王安可，畢毓芳，王玉魁，溫 星，李景鵬

(1.國家林業(yè)局竹子研究開發(fā)中心，浙江 杭州 310012； 2.浙江省竹子高效加工重點實驗室，浙江 杭州 310012)

竹材在人們生活中應(yīng)用非常廣泛，除了憑借其外表獨特和紋理通直等特點被大量加工成竹地板和竹家具外，還被用于制造竹案板、筷子、牙簽、樂器和工藝美術(shù)品等[1]。但竹材有一個限制其應(yīng)用價值的特點——不易腐，但易霉變[2]。目前現(xiàn)有的主要防霉技術(shù)有物理和化學(xué)2種方法。物理方法為煙熏、蒸煮及高溫?zé)崽幚淼?；化學(xué)方法為使用有機碘化物、三唑化合物、硼化物和銅基類防霉劑[3]。眾所周知，物理方法不能有效的防止竹材霉變，雖然這些常用的化學(xué)防霉劑添加技術(shù)可以在很大程度上抑制竹材的霉變，但是由于化學(xué)藥劑的毒性較大，因此限制了其在家居生活領(lǐng)域的應(yīng)用。隨著人們生活水平提高、生活模式與消費觀念的改變，開發(fā)更加環(huán)保有效的防霉技術(shù)也變的極為迫切。

植物精油是一類從植物中萃取的芳香味油狀液體，是一類優(yōu)良的天然抗菌材料。作為抗菌材料，植物精油具有以下優(yōu)點：(1)具有廣譜高效的抗菌活性[4]；(2)具有熏蒸特性、氣味芳香；(3)取自天然植物，綠色環(huán)保；(4)來源廣，提取容易。竹材是一種多孔結(jié)構(gòu)的材料并且縱向滲透性良好，這一特性使得其可作為精油緩釋的優(yōu)良載體。此外，植物精油因其多種優(yōu)點在抗菌領(lǐng)域具有巨大的潛在應(yīng)用價值[5-6]，若能有效抑制霉菌生長，在作為環(huán)保型竹材防霉劑的同時還可凈化環(huán)境空氣，舒緩情緒等。甚至可以根據(jù)精油特征，開發(fā)新型的竹材產(chǎn)品，進一步提高竹產(chǎn)品的附加值。

本研究選用生活中最常見的3種植物精油——雜熏衣草(Lavandulaangustifolia×latifolia)、茶樹(又稱白千層，Melaleucaalternifolia)和藍(lán)膠尤加利(又稱藍(lán)桉，Eucalyptusglobules)精油，初步研究其對3種常見竹材霉菌——黑曲霉(Aspergillusniger)、桔青霉(Penicillamcitrinum)和哈茨木霉(Trichogermaharzianum)的抗菌作用；并評估3種精油對竹材霉菌的防治效力。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗中所用的精油均采購自莉微兒(深圳)貿(mào)易有限公司；其中熏衣草精油原料為為法國雜薰衣草，茶樹精油原料為澳洲互葉白千層，藍(lán)膠尤加利精油原料為澳洲藍(lán)膠尤加利。所用菌種黑曲霉、桔青霉和哈茨木霉以及馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基均購自北京北納創(chuàng)聯(lián)生物科技有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1精油有效成分的測定 按照國家標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 12653-2008 中國熏衣草(精)油》、《GB/T 1886.270-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 茶樹油(又名互葉白千層油)》、《GB/T 1886.33-2015食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 桉葉油(藍(lán)桉油)》中規(guī)定的檢測程序設(shè)定，通過GC-MS檢測3種精油的有效成分；并按照國家標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 11538-2006 精油 毛細(xì)管柱氣相色譜分析 通用法》中所述的面積歸一化法計算主要成分含量。

