孟永亮，孫彥

（齊魯醫(yī)藥學(xué)院，山東 淄博 255213）

醫(yī)學(xué)院校在日常教學(xué)中有許多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，家兔是實(shí)驗(yàn)中最常用的動(dòng)物。麻醉是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中一個(gè)至關(guān)重要的環(huán)節(jié)[1]。麻醉過(guò)淺使動(dòng)物遭受過(guò)多的痛苦、影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)程和實(shí)驗(yàn)結(jié)果；麻醉過(guò)深時(shí)，輕者影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，重者可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡，嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，浪費(fèi)時(shí)間和精力[2]。把握好麻醉尺度是對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、工作人員的基本要求。本實(shí)驗(yàn)將常用的4種麻醉藥物應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)家兔，比較其麻醉效果，以指導(dǎo)科研人員對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行麻醉[3]。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康家兔，體重約2 kg，由齊魯醫(yī)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。家兔分籠飼養(yǎng)，自由進(jìn)食和飲水，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周[4]。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物

烏拉坦（北京通縣育才精細(xì)化工廠），戊巴比妥鈉（北京市普博斯生物科技有限公司），異丙酚（北京市費(fèi)森尤斯卡比醫(yī)藥有限公司），硫噴妥鈉（上海盈公實(shí)業(yè)有限公司），生理鹽水。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

2和10 ml一次性注射器，嬰兒稱，兔固定器，計(jì)時(shí)器，分析天平，稱量紙，玻璃棒，燒杯，棉簽等。

1.4 藥物的選擇與配制

查閱相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的文獻(xiàn)和資料，選取常用的4種麻醉藥：烏拉坦、戊巴比妥鈉、異丙酚、硫噴妥鈉[5]。取藥品用生理鹽水配置為20.0%烏拉坦[6]、0.7%戊巴比妥鈉[7]、1.0%異丙酚[8]、2.5%硫噴妥鈉。

用分析天平精密稱定20 g（實(shí)際19.9862 g）烏拉坦，溶于生理鹽水100 ml，得到濃度為20.0%的烏拉坦溶液；稱定0.7 g（實(shí)際0.7012 g）戊巴比妥鈉，與100 ml生理鹽水混合均勻，配制成濃度為0.7%的戊巴比妥鈉溶液；購(gòu)買(mǎi)成品1.0%異丙酚；稱定0.5 g（實(shí)際0.4992 g）硫噴妥鈉，以20 ml生理鹽水配制成濃度為2.5%的硫噴妥鈉溶液。

1.5 麻醉方法

麻醉前實(shí)驗(yàn)家兔禁食6 h。將外觀相似，體重約2 kg的12只家兔隨機(jī)分為烏拉坦組、戊巴比妥鈉組、異丙酚組、硫噴妥鈉組，每組3只。烏拉坦組用20.0%烏拉坦經(jīng)耳緣靜脈緩慢推注8.0 ml。戊巴比妥鈉組用0.7%戊巴比妥鈉經(jīng)耳緣靜脈緩慢推注2.0 ml。異丙酚組用1.0%異丙酚經(jīng)耳緣靜脈緩慢推注2.0 ml。硫噴妥鈉組用2.5%硫噴妥鈉經(jīng)耳緣靜脈緩慢推注1.2 ml。耳緣靜脈推注時(shí)要嚴(yán)格控制給藥速度，避免因注射速度過(guò)快而導(dǎo)致家兔死亡。

1.6 觀察指標(biāo)

對(duì)麻醉后的家兔行蚓突切除術(shù)，進(jìn)行麻醉效果的比較。通過(guò)觀察呼吸頻率（觸摸計(jì)數(shù)）、心率（聽(tīng)診器計(jì)數(shù)）、角膜反射、趾蹼反射（鉗夾趾間組織引起縮肢）、肌肉緊張度（詢問(wèn)手術(shù)醫(yī)師）、有無(wú)躁動(dòng)等指標(biāo)，分別記錄各組麻醉起效時(shí)間、麻醉維持時(shí)間、麻醉蘇醒時(shí)間、呼吸頻率、心率、追加給藥次數(shù)、累計(jì)給藥量、術(shù)后2 h內(nèi)死亡數(shù)。麻醉誘導(dǎo)期：仔細(xì)觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的精神、活動(dòng)、生理反射及疼痛反射等，以了解麻醉深度；當(dāng)家兔出現(xiàn)頭頸下垂、站立不穩(wěn)、睫毛及角膜反射遲鈍、肌肉松弛、趾蹼反射消失后，說(shuō)明已達(dá)到麻醉效果。麻醉起效時(shí)間：從麻醉開(kāi)始到家兔達(dá)到麻醉效果的時(shí)間。麻醉維持期：主要表現(xiàn)為肌肉松弛，腹式呼吸，對(duì)切割無(wú)反應(yīng)；如發(fā)現(xiàn)家兔麻醉效果不佳，可追加劑量。麻醉維持時(shí)間：達(dá)到麻醉效果至手術(shù)結(jié)束的時(shí)間。麻醉蘇醒時(shí)間：手術(shù)結(jié)束至家兔開(kāi)始出現(xiàn)頭頸抬起，睫毛、角膜及趾蹼反射敏感的時(shí)間。其他監(jiān)測(cè)指標(biāo)：記錄麻醉維持期間家兔平均呼吸頻率及心率、術(shù)后2 h內(nèi)死亡數(shù)。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用單因素方差分析，兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4組家兔麻醉起效時(shí)的各指標(biāo)比較

