羅亞敏，任小巧，宋慧榮，頓 珠，陶曉華，△

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029； 2.西藏藏醫(yī)學(xué)院，拉薩 850000)

偏頭痛作為一種反復(fù)發(fā)作的慢性疾病，其病程較長(zhǎng)，遷延難愈。據(jù)文獻(xiàn)研究記載，頭痛占47%，其中偏頭痛占10%，而慢性頭痛的發(fā)病率約為3%，且這一發(fā)病率呈上升趨勢(shì)[1]。本病屬于中醫(yī)學(xué)頭風(fēng)、頭痛、首風(fēng)等范疇，并有久痛入絡(luò)、久病多瘀之論，且臨床上偏頭痛患者也多有血瘀兼證，故瘀血阻絡(luò)是偏頭痛發(fā)作的主要病機(jī)特點(diǎn)[2-3]。血瘀證指多種原因引起的血脈不暢、血行遲緩澀滯、血液壅阻于脈中或離經(jīng)停積的病理狀態(tài)，是多種疾病的發(fā)病基礎(chǔ)或病變結(jié)果[4]。血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)是臨床判斷血瘀證的重要客觀指標(biāo)[5]。

藏醫(yī)認(rèn)為偏頭痛為內(nèi)脈疾病[6]，屬于白脈病范疇。作為治療白脈病的首選藏藥，如意珍寶丸療效顯著，其由珍珠母、沉香、石灰華、金礞石、紅花等30余種藥材組成，具有清熱、醒腦開(kāi)竅、舒筋活絡(luò)及干黃水等功效，主要用于治療瘟疫、陳舊熱癥、白脈病、四肢麻木、癱瘓、口眼歪斜、神志不清、痹癥、痛風(fēng)、肢體強(qiáng)直和關(guān)節(jié)不利等疾病，尤其適用于治療白脈病[7]。故本實(shí)驗(yàn)從血液流變學(xué)方向探討藏藥如意珍寶丸治療偏頭痛的藥理作用。

1 材料與方法

1.1 藥物與儀器

藏藥如意珍寶丸(0.5 g×10丸/板×2板/盒)，青海金訶藏藥藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)(國(guó)藥準(zhǔn)字Z63020064)；復(fù)方丹參滴丸，天津天士力集團(tuán)生產(chǎn)(國(guó)藥準(zhǔn)字ZL93100050)；鹽酸腎上腺素注射液，天津金耀藥業(yè)有限公司生產(chǎn)(國(guó)藥準(zhǔn)字H12020526)；注射用生理鹽水,四川科倫藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)；肝素鈉抗凝管,河北鑫樂(lè)醫(yī)療器械科技股份有限公司(國(guó)藥準(zhǔn)字17088801)；枸櫞酸鈉抗凝管,湖南省瀏陽(yáng)市醫(yī)用儀具廠(國(guó)藥準(zhǔn)字140523)；戊巴比妥鈉，德國(guó)生產(chǎn)(國(guó)藥準(zhǔn)字171060)；全自動(dòng)血液黏度動(dòng)態(tài)分析儀，重慶南方數(shù)控設(shè)備有限責(zé)任公司生產(chǎn)；LD5-2B臺(tái)式低速離心機(jī)，京立有限公司生產(chǎn)。

1.2 動(dòng)物

清潔級(jí)SD雄性大鼠，體質(zhì)量200～220 g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供(合格證號(hào)SCXK(京)2016-0006)。

1.3 血液流變學(xué)檢測(cè)

SD雄性大鼠48只，體質(zhì)量200～220 g，大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為空白組、模型組、藏藥如意珍寶丸高(10 g·kg-1)、中(5 g·kg-1)、低(2.5 g·kg-1)組和復(fù)方丹參滴丸組(0.5 g·kg-1)6組各8只，連續(xù)灌胃給藥7 d。動(dòng)物取血前1 d，除空白組外其余動(dòng)物均皮下注射腎上腺素0.08 mL·kg-1，每日2次，間隔4 h。注射后2 h將大鼠浸入冰水中5 min，復(fù)制血瘀模型后禁食不禁水。次日上午大鼠動(dòng)脈取血4.5 mL，其中3 mL血迅速注入肝素鈉抗凝管中搖勻后，置入35 ℃ 恒溫水浴箱中備用，1.5 mL迅速注入枸櫞酸鈉抗凝管中搖勻備用。

采用全自動(dòng)血液黏度動(dòng)態(tài)分析儀記錄中切變率黏度值、低切變率黏度值(切變率分別為30 s-1、1 s-1)；血漿黏度值、紅細(xì)胞壓積值(HCT)、纖維蛋白原含量、紅細(xì)胞聚集指數(shù)用高速微量離心機(jī)離心后，以全自動(dòng)血液黏度分析儀測(cè)定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，每組數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布時(shí)，組間比較采用單因素方差分析，若方差齊組間差異比較采用LSD法，若方差不齊組間差異比較采用Tamhane法，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 藏藥如意珍寶丸對(duì)急性血瘀模型大鼠血液黏度的影響

