程 鵬 何先元 喻錄容 張義兵

（1 重慶醫(yī)科大學實驗管理中心，重慶 401331；2 重慶醫(yī)科大學中醫(yī)藥學院，重慶 401331）

中藥藥理學是連接現(xiàn)代醫(yī)學和中醫(yī)藥學的關(guān)鍵節(jié)點課程，已經(jīng)證明藥理學采用現(xiàn)代生物醫(yī)學方法及現(xiàn)代儀器設(shè)備能夠解釋大量的醫(yī)學現(xiàn)象，中藥藥理學作為藥理學和中藥學交叉綜合的學科，就是要借鑒藥理學及先進的儀器設(shè)備來研究和闡明中醫(yī)藥作用機理。通過中藥藥理學實驗來培養(yǎng)學生的創(chuàng)新能力和解決問題的探索能力，提高學生的綜合素質(zhì)，是我們中藥藥理學實驗教育教學改革的重點內(nèi)容，也是更快更好地使中醫(yī)藥走向世界的重要途徑［1-5］。由于中藥物質(zhì)基礎(chǔ)的多樣性和復(fù)雜性，導致中藥效應(yīng)的非線性、多效性、雙向性以及不確定性等特點，我們在實驗教學改革過程中，從培養(yǎng)學生的整體觀出發(fā)，對人參抗應(yīng)激作用實驗進行改進，在豐富學生理論知識和提高實驗技能的前提下，注重鍛煉學生發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力，達到培養(yǎng)學生將來具備自主學習能力、獨立設(shè)計實驗?zāi)芰蛣?chuàng)新思維能力的高素質(zhì)人才［6-10］。

1 實驗方案的設(shè)計

1.1 器材設(shè)備 圓柱型玻璃缸（50 cm×50 cm）、磨口廣口瓶300 mL、凡士林、鉛絲（每根1 g 左右）、秒表、冰塊、溫度計、小鼠灌胃器、鼠籠、電子天平、木棒等。

1.2 藥品試劑 鈉石灰、苦味酸、A 人參水煎液1 g/mL、B 黨參水煎劑1 g/mL、C 黃芪水煎劑1 g/mL、D 枸杞子水煎劑1 g/mL、E 四逆湯1 g/mL、F 附子干姜1 g/mL。

1.3 實驗動物 昆明種健康小鼠，體質(zhì)量（20±2） g，重慶醫(yī)科大學動物實驗中心提供，動物許可證號：SCXK（渝） 2002-0001。

2 實驗教學實施

2.1 實驗準備 由于本次試驗屬于最后一次實驗，我們要求學生全過程參與實驗材料的準備，中藥煎劑，預(yù)制冰塊，鉛絲整理等實驗準備工作。

2.2 學生分組 將學生分成6 組，每組選用一種中藥煎劑。選小鼠60 只，隨機分成6 組，每組10 只，灌胃0.2 mL/10 g 所選中藥煎劑。

2.3 實驗過程 各組給藥后1 h 后，在小鼠尾根部束體重5% 的鉛絲，然后將小鼠放入玻璃水缸（50 cm×50 cm），內(nèi)裝冰水混合物，水深40 cm，水溫0 ℃），木棒敲打水缸邊緣，刺激小鼠快速游動；并開始計時，當小鼠全身顫抖，頭沉入水中，嗆第一次水時終止計時，記錄為小鼠負重抗疲勞抗寒冷時間。然后，將每只小鼠分別放置到有鈉石灰的磨口廣口瓶中，用凡士林密封瓶口，至小鼠死亡，記錄為小鼠寒冷疲勞后耐缺氧時間。

2.4 實驗結(jié)果 每小組，記錄小鼠游泳時間，小鼠死亡時間。完整比較小鼠對不同中藥煎劑抗應(yīng)激效應(yīng)的結(jié)果。

3 實驗教學改革效果

3.1 教學秩序 這次實驗安排在最后一次實驗，經(jīng)過前面幾次實驗的訓練，以小組為單位的實驗設(shè)計和實驗準備都比較充分，實驗操作比較熟練，實驗過程井然有序，學生能很好地完成小鼠捉持、稱重、標記、灌胃、觀察記錄等程序。小鼠數(shù)量使用比較多，基本上每個同學都有動手操作的機會，為學生們以后進一步從事研究打下比較好的基礎(chǔ)。

