任占良 侯俊明 任小朋 張泳

肺癌的發(fā)病率和病死率均位居惡性腫瘤的首位[1]，并且發(fā)病率不斷增長，多數(shù)患者就診時(shí)已處于晚期，臨床上缺乏篩查、評估預(yù)后的敏感指標(biāo)。異常糖鏈糖蛋白又稱腫瘤異常蛋白(tumor abnormal protein，TAP)，是近年來發(fā)現(xiàn)的一種具有高靈敏度和特異度的腫瘤檢測指標(biāo)，臨床上可作為早期篩查和評估預(yù)后的指標(biāo)。肺癌腫瘤細(xì)胞增殖活躍，細(xì)胞免疫功能受到抑制，CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞動(dòng)態(tài)平衡失調(diào)，加快了腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展，因此，CD4+/CD8+T細(xì)胞比值被作為反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能的指標(biāo)[2]。本研究回顧性分析TAP水平和細(xì)胞免疫功能表達(dá)對評估肺癌患者預(yù)后療效和復(fù)發(fā)的作用。

資料與方法

一、 臨床資料

1. 資料來源：選取2016年1月—2017年5月陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院收治的肺癌患者的臨床資料。

(1) 病例納入標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)臨床表現(xiàn)、胸部X線片檢查和CT掃描結(jié)果提示肺部占位性病變，行支氣管鏡、CT引導(dǎo)下肺部占位穿刺活檢、病理組織學(xué)確診為肺癌。

(2) 病例排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重凝血功能障礙；嚴(yán)重心肺、肝腎疾病及全身臟器衰竭；預(yù)計(jì)生存時(shí)間<3個(gè)月；卡氏(Karnofsky，KPS)<60分。

根據(jù)病例納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，共納入49例肺癌患者，其中男性33例，女性16例；年齡30～78歲，平均年齡(63.5±12.1)歲；其中腺癌26例，鱗癌23例。

2. 分組：依據(jù)治療方式進(jìn)行分組。①觀察組(n=28)：行肺癌根治術(shù)加術(shù)后輔助化療。其中男性19例，女性9例；年齡37～75歲，平均年齡(64.8±11.5)歲；腺癌15例，鱗癌13例。②對照組(n=21)：行單純化療。其中男性14例，女性7例；年齡30～78歲，平均年齡(61.4±13.9)歲；腺癌11例，鱗癌10例。兩組患者中腺癌化療選用DP方案，鱗癌化療選用GP方案。兩組患者均簽署知情同意書。

二、 方法

1. TAP測定方法：由專業(yè)檢驗(yàn)人員采集患者無名指末梢的第1、2滴全血，在載玻片上推成均勻、厚薄一致的涂片2張；自然干燥后將TAP試劑用滴管滴在涂片上，每張涂片3滴，共6個(gè)液斑，2 h后用TAP檢測圖文系統(tǒng)及軟件面積測量功能測量凝聚顆粒面積。觀察涂片上6個(gè)斑點(diǎn)，辨認(rèn)凝聚物的形態(tài)。

2. 細(xì)胞免疫功能測定：抽取靜脈血以流式細(xì)胞儀檢測CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)。

三、 觀察指標(biāo)

1. TAP表達(dá)：檢測兩組患者治療前以及治療后1、3個(gè)月TAP的表達(dá)狀況。TAP判定：血清中存在TAP時(shí)，可與試劑形成特定形態(tài)的類晶體凝聚物。TAP 陽性：凝聚物顆粒面積≥225 μm2；TAP弱陽性: 121 μm2≤凝聚物面積﹤225 μm2；TAP陰性：未見類晶體凝聚物[3]。

2. 細(xì)胞免疫功能：檢測兩組患者治療前以及治療后1、3個(gè)月的細(xì)胞免疫功能，觀察CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)。

3. 生活質(zhì)量：采用KPS評分標(biāo)準(zhǔn)評估治療后3個(gè)月患者的功能狀態(tài)，治療前后評分差值增加10分以上者為改善，減少10分以上者為降低，增加或減少未超過10分者為穩(wěn)定。改善表示有效，穩(wěn)定、降低表示無效。有效率為改善例數(shù)/總例數(shù)×100%。

四、 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié) 果

一、 兩組肺癌患者一般資料比較

觀察組和對照組患者的平均年齡、性別構(gòu)成比、病理類型比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

