謝金東, 周建華, 李志雄, 楊燕燕, 俞春英, 王訓(xùn)立
(1. 福建中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心, 福州 350122;2. 福建省計(jì)劃生育科學(xué)技術(shù)研究所, 福州 350011)
在醫(yī)學(xué)生命科學(xué)研究中, 去勢(shì)手術(shù)是制作某些疾病動(dòng)物模型的常用手段。例如, 制作大鼠、犬前列腺增生動(dòng)物模型需要摘除睪丸; 骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型需要摘除老年雌性動(dòng)物卵巢等。不同種類、不同大小的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物, 因其體質(zhì)量、解剖結(jié)構(gòu)等不同, 對(duì)去勢(shì)手術(shù)的要求也不一樣。獼猴(Macaca Nulatta), 在生物進(jìn)化、生殖生理等方面與人類較為相似, 是研究人類疾病機(jī)制的理想動(dòng)物模型[1]。在研究獼猴前列腺增生動(dòng)物模型過(guò)程中, 我們對(duì)12只雄性獼猴實(shí)施了睪丸切除手術(shù)(去勢(shì)手術(shù)), 現(xiàn)把手術(shù)操作方法, 介紹如下。
普通級(jí)雄性獼猴, 12只, 年齡8~12歲, 體質(zhì)量7~12 kg,由福建省計(jì)劃生育科學(xué)技術(shù)研究所提供[閩林馴繁(2008-7)號(hào), SCXK(閩)2015-0002]。動(dòng)物單籠懸掛飼養(yǎng),籠具規(guī)格: 75 cm×80 cm×90 cm,[SYXK(閩)2015-0007]。適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后開(kāi)始實(shí)驗(yàn),所有實(shí)驗(yàn)操作符合動(dòng)物福利和倫理原則。
常規(guī)手術(shù)器械和消毒藥品。鹽酸氯胺酮注射液(2 mL、含0.3 g氯胺酮),沈陽(yáng)市獸藥廠出品;陸眠寧II注射液(40 mg/2 mL/支)(主要成分: 鹽酸塞拉嗪),鹿醒寧注射液(250 mg/2 mL/支)(主要成分:尼可剎米),吉林省華牧動(dòng)物保健品有限公司出品;注射用頭孢拉定(粉劑、1 g/瓶),浙江海正藥業(yè)股份有限公司出品。
1.3.1 術(shù)前準(zhǔn)備 預(yù)先清潔消毒手術(shù)室。徹底清潔墻壁、天花板及地面粉塵,保持手術(shù)臺(tái)及手術(shù)用具干凈整潔,不放置與手術(shù)無(wú)關(guān)物品; 提前1 h開(kāi)啟手術(shù)室紫外燈進(jìn)行消毒; 保持室內(nèi)溫度20~25 ℃。手術(shù)者(主刀與助手)2~3人,戴一次性(已滅菌的)口罩帽子與乳膠手套,穿手術(shù)衣,嚴(yán)格無(wú)菌操作。術(shù)前動(dòng)物禁食12 h,麻醉前檢查動(dòng)物精神狀況、排泄物等正常后,方可安排手術(shù)。