2.1.1 體重 4組家兔體重比較，經(jīng)單因素方差分析，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

2.1.2 麻醉起效時(shí)間 4組麻醉起效時(shí)間比較，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表 1。

2.1.3 呼吸頻率 4組呼吸頻率比較，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.1.4 心率 4組心率比較，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，戊巴比妥鈉組與異丙酚組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；其余各組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表 1。

表1 4組家兔麻醉起效時(shí)的各指標(biāo)比較 （n =3，±s）

表1 4組家兔麻醉起效時(shí)的各指標(biāo)比較 （n =3，±s）

心率/（次/min）烏拉坦組 2.1±0.1 6.4±0.8 32.6±1.5 150.6±9.2戊巴比妥鈉組 1.9±0.2 9.0±0.6 46.8±2.8 172.3±10.1異丙酚組 2.2±0.1 7.7±0.3 42.5±2.5 162.1±10.4硫噴妥鈉組 2.2±0.1 3.1 ±0.5 50.4±1.9 180.4±10.6 F值 25.064 130.053 80.394 39.821 P值 0.071 0.003 0.042 0.039組別 體重/kg麻醉起效時(shí)間/min呼吸頻率/（次/min）

2.2 4組家兔麻醉維持時(shí)的各指標(biāo)比較

2.2.1 麻醉維持時(shí)間 4組麻醉維持時(shí)間比較，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，烏拉坦組與硫噴妥鈉組、戊巴比妥鈉組與異丙酚組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；其余各組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表 2。

2.2.2 呼吸頻率 4組麻呼吸頻率比較，經(jīng)單因素方差分析，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

2.2.3 心率 4組心率比較，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 4組家兔麻醉維持時(shí)的各指標(biāo)比較 （n =3，±s）

表2 4組家兔麻醉維持時(shí)的各指標(biāo)比較 （n =3，±s）

心率/（次/min）烏拉坦組 32.2±3.7 30.3±2.6 142.3±7.2戊巴比妥鈉組 40.1±6.5 42.8±6.0 137.5±8.5異丙酚組 43.4±3.9 41.4±5.5 155.4±7.2硫噴妥鈉組 30.6±3.7 48.3±3.0 167.3±10.1 F值 38.987 98.962 86.022 P值 0.021 0.053 0.036組別 麻醉維持時(shí)間/min呼吸頻率/（次/min）

2.3 4組家兔麻醉蘇醒時(shí)的各指標(biāo)比較

2.3.1 麻醉蘇醒時(shí)間 4組麻醉蘇醒時(shí)間比較，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，戊巴比妥鈉組與異丙酚組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；其余各組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

2.3.2 呼吸頻率 4組呼吸頻率比較，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

2.3.3 心率 4組心率比較，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。進(jìn)一步兩兩比較經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，戊巴比妥鈉組與異丙酚組、硫噴妥鈉組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；其余各組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 4組家兔麻醉蘇醒時(shí)的各指標(biāo)比較 （n =3，±s）

表3 4組家兔麻醉蘇醒時(shí)的各指標(biāo)比較 （n =3，±s）

心率/（次/min）烏拉坦組 25.2±3.7 33.2±3.6 145.4±7.1戊巴比妥鈉組 13.6±6.4 42.8±5.4 175.6±9.4異丙酚組 12.1±3.9 47.4±3.9 170.8±8.1硫噴妥鈉組 5.1±1.4 51.4±1.9 176.7±5.3 F值 92.054 86.121 104.602 P值 0.004 0.031 0.022組別 麻醉蘇醒時(shí)間/min呼吸頻率/（次/min）

