白晶 吳蒙

1 遼化總醫(yī)院 （遼寧 遼陽 111003）

2 牡丹江醫(yī)學(xué)院 （黑龍江 牡丹江 157011）

隨著微柱凝膠法（Micro-column Gel Method，MGT）在醫(yī)院普及，ABO血型正反定型不符結(jié)果越來越多，在基層醫(yī)院由于人員、設(shè)備、試劑等因素所限，會出現(xiàn)無法報告血型鑒定結(jié)果，導(dǎo)致需要輸血患者轉(zhuǎn)院。本文回顧性分析本院輸血科ABO血型鑒定中出現(xiàn)正反定型不符結(jié)果，用文中試驗方法解決了大部分問題，使患者得到及時輸血，且輸注有效，現(xiàn)報告如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

2013～2017年送檢本院輸血科2178例血型檢測標(biāo)本，患者年齡2～91歲，70歲以上840例。其中，消化道出血219例，尿毒癥187例，肝硬化115例，多發(fā)性骨髓瘤（Multiple Myeloma，MM）52例，M2 23例，骨髓增生異常綜合癥（Myelodysplastic Syndrome，MDS）30例，其他白血病218例，其他癌566例。

Diamed-ID操作系統(tǒng)，DT5-3血庫專用離心機(jī)，ABO血型正/反定型檢測卡（Diaclon），低離子抗人球蛋白卡（Diaclon），人ABO血型反定型用紅細(xì)胞試劑盒（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）。

1.2 方法

排除人為因素造成正反定型不符；分析正反定型不符是否與患者病情、年齡有關(guān)，查詢?nèi)鹈姥獛旃芾硐到y(tǒng)，檢索患者歷史血型信息；臨床資料結(jié)合血清學(xué)反應(yīng)格局初步判斷產(chǎn)生正反定型不符原因，再做相應(yīng)的試驗；綜合分析確認(rèn)患者血型。

ABO血型正反定型采用Diamed-ID操作系統(tǒng)采用MGT法用廠家提供說明書進(jìn)行。

表1. 血型抗體減弱

表2. 抗原減弱

1.2.1抗體減弱

試驗1：在MGT法加大反定患者血漿標(biāo)本量為正常3倍，其他步驟不變。試驗2：采用試管法離心后顯微鏡鏡檢。試驗3：采用試管法延長反應(yīng)時間，加血漿和紅細(xì)胞后置于4?C環(huán)境中15～30min，離心后鏡檢。1.2.2抗原減弱或者ABO亞型

試驗1：溫鹽水洗滌患者紅細(xì)胞6～8次，重新進(jìn)行MGT法檢測。試驗2：吸收放散實驗、H血型物質(zhì)檢測。試驗3：加做抗H、抗A1、抗AB、A2細(xì)胞、O細(xì)胞。

1.2.3異常蛋白干擾

試驗：延長標(biāo)本離心時間5～10min（3500r/min），同時在CTL孔加做自身對照（患者自身紅細(xì)胞+血漿），O細(xì)胞對照（O細(xì)胞+患者血漿）重新進(jìn)行MGT法檢測。

1.2.4冷凝集素干擾

試驗1：采用37?C溫生理鹽水洗滌患者紅細(xì)胞6～8次，直到顯微鏡下觀察紅細(xì)胞無凝集狀態(tài)時再重做MGT法和試管法。試驗2用O型洗滌紅細(xì)胞在4?C條件下吸收患者血清中高效價冷凝集素，待1～2h吸收完全后，再取血清做反定型。

表3. 異常蛋白干擾

表4. 疑為冷凝集素干擾

2.結(jié)果

2178例ABO血型鑒定中有12例患者出現(xiàn)正反定型不符70次，分別被鑒定為抗體減弱（57次）、抗原減弱（7次）、異常蛋白干擾（3次）、冷凝集素干擾（2次）、疑為亞型（1次）。典型患者血清學(xué)反應(yīng)格局如下，見表1～4。

患者12，58歲，腹痛腹脹入院，MGT法ABO血型正定抗A陰性，抗B陰性，CTL陰性，A細(xì)胞陰性，B細(xì)胞4+，O細(xì)胞陰性，正定O型，反定A型，正反定型不符，吸收放散試驗紅細(xì)胞有A抗原，綜合考慮為亞型，無其他試劑，未確認(rèn)，未發(fā)報告單。