1.2.2霉菌懸浮液的制備 將黑曲霉、桔青霉和哈茨木霉接種在含PDA培養(yǎng)基的90 mm培養(yǎng)皿中，溫度28℃、濕度80%±5%、暗培養(yǎng)7 d。將培養(yǎng)基表面的菌絲轉(zhuǎn)移到已滅菌的研缽中，加少許無菌生理鹽水研磨至無塊狀，后使用無菌棉球過濾，制備成懸濁液。使用血球計數(shù)板計數(shù)，用無菌生理鹽水將各菌懸浮液稀釋到終濃度為1×106個·mL-1，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3精油抗霉菌性檢測——牛津杯法 在90 mm培養(yǎng)皿中加入15 mL 2%的無菌瓊脂溶液，凝固后再加入20 mL已滅菌的PDA培養(yǎng)基。在每個制備好的平板中加入霉菌懸浮液200 μL，每種菌12個平板。在每個平板的中央插入一個無菌的牛津杯，每個牛津杯中加入精油150 μL。3個菌種與3種精油交叉處理，以未添加精油的平板為空白對照(CK)，重復(fù)3次，28 ℃暗培養(yǎng)10 d。拍照記錄結(jié)果。

1.2.4精油對竹材霉菌防治效力試驗 該項試驗方法基本參照國家標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 18261-2013 防霉劑對木材霉菌及變色菌防治效力的實驗方法》中關(guān)于實驗室內(nèi)竹材霉菌試驗的規(guī)定。本試驗只使用混菌法(1.2.2中的3種霉菌懸浮液等比例混合)對精油的防霉效力進行研究。

2 結(jié)果

2.1 精油的有效成分

通過GC/MS測得的精油化學(xué)組分見表1。結(jié)果顯示，薰衣草油的主要成分是芳樟醇(41.94%)、鄰氨基苯甲酸芳樟酯(31.66%)、樟腦(7.60%)，1，8-桉葉素(6.97%)、β-蒎烯(4.45%)和乙酸熏衣草酯(3.06%)；茶樹油的主要成分是松油烯-4-醇(53.06%)、γ-松油烯(20.45%)、P-傘花烴(10.23%)、異松油烯(9.36%)、α-松油烯(4.34%)和1，8-桉葉素(2.56%)；尤加利油的主要成分是1，8-桉葉素(72.58%)、P-傘花烴(15.95%)、苧烯(5.98%)和(-)-β-蒎烯(5.48%)。

表1 精油的特征組分含量Tab.1 Chemical components of essential oils

圖1 熏衣草、茶樹和尤加利精油對霉菌的抑菌結(jié)果Fig.1 Anti-mildew effects of Lavandula angustifolia,Melaleuca alternifolia and Eucalyptus globules essential oil

注：左上為未處理的竹材試件(CK)，右上為熏衣草精油處理的竹材試件，左下為尤加利精油處理的竹材試件，右下為茶樹精油處理的竹材試件。PS：Upleft is bamboo timbers without treatment (CK), upright is bamboo timbers with lavender oil treatment, downleft is bamboo timbers with eucalypt oil treatment and downright is bamboo timbers with tea tree oil treatment.圖2 精油對竹材的防霉效果Fig.2 Mouldproof effect of essential oils on bamboo

2.2 精油對霉菌的抑菌作用

為了研究熏衣草、茶樹和尤加利精油的抗霉菌性能，該試驗使用牛津杯抑菌圈法對黑曲霉、桔青霉和哈茨木霉進行測試。圖1中茶樹精油的3個處理都產(chǎn)生了明顯的抑菌圈，熏衣草精油對哈茨木霉的處理有明顯的抑菌圈，尤加利精油對桔青霉的處理有非常小的抑菌圈；其它處理均未見明顯抑菌圈。但是所有精油處理的平板與對照(CK)相比，菌的長勢都有非常明顯的減弱，說明3種供試精油對3種所試霉菌都有不同程度的抑制作用。

總體上，以精油為單位以菌的生長量作為衡量標(biāo)準(zhǔn)，圖中可以明顯看出對霉菌的抑菌效果從強到弱依次是茶樹>熏衣草>尤加利。但以單個菌種來說，抑菌效果的強弱有所不同。對黑曲霉的抑菌能力依次是茶樹>熏衣草>尤加利；其中茶樹與熏衣草的抑菌能力相差不大，幾乎黑曲霉的菌絲體和孢子都不能正常生長，只在平板中可見非常微弱的孢子初期萌發(fā)狀態(tài)；但是尤加利對黑曲霉的抑制作用非常微弱，在平板中可見菌體生長非常旺盛，但仍弱于CK。對桔青霉的抑菌能力依次是茶樹>尤加利>熏衣草，抑菌圈明顯為從大到小到無。對哈茨木霉的抑菌能力依次是熏衣草>茶樹>尤加利；熏衣草對哈茨木霉的抗性較強，可見非常明顯的抑菌圈，并且周圍菌的長勢非常微弱；茶樹處理可見明顯抑菌圈，但周圍仍見明顯白色菌絲；尤加利處理不僅沒有抑菌圈，平板中菌絲生長明顯，但與CK相比長勢較弱。

