白艷艷,張 斌,劉健鵬,韓 斌，郝玉青,高 艷,劉萬華

(1.榆林市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,陜西榆林 719000；2.榆林市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,陜西榆林 719000)

副豬嗜血桿菌病是由副豬嗜血桿菌(Haemophilusparasuis,HPS)引起豬的一種高致病性傳染病，主要危害2周齡～4月齡的豬，5周齡～8周齡仔豬多發(fā)[1-2],發(fā)病率為10%～15%，有窩發(fā)特點(diǎn)，病死率可高達(dá)50%以上。發(fā)病豬主要表現(xiàn)胸膜炎、腹膜炎、心包炎、肺炎、關(guān)節(jié)炎及腦炎等[3-5]。

2017年2月22日,榆林市某豬場(chǎng)豬只出現(xiàn)高熱、拉稀、全身點(diǎn)狀出血、死亡等癥狀。先后使用保本傳奇、止痢王、先鋒霉素、地塞米松等藥物治療，效果不明顯。2月28日發(fā)病仔豬開始出現(xiàn)死亡，之后出現(xiàn)大批量死亡。3月20日，對(duì)該病進(jìn)行了現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查、實(shí)驗(yàn)室診斷和流行病學(xué)調(diào)查[6]。

1 材料與方法

1.1 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查

采取問卷調(diào)查的方式對(duì)該豬場(chǎng)內(nèi)基本情況、免疫情況、發(fā)病情況、治療用藥情況、采取的措施及效果、周邊環(huán)境、飼養(yǎng)管理模式等進(jìn)行調(diào)查。

1.2 病理剖檢

剖檢病死仔豬，觀察主要病理變化。

1.3 實(shí)驗(yàn)室診斷

無菌采集5頭病死仔豬的肝臟、脾臟、肺臟樣品，分別采用副豬嗜血桿菌、豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬圓環(huán)病毒2型的PCR或RT-PCR檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒購自北京億森寶公司(批號(hào)分別為20161102、20170113、20161221、20161102)。

1.4 數(shù)據(jù)處理分析

對(duì)收集的數(shù)據(jù)，利用Excel進(jìn)行整理，采用EPIINFO7.2軟件進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，卡方(x2)檢驗(yàn)顯著性水準(zhǔn)設(shè)為0.05，P<0.05為差異顯著。采用描述性流行病學(xué)方法進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查結(jié)果

2.1.1 基本情況 該豬場(chǎng)位于榆林市榆陽區(qū)某鎮(zhèn)，布局簡(jiǎn)單，不分生產(chǎn)區(qū)和生活區(qū)。只有一棟簡(jiǎn)易的豬舍，衛(wèi)生條件差，無生物安全措施。該畜主去年養(yǎng)豬14頭，其中母豬1頭，仔豬3頭，育肥豬10頭，在未引入新仔豬之前都沒有臨床發(fā)病豬。于2017年2月16日在馬合集市以700元1頭的價(jià)格購買了100頭1月齡仔豬，購買時(shí)仔豬健康，無任何檢疫證明和免疫證明。周圍3 km內(nèi)有1戶養(yǎng)豬戶，養(yǎng)育肥豬20只，調(diào)查時(shí)該戶養(yǎng)殖情況正常。

2.1.2 飼養(yǎng)管理情況 場(chǎng)內(nèi)飼料由瑞斯預(yù)混料混合玉米、麩皮等制成，無霉變異常。飼養(yǎng)由養(yǎng)殖戶夫婦2人負(fù)責(zé)，場(chǎng)內(nèi)管理較混亂、環(huán)境差，對(duì)進(jìn)場(chǎng)車輛和人員沒有消毒措施。

2.1.3 免疫情況 以前飼養(yǎng)的14頭豬無任何免疫記錄，新購入的仔豬在出現(xiàn)拉稀、死亡等癥狀后，分別于3月6日和3月19日接種豬瘟、豬丹毒、豬肺疫三聯(lián)苗和豬瘟脾淋苗，除此之外沒有其他免疫記錄。

