劉騰飛，董明輝,*，楊代鳳，張存政，顧俊榮，徐德良

茶是經(jīng)過加工處理的茶樹鮮葉加入沸水后制成的具有芳香氣味的飲料，是世界三大天然飲料之一，具有豐富的營養(yǎng)和保健功效[1-2]，備受消費(fèi)者的青睞。茶葉在種植、加工、貯運(yùn)、銷售等過程中極易受到有毒化學(xué)物質(zhì)的污染，如農(nóng)藥殘留、重金屬殘留、真菌毒素等，嚴(yán)重影響茶葉的質(zhì)量和安全，對人體健康造成極大的威脅，近年來引起人們越來越多的關(guān)注。

為了有效地對茶葉的質(zhì)量與安全進(jìn)行監(jiān)管，建立高效率、高通量、高選擇性和高靈敏度的檢測技術(shù)尤為重要。本文對近年來茶葉質(zhì)量安全的主要化學(xué)影響因素農(nóng)藥殘留、重金屬殘留和真菌毒素的典型檢測技術(shù)進(jìn)行了總結(jié)，包括它們的來源及危害、樣品前處理技術(shù)和檢測技術(shù)，并對未來的發(fā)展趨勢進(jìn)行了展望，以期為今后開展相關(guān)的檢測研究提供參考。

1 茶葉中農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)

1.1 農(nóng)藥殘留來源及危害

農(nóng)藥是茶葉生產(chǎn)中必不可少的生產(chǎn)資料，被廣泛用于殺滅害蟲、清除雜草、控制病害。主要常用的農(nóng)藥包括擬除蟲菊酯類、有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、煙堿類、沙蠶毒素類、植物生長調(diào)節(jié)劑類等。隨著農(nóng)藥使用的日趨廣泛，不合理使用、亂用、濫用農(nóng)藥造成的危害也逐漸顯現(xiàn)。據(jù)報道，目前茶葉上的農(nóng)藥殘留已超過300 種[3]。農(nóng)藥殘留很難徹底消除，某些農(nóng)藥由于自身的不穩(wěn)定性，其含量會在茶葉上自然消解而減少，但長期攝入會對人體產(chǎn)生急性或慢性毒性，很多農(nóng)藥甚至?xí)鹚^致癌、致畸、致突變的“三致”問題[4-5]。茶葉中農(nóng)藥殘留的產(chǎn)生一方面來自于茶園直接施藥，茶樹葉片對農(nóng)藥的吸收，特別是農(nóng)藥使用不科學(xué)，如使用違禁農(nóng)藥和高殘留農(nóng)藥、農(nóng)藥噴施濃度或劑量過高、違反農(nóng)藥安全間隔期要求、在即將收獲時施藥或在施藥后未到安全間隔期采摘加工等，均會導(dǎo)致農(nóng)藥殘留過高甚至超標(biāo)；另一方面可能是由于茶葉生長的環(huán)境受到污染，茶葉在生長的過程中吸收了環(huán)境土壤或水源中的農(nóng)藥污染物而產(chǎn)生農(nóng)藥殘留[6]。

1.2 樣品前處理技術(shù)

為了獲得良好的準(zhǔn)確性、靈敏度和選擇性，茶葉樣品的前處理過程對于檢測方法極為重要。目前已有許多關(guān)于茶葉樣品前處理技術(shù)和方法的研究，以提高檢測方法的靈敏度和選擇性。針對不同類型茶葉、不同提取和凈化目的，常用的農(nóng)藥殘留前處理技術(shù)主要有索氏提取、振蕩提取、均質(zhì)提取、超聲提取、固相萃取、固相微萃取、分散固相萃取、分散液相微萃取、加速溶劑萃取、凝膠滲透色譜、基質(zhì)固相分散萃取、微波輔助萃取、攪拌棒吸附萃取、納米材料富集等[7-17]，不同前處理技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)見表1。

表1 茶葉中農(nóng)藥殘留檢測的樣品前處理方法比較Table 1 Comparison of different sample pretreatment methods for pesticide residues in tea

1.3 農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)