表1顯示，與空白對(duì)照組比較，模型組大鼠中切變率黏度、低切變率黏度、血漿黏度均明顯提高(P<0.01)，表示造模成功。與模型組比較，陽(yáng)性藥可不同程度地降低中切率、低切率、血漿黏度值，尤以低切率差異變化明確(P<0.05)；而藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量亦可不同程度地降低中切率、低切率、血漿黏度，然以低劑量對(duì)血液黏度值顯示出明確的量效關(guān)系，而高劑量?jī)H在中、低切變率有顯著變化(P<0.05)。與陽(yáng)性藥比較，如意珍寶丸高、中、低劑量對(duì)血液黏度雖然產(chǎn)生改變，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1 藏藥如意珍寶丸對(duì)急性血瘀模型大鼠血液黏度的影響(±s)

組 別鼠數(shù)劑量/g·kg-1全血黏度中切/mPa·s-1低切/mPa·s-1血漿黏度/mPa·s-1空白組8—34.0±4.8110.5±1.641.6±0.13模型組8—45.7±4.09&&14.5±1.22&&1.9±0.02&&珍寶丸組810.038.4±1.49*12.0±0.46*1.7±0.1185.043.4±6.7113.6±2.351.8±0.0582.536.5±1.30*11.3±0.41*1.7±0.10*丹參組80.538.9±1.5013.2±0.73*1.8±0.05

注：模型組與空白組比較:&&P<0.01；實(shí)驗(yàn)組與模型組比較:*P<0.05

2.2 藏藥如意珍寶丸對(duì)急性血瘀模型大鼠紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白原的影響

表2顯示，與空白組比較，模型組的紅細(xì)胞聚集指數(shù)(P<0.01)、紅細(xì)胞壓積含量(P<0.05)均有不同程度的提高，顯示造模成功。與模型組比較，陽(yáng)性藥組可使紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞壓積含量產(chǎn)生顯著的藥物作用(P<0.05)，可知復(fù)方丹參滴丸對(duì)紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞壓積值的變化有特異性，以此表現(xiàn)出活血作用；而藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量亦可不同程度地降低紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞壓積等紅細(xì)胞指數(shù)值，其中以低劑量顯示出明確的量效關(guān)系，高劑量?jī)H紅細(xì)胞壓積中有顯著改變(P<0.05)。與陽(yáng)性藥比較，藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量對(duì)血液狀態(tài)產(chǎn)生趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表2顯示，與空白組比較，模型組大鼠纖維蛋白原出現(xiàn)明顯量效關(guān)系(P<0.01)，表示模型成功。與模型組比較，陽(yáng)性藥組可使纖維蛋白原值降低，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量亦有使纖維蛋白原降低的特性，但僅以低劑量對(duì)纖維蛋白原具有相關(guān)性(P<0.05)，可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)藥有一定的活血化瘀作用。與陽(yáng)性藥比較，藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量雖有使纖維蛋白原產(chǎn)生變化的功能，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表2 藏藥如意珍寶丸對(duì)急性血瘀模型大鼠紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白原的影響(±s)

表2 藏藥如意珍寶丸對(duì)急性血瘀模型大鼠紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白原的影響(±s)

組 別鼠數(shù)劑量/(g·kg-1)紅細(xì)胞聚集指數(shù)紅細(xì)胞壓積/%纖維蛋白原/g·L-1空白組8—0.3±0.050.4±0.013.5±0.42模型組8—0.5±0.04&&0.5±0.02&4.0±0.15&&珍寶丸組810.00.4±0.030.4±0.00*3.7±0.1485.00.4±0.080.4±0.063.8±0.0282.50.4±0.01*0.4±0.02*3.6±0.13*丹參組80.50.4±0.02*0.4±0.00*3.9±0.01