3.討論

ABO血型正反定型不符原因分人為因素和客觀因素，人為因素包括操作中加錯標(biāo)本或試劑、細(xì)胞與血清比例不當(dāng)、結(jié)果判讀錯誤等?？陀^因素包括因某種疾?。òò籽。?dǎo)致抗原性減弱，紅細(xì)胞發(fā)生多凝集現(xiàn)象及產(chǎn)生類B物質(zhì)；抗體效價低，如嬰幼兒、老年人、低丙種蛋白血癥等；存在不規(guī)則抗體；某些藥物干擾；試劑不標(biāo)準(zhǔn)、試劑失效或污染等[1]。本次分析引起患者ABO血型正反定型不符原因按樣本比例從大到小為抗體減弱＞抗原減弱＞異常蛋白干擾＞冷凝集素＞ABO亞型。

MM和老年人常會出現(xiàn)抗體效價減低，干擾ABO血型反定型?；颊?，男性，MM，2013年血型為A型，輸紅細(xì)胞3.5U。2016年出現(xiàn)26次抗體減弱，輸紅細(xì)胞42U。2017年3次反定多出來抗體，輸紅細(xì)胞6U。之后2次血型正常，輸紅細(xì)胞4U。輸血治療均有效。多發(fā)性骨髓瘤由于正常免疫球蛋白減少或異常免疫球蛋白（M蛋白）增多常會干擾MGT法ABO血型鑒定，同一患者在疾病期即可出現(xiàn)抗體減弱，也可出現(xiàn)多出來的抗體，干擾反定型結(jié)果。有專家建議MM患者出現(xiàn)正反定型不符結(jié)果時，可以以正定型結(jié)果為準(zhǔn)。

白血病患者會發(fā)生抗原減弱?；颊?，2014年正定雙群，發(fā)A型紅細(xì)胞2U，輸注有效。轉(zhuǎn)院到盛京醫(yī)院診斷M2。之后13次血型正常。輸紅細(xì)胞20U，機(jī)采血小板20治療量，輸注有效。目前認(rèn)為報道較多的是白血病引起抗原的減弱或消失，對于疾病患者，抗原減弱在疾病期出現(xiàn)，一旦病情緩

解，血型表型會恢復(fù)正常[2,3]。有專家建議急性髓細(xì)胞白血病、M2、MDS患者常會干擾正定型結(jié)果，以反定型結(jié)果為準(zhǔn)。

高效價冷凝集素是患者體內(nèi)產(chǎn)生了抗自身紅細(xì)胞的嗜異性冷抗體，在體外4?C或室溫條件下可與自身紅細(xì)胞或ABO系統(tǒng)其他各個血型的紅細(xì)胞發(fā)生特異性凝集反應(yīng)。對此可采用溫鹽水洗滌，直至顯微鏡下觀察紅細(xì)胞無凝集狀態(tài)時再做正定型[4]。本研究中患者11，2013年之前已確診特發(fā)性血小板減少性紫癜，輸血小板及紅細(xì)胞共8次，2013年ABO血型正反定型不符，考慮患者冷凝集素干擾血型正定型，造成結(jié)果假陽性。

亞型也是造成ABO血型正反定型結(jié)果不符的一個重要因素。當(dāng)非新生兒、未患使抗原抗體減弱的疾病、非老年人出現(xiàn)正定凝集強(qiáng)度弱于4+，應(yīng)考慮亞型。

由于引起ABO血型正反定型不符的原因復(fù)雜，在基層醫(yī)院應(yīng)努力提高解決ABO正反定型不符能力，為患者及時有效的進(jìn)行輸血治療提供有力的保障。

[1] 陳小伍,于新發(fā),田兆嵩.輸血治療學(xué)[M].科學(xué)出版社,2012:37.

[2] 胡榮華,王淑芬,馬麗榮,等.白血病引起ABO血型抗原暫時減弱1例[J].中國輸血雜志,1989,2(2):83-84.

[3] 楊珊.健康獻(xiàn)血者及疾病患者ABO正反定型不符比較研究[J].臨床輸血雜志,2009,22(5):550-552.

[4] 余忠清,胡麗華.ABO疑難血型鑒定與臨床輸血的研究[J].臨床血液學(xué)雜志,2010,2(2):100.