于文蛟,王苗苗,韓 飛,李慕春
(新疆維吾爾自治區(qū)分析測(cè)試研究院,新疆烏魯木齊 830011)
核桃(Juglans regia L.)又名胡桃、羌桃,為胡桃科(Juglandaceae) 胡桃屬(Juglans) 植物,是一種具有很高藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的珍貴果木[1-3]。核桃原產(chǎn)于亞洲西部,自漢代時(shí)傳入我國(guó),至今己有1 700多年的栽培歷史,目前我國(guó)的栽培面積居世界首位。臨床上,核桃廣泛用于治療泌尿系統(tǒng)結(jié)石、慢性氣管炎、皮炎、濕疹及痢疾等疾病[4-7]。核桃仁又名胡桃肉、萬(wàn)歲子,富含油脂、蛋白質(zhì)及維生素等營(yíng)養(yǎng)成分。據(jù)《本草綱目》記載,核桃仁能補(bǔ)氣益血、潤(rùn)燥化痰、溫肺潤(rùn)腸,且味甘性平[8]?!堕_(kāi)寶本草》曰:核桃仁,食之令人強(qiáng)健、潤(rùn)肌、黑發(fā)須。分心木是核桃果核的干燥木質(zhì)隔膜,味苦、澀,性平,入脾、腎經(jīng),具有補(bǔ)腎、抑菌、抗氧化等功效[9]。核桃殼富含黃酮類化合物和胡桃醌,具有增強(qiáng)免疫力、化感、消炎、抗菌、抗癌等功效[10-12]。
植物多酚(Plant polyphenol)是多羥基酚類化合物的總稱,又叫植物單寧,是天然植物中分離提純的多種酚類化合物的復(fù)合體,廣泛存在于蔬菜、水果、豆類、谷物類、茶等植物中[13-14]。植物多酚具有很強(qiáng)的抗氧化能力,能清除人體過(guò)剩的自由基,它在油脂、食品、醫(yī)藥、日化、輕化、化妝品、保健品和環(huán)境等諸多方面具有廣闊的應(yīng)用前景,并被專家譽(yù)為21世紀(jì)對(duì)人類健康產(chǎn)生巨大影響的化合物[15-18]。近年來(lái),隨著多酚等植物次生代謝物質(zhì)在醫(yī)療保健方面研究的深入,日益受到人們的關(guān)注。
目前,以核桃為藥源植物的研究大都只局限于單一品種,且針對(duì)核桃仁的較多,而對(duì)不同品種及不同部位中多酚的分布特點(diǎn)研究鮮有報(bào)道。試驗(yàn)以3個(gè)不同地區(qū)的核桃品種為試材,比較分析不同的核桃品種及其在核桃殼、核桃仁和分心木的多酚含量,以期明確多酚在核桃不同部位的分布規(guī)律及品種間的差異,從而為核桃的開(kāi)發(fā)利用和良種選育提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支持。
阿克蘇核桃,新疆天山林果業(yè)食品有限公司提供;和田薄皮核桃,新疆八大怪食品有限公司提供;鞏留野核桃,新疆伊犁鞏留縣提供。
無(wú)水碳酸鈉,西安化學(xué)試劑廠提供;福林酚試劑(FC試劑),新疆新隆昌實(shí)驗(yàn)器材有限公司提供;無(wú)水乙醇,西安化學(xué)試劑廠提供;一水合沒(méi)食子酸,天津光復(fù)精細(xì)化工研究所提供;石油醚(60~90℃),天津市富宇精細(xì)化工有限公司提供。以上試劑均為分析純。
UV-2700型紫外分光光度計(jì),日本島津公司產(chǎn)品;碎樣機(jī),飛利浦公司產(chǎn)品;密封式化驗(yàn)制樣粉碎機(jī),南昌通化化驗(yàn)制樣機(jī)廠產(chǎn)品;電子天平,賽多利斯科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品。
2.1.1 核桃仁處理
取無(wú)皮核桃樣品機(jī)械破碎,取出核桃仁粉碎,稱取1.00 g粉碎樣品,加入50 mL 60%乙醇在55℃下回流30 min,過(guò)濾后收集濾液。濾渣用相同提取工藝提取2次,3次濾液合并后用60%乙醇定量,蒸餾除去乙醇后的溶液用去離子水定容到50 mL;石油醚等體積萃取2次,除去脂溶性雜質(zhì),水相樣品溶液低溫避光保存,備用。
2.1.2 核桃殼處理
取無(wú)皮核桃樣品機(jī)械破碎,取出核桃殼粉碎,過(guò)40目,稱取0.50 g粉碎樣品,加入50 mL 60%乙醇在55℃下回流30 min,過(guò)濾后收集濾液。濾渣用相同提取工藝提取2次,3次濾液合并后用60%乙醇定量,低溫避光保存,備用。
2.1.3 核桃分心木處理