隨著新型分析儀器和技術(shù)的發(fā)展，越來越多的方法被應(yīng)用于茶葉農(nóng)藥殘留的分析，主要有色譜法、光譜法、免疫法等，其中色譜法包括GC、HPLC、色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等技術(shù)，應(yīng)用最廣泛。

1.3.1 色譜法

GC法主要用于易氣化、熱穩(wěn)定性好的化合物的測定，多用于分離和測定茶葉中的有機(jī)磷類、有機(jī)氯類、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留。常用的檢測器有電子捕獲檢測器（electron capture detector，ECD）、火焰光度檢測器（flame photometric detector，F(xiàn)PD）和氮磷檢測器（nitrogen phosphorus detector，NPD）。

Hou Xiaohong等[18]建立了GC-ECD法檢測綠茶、紅茶、普洱茶、茉莉花茶、鐵觀音茶中的聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、氰戊菊酯8 種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的分析方法。樣品以乙醇為溶劑，采用超聲提取，分散液相微萃取法凈化。通過對分散液相微萃取法進(jìn)行優(yōu)化，8 種目標(biāo)農(nóng)藥的富集因子在292～883之間。該方法的線性范圍為0.005～0.100 mg/kg，回收率為92.1%～99.6%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（relative standard deviation，RSD）小于6.0%，檢出限（limit of detection，LOD）為0.08～0.50 μg/kg。與Wang Chun[19]、Matsadiq[20]等報道的方法相比，該方法靈敏度高，LOD低，提取溶劑采用低毒的乙醇，使用量僅有2.4 mL，是一種環(huán)境友好的茶葉農(nóng)藥殘留檢測新技術(shù)。將該方法應(yīng)用于實(shí)際樣品分析，在綠茶、茉莉花茶、鐵觀音茶樣品中均檢測到聯(lián)苯菊酯、高效氯氟氰菊酯和氯氰菊酯，含量依次為98～200、5～23、19～27 μg/kg，紅茶、普洱茶樣品未檢測到相關(guān)農(nóng)藥殘留。Liu Dan等[21]建立了GC-ECD法檢測茶葉中有機(jī)氯類和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的分析方法。樣品通過直接懸浮液滴微萃取法提取、凈化，可以顯著降低茶葉基質(zhì)的干擾。該方法的線性范圍為0.000 5～2.000 0 μg/mL，回收率在80.0%～120.8%之間，RSD值為0.8%～19.9%，LOD值為0.04～1.00 μg/L。Moinfar等[22]建立了分散液-液微萃取結(jié)合GC-FPD法檢測茶葉中10 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的分析方法。該方法快速、準(zhǔn)確、溶劑用量少、靈敏度高，LOD值為0.03～1.00 μg/kg，回收率在83.3%～117.4%，RSD值為3.0%～7.8%。Oh[23]建立了GC-NPD法測定綠茶中194 種農(nóng)藥殘留的檢測方法。樣品采用丙酮-乙腈混合溶劑提取，二氯甲烷分離，弗羅里硅土固相萃取柱凈化，待測農(nóng)藥中有147 種農(nóng)藥殘留的回收率大于70%。

對于一些極性強(qiáng)、不易揮發(fā)、熱穩(wěn)定性差的農(nóng)藥，如氨基甲酸酯類、磺酰脲類、苯氧羧酸類等，不適于使用GC法檢測，HPLC為這些農(nóng)藥殘留的檢測提供了強(qiáng)有力的工具。與GC法相比，HPLC流動相參與分離機(jī)制，通過靈活調(diào)節(jié)其組成、比例和pH值，可使許多極難分離的待測農(nóng)藥得以分析。HPLC常用的檢測器有紫外檢測器（ultraviolet absorption detector，UVD）、熒光檢測器（fluorescence detector，F(xiàn)LD）和二極管陣列檢測器（diode array detector，DAD）。

