回瑞華,侯冬巖,李鐵純,刁全平
(鞍山師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,遼寧 鞍山 114007)
麥類是人類主要的糧食作物,其種類繁多包括大麥、小麥、蕎麥、燕麥、青稞等.麥類主要含有淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪、礦物質(zhì)、多糖等營養(yǎng)成分.作為日常主食,常見的有大餅油條、饅頭包子、面條、卷面、水餃和燒賣的皮等,還被加工成蛋糕面包、餅干茶食、休閑食品等方便食品.目前,對(duì)麥粉營養(yǎng)價(jià)值的研究比較多[1-3],而對(duì)于麥麩營養(yǎng)價(jià)值的研究較少.麥麩就是麥類磨取面粉后篩下的皮,是麥類加工成面粉后的副產(chǎn)品.研究表明,麥粉和麥麩中含有豐富的多糖[4],多糖是由10個(gè)以上單糖通過糖苷鍵連結(jié)而成的大分子物質(zhì).近年來研究發(fā)現(xiàn),多糖具有非常重要的生理活性,如消炎、抗癌、增強(qiáng)人體免疫力、抗衰老等作用[5-7].本研究以遼寧、山東、四川小麥麥粉和麥麩為原料,采用超聲法提取其多糖,用光譜法分析多糖含量[8-11],并對(duì)麥粉與麥麩多糖的含量進(jìn)行比較分析,為麥粉與麥麩的開發(fā)利用提供試驗(yàn)依據(jù).
儀器和試劑見表1.
表1 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
麥粉和麥麩:將產(chǎn)于遼寧、山東、四川的小麥粉碎、過篩后將小麥粉和皮分開,得到麥粉和麥麩,備用.
分別將1.2樣品1.000 0 g置于250 mL三角燒瓶中,分別用石油醚30 mL、乙醇30 mL超聲提取20 min,殘?jiān)鼡]干溶劑后,分別再用20 mL水超聲提取2次,每次30 min,過濾,合并兩次水提液,減壓濃縮至20 mL,再加乙醇至醇含量達(dá)85%,密閉靜置24 h.抽濾,濾餅用70%乙醇洗滌,除去乙醇,得多糖提取物,在60 ℃水浴溫度下用水溶解并定容至25 mL容量瓶中,搖勻,備用.
精密稱取干燥的無水葡萄糖0.025 0 g置于250 mL容量瓶中,加水至刻度,搖勻,備用.
從1.3樣品多糖的提取液中取1 mL于容量瓶中,分別加入5%苯酚1 mL、濃硫酸5 mL,搖勻,放置10 min后,40 ℃水浴加熱10 min再放置10 min,以相應(yīng)試劑為空白,在最大吸收波長處測其吸光度.
從1.4葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液中取1 mL溶液于容量瓶中,分別加入5%苯酚1 mL、濃硫酸5 mL,搖勻,放置10 min后,40 ℃水浴加熱10 min,再放置10 min,在200~800 nm范圍內(nèi)進(jìn)行波長掃描,如圖1.
從1.3樣品多糖的提取液中,取1 mL溶液置容量瓶中,分別加入5%苯酚1 mL、濃硫酸5 mL,搖勻,放置10 min后,40 ℃水浴加熱10 min,再放置10 min,在200~800 nm范圍內(nèi)進(jìn)行波長掃描,如圖2~7.
圖1 標(biāo)準(zhǔn)品的波長掃描圖 圖2 遼寧小麥粉的波長掃描圖
圖3 遼寧小麥麩的波長掃描圖 圖4 山東小麥粉的波長掃描圖
圖5 山東小麥麩的波長掃描圖 圖6 四川小麥粉的波長掃描圖
圖7 四川小麥麩的波長掃描圖
由圖1~7可知,標(biāo)準(zhǔn)品的波長掃描圖與樣品多糖的波長掃描圖基本一致,最大吸收波長為489.0 nm.因此,實(shí)驗(yàn)以葡萄糖作為麥粉與麥麩樣品多糖的標(biāo)準(zhǔn)品,測定波長為489.0 nm.
分別取0.20,0.30,0.40,0.50,0.60,0.70,0.80 mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,置10 mL容量瓶中,加水至1 mL,分別加入5%苯酚試液1 mL、濃硫酸5 mL,搖勻,放置10 min,40 ℃水浴加熱10 min,再放置10 min,于波長489.0 nm處測定吸光度.以葡萄糖的濃度(C)為橫坐標(biāo)、吸光度(A)為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖8.其線性回歸方程為A=0.064 7×C+0.017 9,相關(guān)系數(shù)r=0.998 8,說明葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品在2.847~11.428 6 μg/mL范圍內(nèi),A與濃度C呈良好線性關(guān)系,可按標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量分析.
圖8 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線
用與繪制吸收曲線相同方法配制的樣品進(jìn)行穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明:樣品放置120 min,測得其吸光度值基本不變,說明測定方法的穩(wěn)定性較好.
移取1.4中一定濃度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,按1.5方法,在標(biāo)準(zhǔn)曲線下測定吸光度A,求得標(biāo)準(zhǔn)偏差和變異系數(shù),結(jié)果列于表2中.
將1.3樣品多糖的提取液分別配制不同濃度的樣品液,按標(biāo)準(zhǔn)加入法加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液,按1.5方法操作,測定該方法的回收率,結(jié)果見表3.
表2 方法的精密度實(shí)驗(yàn)
表3 回收率實(shí)驗(yàn)
精密稱取1.000 0 g樣品,按1.3的條件提取制備樣品溶液.按1.5測定方法在測定波長λ=489.0 nm處測其吸光度,結(jié)果見表4.
表4 樣品多糖含量
由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,山東小麥和麥麩中多糖含量最高,四川小麥和麥麩中多糖含量次之,遼寧小麥和麥麩中多糖含量最低.同一地區(qū)的麥麩中多糖含量高于小麥中多糖含量.