[摘 要]目的：應用hplc法測定酒石酸美托洛爾片中的凈含量。方法：選用標準色譜柱、醋酸鹽緩沖液、三乙胺、磷酸、冰醋酸、乙腈等，在固定波長、流速、溫度條件下進行檢測，了解其線性關系以及回收率，通過多次實驗進行比較，獲取最佳結果。結果：參數(shù)條件上，取C18色譜柱220mm*4.6mm、5μm，醋酸鹽緩沖液取3.9g并加水810ml稀釋，三乙胺取2.0ml、磷酸取3.0ml、冰醋酸取10.0ml、乙腈824：146作為流動相，取固定波長275nm、流速條件1.0ml/min、柱溫為30℃時，酒石酸美托洛爾在0.05—4mg·ml-1范圍內(nèi)的線性關系良好，反復實驗獲取r=0.99995，酒石酸美托洛爾回收率則達到99.4%的高水平。結論：應用hplc法測定酒石酸美托洛爾片中的凈含量效果良好，在固定參數(shù)下了解了線性關系水平，且具有較高的回收率。

[關鍵詞]hplc法；酒石酸美托洛爾；磷酸；三乙胺

中圖分類號：S358 文獻標識碼：A 文章編號：1009-914X（2018）26-0193-01

前言：hplc法也即高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography），屬于色譜法的分支之一，其特色是以液體作為流動相，通過高壓輸液系統(tǒng)將對象推入色譜柱中進行分析，在醫(yī)學、化學甚至法檢等領域得到廣泛應用。酒石酸美托洛爾片一般用于治療心肌梗死、高血壓、心臟神經(jīng)官能癥等疾病，其核心成分為酒石酸美托洛爾，測定藥品中酒石酸美托洛爾的含量對于推動醫(yī)學研究和進步有一定的積極意義，我院針對相關內(nèi)容進行了研究，所獲結果如下：

1.儀器與試劑

1.1 儀器

本次試驗主要應用高效液相色譜儀進行，色譜儀型號為Waters510，色譜工作站為N2000，波長檢測器型號為Waters2487，可進行波長的高精度調整，分析天平選用賽多利斯BPZn—D，為保證試驗精度，應用超聲波清洗器輔助試驗，型號為KQ—300VDE，光度計選用雙光束紫外可見型，型號為TU—1901。色譜柱選用C18色譜柱220mm*4.6mm、5μm。經(jīng)檢測所用儀器符合試驗要求。

1.2 試劑

選用酒石酸美托洛爾片作為藥劑（生產(chǎn)廠家：阿斯利康制藥有限公司，批準文號：國藥準字H32025391），所用乙腈、甲醇等均為色譜純，水為蒸餾處理后的純凈水，醋酸鹽緩沖液、三乙胺、磷酸、冰醋酸等均為分析純，經(jīng)檢測所用試劑符合試驗要求。

2.測定過程

2.1 色譜條件選取

依據(jù)文獻記載確定色譜條件包括流動相、波長和柱溫。流動相為：醋酸鹽緩沖液取3.9g并加水810ml稀釋，三乙胺取2.0ml、磷酸取3.0ml、冰醋酸取10.0ml制成混合溶液后搖勻，再添加乙腈824：146。檢測波長：此前的實驗中，學者所取波長略有差別，本次研究確定檢測波長為275nm。柱溫：選取柱溫為固定溫度30℃，并利用設備保持溫度穩(wěn)定。此外，要求酒石酸美托洛爾峰計算應大于2000。

2.2 溶媒制備

應用純凈水、乙醇（濃度50%），以及此前制備的流動相進行溶媒制備，在超聲條件下提取。超聲振蕩的時間分別為20min、30min、40min，對提取的溶媒進行分析，發(fā)現(xiàn)時間條件不會顯著影響溶媒質量，因此該參數(shù)確定為20min，以提升實驗的總體效率。

2.3 實驗溶液制備

在無菌條件下進行實驗溶液制備，應用天平精確稱取各類試劑用量，放置于塞錐形瓶中，精確稱取流動相10mL，進行超聲冷卻處理，使其與室溫條件平衡，如果出現(xiàn)揮發(fā)損耗，則進行補充，使總量保持穩(wěn)定，之后搖晃均勻、過濾，獲取實驗用濾液[1]。

2.4 精密度測定

完成實驗溶液、溶媒的制備后，進行精密度測定。精確稱取酒石酸美托洛爾3g，加入流動相制成混合溶液，濃度要求達到0.3mg·ml-1，作為標準觀察溶液，選取固定色譜條件，精確稱取10μL反復進行5次實驗，對峰面積進行記錄和計算，5次實驗結果表明，RSD穩(wěn)定在0.65%左右，這表明實驗的精確度可以得到保證。

2.6 線性考察

精確稱取酒石酸美托洛爾3g，加入流動相制成混合溶液，濃度分別要求達到0.3mg·ml-1、0.4mg·ml-1、0.5mg·ml-1、0.6mg·ml-1、0.7mg·ml-1，在固定參數(shù)條件下，分別稱取10μL各進行5次實驗，對峰面積進行記錄和計算，根據(jù)固定條件獲取峰面積計算方程式為16541.32x-8965.36（r=0.99995）。一固定方程為基礎，反復計算后獲取結果，表明酒石酸美托洛爾在0.05—4mg·ml-1范圍內(nèi)的線性關系良好。

2.7 回歸率實驗

在固定參數(shù)條件下。進一步進行會規(guī)律分析實驗，選用酒石酸美托洛爾片15片作為藥劑（生產(chǎn)廠家：阿斯利康制藥有限公司，批準文號：國藥準字H32025391），并對藥劑進行加工處理，其中5片中酒石酸美托洛爾含量為70%、另外5片中酒石酸美托洛爾含量為90%、最后5片中酒石酸美托洛爾含量為110%，選取固定色譜條件進行試驗，實驗共進行15次，綜合計算結果表明回收率可以達到99.4%，RSD穩(wěn)定在0.65%左右。

3.討論

對各類資料進行分析發(fā)現(xiàn)，此前研究人員進行酒石酸美托洛爾含量測定時，選取的檢測波長一般在180-910nm之間，受限于當時的技術條件，色譜分析的誤差明顯，因此始終未能了解最佳檢測波長[2]。本次實驗中，技術條件較為理想，經(jīng)過測定和文獻分析，發(fā)現(xiàn)當檢測波長處于275nm時，峰面積最大，能夠為后續(xù)分析提供最佳參考，因此確定檢測波長為275nm。參數(shù)條件的確定通過文獻分析和實測獲取，結合實驗結果，酒石酸美托洛爾片中的凈含量一般處于標示量95%-105%的水平。

綜上所述，應用hplc法測定酒石酸美托洛爾片中的凈含量效果良好，在固定參數(shù)下了解了線性關系水平，且具有較高的回收率。

參考文獻

[1] 裴貴珍，漆新文，李文軍.酒石酸美托洛爾片仿制藥與原研藥溶出曲線的相似性評價[J].中國藥房，2017，28（09）：1262-1264.

[2] 蔡美明，李忠紅，陳民輝.國產(chǎn)酒石酸美托洛爾片的溶出度質量評價[J].藥學與臨床研究，2015，23（06）：546-548.

作者簡介

李鐵勝（1981），男，黑龍江省大興安嶺地區(qū)加格達奇區(qū)人，民族：蒙古，職稱：副主任藥師，學歷：大學本科。研究方向：藥品檢驗。