二、 兩組肺癌患者治療前后TAP表達(dá)比較

檢測兩組患者治療前后的TAP表達(dá)，結(jié)果顯示兩組患者治療前TAP表達(dá)陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.647，P>0.05)。觀察組治療后1、3個(gè)月，TAP表達(dá)陽性率均較治療前顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.2486，P=0.039；χ2=31.2391，P=0.000)；對照組治療后1、3個(gè)月，TAP表達(dá)陽性率較治療前無明顯變化(χ2=0.8281，P=0.3628；χ2=2.4846，P=0.115)；治療1、3個(gè)月后，觀察組TAP表達(dá)陽性率均顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=9.819，P=0.007；χ2=6.716，P=0.035)(表1)。

表1 兩組患者治療前后TAP表達(dá)比較 [n(%)]

三、 兩組肺癌患者免疫功能比較

觀察組治療后1、3個(gè)月，CD4+/CD8+比值均較治療前升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-9.635，P<0.01；t=-6.704，P<0.01)；照組治療后1個(gè)月，CD4+/CD8+比值與治療前比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=-1.649，P=0.105)；但治療后3個(gè)月，CD4+/CD8+比值較治療前下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.176，P=0.034)。治療后1、3個(gè)月，觀察組CD4+/CD8+比值均顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表2)。

組別治療前治療后1個(gè)月治療后3個(gè)月觀察組(n=28)1.07±0.151.57±0.231.78±0.54對照組(n=21)1.11±0.361.28±0.410.86±0.49t值0.531-4.557-6.137P值0.5980.0000.000

四、 兩組患者生活質(zhì)量評分比較

治療后3個(gè)月KPS評分顯示，觀察組改善16例，穩(wěn)定9例，降低3例，有效率為57.14%；對照組改善8例，穩(wěn)定8例，降低5例，有效率為38.09%，觀察組的有效率顯著優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.275，P=0.007)。

討 論

肺癌患者進(jìn)行TAP檢測與腫瘤標(biāo)志物相比，腫瘤細(xì)胞增殖達(dá)到一定程度時(shí)可在末梢血液中檢出TAP，可提前半年甚至數(shù)年在受檢者末梢血液中檢測到[4]，起到篩查、判斷預(yù)后的作用。研究[5]顯示，腫瘤細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生多種異常糖鏈糖蛋白，TAP是人體內(nèi)癌基因和抑癌基因突變導(dǎo)致蛋白質(zhì)的糖鏈結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，是一種高靈敏度和特異度的腫瘤檢測指標(biāo)[6]。研究[7]表明，TAP與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預(yù)后有密切關(guān)系；TAP在肺、食管、胃、結(jié)直腸、肝膽及乳腺等惡性腫瘤中均有表達(dá)，陽性率70%～95%[8]。TAP陰性提示腫瘤可能根除；TAP陰性或弱陽性，但在1個(gè)月后再次表達(dá)為陽性則提示腫瘤殘留或腫瘤轉(zhuǎn)移；TAP陰性1年后再次表達(dá)為陽性則提示腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。由此可見，在腫瘤患者體內(nèi)檢測到TAP，說明機(jī)體內(nèi)腫瘤細(xì)胞增殖較多，有復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的可能；根治性切除腫瘤病灶后測不到TAP，說明出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的概率較低。本研究顯示觀察組患者行肺癌根治術(shù)后再化療，TAP陽性率顯著降低；而對照組僅行化療，TAP陽性率與治療前比較無差異。以上結(jié)果提示TAP可作為肺癌判斷預(yù)后、復(fù)發(fā)的敏感指標(biāo)。

