葛高順，倪二茹，方宜臻，孟 琦，郭奕昌，謝華斌

(廈門大學(xué)附屬心血管病醫(yī)院檢驗科，福建廈門 361004)

近年來，世界衛(wèi)生組織報道，心血管疾病已是全球的頭號死因。研究發(fā)現(xiàn)細胞色素氧化酶P450家族中最重要的成員CYP2C19可影響許多心血管疾病常用藥物的代謝，如質(zhì)子泵抑制劑、抗血小板藥物等［1］。目前，已發(fā)現(xiàn)超過34種CYP2C19等位基因突變，根據(jù)基因型可將其分為以下4種表型:超快代謝型(UM)、快代謝型(EM)、中間代謝型(IM)和慢代謝型(PM)［2］。CYP2C19 基因突變可導(dǎo)致P450酶活性表現(xiàn)出遺傳多態(tài)性，使藥物活性具有明顯個體差異［3］，即基因型和表型差異與心血管疾病的療效，缺血缺氧性心血管事件或死亡率密切相關(guān)。所以通過CYP2C19基因型或表型合理用藥，可提高療效、降低藥物不良反應(yīng)的發(fā)生率［4］。目前，國內(nèi)外文獻報道顯示CYP2C19基因型或表型存在一定種族和地域差異，本文旨在了解廈門地區(qū)心血管疾病患者CYP2C19基因型與表型的分布特征，以期為廈門地區(qū)心血管疾病患者更合理的個體化用藥提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2016年4月～2018年4月廈門大學(xué)附屬心血管病醫(yī)院診斷為心血管疾病的患者2017例，其中男性1630例、女性387例。再根據(jù)患者年齡分為兩組:＜65歲組1031例，平均年齡55歲;≥65歲組986例，平均年齡73歲。

1.2 試劑與儀器 TL998A熒光檢測儀(西安天隆科技有限公司);測序反應(yīng)通用試劑盒(北京華夏時代基因科技發(fā)展有限公司)。

1.3 方法 采集受檢者空腹靜脈血2 ml于EDTA-K2抗凝真空管，按照試劑盒說明書進行外周血單個核細胞分離，分別加入具有探針的熒光檢測試劑 CYP2C19*2 9154G＞A(rs4244285)，CYP2C19*3 7948G＞A(rs4986893)，CYP2C19*17 806C＞T(rs12248560)進行雜交測序，判讀結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 22.0進行統(tǒng)計學(xué)分析，基因分布采用Hardy-Weinberg平衡定律檢驗，計數(shù)資料以%表示，各基因型與表型在不同性別、年齡、疾病類型、地區(qū)組間比較用Pearsonχ2檢驗分析差異性，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CYP2C19基因型分布情況 見表1。CYP2C19*2，CYP2C19*3及 CYP2C19*17等位基因突變率分別為 57.21%，10.61%和 0.99%，Hardy-Weinberg平衡定律檢驗CYP2C19*2存在偏差(χ2=10.19，P＜0.05)，CYP2C19*3(χ2=0.17，P=0.68)與 CYP2C19*17(χ2=0.05，P=0.82)在遺傳中穩(wěn)定不變，即數(shù)據(jù)來自同一孟德爾群體，具有群體代表性。

表1 CYP2C19基因型的分布

2.2 CYP2C19表型分布情況 見表2。

表2 CYP2C19表型的分布

超快代謝型(UM)、快代謝型(EM)、中間代謝型(IM)和慢代謝型(PM)檢出率分別為0.55%，35.35%，50.47%和13.63%。

2.3 性別對CYP2C19基因型與表型的影響 見表3。1630例男性和387例女性心血管疾病患者CYP2C19的基因型和表型分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.002～1.422，均P＞0.05)。

表3 CYP2C19基因型與表型在不同性別中的分布

2.4 年齡對CYP2C19基因型與表型的影響 見表4。1031例＜65歲和986例≥65歲的心血管疾病患者CYP2C19的基因型和表型分布差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.002～3.749，P＞0.05)。

