)炎(Spondyloarthritis,SpA)是一組慢性炎癥性風(fēng)濕性疾病,SpA與IBD的臨床發(fā)病存在相關(guān)性.對SpA患者的長期隊列研究發(fā)現(xiàn),部分患者腸道活檢存在慢性炎癥,其中6.5%的SpA患者在5年內(nèi)發(fā)展為臨床明顯的IBD[38].30%的IBD患者出現(xiàn)關(guān)節(jié)病變,如外周關(guān)節(jié)炎,甚至是失去生命的強直性脊柱炎[39].IBD與SpA之間存在顯著的疾病重疊,極有可能與腸道微生態(tài)失衡相關(guān)[40].與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)及健康人群對照,SpA患者糞便菌群中瘤胃球菌屬豐度增加了2-3倍,且與有IBD病史的患者的疾病活動度呈正相關(guān)[41].部分伴有SpA的CD患者腸道菌群中存在一種特定的大腸桿菌(AIEC E.coli2A),進一步實驗研究證實這種大腸桿菌驅(qū)動全身性TH17免疫異常并惡化結(jié)腸炎和關(guān)節(jié)炎的發(fā)展[42].

4.3 葡萄膜炎 葡萄膜炎在IBD患者中的發(fā)病率為0.5%-3%,是IBD患者最常見的眼病,在UC患者中,葡萄膜炎常累及雙側(cè),發(fā)病隱匿并且持久[43].葡萄膜炎的臨床常見癥狀為眼痛、畏光、視力模糊和頭痛.眼睛是炎癥性疾病常發(fā)部位,腸道微生物可介導(dǎo)免疫炎癥反應(yīng)的發(fā)生,推測腸道微生態(tài)失調(diào)可能與眼部炎癥相關(guān).實驗研究發(fā)現(xiàn)在自身免疫性葡萄膜炎小鼠中,口服抗生素改變微生物群導(dǎo)致葡萄膜炎嚴重程度降低,而腸道共生微生物群抗原的信號通過刺激視網(wǎng)膜特異性T細胞觸發(fā)自身免疫性葡萄膜炎,證實了腸道微生物組在葡萄膜炎發(fā)病機制中的重要性[44,45].Huan等[46]對急性前葡萄膜炎(acute anterior uveiti,AAU)患者糞便菌群檢測發(fā)現(xiàn)與健康對照組多樣性顯著不同,同時與健康對照組比較,在AAU患者中,羅氏菌屬等8個屬減少,僅韋榮氏球菌屬增加.

4.4 代謝性骨病 IBD患者的代謝性骨病主要與低骨密度相關(guān),常合并骨質(zhì)減少和骨質(zhì)疏松,而骨胳系統(tǒng)長期受累容易增加骨折風(fēng)險.IBD患者骨質(zhì)異常的危險因素主要有糖皮質(zhì)激素、年齡、吸煙、運動減少、以及營養(yǎng)不良等,而上述危險因素與腸道微生物改變有關(guān)[47].實驗研究證實腸道微生物與骨密度產(chǎn)生密切相關(guān)[48,49].IBD腸道微生態(tài)失衡,激活異常免疫系統(tǒng),促進炎癥反應(yīng),增強破骨細胞因子表達,減少鈣、維生素D、維生素K等營養(yǎng)物質(zhì)吸收,最終導(dǎo)致骨質(zhì)流失及骨量減少[50,51].臨床研究證實骨質(zhì)疏松患者與健康人群在門、科、種分類水平的部分腸道菌群含量存在差異,其中芽單胞菌門、綠彎菌門、酸桿菌門、芽單胞菌科、叢毛單胞菌、厭氧繩菌科、毛螺菌及優(yōu)桿菌等腸道菌群在骨質(zhì)疏松患者中所占比例要大于正常對照組(P＜0.05)[52].但IBD合并代謝性骨病患者的腸道微生物特征仍有待進一步完善研究.

5 結(jié)論

綜上所述,雖然內(nèi)鏡檢查、影像學(xué)檢查、實驗室檢查是診斷IBD的重要輔助診斷,但是由于IBD臨床癥狀不典型、病變發(fā)展多樣化,延遲診斷、錯誤診斷仍頻頻發(fā)生,尋求新型生物標記物以便早期準確診斷IBD是研究的重點.眾所周知,腸道菌群已被證實是IBD的重要病因病機,目前多項臨床研究證實腸道菌群與IBD病程的關(guān)聯(lián),將腸道菌群與臨床癥狀、內(nèi)鏡表現(xiàn)、影像學(xué)、血清學(xué)等聯(lián)合應(yīng)用,或有助于IBD鑒別診斷、疾病嚴重程度評估及腸外表現(xiàn)等并發(fā)癥診斷,提高發(fā)病初期診斷的準確率,使患者采取及時治療以延緩病情進展.但是腸道菌群在IBD診斷中尚存部分難點有待進一步研究.應(yīng)用腸道菌群鑒別IBD與結(jié)直腸癌、腸結(jié)核、腸淋巴瘤等其它器質(zhì)性疾病是一方面,另一方面由于IBD病程長,不排除進展為結(jié)直腸癌、腸淋巴瘤或合并結(jié)核感染,在這些復(fù)雜情況下,IBD腸道菌群的特征又是如何？目前臨床研究重在尋找與IBD疾病嚴重程度相關(guān)的特征性腸道菌群標記物,而事實上IBD疾病嚴重程度是一個動態(tài)的病變過程,在這一過程中腸道微生物標記物動態(tài)變化如何？腸道微生物不僅與腸道疾病相關(guān),而且參與誘導(dǎo)腸外疾病的發(fā)病及其進展,已有研究表明IBD腸外表現(xiàn)與腸道微生態(tài)變化密切相關(guān),該如何應(yīng)用腸道菌群將IBD特有的腸外表現(xiàn)和腸外疾病相鑒別？同時目前針對腸道菌群的臨床研究大多為觀察性研究,部分研究結(jié)果顯示的特征性菌群標記物未經(jīng)大樣本驗證,缺乏大數(shù)據(jù)支持,其敏感度和特異度仍有待考查.另有部分研究顯示基于腸道菌群建立的預(yù)測模型對IBD診斷的特異度和靈敏度較高,但是該模型部分存在缺陷,首先,微生物模型的建立受研究者主觀因素影響,對不同的臨床研究缺乏應(yīng)用普適性,其次在建立微生物模型的過程中,受試者年齡、性別、地域、飲食、生活習(xí)慣等基線資料對腸道微生物有一定的影響,因此該模型的精準性易受多重因素影響,建模時應(yīng)該嚴格控制變量.因此,腸道菌群要成為IBD診斷性生物標記物尚需大量試驗性研究證實,而在未來的研究中,可結(jié)合宏基因組測序、代謝組學(xué)等檢測技術(shù)以便更好地鑒定出IBD的菌群生物標記物.