王彥波 李穎 李湛

彎曲菌病是全球范圍內(nèi)胃腸炎的主要病因, 能引起散發(fā)性和地方流行性胃腸炎暴發(fā), 也是全球廣泛流行的人獸共患病原菌。在一些發(fā)達(dá)國家監(jiān)測(cè)中，彎曲菌在腹瀉病原譜中的構(gòu)成甚至超過沙門菌、志賀菌等傳統(tǒng)病原排在首位[1]。隨著我國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和國民生活模式的改變,彎曲菌感染監(jiān)測(cè)工作逐步受到重視[2]，尤其在中國疾病預(yù)防控制中心(CDC)推廣加強(qiáng)過濾法分離彎曲菌法后，彎曲菌檢測(cè)難點(diǎn)得到突破。北京市順義區(qū)CDC從2016年5月開始使用加強(qiáng)過濾法在腹瀉病例中進(jìn)行彎曲菌病原學(xué)監(jiān)測(cè)，彎曲菌檢測(cè)工作對(duì)掌握順義區(qū)彎曲菌感染狀況及流行變化趨勢(shì)，完善疾病監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)具有重要意義，現(xiàn)將2016年5月-2017年4月間檢測(cè)結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本采集 標(biāo)本采集自順義區(qū)2家哨點(diǎn)醫(yī)院腸道門診腹瀉病例糞便標(biāo)本，病例定義為以腹瀉為主要癥狀的病例，每日排便3次及以上，且糞便性狀異常(稀便、水樣便、粘液便或膿血便)等。樣本采集24 h內(nèi)送至區(qū)CDC進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)。2016年5月-2017年4月共采集腹瀉病例糞便標(biāo)本370份。

1.2細(xì)菌分離與鑒定 彎曲菌培養(yǎng)使用加強(qiáng)過濾法進(jìn)行分離培養(yǎng)[3]，檢測(cè)試劑耗材采購自青島中創(chuàng)生物制品公司。少許腹瀉病例糞便加入促生長(zhǎng)因子增菌液微需氧培養(yǎng)18 h；然后將增菌液滴加在鋪有0.45 μm直徑濾膜的karmali平板和哥倫比亞血平板上，風(fēng)干40 min，使菌液自然濾過，微需氧培養(yǎng)48 h；挑取平板上可疑菌落轉(zhuǎn)種karmali平板培養(yǎng)48 h后進(jìn)行生化鑒定。

1.3儀器與試劑 VITEK 2 COMPACT 微生物鑒定系統(tǒng)、NH(彎曲菌鑒定卡)鑒定卡購自法國梅里埃公司；空腸彎曲菌培養(yǎng)檢測(cè)試劑盒購自青島中創(chuàng)生物科技有限公司；彎曲菌生化檢測(cè)試劑盒購自青島中創(chuàng)生物科技有限公司；哥倫比亞血瓊脂平板和karmali培養(yǎng)基購自O(shè)XOID公司。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用Excel 2010對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

2 結(jié)果

2.1彎曲菌檢出季節(jié)分布 腹瀉糞便標(biāo)本中彎曲菌陽性檢出率7.03%(26/370)，26株彎曲菌中空腸彎曲菌構(gòu)成比為92.31%(24/26),結(jié)腸彎曲菌2株(2/26，表1和圖1)。

表1 各月份彎曲菌檢出情況

注：春季(2016年5月、2017年3-4月)，夏季(2016年6-8月)，秋季(2016年9-11月)，冬季(2016年12月-2017年2月)。圖1 4 個(gè)季節(jié)彎曲菌檢出率分布

2.2患者年齡與性別分布 26例彎曲菌檢測(cè)陽性的病例中，男性19例，女性7例； 15～40歲患者16例，41～60歲患者4例，61～87歲患者6例。

2.3患者職業(yè)分布 彎曲菌檢出陽性病例中，職業(yè)分布占據(jù)前三位的分別是家務(wù)及待業(yè)人員5名，構(gòu)成比為19.23%，農(nóng)民和工人3名，構(gòu)成比為11.54%，離退人員、干部職員及餐飲服務(wù)人員各2名，構(gòu)成比均為7.69%。

2.4臨床癥狀分布 26例彎曲菌感染病例中，17例被診斷為急性胃腸炎，5例診斷為感染性腹瀉，4例診斷為細(xì)菌性痢疾；其中3例病例有基礎(chǔ)病，2例為糖尿病，1例為冠心?。?6例病例各臨床癥狀出現(xiàn)的頻數(shù)為，腹瀉26例，腹痛17例，脫水12例，發(fā)熱8例，嘔吐2例。

