宋 涌

（贛州市白塔水上木材檢查站，江西 贛州 341000）

1 材料和方法

1.1 材料來源

加快沉香樹組織繁殖培育實驗的種子材料是半年生的同期沉香樹種子苗，選用優(yōu)良種子苗，以有效保障試驗結(jié)果的準確性。

1.2 研究方法

選取沉香樹種子苗優(yōu)株上生長健壯的枝條，并除掉葉片，用干凈自來水沖洗大約30min，除掉雜質(zhì)。在進行高度清潔和消毒工作的工作臺上消毒處理枝條表面。用75%的試驗用酒浸泡30s，然后用0.1%升汞液浸泡7min，最后用標準的無菌水沖洗7～8次，保證枝條上不帶有除試驗添加的液體之外的其他液體。接著用無菌吸水紙吸干無菌水，下一步切去與藥液直接接觸的枝條傷口部分，將試驗枝條切成1.5～2.5cm的小長段，帶有1～2個葉芽，將切好的長段作為備用。培養(yǎng)基的選用是以MS培養(yǎng)基，附加3%的蔗糖，0.6%的卡拉膠以及不同濃度配比的激素，調(diào)制pH值為5.8，嚴格按照植物生長所需的植物激素制作培養(yǎng)基，保證培養(yǎng)基里的各項物質(zhì)和數(shù)值都在試驗預(yù)設(shè)的控制下[1]。另外，培養(yǎng)溫度應(yīng)控制在25℃左右，溫差不超過2℃，光照時間應(yīng)在10h/d，光照強度應(yīng)在2000～3000Lx。同時，在開展對照實驗的過程中要保證實驗條件的一致性，在實驗的過程中遵循單一變量原則。

2 結(jié)果探究

2.1 不同培養(yǎng)基中沉香樹外殖體的發(fā)展狀態(tài)

為了更好地探究各種培養(yǎng)基的組成要素對沉香樹外殖體的誘導(dǎo)功效，尋找最優(yōu)良的培養(yǎng)基組成模式，每1個處理接種40個枝段，同時有4個重復(fù)，每個重復(fù)為10枝段，基本的培養(yǎng)基是1/2Ms。

當外殖體接種7d時，葉芽處于萌芽抽長的狀態(tài)，20d以后，大量的基部脹大，在35d時，對外殖體芽的誘導(dǎo)率進行了1次統(tǒng)計，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，外殖體的誘導(dǎo)率是隨著對培養(yǎng)基中所加入的6BA的濃度不同而變化的。外殖體的誘導(dǎo)出芽率會隨著所添加的6BA的濃度加大而變得更低。伴隨著6BA濃度的不斷上升，外殖體的誘導(dǎo)出芽率變得越來越異常，甚至呈現(xiàn)出玻璃化的狀態(tài)。通過對比觀察發(fā)現(xiàn)，對不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的最佳選項是1號，1號培養(yǎng)基的平均誘導(dǎo)率是最高的，且外殖體的表現(xiàn)情況也是最好，其平均誘導(dǎo)率高達85%。

2.2 不同的培養(yǎng)基對沉香樹芽的增殖造成不同影響

分割誘導(dǎo)出的葉芽，在1號培養(yǎng)基中進行增殖，之后的繼代增殖試驗培養(yǎng)基展開。每個都接30芽，設(shè)計了3個重復(fù)，每個重復(fù)都為10芽，基礎(chǔ)的培養(yǎng)基是2/3Ms，對增殖率的統(tǒng)計于40d進行，得到了相應(yīng)的結(jié)果。通過觀察發(fā)現(xiàn)，在沉香樹芽的增長過程中，生長素的6BA的濃度以及水解乳蛋白添加都會對沉香樹葉芽的增長產(chǎn)生巨大的影響。通過添加水解乳蛋白能顯著提高沉香葉芽的增殖率。同時還發(fā)現(xiàn)，6BA的濃度和沉香葉芽的增殖率呈現(xiàn)反比。從培養(yǎng)基5～8號的對比中可以看出，5號培養(yǎng)基是最佳的選擇。

2.3 生長素IBA、NAA對沉香樹不定芽生根的影響

將繼代增殖培養(yǎng)基上生長長度為2～3cm的沉香樹芽切下來，接種在培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基為1/3MS，再添加不同濃度的IBA和NAA，總共有4種處理方式，每1處理接30芽，設(shè)置3個重復(fù)，每重復(fù)10個芽，50d統(tǒng)計生根率，得出結(jié)果。

表1 外植體種于不同培養(yǎng)基的表現(xiàn)情況

表2 不同培養(yǎng)基對沉香樹芽增殖的影響

表3 生長素IBA，NAA對沉香樹誘導(dǎo)不定芽生根的影響

結(jié)果顯示，NAA對接種芽誘導(dǎo)不定根、根數(shù)和根的長度效果均比IBA明顯，生根率和培養(yǎng)基的濃度成反比，生根率多的培養(yǎng)基濃度比較低。通過各個濃度培養(yǎng)基中生根率的對比，易發(fā)現(xiàn)哪一組的培養(yǎng)基更適合提高沉香樹生根率。

2.4 栽培基質(zhì)對沉香樹培苗移栽成活率的影響

組培苗經(jīng)過生根培養(yǎng)工作，長根以后才可以進行移栽。移栽前株苗應(yīng)該7～10d，然后將小苗洗干凈以后粘附在卡拉膠上，再用1500倍液的甲基托布津浸泡6min，種植在消毒過的基質(zhì)上，要求棚內(nèi)空氣濕度80%～95%，然后統(tǒng)計小苗移栽成活率?？傻贸?，不同濃度的栽培基質(zhì)對沉香樹組織培苗成活率和苗的生長影響比較大。泥炭土與河沙的比值為2∶1的基質(zhì)，沉香樹苗的移栽成活率和芽長度以及根的長度生長發(fā)育最快最好，其他種類比例的基質(zhì)移栽成活率相對較低。

3 結(jié)論

綜上所述，在沉香樹組織培養(yǎng)過程中，每個階段都有最合適的培養(yǎng)基，在不定芽誘導(dǎo)的階段，最合適的培養(yǎng)基為1號培養(yǎng)基，而芽的繼代增殖培養(yǎng)基的選擇，最佳選擇是5號培養(yǎng)基。而生根培養(yǎng)基的最佳選擇則是9號培養(yǎng)基。在沉香樹的增殖過程中，6BA的濃度有著舉足輕重的作用。6BA的濃度越高，導(dǎo)致芽的增值率越低，嚴重的會使芽表現(xiàn)出玻璃化或是基部的過渡膨大。而LH會促進芽的增殖率的提高。在沉香組培苗生根階段，生長素IBA和NAA對其會產(chǎn)生不同的影響。芽對NAA有更強烈的反應(yīng)，能夠有效提高沉香樹組培苗的生根率。而IBA則稍遜一籌，芽苗的反應(yīng)并不理想，對生根率沒有明顯的提高。

4 結(jié)語

沉香樹不論是從醫(yī)學(xué)上還是環(huán)境學(xué)上來講，都極有益于社會，但因為部分原因，它的生長速度不能滿足需求，故沉香樹組織培養(yǎng)技術(shù)的研究發(fā)展對社會有巨大貢獻。在現(xiàn)代科技環(huán)境下，沉香樹的培養(yǎng)技術(shù)有更大的發(fā)展空間，試驗條件和技術(shù)都在不斷改進和發(fā)展，未來沉香樹組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展能夠有望滿足社會需求。