王 麗*，王秀麗

（1.山東省聊城市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科聊城大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山東 聊城 252000；2.山東省聊城市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東 聊城 252000）

宮頸癌（Cervical Cancer，CC）是世界女性中最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率與死亡率僅次于乳腺癌而位居第二，其中80%以上的宮頸癌患者在發(fā)展中國家[1]。人乳頭瘤病毒（Human papilloma virus， HPV） 持續(xù)性感染是造成臨床上宮頸癌發(fā)生和發(fā)展的原因， HPV DNA幾乎在所有的宮頸癌中均可被檢測到[2]。在女性生殖道中，根據(jù)HPV致癌性的不同，可分為高危型（HRHPV），可能高危型和低危型（LR-HPV）。HPV16和HPV18是目前報道的最常見的與宮頸癌相關(guān)的型別，約70%以上的侵襲性宮頸癌是由這兩種型別的病毒感染引起[3]。

HPV的基因組中，使HPV病毒具有永生化和轉(zhuǎn)化的潛能主要與E6和E7兩個致癌蛋白有關(guān)。HPV整合是隨機的，同時也具有一定的傾向性，在脆性或異位斷裂位點等熱點區(qū)域[4]相對更易發(fā)生。本研究使用高通量全基因組測序方法對病毒整合事件進行檢測，探討了宮頸癌中HPV16整合與宮頸癌組織的臨床病理因素的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 研究對象

經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn)，收集2012年5月～2017年5月我院因?qū)m頸癌行根治術(shù)擁有完整臨床資料的患者36例。所有病例均經(jīng)病理學(xué)確證?；颊咝g(shù)前HPVNDA陽性，既往無CIN病史及宮頸錐切病史，無盆腔放療病史。

1.2 實驗方法

使用高通量基因測序和芯片捕獲方法在深圳華大基因公司進行測序分析。測序所得的序列在除去載體序列后取插入載體部分序列與NCBI 數(shù)據(jù)庫用在線BLAST程序比對，將所得的人基因組序列在NCBI-Map Viewer中進行查詢，了解病毒整合位置。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析。采用x2檢驗或者Fisher’s精確檢驗等對結(jié)果進行分析，P＜0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

HPV 16整合與宮頸癌的臨床分期相關(guān)，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。HPV16整合率在宮頸鱗癌，間質(zhì)浸潤深度≥1/2和淋巴血管間隙受累的病例中升高；HPV16整合率在其他病理因素中均無統(tǒng)計學(xué)意義，但可提示以上臨床病理因素與病毒整合的相關(guān)。

表1 HPV 16整合與宮頸癌臨床病理之間的關(guān)系

3 討 論

HPV感染后，和宿主發(fā)生的一系列事件促進細胞的惡性轉(zhuǎn)化， HPV發(fā)生整合，編碼E6和E7蛋白的轉(zhuǎn)錄子的表達和穩(wěn)定性提高，E6和E7蛋白能結(jié)合P53和pRb等細胞周期關(guān)鍵性調(diào)節(jié)蛋白并干擾其作用[5]。病毒整合導(dǎo)致了病毒癌基因E6和E7的持續(xù)性表達，也影響宿主DNA的功能。在本研究中，有29例標(biāo)本檢測到HPV16整合，其中12例樣本均檢測到2個以上整合位點，其中1例檢測到了23次整合，提示HPV16可能傾向多點整合到啟動子區(qū)域。

HPV16在Ib2-IIa的宮頸癌中整合事件出現(xiàn)的概率高于Ib1。HPV16的整合率在宮頸鱗癌，間質(zhì)浸潤深度≥1/2和淋巴血管間隙受累的病例中升高；HPV16整合率在其他病理因素統(tǒng)計中均無意義，但仍提示臨床病理因素與病毒整合有關(guān)，宮頸間質(zhì)浸潤深度≥1/2和淋巴血管間隙受累可能是病毒多次整合的高危因素之一。有研究顯示，HPV16整合狀態(tài)與臨床分期、病理類型、組織學(xué)分化相關(guān)不明顯，其整合狀態(tài)與預(yù)后無明顯關(guān)聯(lián)[6]。由于既往研究中均使用E2/E6基因比值計算病毒整合狀態(tài)，結(jié)果顯示與本研究略有不同，可能與研究使用的檢測方法不同有關(guān)。

綜上所述，在宮頸癌中，HPV16整合事件發(fā)生與頻率隨臨床分期加重而升高；在宮頸間質(zhì)浸潤深度≥1/2和淋巴血管間隙受累的樣本中整合事件更容易發(fā)生。