3湯岐梅趙志強(qiáng)毛靜遠(yuǎn)

中藥枳殼(Fructus Aurantii)為蕓香科柑橘屬植物酸橙及其栽培變種的干燥未成熟果實(shí)，性微寒，味苦、辛、酸，歸脾、胃經(jīng)，具有理氣寬中、行滯消脹功效，為常用理氣藥之一[1]。有研究顯示，枳殼含黃酮類、生物堿類、香豆素類和揮發(fā)油等化學(xué)成分，主要有效活性成分以黃酮類如橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷等為主[2]，同時(shí)含有辛弗林、N-甲基酪胺等少量生物堿類[3]。有研究發(fā)現(xiàn)，枳殼的有效成分具有一定抗氧化、抗炎、抗凋亡、升壓、抗休克等作用[4-5]?，F(xiàn)就近年來(lái)研究枳殼的心血管藥理作用文獻(xiàn)綜述如下。

1 心肌保護(hù)作用

1.1 抗缺血再灌注損傷 心肌缺血再灌注損傷與氧自由基累積、Ca2+超載、炎癥介質(zhì)浸潤(rùn)及多途徑誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡等相關(guān)。有研究顯示，柚皮苷可降低缺血再灌注模型大鼠肌酸激酶(CK)和乳酸脫氫酶(LDH)活性，其機(jī)制可能是柚皮苷提高總一氧化氮合酶(tNOS)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性，降低誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)活性，增加eNOS產(chǎn)生的一氧化氮(NO)含量，抑制膜脂質(zhì)過(guò)氧化，減少自由基對(duì)細(xì)胞膜損傷，發(fā)揮抗缺血再灌注損傷[6]。橙皮苷通過(guò)激活磷酸酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)途徑下調(diào)高遷移率族蛋白1蛋白(HMGB1)表達(dá)，減少大鼠心肌梗死面積，降低心肌酶水平，提高超氧化物歧化酶(SOD)活性，降低丙二醛(MDA)含量，發(fā)揮抗炎、抗氧化應(yīng)激及抗心肌細(xì)胞凋亡作用[4]。柚皮素通過(guò)激活線粒體鈣激活鉀通道(MitoKCa)，引起線粒體膜去極化，減少線粒體內(nèi)鈣積累，發(fā)揮心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[7]。

1.2 抑制心肌重構(gòu) 心肌重構(gòu)初期是心室有益的代償過(guò)程，隨著病情進(jìn)展，壓力負(fù)荷增加，氧化應(yīng)激、心肌肥厚、心肌纖維化、心肌凋亡等病理改變加重，最終導(dǎo)致心臟失代償，加速心力衰竭發(fā)生。小鼠心臟壓力負(fù)荷誘導(dǎo)模型研究發(fā)現(xiàn)，橙皮素通過(guò)降低蛋白激酶C(PKC)-Akt和c-Jun氨基末端激酶(JNK)信號(hào)通路的激活，減少心臟體積和心肌細(xì)胞橫截面面積，提高等容收縮期左心室壓力上升最大速率和最小速率，增強(qiáng)小鼠心肌收縮能力，抑制術(shù)后心房鈉尿肽(ANP)、腦利鈉肽(BNP)、ct-肌球蛋白重鏈(ct-MHC) mRNA等心肌增生標(biāo)記物表達(dá)的增加；通過(guò)阻斷轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子pi(TGFpi)-Smad信號(hào)通路，下調(diào)TGF-pi、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)和Ⅰ型膠原纖維表達(dá)，發(fā)揮抗心肌纖維化作用；通過(guò)下調(diào)煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亞單位gp91、p22、p47和p67 mRNA表達(dá)，上調(diào)SOD1和SOD2的mRNA表達(dá)，抑制氧化應(yīng)激；下調(diào)Bax/Bcl-2、Bak和裂解caspase-3等凋亡相關(guān)信號(hào)因子表達(dá)，抑制細(xì)胞凋亡[8]。血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)H9C2心肌肥厚模型研究顯示，橙皮素抑制分子標(biāo)志物BNP和β-MHC的mRNA表達(dá)增加，減少細(xì)胞面積[9]。阻斷左冠狀動(dòng)脈前降支模型大鼠研究顯示，橙皮苷可抑制基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)對(duì)敏感肌小節(jié)蛋白和細(xì)胞骨架蛋白的降解作用，抑制caspase-3介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，下調(diào)髓過(guò)氧化物酶(MPO)表達(dá)，發(fā)揮抗炎作用，下調(diào)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)表達(dá)，抗心肌纖維化[10]。

1.3 對(duì)抗高糖誘導(dǎo)的心肌受損 糖尿病心肌病是一種公認(rèn)獨(dú)立的原發(fā)病，與糖尿病造成的微血管病變相關(guān)。多個(gè)研究顯示，柚皮苷可抑制p38絲裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)通路，下調(diào)線粒體Bax、Bak和細(xì)胞色素-c(Cyt-c)等凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)，增加線粒體膜電位，改善線粒體功能，提高細(xì)胞存活率[11]；抑制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子3(STAT3)通路，減輕線粒體損傷及氧化應(yīng)激，抑制細(xì)胞凋亡[12]；阻斷核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)途徑激活，下調(diào)NF-κB蛋白及外周血腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)表達(dá)，減輕心肌炎癥反應(yīng)[13]；上調(diào)缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)表達(dá)，改善心肌超微結(jié)構(gòu)[14]；下調(diào)糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)表達(dá)，提高左室射血分?jǐn)?shù)，抑制心功能惡化，對(duì)抗高糖誘導(dǎo)的心肌受損[15]。

1.4 減輕抗癌藥物的心肌毒性 隨著抗癌藥物在治療過(guò)程的廣泛應(yīng)用，中藥減輕抗癌藥物心肌毒性的輔助作用受到臨床醫(yī)生關(guān)注。有研究顯示，柚皮苷可增加細(xì)胞中線粒體復(fù)合物(I-IV)活性，升高谷胱甘肽(GSH)、SOD和過(guò)氧化氫酶(CAT)水平，抑制氧化應(yīng)激，減輕阿霉素誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞損傷[16]。柚皮苷干預(yù)柔紅霉素誘導(dǎo)心肌細(xì)胞研究顯示，柚皮苷可減輕細(xì)胞DNA損傷，減少氧自由基產(chǎn)生，抑制細(xì)胞凋亡[17]。另有研究表明，柚皮苷通過(guò)抑制p38MAPK通路，使H9C2心肌細(xì)胞存活率升高，IL-1β、IL-6和TNF-α濃度降低，抑制多柔比星引起的炎癥反應(yīng)及細(xì)胞毒性[18]。

2 抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)

氧化應(yīng)激產(chǎn)生過(guò)量的活性氧(ROS)導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，并調(diào)控黏附分子表達(dá)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)。柚皮苷預(yù)處理高糖誘導(dǎo)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)研究顯示，柚皮苷通過(guò)抑制ROS產(chǎn)生及NF-κB活化，進(jìn)而阻斷HUVECs細(xì)胞間黏附分子表達(dá)[19]。另有研究發(fā)現(xiàn)，柚皮苷通過(guò)激活PI3K/Akt信號(hào)通路，負(fù)調(diào)控NF-κB的轉(zhuǎn)錄活性，同時(shí)抑制NADPH氧化酶4(Nox4)過(guò)表達(dá)，減少ROS生成，減輕TNF-α誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)[20]。橙皮苷干預(yù)代謝綜合征病人研究顯示，與安慰劑組相比，橙皮苷可降低病人超敏C反應(yīng)蛋白(hsCRP)、血清淀粉樣蛋白A(SAA)和可溶性E-選擇素(sE-selection)濃度，降低總膽固醇和載脂蛋白B(ApoB)濃度，升高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)濃度，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，改善內(nèi)皮功能。體外研究表明，橙皮苷對(duì)內(nèi)皮的保護(hù)作用與提高Akt、AMPK和eNOS磷酸化水平，促進(jìn)NO生成，下調(diào)單核細(xì)胞黏附分子表達(dá)有關(guān)[21]。

3 抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖與遷移

平滑肌細(xì)胞增殖和遷移是血管壁增厚、管腔狹窄和斑塊形成等病理改變的關(guān)鍵因素，可加速血管重建。有研究顯示，柚皮苷通過(guò)阻斷TNF-α誘導(dǎo)PI3K/Akt/mTOR/p70S6K通路的激活，抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-κB和AP-1結(jié)合活性的增加，下調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)表達(dá)；并減少TNF-α誘導(dǎo)IL-6、IL-8的生成，抑制大鼠血管平滑肌細(xì)胞浸潤(rùn)和遷移[22]。另有研究表明，柚皮苷的體內(nèi)代謝產(chǎn)物柚皮素通過(guò)激活平滑肌細(xì)胞血紅素加氧酶-1(HO-1)mRNA和蛋白的表達(dá)及活力，抑制TNF-α誘導(dǎo)的大鼠平滑肌細(xì)胞的遷移和增殖[23]。橙皮素顯著抑制血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)-BB誘導(dǎo)的主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞增殖，其機(jī)制考慮與阻斷平滑肌細(xì)胞周期G0/G1期向S期轉(zhuǎn)化有關(guān)[24]。

4 調(diào)控血管舒縮

有研究顯示，柚皮素和柚皮苷通過(guò)促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞釋放NO，舒張KCl或PE預(yù)收縮的大鼠主動(dòng)脈[25]；柚皮素通過(guò)刺激大電導(dǎo)鈣激活鉀離子通道(BKCa)的開(kāi)放，促進(jìn)細(xì)胞膜超級(jí)化，降低細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度，舒張小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌[26]；橙皮素通過(guò)激活電壓依賴性鉀通道(KV)，提高平滑肌細(xì)胞膜超級(jí)化的電流密度，舒張腎動(dòng)脈血管環(huán)[27]。枳殼醇提物(FAE)對(duì)去除內(nèi)皮大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)具有收縮作用，其機(jī)制可能與激活血管平滑肌上的電壓依賴性鈣通道，促使胞外Ca2+內(nèi)流有關(guān)；在內(nèi)皮完整情況下FAE可作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)NO釋放，部分抵消血管收縮[28]。N-甲基酪胺注射液可間接興奮α、β受體，增加狗下肢血管阻力，而對(duì)冠狀動(dòng)脈和腎動(dòng)脈具有舒張作用，其綜合效應(yīng)為升高血壓[29]。以上枳殼不同成分對(duì)血管舒縮功能的影響存在差異，具體有效成分及綜合血管舒縮效應(yīng)有待進(jìn)一步研究。

5 調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝

有研究發(fā)現(xiàn)，柚皮苷通過(guò)抑制3-羥基-3甲基戊二酰輔酶(HMG-CoA)、?；o酶A-膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性，降低高脂、高膽固醇喂養(yǎng)大鼠的血漿膽固醇和三酰甘油含量，提高HDL-C與總膽固醇比值，影響膽固醇合成[30]。體外和體內(nèi)研究均發(fā)現(xiàn)，新橙皮苷通過(guò)上調(diào)p-AMPK蛋白表達(dá)增強(qiáng)脂肪酸氧化，減少膽固醇和三酰甘油產(chǎn)生；同時(shí)新橙皮苷具有升高HDL-C，降低低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)/HDL-C及ApoB/ApoA-1比值，減輕小鼠體重等脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)作用，其機(jī)制與增加PPAR-α和FGF21蛋白及基因表達(dá)相關(guān)[31]。家兔動(dòng)脈粥樣硬化模型研究顯示，橙皮苷可下調(diào)單核細(xì)胞趨化蛋白1 mRNA表達(dá)，抑制體外LDL-C氧化，降低血漿MDA含量，發(fā)揮抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用[32]。

6 抗血小板聚集作用

血小板聚集通過(guò)花生四烯酸(AA)、血小板活化因子、腺苷二磷酸等多種途徑誘導(dǎo)，血栓素A2(TXA2)形成和釋放是血小板激活的中心環(huán)節(jié)。有研究顯示，橙皮素通過(guò)環(huán)氧合酶1(COX-1)途徑抑制AA生成TXA2，呈濃度依賴性降低AA誘導(dǎo)的血小板聚集；在降低膠原蛋白誘導(dǎo)的血小板聚集方面，橙皮素可抑制磷脂酶C(PLC)-γ2磷酸化和Ca2+釋放，提示PLC-γ2上游通路可能是橙皮素抑制血小板聚集的潛在靶點(diǎn)[33]。高脂血癥家兔模型研究顯示，中、高劑量柚皮苷通過(guò)降低血小板Ca2+濃度，下調(diào)肌球蛋白輕鏈磷酸化，抑制血小板收縮和釋放；柚皮苷對(duì)血小板的調(diào)節(jié)作用與調(diào)控血脂水平，降低血小板敏感性相關(guān)[34]。

7 其 他

有研究報(bào)道，橙皮素通過(guò)可逆性阻滯細(xì)胞hERG鉀通道，發(fā)揮抗心律失常作用[35]；辛弗林和N-甲基酪胺可通過(guò)興奮α、β受體發(fā)揮抗休克作用[5]；N-甲基酪胺可增加腎血流量，具有顯著的利尿效應(yīng)[29]。

8 小 結(jié)

《素問(wèn)·痿論》云“心主身之血脈”，心系疾病常引起血脈運(yùn)行不利，所謂“脈道不通，氣不往來(lái)”，脈道不暢則氣機(jī)阻滯，進(jìn)而血行不利，瘀血內(nèi)阻；津液運(yùn)化失常，則聚液生痰；痰飲瘀血產(chǎn)生常加重氣滯，形成氣滯、血瘀、痰飲相互為病的惡性循環(huán)。因此，在心系疾病治療中，理氣中藥發(fā)揮調(diào)和氣、血、津液作用。有研究顯示，以柴胡、枳殼、瓜蔞皮為君藥的“寬胸理氣活血法”治療氣滯痰阻血瘀證導(dǎo)致心脈痹阻的心臟X綜合征，可有效減少病人心絞痛發(fā)生，改善臨床癥狀[36]?！侗静菅芰x》曰：“他方但導(dǎo)敗風(fēng)壅之氣，可常服者，故用枳殼”，枳殼既可調(diào)理氣機(jī)瘀滯之主證，也可在益氣、活血、化痰、利水等心血管常用藥物配伍中發(fā)揮佐使之功，佐補(bǔ)益之藥而通利氣機(jī)，補(bǔ)而不滯，使通利之藥更助血行痰化水利，以輔助君臣，協(xié)同增效，在心血管疾病中的臨證處方配伍應(yīng)用靈活。

綜上所述，枳殼主要活性成分具有保護(hù)心肌細(xì)胞、抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)、抑制平滑肌細(xì)胞增殖和遷移、調(diào)控血管舒縮、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、抗血小板聚集等心血管藥理作用，體現(xiàn)中藥多組分、多環(huán)節(jié)、多途徑、多靶點(diǎn)的藥理特點(diǎn)。枳殼在方劑中的協(xié)同增效機(jī)制有待研究，其主要活性成分量效關(guān)系尚未明確，有待今后研究進(jìn)一步明確。