2.3 精油對竹材霉菌防治效力

根據(jù)國標(biāo)中的規(guī)定，在4周后觀察竹材試件表面的霉變面積(圖2)。在圖中可以清晰的看到，未經(jīng)處理的竹材試件(CK)感染面積為全部，感染值分級為4；經(jīng)過薰衣草、尤加利和茶樹精油處理的試件全部沒有被感染，感染值分級為0。該試驗結(jié)果說明試驗中所使用的薰衣草、尤加利和茶樹精油可以有效的防止竹材霉變。

此外，觀察試件下方的菌絲生長可以發(fā)現(xiàn)，放置了精油處理試樣的平板，培養(yǎng)基表面的霉菌數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于CK。并且精油試件正下方的霉菌也比平板邊緣少，尤其是尤加利和茶樹精油試件的下方，霉菌幾乎無法生長。這說明，精油揮發(fā)出的氣態(tài)物質(zhì)可以抑制霉菌生長，并且可能蒸汽濃度越大抑菌效果越好。

3 分析與討論

3.1 精油有效成分分析

由于植物受品種、種植地環(huán)境和栽培方式等因素的影響，蒸餾得到的精油組分會產(chǎn)生比較大的差別。目前許多國家對常見的植物精油制定了標(biāo)準(zhǔn)，對精油的一些特性作出了規(guī)定，以便評估其質(zhì)量。表2為我國對產(chǎn)自中國的熏衣草、茶樹和桉樹油的特征組分給出的標(biāo)準(zhǔn)。表3為國際(ISO)上對熏衣草(真實熏衣草[7](LavandulaangustifoliaMill.)、雜熏衣草[8](LavandulaangustifoliaMiller×latifoliaMedikus))、茶樹[9]和蘭桉[10]油的特征組分給出的標(biāo)準(zhǔn)。

表2 精油中國國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的特征組分Tab.2 GB standard components of essential oils

表3 精油國際標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的特征組分Tab.3 ISO standard components of essential oils

注：tr.指痕量
PS：The tr. means trace.

3.1.1熏衣草精油的主要有效成分分析 目前薰衣草的種類主要有狹葉薰衣草(True lavender，LavandulaangustifoliaMill，又稱真薰衣草)和寬葉薰衣草(Spike lavender，LavandulalatifoliaL.)。真熏衣草和雜熏衣草(狹葉和寬葉的自然雜交品種)是法國西南部(市場主流)傳統(tǒng)種植的精油生產(chǎn)品種。

但不論是ISO還是國標(biāo)(GB)，特征成分中都沒有涉及鄰氨基苯甲酸芳樟酯(這一成分是本研究所用熏衣草精油的主要成分)，而標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定含量較大的乙酸芳樟酯卻在所試精油中沒有發(fā)現(xiàn)。雖然這一結(jié)果與現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)相悖，但也并不是個例。采購自英國Aroma Trading Ltd.的真熏衣草(L.angustifolia)精油，其有效成分是芳樟醇34.5%和鄰氨基苯甲酸芳樟酯38.4%[11]。波蘭種植的5種熏衣草(L.angustifoliaL.)其精油的主要成分為芳樟醇23.9%～15.8%、鄰氨基苯甲酸芳樟酯12.3%～16%。種植在羅馬尼亞西部的L.angustifoliaL.精油的主要成分也是芳樟醇和鄰氨基苯甲酸芳樟酯[12]。Bayoub[13]還發(fā)現(xiàn)L.officinalisL.是以鄰氨基苯甲酸芳樟酯作為最主要的組分的(46.3%)。并且巧合的是含有大量鄰氨基苯甲酸芳樟酯的熏衣草精油，其中都不含有乙酸芳樟酯。結(jié)合本研究中的結(jié)果，筆者猜測本研究使用的雜熏衣草原料可能是L.angustifoliaL.與L.latifolia雜交的品種而不是主流L.angustifoliaMiller。