2.1.4 治療用藥情況 豬發(fā)病初期,使用保本傳奇、止痢王、先鋒霉素、地塞米松、利巴韋林等藥物治療，治療過的仔豬癥狀有所緩解，但其他仔豬先后又出現(xiàn)拉稀、高熱等癥狀。3月17日拌料使用支原凈、金霉素、阿莫西林、黃芪多糖、卡那霉素、長效土霉素等藥物，效果不明顯。

2.2 臨床表現(xiàn)

2017年2月22日,新購仔豬開始出現(xiàn)拉稀，呈灰色或黃色糞便，2 d～5 d后陸續(xù)出現(xiàn)高熱至41.5℃，扎堆、消瘦、被毛凌亂、食欲減退、相繼死亡等癥狀。全身點(diǎn)狀或整片出血，耳后有滲出性黏液和結(jié)痂(圖1)。從發(fā)病到死亡最短2 d，最長5 d。

2.3 剖檢變化

病死豬剖檢可見全身有出血點(diǎn)或出血斑，肺部息肉樣變，腎臟腫大有針尖狀出血點(diǎn)，脾臟腫大梗死，膀胱有出血點(diǎn)，腹股溝淺淋巴結(jié)腫大和出血，腹腔和胸腔有果凍樣積液及滲出，心包積液，有纖維性滲出液，呈多發(fā)性纖維素性漿膜炎(圖2)。

圖1 發(fā)病豬皮膚出血點(diǎn)和出血斑

1.腎臟出血點(diǎn)；2.胸腔積液；3.肺臟息肉樣變；4.心包積液、有纖維性滲出1.Kidney hemorrhagic spots；2.Pleural effusion；3.Lung polypoid change；4.Pericardial effusion,fibrous exudation

2.4 流行病學(xué)特點(diǎn)

2.4.1 時(shí)間分布 該場(chǎng)于2017年2月22日開始發(fā)病，2月28出現(xiàn)第1例死亡，之后零星死亡，于3月6日注射豬瘟、豬丹毒、豬肺疫三聯(lián)苗，3月8日出現(xiàn)死亡高峰，當(dāng)日死亡7例，之后發(fā)病豬每天都有死亡，經(jīng)多次診治用藥無明顯效果，3月19日緊急免疫接種豬瘟疫苗4頭份，3月20日?qǐng)?bào)告我中心，3月24日注射副豬嗜血桿菌病疫苗。該豬場(chǎng)圈舍共存欄114頭豬，發(fā)病86頭，死亡74頭，疾病流行曲線見圖3。

2.4.2 空間分布 該養(yǎng)豬場(chǎng)位于榆林市榆陽區(qū)，其中母豬、育肥豬和仔豬共同飼養(yǎng)在1棟圈舍里，飼養(yǎng)模式極不合理，3棚仔豬均有發(fā)病(圖4)。

2.4.3 群間分布 該養(yǎng)殖戶共飼養(yǎng)豬114頭，其中母豬1頭，育肥豬10頭，仔豬103頭。發(fā)病86頭，死亡74頭，其中母豬和育肥豬的發(fā)病率為27.3%，

仔豬發(fā)病率為80.6%，仔豬病死率為89.2%，采用EPIINFO7.2軟件進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，仔豬發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)是母豬和育肥豬的11.066 7倍，OR(95%CI)=11.066 7(2.691 4～45.50)，P值0.000 5，差異顯著(表1)。

2.5 環(huán)境條件變化

據(jù)了解，發(fā)病前2天( 2月22日)天氣驟變，氣溫急劇下降，最低溫從0℃降至-15℃，并伴有降雪。經(jīng)查詢，2017年2月氣溫如圖5所示。

2.6 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果

對(duì)采集的5頭仔豬的病料進(jìn)行副豬嗜血桿菌、豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬圓環(huán)病毒2型PCR或RT-PCR 檢測(cè)，結(jié)果有4頭仔豬樣品為副豬嗜血桿菌陽性，2份為豬圓環(huán)病毒2型陽性，1份為豬瘟病毒陽性(圖6)。