注：模型組與空白組比較:&&P<0.01，&P<0.05；實(shí)驗(yàn)組與模型組比較:*P<0.05

3 討論

藏醫(yī)以“黑白脈”學(xué)說(shuō)論述神經(jīng)、血管之間的聯(lián)系。其理論表明，人體各有脈絡(luò)，而部分脈絡(luò)又相互連接稱之聯(lián)結(jié)脈。聯(lián)結(jié)脈分為白脈(指神經(jīng))和黑脈(指血管)2種，腦為白脈之海，腦至延髓自內(nèi)發(fā)出命脈，延伸若干分支，布于五臟六腑、四肢及具感知功能的水脈中[8]。如白脈神經(jīng)損傷，則有可能引起全身性神經(jīng)功能障礙，日久可造成黑脈的病變，因此白脈病的發(fā)病機(jī)制與偏頭痛的病理性質(zhì)相似。現(xiàn)代研究證實(shí)，藏藥如意珍寶丸治療白脈病有效率達(dá) 87%以上，且有明顯的止痛效果，是目前治療神經(jīng)性疼痛最理想的藏藥之一[9]，且其用于偏頭痛的治療亦具良效[10]。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，偏頭痛其病因可為感受外邪或臟腑功能失調(diào)或外傷，使氣血運(yùn)行不暢，瘀阻腦中脈絡(luò)而發(fā)，或久病入絡(luò)入血而致瘀，瘀阻于上，清氣不升，濁氣不降，氣血壅滯，閉塞不通，不通則痛，故“瘀血阻絡(luò)”必然為頭痛的主要病機(jī)[11-12]。治療原則以祛風(fēng)止痛通絡(luò)、活血化瘀為主，而藏藥如意珍寶丸的藥方中即包含此類作用。如珍珠母、甘草膏、短穗兔耳草醒腦開(kāi)竅、疏通脈道；蓽茇、高良姜、肉桂溫通經(jīng)絡(luò)；木香、 藏木香、麝香消炎止痛；紅花、乳香活血化瘀；決明子、黃葵子干黃水；丁香、肉豆蔻、豆蔻調(diào)養(yǎng)五臟；金礞石、螃蟹補(bǔ)腎利尿；沉香祛風(fēng)、調(diào)和風(fēng)能和隆病[13]，諸藥合用可以改善血液濃度、疏通經(jīng)絡(luò)、修復(fù)陳舊組織的神經(jīng)血管損傷。

利用現(xiàn)代技術(shù)不僅能深入辨釋血瘀證的血液流變學(xué)特點(diǎn)，亦能清楚其治療機(jī)制及過(guò)程，提高治證效果。臨床血液流動(dòng)指標(biāo)主要包括全血黏度、紅細(xì)胞壓積、血漿黏度、紅細(xì)胞變性指數(shù)、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、纖維蛋白原含量[14]。全血黏度是血液流動(dòng)時(shí)鄰近兩層平行流體層互相位移時(shí)的摩擦力而形成的阻力，其為血清黏度、血細(xì)胞比容、紅細(xì)胞變性、聚集能力、血小板和白細(xì)胞流變性的綜合表現(xiàn)。全血黏度包括高切、中切、低切變率黏度，中切變率黏度反映紅細(xì)胞無(wú)明顯變形和聚集時(shí)的流動(dòng)性，低切變則反映紅細(xì)胞的聚集能力。血黏度受諸多因素影響，而紅細(xì)胞作為血液的有形成分，由于數(shù)量最多、所占比率最大，是影響血液黏度的主要成分。因此，紅細(xì)胞壓積是影響血黏度最重要的因素，紅細(xì)胞壓積增大，使血液的黏滯性增加、流動(dòng)性減弱，紅細(xì)胞表面電荷減少、聚集性增加，紅細(xì)胞沉降率方程式K值增大，紅細(xì)胞沉降增快，血液黏度增大[15-16]。紅細(xì)胞數(shù)量增加，細(xì)胞的聚集性增強(qiáng)，引起低切變率血黏度升高，紅細(xì)胞的變形性降低，引起高切變率血黏度升高?？傊谌魏吻凶兟氏?，隨著紅細(xì)胞壓積的增高，血黏度隨之升高[17]。此外，纖維蛋白原含量增加則表示血液黏度越高。

由于暴怒時(shí)機(jī)體內(nèi)腎上腺素分泌快速升高，本實(shí)驗(yàn)一次性大劑量皮下注射腎上腺素模擬機(jī)體的暴怒狀態(tài)，肝氣郁結(jié)、氣滯血瘀，使大鼠皮膚黏膜血管收縮，血液流動(dòng)變慢；至2 h后給予冰水刺激，模擬中醫(yī)寒凝血瘀、結(jié)合氣滯血瘀和寒凝血瘀兩種因素建立急性血瘀證模型。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，陽(yáng)性藥活血作用體現(xiàn)在于導(dǎo)致紅細(xì)胞聚集能力下降；藏藥如意珍寶丸對(duì)紅細(xì)胞壓積值改善作用最好，對(duì)紅細(xì)胞聚集指數(shù)作用次之，對(duì)纖維蛋白原作用最弱。與陽(yáng)性藥組相較，藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量對(duì)血液狀態(tài)的影響無(wú)明顯關(guān)系變化。但可以說(shuō)明，藏藥如意珍寶丸與陽(yáng)性藥具有同等效果的活血化瘀作用，且丹參滴丸注重心血管方面的化瘀作用，故可考慮進(jìn)一步探討藏藥如意珍寶丸治療心血管方面的藥效學(xué)作用。

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，藏藥如意珍寶丸高、中、低劑量對(duì)腎上腺素聯(lián)合冰水游泳法復(fù)制大鼠急性血瘀模型，均不同程度地降低大鼠血液黏度、紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞聚集指數(shù)和纖維蛋白原含量，活血化瘀作用明顯，而該作用可能是其臨床用于治療偏頭痛的藥理作用之一。