根據(jù)前人的研究，可以肯定的是國標(biāo)中規(guī)定的主要特征組分乙酸芳樟酯和芳樟醇[14-16]均有有效的抗菌性能[17]，且二者之間沒有協(xié)同作用[18]。目前還沒有關(guān)于鄰氨基苯甲酸芳樟酯抗菌能力的報道，所以關(guān)于其是否為有效的抗菌組分還有待研究。

3.1.2茶樹精油的主要有效成分分析 市面上大多數(shù)的茶樹油原料為互葉白千層(Melaleucaalternifolia)，但包鱗白千層(M.bracteata)、白油樹(M.quinquenervia)、石南葉白千層(M.ericifolia)、綠花白千層(M.viridiflora)、白千層(M.leucadendron)散花白千層(M.dissiliflora)和輪葉白千層(M.linariifolia)等也可以作為白千層油的原料[19]。由于種植混亂和原料價格等問題，許多茶樹油的品質(zhì)不穩(wěn)定，同一批次的茶樹油可能混雜了不同種的白千層原料。茶樹油的成分種類大體相同，但根據(jù)主成分的不同可分為不同的化學(xué)類型(不依賴植物學(xué)分類)，如松油烯-4-醇型、γ-松油烯型、桉葉素型、桉葉素-異松油烯型、桉葉素-松油烯-4-醇型等[20]；這些類型的不同與引種地和栽培環(huán)境有密切的關(guān)系[21]。本研究中使用的為松油烯-4-醇型白千層油，所含主要組分基本符合國際和國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)。

Terzi[22]對茶樹油和其主要組分松油烯-4-醇、γ-松油烯、1，8-桉葉素的抗菌性進行對比，發(fā)現(xiàn)這3種組分對Fusariumculmorum、Pyrenophoragraminea和Fusariumgraminearum均有抑制作用，其中松油烯-4-醇型尤為突出。Mondello[23]在對茶樹油及其成分松油烯-4-醇和1，8-桉葉素的抗菌(Candidaspp.)性比對時發(fā)現(xiàn)，松油烯-4-醇具有極強的抑菌功能，但1，8-桉葉素在所試濃度(4%)內(nèi)沒有發(fā)現(xiàn)有抑菌效果。由此，可以肯定的是松油烯-4-醇是茶樹油抗菌的主要活性成分。

3.1.3尤加利精油的主要有效成分分析 雖然桉(澳洲產(chǎn)區(qū)的多稱為尤加利)屬的品種較多，但所產(chǎn)精油的主成分均為1，8-桉葉素。這一點從有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)中可以證實，國標(biāo)中規(guī)定桉屬精油中1，8-桉葉素含量需≥80%(表2)，ISO規(guī)定其含量需≥60%(表3)才能認(rèn)定為合格的桉樹精油。

但另研究者意外的是，作為桉屬精油主要成分的1，8-桉葉素并不是非常有效的抑菌活性成分，在大多數(shù)研究中都被證實沒有抑菌活性。Vilela[24]比較了尤加利精油和1，8-桉葉素對曲霉屬的黃曲霉(A.flavusLink)和寄生曲霉(A.parasiticusSpeare)的抑菌活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)2.5%的精油添加，幾乎可以完全抑制黃曲霉和寄生曲霉的生長，但是1，8-桉葉素并不會抑制這2種菌的生長。SafaeiGhomi[25]也證實1，8-桉葉素對黑曲霉沒有抑制作用，但含有該成分的E.largiflorens對黑曲霉有抑菌活性。

雖然除了1，8-桉葉素外，桉樹精油還含有其它一些物質(zhì)，如對傘花烴和α-蒎烯等。其中據(jù)研究對傘花烴對念珠菌屬(Candidaspp.)有有效的抑制作用[26]，但是對Alternariaspp.、Fusariumspp.、Pythiumultimum和Phytophthoracapsici等真菌完全沒有抑制作用[27]。Filipowicz[28]發(fā)現(xiàn)對傘花烴和正反式α/β蒎烯對Candidaalbicans和一些細(xì)菌有抗菌作用。所以尤加利的抗菌可能是含量并不多的傘花烴和蒎烯等物質(zhì)引起的。