取無(wú)皮核桃樣品機(jī)械破碎,取出核桃分心木粉碎,稱取0.50 g粉碎樣品,加入50 mL 60%乙醇在55℃下回流30 min,過(guò)濾后收集濾液。濾渣用相同提取工藝提取2次,3次濾液合并后用60%乙醇定量,低溫避光保存,備用。
準(zhǔn)確稱取一水合沒(méi)食子酸0.110 0 g,溶于100 mL去離子水中,攪拌使之充分溶解,然后轉(zhuǎn)移到250 mL容量瓶中,定容,充分混勻。取上述溶液10 mL,定容至100 mL,充分混勻,所得溶液即為質(zhì)量濃度為0.04 mg/L的沒(méi)食子酸溶液。
從其中分別吸取0,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL轉(zhuǎn)移至25 mL比色皿中,然后分別加入2 mL FC試劑、10 mL 10%Na2CO3溶液,搖勻,于50℃下恒溫水浴中避光反應(yīng)1 h,以濃度為零的反應(yīng)液為空白,于波長(zhǎng)765 nm處測(cè)定吸光度。得沒(méi)食子酸質(zhì)量濃度(X) 與吸光度(Y) 之間的直線方程Y=0.113 41X+0.022 16 (R2=0.997 96)。
沒(méi)食子酸測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖1。
圖1 沒(méi)食子酸測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線
分別取適量各種已提取的核桃樣品于25 mL比色管中,然后分別加入2 mL FC試劑、10 mL 10%Na2CO3溶液,搖勻,于50℃下恒溫水浴中避光反應(yīng)1 h,于波長(zhǎng)765 nm處測(cè)定吸光度。
表1 9個(gè)核桃樣品中多酚含量測(cè)定結(jié)果(n=3,±s)
表1 9個(gè)核桃樣品中多酚含量測(cè)定結(jié)果(n=3,±s)
核桃樣品 含量/%核桃仁(阿克蘇)核桃仁(和田)核桃仁(伊犁鞏留)核桃殼(阿克蘇)核桃殼(和田)核桃殼(伊犁鞏留)核桃分心木(阿克蘇)核桃分心木(和田)核桃分心木(伊犁鞏留)1.5 9 2 7±0.0 3 9 9 1.4 3 9 5±0.0 6 7 8 1.7 6 0 6±0.0 6 7 6 0.0 9 1 4±0.0 1 0 7 0.0 4 1 0±0.0 0 3 0 0.0 9 9 4±0.0 0 8 0 0.8 7 5 7±0.0 1 1 7 0.6 3 1 4±0.0 0 3 4 1.1 1 9 8±0.0 0 9 6
不同地區(qū)石榴不同部位間多酚含量的比較見(jiàn)圖2。
圖2 不同地區(qū)石榴不同部位間多酚含量的比較
由表1和圖2可知,3個(gè)不同地區(qū)核桃不同部位的多酚含量各不相同,其平均值分別為核桃仁1.60%,核桃殼0.08%,核桃分心木0.88%,核桃仁中多酚含量最高,顯著高于其他器官,其次是核桃分心木,為核桃仁多酚含量的43.9%~63.6%,核桃殼中多酚含量最低,僅為核桃仁中多酚含量的2.8%~5.7%。由此可見(jiàn),核桃仁和核桃分心木是核桃多酚的集中分布部位。
由表1和圖2可知,在核桃仁中,鞏留野核桃的多酚含量最高,為1.76%,阿克蘇核桃的多酚含量次之,為1.59%,和田薄皮核桃的多酚含量最少,為1.44%。在核桃殼中,鞏留野核桃的多酚含量最高,為0.10%,阿克蘇核桃的多酚的含量次之,為0.09%,和田薄皮核桃的多酚含量最少,為0.04%。在核桃分心木中,鞏留野核桃多酚含量最高,為1.12%,阿克蘇核桃的多酚含量次之,為0.88%,和田薄皮核桃的多酚含量最少,為0.63%。結(jié)果表明,3個(gè)不同地區(qū)核桃多酚含量各不相同,其平均值分別為鞏留野核桃0.99%,阿克蘇核桃0.85%,和田薄皮核桃0.70%。由此可見(jiàn),鞏留野核桃的多酚含量高于其他2個(gè)地區(qū)的核桃。
綜上所述,比較同一種核桃的不同部位中,核桃仁的多酚含量最高,核桃殼的多酚含量最低。在核桃仁、核桃殼、核桃分心木中,伊犁鞏留野核桃的多酚含量均為最高的,阿克蘇核桃的多酚含量次之,和田薄皮核桃的多酚含量最少。研究結(jié)果為核桃開(kāi)發(fā)多酚相關(guān)功能食品或藥品提供了一定的理論基礎(chǔ)和試驗(yàn)依據(jù),對(duì)于提高核桃的附加值和核桃資源的有效利用具有重要意義。