段永平 趙美榮
(內(nèi)蒙古赤峰學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院 024000)
植物生長調(diào)節(jié)劑的一個重要生理作用是誘導(dǎo)植物插條產(chǎn)生不定根[1],植物生長素對插條不定根誘導(dǎo)實驗是許多學(xué)校選擇開出的學(xué)生實驗,在這個實驗過程中,常用的方法采用萘乙酸處理易生根的植物插條為材料[2]觀察對不定根誘導(dǎo)的影響,在處理材料過程中,均采用小燒杯水培的方式。但是,采用這種方法主要存在的問題是: 如果處理時間較長,會使浸入處理液中的材料發(fā)生腐爛的現(xiàn)象,導(dǎo)致實驗失敗。經(jīng)過幾年的實驗摸索,利用菜豆(Phaseolusvulgaris)芽下胚軸作為實驗材料,使用培養(yǎng)皿和濾紙夾層進行培養(yǎng),較好地解決了材料處理過程中腐爛的問題,取得了較好的實驗效果,具體做法如下。
菜豆芽的準備采用王金祥的方法[3],挑取飽滿的菜豆種子,清水清洗6遍,用0.1%的NaClO消毒30min,再用清水沖洗6次,然后浸種8h,將水倒掉,上覆濕紗布,在25℃~28℃條件下培養(yǎng),待下胚軸長度達到4~5cm時,即可作為實驗材料使用。
在12cm的玻璃培養(yǎng)皿鋪3層直徑11cm的濾紙,再用濾紙裁成10cm×7cm的長方形10張,其中,將3張長方形濾紙疊在一起使用,10cm長邊一側(cè)接觸培養(yǎng)皿底部,另一側(cè)擔(dān)在培養(yǎng)皿的邊緣,留另外2張濾紙疊在一起,將來覆蓋在實驗材料上面?zhèn)溆谩?/p>
取培養(yǎng)好的菜豆芽,在豆芽根上0.5cm處用刀片切除菜芽根;培養(yǎng)皿中加入處理材料的萘乙酸溶液(按設(shè)定的濃度進行配制),將去掉菜豆芽的根的實驗材料5~10株平鋪在長方形的濾紙上,擺放位置上端以子葉長出濾紙0.5~1cm為宜,避免菜豆芽的莖尖直接接觸濾紙為宜;然后,蓋上備用的濾紙,最好上、下層濾紙對齊,待萘乙酸溶液完全浸濕濾紙后,保持培養(yǎng)皿萘乙酸溶液0.5cm左右,然后放入培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。這樣處理實驗材料,濾紙通過毛細管現(xiàn)象從培養(yǎng)皿下部獲得萘乙酸溶液,大豆芽下胚軸部分直接接觸萘乙酸溶液達到處理材料的目的。同時,由于處理材料處在兩夾層濾紙中間,材料下胚軸可通過濾紙縫隙獲得O2,保證材料進行有氧呼吸,這樣就避免水培方法處理實驗材料致使O2供應(yīng)不足,引起材料進行無氧呼吸、材料腐爛的問題。待達到處理時間,即可進行觀察、統(tǒng)計設(shè)計的實驗結(jié)果(圖1)。
圖1 菜豆不定根誘導(dǎo)結(jié)果
在相同的實驗中,也可使用市場購買大豆(Glycinemax)芽等作為實驗材料,也能獲得比較好的實驗效果。
*前文受翰思科學(xué)儀器公司關(guān)注*