3 討論

烏拉坦屬于氨基甲酸酯類(lèi)藥物，通過(guò)抑制乙酰膽堿酶的活性，造成乙酰膽堿的累積，影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常的神經(jīng)傳導(dǎo)，而引起麻醉作用[9]。與其他的麻醉劑相比，烏拉坦廉價(jià)、易得、好配置、麻醉效果穩(wěn)定、維持時(shí)間長(zhǎng)、術(shù)后死亡率較高，適用于日常教學(xué)的觀察性實(shí)驗(yàn)[10]。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中筆者發(fā)現(xiàn)，隨著劑量增加，烏拉坦對(duì)實(shí)驗(yàn)家兔呼吸和心率的影響逐漸增加，同時(shí)與靜脈注射的速度關(guān)系密切，如藥量過(guò)大、給藥過(guò)快，會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心跳呼吸驟停[11]。因此，在使用過(guò)程中，對(duì)烏拉坦的危害性及其理化性質(zhì)要有充分認(rèn)識(shí)，制定科學(xué)、安全的使用方法，特別是日常教學(xué)試驗(yàn)中，由于用量大、人員多，需要在使用前對(duì)學(xué)生進(jìn)行專門(mén)指導(dǎo)，讓其對(duì)烏拉坦有充分的了解，增加實(shí)驗(yàn)的安全性和成功率[12]。

戊巴比妥鈉是一種長(zhǎng)效麻醉劑，對(duì)家兔等小型動(dòng)物靜脈注射后起效快、麻醉時(shí)間長(zhǎng)[13]。本實(shí)驗(yàn)中，戊巴比妥鈉的麻醉起效時(shí)間最慢，麻醉維持時(shí)間在4種麻醉藥品中排第2，術(shù)中肌肉松弛效果中等，鎮(zhèn)痛效果不佳，術(shù)中動(dòng)物掙扎和身體抖動(dòng)較多，術(shù)后死亡率不高，蘇醒情況相對(duì)較好。以戊巴比妥鈉作為麻醉劑用于實(shí)驗(yàn)教學(xué)時(shí)，由于學(xué)生經(jīng)驗(yàn)不足，常不能很好地控制給藥速度，因麻醉過(guò)深或給藥速度過(guò)快造成動(dòng)物術(shù)中死亡的例子較常見(jiàn)。戊巴比妥鈉鎮(zhèn)痛作用較弱，術(shù)中常因動(dòng)物掙扎或身體抖動(dòng)而被學(xué)生誤認(rèn)為是麻醉深度不夠而追加給藥，所以在教學(xué)實(shí)驗(yàn)中的用量偏大。因此不建議將該藥應(yīng)用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[8]。

異丙酚為白色均勻乳狀液體，商品名是得普利麻，為快速短效的靜脈麻醉藥。因其麻醉誘導(dǎo)迅速、平穩(wěn)、容易維持、并發(fā)癥少，且代謝迅速、安全，被廣泛應(yīng)用于臨床[14]。異丙酚是一種安全有效的靜脈麻醉藥，具有出現(xiàn)麻醉現(xiàn)象時(shí)間快，作用平穩(wěn)，停藥后不會(huì)持久出現(xiàn)麻醉現(xiàn)象，恢復(fù)期間也不會(huì)出現(xiàn)興奮、惡心、嘔吐等現(xiàn)象，越來(lái)越多用于手術(shù)室患者的麻醉誘導(dǎo)和維持[15]。異丙酚是一種新型短效靜脈全身麻醉藥物，臨床多用于不同年齡、不同部位大小手術(shù)的全麻誘導(dǎo)。本實(shí)驗(yàn)中，異丙酚的麻醉起效時(shí)間位列第2，麻醉維持時(shí)間較短，術(shù)后蘇醒情況最佳。本實(shí)驗(yàn)中，異丙酚麻醉組的3只家兔在術(shù)后2 h都完全蘇醒，在4組中死亡率（術(shù)后2 h沒(méi)有蘇醒的情況）最低。異丙酚的麻醉作用平穩(wěn)，但停藥后其麻醉作用迅速消失，因此該藥適用于短時(shí)間動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，不適用于長(zhǎng)時(shí)間的觀察性實(shí)驗(yàn)。

硫噴妥鈉是超短時(shí)巴比妥類(lèi)藥物，脂溶性高，容易通過(guò)血腦屏障，靜脈注射幾乎可以立即產(chǎn)生麻醉效果，因而便于掌握用藥劑量，防止呼吸、循環(huán)抑制[16]。本實(shí)驗(yàn)中，硫噴妥鈉起效時(shí)間最快，維持時(shí)間最短，術(shù)后死亡率適中，術(shù)后蘇醒情況相對(duì)較好。在一些實(shí)驗(yàn)家兔外科手術(shù)中，這樣的麻醉維持時(shí)間是達(dá)不到要求的，也不是理想的麻醉維持時(shí)間。

綜上所述，在日常的以動(dòng)物為實(shí)驗(yàn)對(duì)象的醫(yī)學(xué)教學(xué)中，考慮各種人為因素、教學(xué)因素，同時(shí)也滿足節(jié)約實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)的目的，便于學(xué)生操作，采用烏拉坦可起到有效的麻醉作用，麻醉維持時(shí)間充足。而且烏拉坦的價(jià)格相對(duì)低廉，是一種較理想的動(dòng)物麻醉劑，可在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中推廣應(yīng)用[15]。