2.5可疑食品分布及暴露史情況 彎曲菌檢測(cè)陽性病例主訴可疑食品包括蔬菜及水果、肉與肉制品、飲料、糧食及其制品等；可疑就餐地點(diǎn)包括家庭自制和在外就餐；可疑食品加工及包裝方式包括家庭自制、定型包裝、散裝、餐飲服務(wù)業(yè)現(xiàn)場(chǎng)加工等(表2)。

表2 彎曲菌感染病例暴露史情況

3 討論

3.1彎曲菌培養(yǎng)條件苛刻，菌落小，無特異識(shí)別特征，分離培養(yǎng)中極易被雜菌遮蔽，并且隨著變形桿菌等腸桿菌科細(xì)菌耐藥性的加劇，傳統(tǒng)基于抗生素抑制遮蔽菌的分離方法逐漸失去了分離彎曲菌的作用，因此自2000年后中國腹瀉病例中有關(guān)彎曲菌的研究幾乎處于停滯狀態(tài)，彎曲菌在全國病原譜中的構(gòu)成比極低[4-6]。2016年順義區(qū)CDC在日常監(jiān)測(cè)中運(yùn)用加強(qiáng)過濾法分離彎曲菌獲得了較高彎曲菌陽性檢出率，證明加強(qiáng)過濾法在腹瀉病例中分離彎曲菌具有較高的可行性。此次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，彎曲菌也是構(gòu)成順義區(qū)腹瀉病例病原譜的重要病原菌。

3.2監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，彎曲菌一年四季中流行強(qiáng)度無明顯變化，與沙門菌、副溶血弧菌、致瀉大腸埃希菌流行強(qiáng)度隨季節(jié)變化顯著有一定區(qū)別[7-10]。特別是在冬季，彎曲菌檢出率達(dá)到8.00%，說明在冬季腹瀉病例監(jiān)測(cè)中除關(guān)注病毒性腹瀉外還要高度關(guān)注彎曲菌造成的腹瀉。監(jiān)測(cè)結(jié)果還顯示，夏季彎曲菌反而呈現(xiàn)相對(duì)較低的流行強(qiáng)度，這可能與這一時(shí)段沙門菌、副溶血弧菌等病原高強(qiáng)度流行影響監(jiān)測(cè)敏感性有一定關(guān)聯(lián)。其次，15～40歲青壯年是感染彎曲菌的重要群體，應(yīng)該與這一年齡組社會(huì)活動(dòng)頻繁有一定關(guān)聯(lián)。而患者的職業(yè)分布較為分散，說明彎曲菌對(duì)所有人群均具有較高的感染機(jī)率，所有職業(yè)人群都應(yīng)關(guān)注這一病原的感染，特別是26個(gè)病例中有2例餐飲服務(wù)人員，這一人群對(duì)食源性感染傳播可造成巨大風(fēng)險(xiǎn)，值得關(guān)注。最后，從臨床癥狀分析看出，彎曲菌與沙門菌、志賀菌等侵襲性致病菌產(chǎn)生的臨床癥狀較為類似，所以病例大多診斷為急性胃腸炎，其中26個(gè)病例中有4例被診斷為細(xì)菌性痢疾，提示細(xì)菌性痢疾在臨床診斷上的誤區(qū)，除了志賀菌感染，彎曲菌也是造成痢疾樣癥狀感染的重要病原；26個(gè)病例中有8例出現(xiàn)了發(fā)熱，而嘔吐僅出現(xiàn)2例，說明彎曲菌與蠟樣芽胞桿菌、副溶血弧菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌等引起中毒型癥狀的病原有區(qū)別。

3.3從可疑食品和暴露史看出，蔬菜水果在可疑食品中占有一定比重。雖然彎曲菌是重要的人畜共患病原[11-14]，禽類和牲畜類動(dòng)物中普遍存在，但因?yàn)橹袊藳]有生食肉的習(xí)慣，所以肉及其制品在病例主訴的可疑食品中構(gòu)成比不高。蔬菜水果在可疑食品構(gòu)成比占到第一位，說明蔬菜水果與彎曲菌污染的生肉制品存在交叉污染，而生食水果蔬菜間接導(dǎo)致人感染彎曲菌。26例彎曲菌感染患者中24例都主訴由家庭感染為主，說明家庭在日常加工、儲(chǔ)存食品的不科學(xué)方式是導(dǎo)致彎曲菌感染的重要原因，集中餐飲場(chǎng)所反而不是彎曲菌感染的重要場(chǎng)所。

此次選取哨點(diǎn)醫(yī)院為兩家成人醫(yī)院，因此未覆蓋兒童病例，為更加全面了解彎曲菌感染狀況，建立和完善彎曲菌監(jiān)測(cè)體系應(yīng)成為將來腹瀉監(jiān)測(cè)的重要內(nèi)容。