3.2 改進效果 由實驗教師準備實驗材料和設(shè)備改變?yōu)樵谇耙淮螌嶒灲Y(jié)束時布置本次實驗內(nèi)容要求，學生在整理實驗臺的過程中也主動為本次實驗做準備；由單一中藥煎劑改變?yōu)槎嘟M中藥煎劑，以前只準備人參煎劑，但是改革后由于各個小組所使用中藥煎劑不一樣，可能中藥效應(yīng)不一樣，學生積極性非常高，各自小組希望有不一樣的結(jié)果；以前只有一味中藥有復(fù)方和配伍，結(jié)合教材內(nèi)容的變化，增加常用配伍和常用復(fù)方，引導學生對拆方和配伍理論的研究興趣，保持人參煎劑一直不變，這部分每年只能有1~2 組改變，改變后的藥理效應(yīng)與往年對比，熟悉中藥藥效差異變化趨勢；以前單一疲勞應(yīng)激因素改變?yōu)槎喾N綜合因素，通過低溫、負重游泳和耐缺氧等綜合因素處理，適當縮短實驗時間，同時又能使學生通過一次實驗了解不同中藥對小鼠抗應(yīng)激性的作用效果不同；計算分析比較不同組別中藥煎劑之間的效果，明白中藥作用的復(fù)雜性和非線性特點。

3.3 結(jié)果考核 由于實驗課時少，本實驗實際耗時課堂是不夠的，所以考核時包括課前實驗材料設(shè)備的準備、中藥藥理學實驗技能全面考核、儀器設(shè)備歸類收放以及實驗臺整理等全過程?？己思骖檪€人和小組，個人考核主要包括小鼠捉持、灌胃、實驗結(jié)果、實驗過程記錄及實驗報告，小組考核包括某味中藥煎煮、實驗結(jié)果數(shù)據(jù)分析、實驗設(shè)備準備、實驗設(shè)備收放、實驗臺整理和實驗室清潔等，最后全班不同小組實驗結(jié)果數(shù)據(jù)分析整理成文檔保存，便于與上一年級同學實驗結(jié)果比較，作為下一年級同學分析參考。

4 結(jié)語

由于本次實驗設(shè)計是要求每個同學都有動手的機會，所以就存在即使是同一小組一種煎劑處理的小鼠，實驗結(jié)果數(shù)據(jù)差異也比較大，除去小鼠個體差異外，還要讓學生明白，不同的實驗操作者，實驗結(jié)果也會有差異，激勵學生在以后實驗研究中要熟練掌握實驗操作技能，減少人為因素差異，盡管本實驗數(shù)據(jù)結(jié)論不十分精確，只能作為分析中藥作用效果的趨勢，不能作為科學研究分析的數(shù)據(jù)，但是學生熟悉了實驗設(shè)計、操作技能和數(shù)據(jù)分析方法，為今后的研究工作打下了基礎(chǔ)。

本實驗在不增加實驗研究經(jīng)費和實驗操作難度前提下，也可以設(shè)計同種中藥煎劑雌雄小鼠分別比較其抗應(yīng)激性能力的研究，使學生通過動物實驗實際了解雌雄動物抗應(yīng)激性的差異。沒有設(shè)計研究中成藥的中藥藥效，主要考慮是藥效緩慢，實驗課程內(nèi)難以見到明顯的效果。中醫(yī)專業(yè)學生對本實驗設(shè)計研究興趣更加濃厚，可能與醫(yī)學專業(yè)學生更加關(guān)注藥物療效，便于指導將來臨床用藥有關(guān)，另外，中藥專業(yè)學生對藥物成分分析以及藥品生產(chǎn)興趣要濃厚一些，今后的實驗設(shè)計也可以根據(jù)不同專業(yè)學生的特點進行適當改革。可以引導學生開展創(chuàng)新實驗研究，通過檢測SOD 以及MDA 等參數(shù)進一步分析研究不同中藥煎劑對小鼠抗應(yīng)激性的差異。

隨著課時普遍減少，中藥藥理學實驗課時就更少，盡管學生有藥理學實驗操作為基礎(chǔ)，具體到中藥學和中醫(yī)學學生來說，其藥理學實驗操作能力還有待提高，所以中藥藥理學實驗教學課程的改革就顯得更加重要，改革的目的是使學生參與的積極性提高，只有這樣學生的實驗操作技能才能提高，我們從改變原來傳統(tǒng)單一的實驗教學內(nèi)容和模式，構(gòu)建多元化和系統(tǒng)性的實驗教學模式，增加實驗的趣味性，提高學生的參與度，結(jié)合實驗數(shù)據(jù)結(jié)果的不確定性，引導培養(yǎng)學生遇到問題、分析問題、解決問題的能力，也更有利于培養(yǎng)學生的創(chuàng)新性和實踐性，開拓學生研究性思維。