1.3.2 麻醉與手術(shù) 按8 mg/kg氯胺酮注射液肌肉注射, 同時(shí)肌肉注射陸眠寧II注射液0.07 mL/kg, 協(xié)同麻醉后, 仰躺, 四肢固定于手術(shù)臺(tái)上。此麻醉劑量下動(dòng)物在無(wú)催醒劑催醒的情況下, 一般在1.5 h后會(huì)自然蘇醒。術(shù)中觀察動(dòng)物的呼吸、心跳及體溫。陰囊剃毛備皮, 0.5%碘伏消毒, 75%消毒酒精脫碘后, 暴露陰囊中隔皮膚, 放置消毒好的方巾及洞巾, 用皮鉗固定。采用陰囊中隔皮膚切口, 切口長(zhǎng)度3~4 cm(以睪丸大小可剛好能用手?jǐn)D出為佳), 切開(kāi)皮膚, 注意不要傷及睪丸(圖1左)。分離睪丸與陰囊腔, 用手把一側(cè)睪丸往切口輕輕拉出, 用力不宜太大, 以免扯動(dòng)腹股溝管環(huán), 引起疝氣。依次分離并鉗夾輸精管、睪丸、附睪的動(dòng)靜脈和輸精管動(dòng)脈, 用3-0號(hào)PGLA可吸收縫線雙重結(jié)扎后, 切除睪丸及附睪。同法切除對(duì)側(cè)睪丸及附睪(圖1右)。最后觀察處理陰囊腔內(nèi)無(wú)出血及異物后, 灑上頭孢拉定粉約0.5 g。縫合陰囊中隔皮膚切口, 用3-0號(hào)PGLA縫線全層圓針連續(xù)內(nèi)縫,整齊創(chuàng)面, 涂0.5%碘伏消毒。最后,在腿部肌注頭孢拉定1 g,防感染。術(shù)后均不放置引流條,無(wú)需拆線。
圖1 獼猴睪丸摘除手術(shù)
1.3.2 術(shù)后護(hù)理 手術(shù)完后, 可肌注與陸眠寧II注射液同劑量的鹿醒寧注射液, 使動(dòng)物早些蘇醒, 恢復(fù)體溫, 以便于觀察術(shù)后動(dòng)物體況, 并密切觀察手術(shù)部位愈合情況。術(shù)后單籠懸掛飼養(yǎng), 飼喂方式不變。觀察室保持室溫20~26 ℃。本手術(shù)是小型手術(shù), 術(shù)后無(wú)使用鎮(zhèn)痛藥。手術(shù)第2日始, 每日肌注頭孢拉定1 g, 手術(shù)部位0.5%碘伏消毒, 防感染; 連續(xù)3 d。
實(shí)施手術(shù)12例,其中3只猴第2日見(jiàn)陰囊有腫脹現(xiàn)象, 說(shuō)明有術(shù)后陰囊出血或發(fā)生疝氣。經(jīng)按壓觸摸, 有一只腫脹較軟,有波動(dòng)感, 是出血引起。用10 mL注射器吸取約15 mL血樣液體后,注入0.5 g(2 mL)頭孢拉定注射液。另二只腫脹較硬,應(yīng)為發(fā)生疝氣。我們于下午再次麻醉手術(shù),切開(kāi)有腫脹一側(cè)陰囊皮膚,注意不要傷及腫脹內(nèi)容物。發(fā)現(xiàn)一只是腸系膜漏出,另一只為腸管漏出。腸系膜漏出者,慢慢用手指回納至腹腔; 腸管漏出者,擴(kuò)大(剪開(kāi))一點(diǎn)腹股溝管環(huán),慢慢用手指回納至腹腔。之后,用3-0號(hào)PGLA縫線包裹陰囊內(nèi)精索殘端,行疝囊口“8”字縫合閉合。陰囊皮膚切口縫合及抗炎同上,再手術(shù)后,恢復(fù)良好。
本實(shí)驗(yàn)采用的獼猴睪丸切除術(shù)與其它動(dòng)物的手術(shù)方法有所不同[2-6], 與人的傳統(tǒng)睪丸切除術(shù)相似[7,8],但另有其特點(diǎn)。為了特定的科研要求, 本文中12只實(shí)驗(yàn)猴均切除睪丸及附睪, 術(shù)后恢復(fù)觀察2個(gè)月后開(kāi)始給予藥物制作動(dòng)物模型。所有手術(shù)遵守?zé)o菌操作原則。特別是做疝氣手術(shù), 與人的手術(shù)有異[9], 不采用腹部切口, 而是在疝氣一邊的陰囊做切口復(fù)位,主要是考慮獼猴不宜在清醒狀態(tài)下輸液, 連續(xù)手術(shù),腹部切口創(chuàng)傷較大, 術(shù)后護(hù)理難度大, 不利受試動(dòng)物恢復(fù)體況。再者, 采用二種麻醉藥合用方法[10](同時(shí)肌肉內(nèi)注身8 mg/kg氯胺酮注射液和0.07 mL/kg陸眠寧II注射液), 較適用于獼猴手術(shù)操作, 簡(jiǎn)便且效果好。