圖3 榆林市某養(yǎng)殖戶豬發(fā)病流行曲線

圖4 豬舍布局

項(xiàng)目 Item發(fā)病/頭Incidence未發(fā)病/頭Health小計(jì)/頭Subtotal仔豬 Piglets8320103母豬和育肥豬 Sows and fattening pigs3811合計(jì) Total8628114

3 討論

根據(jù)剖檢變化和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，判定這是一起仔豬因應(yīng)激反應(yīng)引發(fā)副豬嗜血桿菌病暴發(fā)。副豬嗜血桿菌是豬上呼吸道的一種常見菌，屬于條件性致病菌，常在豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬圓環(huán)病毒2型、豬瘟病毒、豬偽狂犬病病毒及流感病毒等感染后繼發(fā)感染或并發(fā)感染[7]。由于該豬場(chǎng)豬舍幾乎無生物安全措施，對(duì)進(jìn)出的車輛、人員無消毒措施，豬舍也從來不消毒，導(dǎo)致豬舍中長期存在副豬嗜血桿菌、豬圓環(huán)病毒2型等病原。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果顯示1份為豬瘟病毒陽性，由于該養(yǎng)殖戶3月19日剛注射過豬瘟疫苗，并且無豬瘟的剖檢病理變化，說明該份樣品可能為豬瘟疫苗毒陽性。

副豬嗜血桿菌主要感染2周齡～4月齡豬，這起暴發(fā)副豬嗜血桿菌病的豬群都是1月齡的仔豬。引起仔豬應(yīng)激的主要原因有轉(zhuǎn)群、氣候變化、圈舍保溫措施不夠等[8-9]。此次引起仔豬應(yīng)激的可能原因是圈舍保溫措施不好，再加上發(fā)病前天氣驟變，氣溫急劇下降至最低溫-15℃，并伴有降雪，且豬群發(fā)病期間溫度波動(dòng)劇烈，造成仔豬應(yīng)激，機(jī)體抵抗力下降，最終導(dǎo)致仔豬發(fā)生副豬嗜血桿菌病。

圖5 榆林市榆陽區(qū)2017年2月氣溫變化圖

4 建議

該養(yǎng)殖戶在斷奶仔豬發(fā)病期間，曾給病豬注射了多種藥物，但效果不是很理想。根據(jù)調(diào)查分析結(jié)果，建議該養(yǎng)殖戶采取以下 防控措施：①購買來源可靠、免疫程序規(guī)范的規(guī)模豬場(chǎng)的仔豬；②建立有效的生物安全措施，改善舍內(nèi)外的衛(wèi)生狀況，徹底清理豬舍衛(wèi)生，對(duì)場(chǎng)地、用具、飲水定期消毒，加強(qiáng)保溫措施等[10-12]；③對(duì)全群豬用電解質(zhì)加維生素C粉飲水，以增強(qiáng)豬群抵抗力，減少應(yīng)激反應(yīng)[13]；④對(duì)病豬進(jìn)行隔離治療，同時(shí)對(duì)整個(gè)豬群采取嚴(yán)格的控制措施[14-15]；⑤免疫接種副豬嗜血桿菌疫苗。3月24日對(duì)仔豬免疫副豬嗜血桿菌疫苗后，仔豬的死亡開始逐漸減少，3月28日之后再無仔豬死亡現(xiàn)象，其他仔豬逐漸恢復(fù)正常。

1～5. 5份樣品；6.陽性對(duì)照；M.DNA標(biāo)準(zhǔn)DL 2 000；7.陰性對(duì)照

1-5. 5 samples;6. Positive control;M. DNA Marker DL 2 000;7. Negative control

圖6副豬嗜血桿菌RT-PCR檢測(cè)電泳圖

Fig.6 Electrophoresis of RT-PCR detection ofHaemophilusparasuis