Liang Pei等[24]建立了HPLC-DAD法檢測茶葉中氯磺隆、芐嘧磺隆、氯嘧磺隆、吡嘧磺隆等4 種磺酰脲類除草劑的分析方法。樣品以氰基硅膠、多壁碳納米管（multiwalled carbon nanotube，MWCNT）為分散劑和凈化劑，經(jīng)基質(zhì)固相分散萃取，直接液-液微萃取凈化后，采用ZORBAX Eclipse XDB-C18柱分離，乙酸-甲醇-水（0.5∶50∶50，V/V，下同）洗脫分離。該方法的線性范圍為0.005～10.000 μg/g，LOD值為1.31～2.81 ng/g，RSD值小于6.95%，平均回收率為72.8%～110.6%。用該方法對當(dāng)?shù)爻匈徺I的綠茶、紅茶、烏龍茶3 種茶葉樣品進(jìn)行分析，在所有樣品中均未檢出相關(guān)農(nóng)藥殘留。

Hou Ruyan等[25]采用HPLC-UVD法檢測茶葉中呋蟲胺、烯啶蟲胺、噻蟲嗪、吡蟲啉、噻蟲胺、氯噻啉、啶蟲脒、噻蟲啉等8 種新煙堿類農(nóng)藥殘留。樣品經(jīng)乙腈高速均質(zhì)提取，石墨化碳黑（graphitized carbon black，GCB）與N-丙基乙二胺（primary secondary amine，PSA）固相萃取凈化后，采用Gemini C18柱分離，甲醇-水梯度洗脫分離。該方法的線性范圍為0.02～1.00 mg/L，回收率在71.4%～106.6%，RSD值小于10%，定量限（limit of quantitation，LOQ）為0.02～0.10 mg/kg。用該方法對53 份出口綠茶和紅茶樣品進(jìn)行分析，在其中2 份樣品中檢測到吡蟲啉，含量在0.18～0.27 mg/kg之間，高于歐盟規(guī)定的茶葉限量標(biāo)準(zhǔn)（0.05 mg/kg），但遠(yuǎn)低于日本規(guī)定的限量標(biāo)準(zhǔn)（10～50 mg/kg）。

Wu等[26]建立了HPLC-FLD法測定茶葉中19 種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法。樣品采用乙腈高速均質(zhì)提取，氨基固相萃取柱凈化，以反相Spherical C18柱分離，乙腈-水梯度洗脫分離。該方法的線性范圍為0.05～10.00 mg/L，回收率為65%～135%，RSD值小于20%，LOD值為0.000 5～0.023 0 mg/L，LOQ值為0.008～0.077 mg/L。采用該方法對2004—2005年臺灣地區(qū)部分茶葉中農(nóng)藥殘留的污染情況進(jìn)行調(diào)查，共采集4 133 份茶葉樣品，主要來自當(dāng)?shù)氐牟枞~加工廠和茶葉市場。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，共有2 種農(nóng)藥殘留在樣品中被檢測到，分別是西維因和克百威。其中，西維因在2004年和2005年均被檢測到，檢出率為0.086%～0.384%，含量為0.01～1.39 mg/kg。克百威僅在2005年被檢到，檢出率和含量分別為0.043%、0.01 mg/kg。

GC和HPLC是茶葉農(nóng)藥殘留檢測的經(jīng)典方法，但是假陽（陰）性誤判、高LOD以及復(fù)雜的樣品前處理等不足使得其難以滿足茶葉中多殘留檢測要求。色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，如GC-MS、GC-串聯(lián)質(zhì)譜（GC tandem mass spectrometry，GC-MS/MS）、HPLC-串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC tandem mass spectrometry，HPLC-MS/MS）等，結(jié)合了色譜與質(zhì)譜兩者的優(yōu)點(diǎn)，將色譜的高分離性能和質(zhì)譜的高鑒別特征相結(jié)合，在農(nóng)藥殘留的多類多組分檢測上具有高靈敏度、高通量的優(yōu)勢，已廣泛應(yīng)用于茶葉質(zhì)量安全的確證研究。三重四極桿（triple quadrupole，QqQ）能減少與目標(biāo)農(nóng)藥組分共同洗脫出來的化合物和基質(zhì)的干擾，降低了對色譜分離性能的要求，具有更低的信噪比，而且采用多反應(yīng)離子監(jiān)測（multiple reaction monitoring，MRM）模式比選擇離子監(jiān)測（selected ion monitoring，SIM）模式對待測物的分析更為可靠。特別是對超低濃度農(nóng)藥殘留，分析結(jié)果線性范圍寬、重復(fù)性好、準(zhǔn)確度高。因此，QqQ比單四極桿具有更高的靈敏度[27]。由于提高了信噪比，降低了檢測限，即使在有大量雜質(zhì)干擾的情況下，這些檢測技術(shù)也能實(shí)現(xiàn)對痕量農(nóng)藥殘留的分析。

Kanrar等[28]采用GC-MS法同時檢測茶葉、茶湯和茶渣中的67 種農(nóng)藥殘留。樣品用乙酸乙酯-正己烷提取后，以PSA、GCB和弗羅里硅土為吸附劑進(jìn)行分散固相萃取。該方法凈化效率高，基質(zhì)效應(yīng)低，29 min內(nèi)可完成樣品中所有組分的分析和確證，回收率為70%～120%，RSD值小于20%，定量限低于歐盟規(guī)定的茶葉限量標(biāo)準(zhǔn)。

Peng Chifang等[29]采用GC-MS同時檢測茶葉中的阿特拉津、乙烯菌核利、腐霉利、氟菌唑、抑霉唑、噻嗪酮、丙環(huán)唑、氯苯嘧啶醇、噠螨靈9 種有機(jī)雜環(huán)類農(nóng)藥殘留。樣品采用丙酮-正己烷混合溶劑提取，以GCB和中性Al2O3為吸附劑固相萃取凈化，顯著減小了基質(zhì)的干擾，所有待測農(nóng)藥均達(dá)到分離檢測要求，在0.02～40.00 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，LOD值為0.01～5.00 mg/kg，加標(biāo)回收率在73%～116%之間，RSD值為3%～27%。

Zhao Pengyue等[30]采用HPLC-MS/MS確證分析綠茶、烏龍茶、普洱茶中的37 種農(nóng)藥殘留。樣品采用乙腈提取，以MWCNT、PSA和GCB為固相吸附劑進(jìn)行分散萃取凈化，有效地降低了基質(zhì)帶來的背景干擾。該方法的LOD值為5～20 μg/kg，平均回收率為70%～111%，RSD值小于14%。

Chen Hongping等[31]建立了GC-MS/MS檢測綠茶、烏龍茶、紅茶中70 種農(nóng)藥殘留的分析方法。茶樣采用乙腈高速均質(zhì)提取，以MWCNT、PSA、GCB和C18為吸附劑進(jìn)行分散固相萃取凈化。11 種待測農(nóng)藥表現(xiàn)出較強(qiáng)的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)。該方法的線性范圍為10～1 000 μg/L，回收率為71%～105%，RSD值小于20%，LOQ值為5～25 μg/kg。

Cao Yalin等[32]建立了HPLC-MS/MS同時定量分析烏龍茶、紅茶、綠茶和花茶中16 種氨基甲酸酯類、有機(jī)磷類和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的檢測方法。樣品采用甲醇溶劑提取，以C18和弗羅里硅土為吸附劑基質(zhì)分散固相萃取凈化。該方法的LOD值為0.01～1.38 ng/g，LOQ值為0.03～4.74 ng/g，回收率在87.7%～99.6%之間，RSD值小于10%，所測農(nóng)藥的線性范圍為1～500 ng/g（擬除蟲菊酯為2～800 ng/g）。樣品檢測結(jié)果表明，4 種茶葉均不同程度地受到農(nóng)藥的污染，檢出農(nóng)藥主要包括滅多威、樂果、馬拉硫磷、毒死蜱、甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯和氰戊菊酯。除滅多威外，其他農(nóng)藥的殘留量均低于歐盟規(guī)定的茶葉限量標(biāo)準(zhǔn)，其中，聯(lián)苯菊酯在所有樣品中均被檢測到，含量為14.18～1 700.79 ng/g。

HPLC-MS/MS具有高選擇性、高靈敏度的特點(diǎn)，但仍要對樣品進(jìn)行復(fù)雜的凈化過程以降低檢測時的基質(zhì)效應(yīng)，尤其是對于基質(zhì)復(fù)雜的茶葉樣品，固相萃取等前處理方法雖然可以起到除雜凈化作用，但費(fèi)時費(fèi)力。相比而言，在線凈化技術(shù)（如Turbo Flow技術(shù)）可以快速、全自動地處理分析樣品，與色譜分離檢測系統(tǒng)串聯(lián)，實(shí)現(xiàn)在線檢測的目標(biāo)。該技術(shù)結(jié)合了擴(kuò)散、化學(xué)和體積排除的原理，通過改變凈化流動相配比和選擇不同功能的色譜柱，實(shí)現(xiàn)不同化學(xué)性質(zhì)物質(zhì)的在線凈化富集，然后通過切換流路，用合適的流動相將分析物洗脫至分析柱進(jìn)行色譜分離分析。在線凈化省去了樣品前處理中大多數(shù)費(fèi)時的步驟，不僅提高了樣品處理的通量，還減小了操作過程中的錯誤和可變因素帶來的誤差，由于除去了大部分的基質(zhì)干擾影響，使得目標(biāo)農(nóng)藥殘留的響應(yīng)更好、信噪比更高。但目前將該技術(shù)應(yīng)用于茶葉基質(zhì)中的農(nóng)藥殘留尤其是多殘留檢測的研究較少。

李慧思等[33]建立了茶葉中吡蟲啉、啶蟲脒、噻蟲啉、噻蟲嗪和噻蟲胺5 種煙堿類農(nóng)藥殘留的在線凈化-HPLC-MS/MS檢測方法。樣品采用水浸泡、乙腈提取，提取液經(jīng)在線凈化柱Cyclone-P凈化，乙腈-水溶液（3∶7，V/V）將分析物洗脫轉(zhuǎn)入至Eclipse XDB-C18分析柱，乙腈-體積分?jǐn)?shù)0.1%甲酸溶液為流動相進(jìn)行梯度洗脫，經(jīng)色譜分離后，用MS/MS檢測。5 種煙堿類農(nóng)藥在1.0～10.0 μg/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，LOQ值均為0.01 mg/kg，在茶葉中3 個水平的添加回收率在68.0%～113.2%之間，RSD值在3.2%～7.6%之間。采用本方法和GB/T 23205—2008《茶葉中448 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》方法[34]分別對含吡蟲啉和啶蟲脒的茶葉樣品進(jìn)行檢測，2 種方法的檢測結(jié)果基本一致，但該方法無需經(jīng)過復(fù)雜的樣品前處理過程，實(shí)現(xiàn)了樣品凈化的全自動化，整個檢測過程十分簡便。

葉芳挺等[35]建立了在線凈化-HPLC-MS/MS測定茶葉基質(zhì)中撲滅通、莠滅凈、三唑酮等30 種農(nóng)藥殘留的方法。茶樣經(jīng)乙腈超聲提取后，經(jīng)在線凈化柱Turbo Flow Cyclone凈化，使用Hypersil GOLD色譜柱分離，以0.1%甲酸-水溶液和0.1%甲酸-甲醇溶液為流動相進(jìn)行梯度洗脫，在電噴霧正離子選擇反應(yīng)監(jiān)測模式下檢測。結(jié)果表明，30 種目標(biāo)農(nóng)藥在6.25～100.00 μg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.993，線性范圍最低濃度點(diǎn)6.25 μg/L連續(xù)進(jìn)樣6 針，RSD值在2.85%～7.48%范圍內(nèi)。該方法在線凈化系統(tǒng)只有提取和過濾兩步，100 個樣品3 h就能處理完畢，極大地提高了日常工作效率，非常適合高通量實(shí)驗(yàn)室的分析任務(wù)。

超高效合相色譜（ultra-performance convergence chromatography，UPC2）[36]技術(shù)是近幾年推出的基于超臨界流體色譜的全新的色譜分離技術(shù)。該技術(shù)以超臨界CO2為主要的流動相，具有黏度低、傳質(zhì)性能好、分離效率高、綠色環(huán)保的優(yōu)勢，其色譜柱采用亞2 μm填料，與傳統(tