雍春娥*

（甘肅省靜寧縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，甘肅 平?jīng)?743400）

陰道炎是由于陰道的微生態(tài)平衡被打破或機(jī)體抵抗力下降導(dǎo)致外源性病原體侵入陰道而引起的炎癥性改變，常引起白帶的量、質(zhì)、色、氣味等異常或局部癢、疼痛等癥狀，是臨床常見的婦科疾病。臨床上常通過陰道分泌物的實(shí)驗(yàn)室檢查反映出女性是否存在陰道炎以及感染的病原體的類型，同時(shí)也是診療陰道感染最為重要的依據(jù)[1]。臨床常規(guī)采取0.9%氯化鈉溶液直接涂片法對(duì)女性陰道分泌物進(jìn)行檢查，近年來革蘭染色法廣泛應(yīng)用于臨床，另外還有細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR檢驗(yàn)法。為探討分析對(duì)陰道細(xì)菌感染的有效檢測(cè)方法，本研究對(duì)實(shí)驗(yàn)室常用的3種細(xì)菌檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)效果結(jié)合臨床進(jìn)行對(duì)比分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：隨機(jī)選取2016年1～12月來靜寧縣人民醫(yī)院婦科門診就診的94例婦科陰道炎患者作為研究對(duì)象?；颊吣曜畲鬄?5歲，最小為

20歲，平均年齡（36.12±2.01）歲。所有患者取標(biāo)本前2周內(nèi)無全身及陰道用藥史。所有患者均有陰道瘙癢、白帶異常等陰道炎常見癥狀，臨床初步診斷為陰道炎。所有患者均簽署知情同意書。

1.2 采集標(biāo)本：患者取截石位，醫(yī)護(hù)人員通過窺陰器將陰道擴(kuò)張后，用無菌棉簽從陰道穹隆后方、陰道深處或?qū)m頸口輕柔旋轉(zhuǎn)采集分泌物樣品，避免接觸到外陰部和陰道口，尚無性生活者取其陰道口分泌物，然后將其置于試管中，試管中溶液為無菌0.9%氯化鈉溶液[2]。所有樣本均取3份，分別進(jìn)行3種不同方法的檢驗(yàn)。

1.3 方法[3]：提取患者陰道分泌物，分別采用革蘭染色法、細(xì)菌培養(yǎng)和PCR檢驗(yàn)法進(jìn)行細(xì)菌檢測(cè)。然后對(duì)比分析3種不同檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)結(jié)果。革蘭染色法：將清潔薄片放入95%的乙醇中浸泡后取出擦拭干凈。然后將分泌物均勻涂布于玻片上，在顯微鏡下觀察細(xì)菌情況并判定感染的細(xì)菌類型。細(xì)菌培養(yǎng)法：將分泌物標(biāo)本接種到專用的細(xì)菌分離培養(yǎng)基上，然后將其放入到二氧化碳培養(yǎng)箱中35 ℃溫度下培養(yǎng)48 h，通過觀察選擇光滑的、半透明水滴型菌落進(jìn)行生化檢驗(yàn)并判定細(xì)菌類型。PCR檢驗(yàn)法：在0.9%氯化鈉溶液中加入50 μL陰道分泌物，以12000 r/min的速度離心10 min后，去除上清液并加入堿性裂解液。然后將其放入溫箱進(jìn)行加熱，在98 ℃溫度中加熱10 min，再次用12000 r/min的速度離心5 min，取上清液制作DNA模板。未添加DNA的樣本為陰性對(duì)照組，添加DNA的為陽性組。通過計(jì)算樣本大小判定細(xì)菌類型。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件中進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2比較，以率（%）表示，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

革蘭染色法陽性率為43.6%，細(xì)菌培養(yǎng)法陽性率為78.7%，PCR檢驗(yàn)法陽性率為75.5%。二者比較后得出以下結(jié)果：革蘭染色檢驗(yàn)法對(duì)細(xì)菌的檢出率低于細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR檢驗(yàn)法，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；細(xì)菌培養(yǎng)法與PCR檢驗(yàn)法檢出率均較高，二者之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 陰道細(xì)菌的四種檢驗(yàn)方法檢查結(jié)果對(duì)比[n（%）]

3 討 論

健康女性的陰道內(nèi)寄居著大量微生物，其中以陰道乳酸桿菌為主要優(yōu)勢(shì)菌，其能夠降低陰道pH值，維持陰道正常的酸性環(huán)境，保護(hù)菌群平衡，當(dāng)某些原因，如性行為不潔、頻繁性生活、機(jī)體免疫力下降、婦科手術(shù)等外界因素影響時(shí)，可破壞陰道正常菌群平衡，一些致病菌趁虛而入，生殖道正常菌群（乳酸桿菌）數(shù)量減少，厭氧菌群（莫比倫式菌屬、類桿菌屬族、加德納菌、消化鏈球菌屬和人型支原體屬等）數(shù)量增加，陰道微生態(tài)平衡打破，從而引起陰道炎癥[4]?；颊咧饕憩F(xiàn)為白帶的量、氣味和性狀等異常、外陰部瘙癢等臨床癥狀，影響女性的正常生活。若不及時(shí)治療或治療不當(dāng)均可能引起更為嚴(yán)重的后果，如盆腔炎、異常子宮出血、子宮內(nèi)膜炎、不孕和流產(chǎn)等[5]。近年來臨床抗生素與免疫抑制劑廣泛過度使用破壞正常引導(dǎo)的酸堿平衡，同時(shí)由于思想開放女性多個(gè)性伴侶及流產(chǎn)，另外衛(wèi)生用品質(zhì)量隱患等多種因素影響，陰道炎癥發(fā)病率仍在持續(xù)上升。所以，通過實(shí)驗(yàn)室檢查明確致菌體類型是臨床針對(duì)性治療的前提條件，可有效避免抗生素藥物應(yīng)用的不合理以及確保治療的有效性，同時(shí)可避免過度用藥進(jìn)一步破壞陰道的酸堿平衡，為患者最后的治愈提供最終的治療方案。

在本研究中，我們隨機(jī)選取來我院接受檢查的94例初步診斷為陰道炎的患者，分別用目前臨床上較為常用的3種陰道細(xì)菌檢驗(yàn)方法對(duì)每位患者的陰道分泌物進(jìn)行鑒定，分別是革蘭染色法、細(xì)菌培養(yǎng)法、PCR檢驗(yàn)法最后對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果顯示革蘭染色法的檢出率低于細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR檢驗(yàn)法的檢出更高更準(zhǔn)確，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。目前臨床上最為常用且簡(jiǎn)單易行的陰道分泌物細(xì)菌檢查的方法為革蘭染色法，但細(xì)菌檢出的陽性率較低；從分析結(jié)果可見細(xì)菌培養(yǎng)法在臨床應(yīng)用中效果顯著，但由于檢驗(yàn)過程耗時(shí)太長(zhǎng)，環(huán)節(jié)復(fù)雜，且操作不當(dāng)容易混有其他細(xì)菌或難以培養(yǎng)出目標(biāo)菌群，對(duì)檢驗(yàn)人員操作水平和環(huán)境要求高，因此在基層醫(yī)院中很難展開；結(jié)果可見PCR檢驗(yàn)法在臨床應(yīng)用中的細(xì)菌檢出率也較高，且結(jié)果特異性高、細(xì)菌的靈敏度強(qiáng)，對(duì)雜菌的判斷較明顯，操作簡(jiǎn)單快速，一般在2～4 h就可以完成，實(shí)驗(yàn)過程中對(duì)標(biāo)本的純度要求低，隨著科技進(jìn)步，PCR技術(shù)的自動(dòng)化減少了人為因素的干預(yù)。因此，通過本次研究，結(jié)合臨床應(yīng)用實(shí)際，PCR檢驗(yàn)法較其他兩種檢驗(yàn)方法具有明顯的優(yōu)勢(shì)，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

綜上所述，PCR檢驗(yàn)法較革蘭染色法和細(xì)菌培養(yǎng)法在陰道分泌物細(xì)菌檢驗(yàn)中具有較多的優(yōu)勢(shì)，如細(xì)菌敏感度和特異性高，操作簡(jiǎn)單方便，減少人為干預(yù)，故在細(xì)菌性陰道炎患者臨床檢驗(yàn)中可以進(jìn)行推廣和使用，以指導(dǎo)臨床診斷和治療。