表4 CYP2C19基因型和表型在不同年齡中的分布

2.5 不同疾病類型CYP2C19基因型與表型的分布 見表5。963例心肌梗死患者和1054例非心肌梗死的心血管疾病患者CYP2C19的基因型和表型分布差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.009～1.546，均P＞0.05)。心肌梗死組與非心肌梗死心血管疾病組的診斷與鑒別診斷，均由本院心內(nèi)科與心外科醫(yī)生嚴格根據(jù)臨床表現(xiàn)、特征性心電圖改變及實驗室檢查指標進行確診分組，且并發(fā)其他系統(tǒng)疾病無明顯差異。

2.6 不同地區(qū)間CYP2C19基因型與表型的比較見表6。結(jié)合本文和近年來文獻已報道結(jié)果，對廈門地區(qū)與南京等10個不同地區(qū)及國家數(shù)據(jù)進行比較。中國地區(qū)差異較小，廈門地區(qū)與南京、北京、武漢地區(qū)比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，與大連地區(qū)比較僅CYP2C19*2 GG基因，EM差異有統(tǒng)計學(xué)意義;亞洲地區(qū)差異也較小，與韓國、泰國比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義;與非亞洲地區(qū)比較差異較大，如與西班牙比較僅CYP2C19*3 AA，CYP2C19*17 TT基因差異無統(tǒng)計學(xué)意義，與俄羅斯、伊朗、土耳其等國家比較僅CYP2C19*3 AA基因，EM差異無統(tǒng)計學(xué)意義，其他差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。

表5 CYP2C19基因型和表型在不同疾病類型中的分布

表6 廈門地區(qū)與文獻報道其他地區(qū)的比較(%)

3 討論CYP2C19與經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(percutaneoustransluminalcoronary intervention，PCI)術(shù)后最常用的抗血小板藥物氯吡格雷的代謝密切相關(guān)。CYP2C19*2，CYP2C19*3等位基因突變可減弱氯吡格雷的抗血小板療效，而CYP2C19*17等位基因突變可增強其療效，根據(jù)基因型可分為4種代謝表型，各表型患者的藥物治療方案有所不同。近年研究發(fā)現(xiàn)，氯吡格雷抵抗(clopidogrel resistance，CPGR)是增加支架內(nèi)血栓、再梗死等不良心血管事件的一個危險標志［15］。本文結(jié)果顯示廈門地區(qū)人群缺乏CYP2C19*17 TT基因型患者，CYP2C19*17等位基因突變率小于1%，超快代謝型患者極少;而CYP2C19*2等位基因突變率則超過50%，中間代謝型患者也超過50%，慢代謝型患者比例高達13.63%，這類患者服用常規(guī)劑量的氯吡格雷可能療效不佳［16］。此外，該人群CYP2C19*2不符合Hardy-Weinberg平衡定律，CYP2C19*3與CYP2C19*17符合 Hardy-Weinberg平衡定律，與部分報道不完全一致，可能與不同地區(qū)人群的基因型分布存在一定差異有關(guān)［11，17］。比 較 不 同 性 別、年 齡、疾 病 類 型 組CYP2C19基因型與表型的頻數(shù)頻率分布差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，而不同地區(qū)間CYP2C19基因型與表型存在不同的差異，與大部分報道相符。廈門地區(qū)與南京、北京、武漢等地區(qū)及韓國、泰國比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義;與大連地區(qū)比較僅CYP2C19*2 GG基因、快代謝型差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其他基因型與表型差異無統(tǒng)計學(xué)意義;與西班牙、俄羅斯、伊朗、土耳其等國家比較差異較大。綜上，亞洲地區(qū)與非亞洲地區(qū)相比，CYP2C19*2，CYP2C19*3等位基因突變率較高，CYP2C19*17等位基因突變率較低，慢代謝型與中間代謝型患者比例較高，超快代謝型患者比例較低。由此可推測，不同地區(qū)及國家患者使用CYP2C19可影響的 藥物治療時劑量應(yīng)有所差異，而廈門地區(qū)心血管疾病患者慢代謝型分布的比例較高，檢測CYP2C19基因有助于心血管疾病患者的個體化藥物治療，特別是PCI術(shù)后的抗血小板治療。參考文獻:

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