手術(shù)是肺癌治療的主要方法。老年患者免疫功能低下、心肺功能耐受性差，對手術(shù)耐受力和麻醉的承受力較低[9]，多數(shù)患者選擇保守治療。研究[10]顯示，腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移與自身免疫功能關(guān)系密切。肺癌的發(fā)生、發(fā)展是T細(xì)胞免疫，其中CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞是重要的免疫細(xì)胞。CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞活化后產(chǎn)生IL-2，促進(jìn)活化B細(xì)胞增殖及調(diào)節(jié)T細(xì)胞亞群的生長，刺激全身或局部的免疫應(yīng)答，增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，發(fā)揮抗腫瘤作用[11]。吳姍姍等[12]報(bào)道，老年肺癌患者外周血中CD4+T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)顯著減少，而CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯增多，CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞的比值下降，提示患者機(jī)體免疫功能下降。肺癌根治術(shù)后去除了腫瘤病灶，免疫功能得到提高；而保守治療患者腫瘤病灶繼續(xù)增長，機(jī)體免疫功能下降。肺癌患者在化療后早期，外周血中CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞比值有所降低，提示機(jī)體免疫功能下降，但全身化療21 d后外周血中CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞比值可得到提高，免疫功能得到改善[13]。本研究中觀察組在治療后1、3個(gè)月細(xì)胞免疫功能逐漸提高，KPS評分增加；對照組治療后1個(gè)月細(xì)胞免疫功能提高，治療后3個(gè)月免疫功能再次下降，提示對照組肺癌患者的腫瘤細(xì)胞增殖活躍，CD4+和CD8+T細(xì)胞動(dòng)態(tài)平衡失調(diào)，機(jī)體細(xì)胞免疫功能抑制，加快了腫瘤的發(fā)生和發(fā)展，使免疫功能再次下降；細(xì)胞免疫功能的高低對患者的治療效果及預(yù)后有重要影響。

因此，檢測血清TAP和細(xì)胞免疫功能的變化，有助于從多個(gè)維度、多項(xiàng)指標(biāo)，對肺癌的預(yù)后、療效評估做出判斷；而且檢測TAP、細(xì)胞免疫功能方便、快速、無創(chuàng)，易于被患者接受，可作為評估肺癌發(fā)生、發(fā)展和術(shù)后復(fù)發(fā)的重要指標(biāo)，對肺癌的診斷起到幫助作用，是判斷預(yù)后的腫瘤標(biāo)志物。

參 考 文 獻(xiàn)

1 錢桂生．為提高我國呼吸系統(tǒng)疾病的診治水平而努力[J/CD]．中華肺部疾病雜志：電子版，2012，5(1)：1-3.

2 許鈺杰，張毅，鄺先奎，等.肺癌患者化療前后T細(xì)胞抑制性分子的研究[J].中國腫瘤臨床，2013，40(16):960-964.

3 施南峰．腫瘤異常蛋白(TAP)篩查早期惡性腫瘤應(yīng)用研究[J]．中國公共衛(wèi)生管理，2010，26(2):187-189.

4 廖世奇，萬波，曾家豫. 肺癌血清腫瘤標(biāo)志物及其檢測方法研究進(jìn)展[J].甘肅醫(yī)藥，2013，32(11):826-829.

5 何萍，徐昌維，單喜花，等. 腫瘤異常蛋白對肺癌患者近期療效的意義[J].河北中醫(yī)，2014，36(12):1915-1916.

6 趙先文,江波,韓存芝.大腸癌患者血清腫瘤標(biāo)志物含量測定與臨床研究[J].中華腫瘤雜志,2005,27(5):286-288.

7 Liu J, Huang XE. Clinical application of serum tumor abnormal protein from patients with gastric cancer[J]. Asian Pac J Cancer Prev, 2015, 16(9): 4041-4044．

8 曹奎杰,劉燕婕. 卵巢上皮癌患者 ABO 血型抗原表達(dá)異常與血清糖鏈蛋白水平的關(guān)系[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2010,33(3):267-268．

9 Granger CL, Parry SM, Denehy L.The self-reported Physical Activity Scale for the Elderly (PASE) is a valid and clinically applicable measure in lung cancer [J].Support Care Cancer, 2015, 23(11):3211-3218.

10 張志軍，張永平，景建闖. 不同麻醉及鎮(zhèn)痛方法對肺癌患者T細(xì)胞影響[J].中國公共衛(wèi)生，2014，30(7):978-980.

11 Hu CY, Zhang YH, Wang T, et al. Interleukin-2 reverses CD8(+) T cell exhaustion in clinical malignant pleural effusion of lung cancer [J]. Clin Exp Immunol, 2016, 186(1): 106-114.

12 吳姍姍,嚴(yán)峰,鄧玉玲,等.小細(xì)胞和非小細(xì)胞肺癌晚期患者CD3+CD4+及CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞亞群的差異[J].中國免疫學(xué)雜志,2015,31(1):114-116,121.

13 王桂枝, 秦文華. 化療對腫瘤患者淋巴細(xì)胞亞群的影響[J].中華全科醫(yī)學(xué)，2009,12(7):1307-1308.