3.2 精油的防霉作用

3.2.1薰衣草精油的防霉作用 根據(jù)2.2和2.3的結(jié)果，可以肯定所試薰衣草精油對竹材致霉菌黑曲霉、桔青霉和哈茨木霉有抑制作用。但不能肯定所有的薰衣草精油均能很好的防止竹材霉變，因為有研究者在對同屬真菌進行試驗時，得出過不同的結(jié)果。如Císarová[29]發(fā)現(xiàn)添加0.625 μL·cm-3的熏衣草(L.angustifoliaMiller)精油可以完全抑制曲霉屬(Aspergillu)的黑曲霉和塔賓曲霉(A.tubingensis)的生長。Angioni[30]發(fā)現(xiàn)意大利薰衣草(LavandulastoechasL. ssp.stoechas)對曲霉屬的黃曲霉(A.flavus)有較弱的抑制所用(抑菌率17.6%～23.1%)。但Daferera[31]卻發(fā)現(xiàn)純薰衣草(L.angustifoliaMiller)精油對青霉菌(Penicilliumdigitatum)幾乎沒有抑制作用。

這些不同的結(jié)果有可能是由于精油的不同施用方法造成的。Inouye[32-33]有趣的發(fā)現(xiàn)薰衣草(作者沒有指出所用薰衣草的具體的拉丁名，只指出產(chǎn)自日本北海道)精油蒸汽可以抑制煙曲霉(Aspergillusfumigatus)的生長，但是液態(tài)的精油卻無法抑制其生長，當(dāng)移除薰衣草精油的蒸汽后，菌絲恢復(fù)生長。他還指出，薰衣草蒸汽會導(dǎo)致分生孢子發(fā)育不完全，這種抑制作用可能是抑制了真菌的呼吸作用而不是直接抑制其生長。在本研究中，筆者使用了牛津杯法和國標(biāo)防霉法。牛津杯法中，由于牛津杯下邊緣直接深入培養(yǎng)基，上邊緣幾乎與培養(yǎng)基上蓋相接，所以筆者認(rèn)為牛津杯法的抑菌途徑應(yīng)為液體接觸為主，氣態(tài)揮發(fā)為輔；而國標(biāo)法中，試件所吸收的精油并沒有直接接觸到霉菌本身，筆者認(rèn)為抑菌途徑為氣態(tài)。結(jié)果也發(fā)現(xiàn)國標(biāo)法的抑菌效果極為顯著，這也從另一方面印證了Inouye提出的薰衣草精油蒸汽對曲霉菌的抑制作用更為明顯。同時也不排除該試驗所用的2種方法都可能是精油通過揮發(fā)氣態(tài)物質(zhì)而非直接接觸產(chǎn)生抑菌效果。

此外，這些不同的結(jié)果很有可能是薰衣草在產(chǎn)地和品種上的差異造成的。不同種植地的薰衣草精油在有效成分含量上差異非常大，例如保加利亞產(chǎn)的薰衣草精油含51.9%的芳樟醇和9.5%的乙酸芳樟酯，法國產(chǎn)的含29.1%的芳樟醇和43.2%的乙酸芳樟酯。并且二者在對黑曲霉和赭曲霉(Aspergillusochraceus)的抗性上有一定區(qū)別[34]。

3.2.2尤加利精油的防霉作用 根據(jù)2.2中的結(jié)果，本研究中尤加利精油在牛津杯法這一試驗中對黑曲霉的抑制作用較為微弱，對哈茨木霉的抑菌效果也弱于其它2種精油。這一結(jié)果與許多前人的研究結(jié)果基本一致。蘇裕昌[35]等對4種桉葉(垂尾桉(Eucalyptusurophylla)、玫瑰桉(E.grandis)、赤桉(E.camaldulensis)及檸檬桉(E.citriodora))精油的抗真菌活性進行檢測，發(fā)現(xiàn)4種桉樹精油對棒曲霉(Aspergillusclavatu)、黑曲霉、桔青霉和綠色木霉(Trichodermaviride)在施用前期(7 d)都有非常明顯的抑制作用，但隨著時間的延長，抑菌效率會大大降低。尤其是4種桉樹對綠色木霉，以及垂尾桉和赤桉對棒曲霉、黑曲霉，檸檬桉對黑曲霉的抑菌活性在21 d時完全失效。Katooli[36]也發(fā)現(xiàn)赤桉(E.camaldulensisDehnh.)精油只在初期(3 d)對青霉菌和黃曲霉菌有抑制作用，在30 d時菌絲的生長與對照無差異。Císarová[29]發(fā)現(xiàn)添加0.625 μL·cm-3的尤加利(E.globulusLabill.)精油對黑曲霉和塔賓曲霉的抑制作用非常微弱。Safaeighomi[25]用Eucalyptuslargiflorens和Eucalyptusintertexta精油對黑曲霉進行抑菌試驗，發(fā)現(xiàn)只有E.largiflorens對黑曲霉有抑菌活性。

上述研究都表明，桉屬精油在對霉菌的長期抗菌作用中效果不佳。但本研究的結(jié)果卻發(fā)現(xiàn)藍(lán)膠尤加利精油對竹材防霉的效用非常明顯。這可能是由于：(1)處理竹材中含有大量的尤加利精油，4周的時間內(nèi)不會被完全的揮發(fā)，較高的精油濃度保證了抑菌效果；(2)尤加利精油的種類較多，對霉菌的抑菌效果與所用精油的原料品種有關(guān)；(3)與薰衣草精油類似，氣態(tài)的尤加利精油更能發(fā)揮其抑菌效果(這一猜想更能解釋在2.3中的結(jié)果，含尤加利精油的竹材試樣下方菌絲幾乎無法生長)。

3.2.3茶樹精油的防霉作用 不論是牛津杯法還是國標(biāo)法，茶樹精油都表現(xiàn)出卓越的抑菌性能。這一結(jié)果與前人的研究也相符合。Hammer[37]發(fā)現(xiàn)茶樹精油對黑曲霉、黃曲霉、煙曲霉和青霉菌(Penicilliumspp.)都有非常高的抑菌活性。Carson[38]對黑曲霉、煙曲霉、黃曲霉和青霉的試驗也獲得同樣的結(jié)果。Bishop[39]也證實茶樹油可以有效抑制黃曲霉的生長。

此外，Cox[40]經(jīng)過實驗發(fā)現(xiàn)，茶樹油可以抑制細(xì)菌和真菌的呼吸作用，并且可以增加細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜和真菌原生質(zhì)膜的滲透性；他提出茶樹油的抑菌原理可能是茶樹油中的萜類物質(zhì)破壞細(xì)胞膜，使細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)滲出，從而破壞其生長。Shao[41]也提出，真菌在接觸茶樹油后其細(xì)胞壁首先被破壞，緊接著生物質(zhì)膜的脂肪酸類型發(fā)生改變，這些變化直接導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)滲出，從而死亡。

4 總結(jié)及存在的問題

本研究選用的雜熏衣草、茶樹和藍(lán)膠尤加利精油對竹材防霉有良好的效果。根據(jù)研究結(jié)果及前人研究推測，精油中有效的抑菌活性成分可能是芳樟醇、松油烯-4-醇、傘花烴(含異構(gòu)體)和蒎烯(含異構(gòu)體)。此外，氣態(tài)的精油對黑曲霉、桔青霉和哈茨木霉的抑菌效果可能要強于液態(tài)的效果。

雖然研究證實雜熏衣草、茶樹和藍(lán)膠尤加利精油對黑曲霉、桔青霉和哈茨木霉的抑菌作用非常有效，但有以下幾個問題沒有解決：(1)精油容易揮發(fā)，當(dāng)竹材中的精油完全揮發(fā)殆盡時，霉菌是否會恢復(fù)生長。(2)如果確認(rèn)氣態(tài)的精油具有更強的防霉作用，如何解決施用技術(shù)的問題。(3)因為精油為天然提取物，每一批次的產(chǎn)品在主要物質(zhì)組成上都有一定的差異，如何保證其使用效果。(4)是否能根據(jù)精油的有效活性抑菌成分，研制更加經(jīng)濟有效的復(fù)合型防霉劑。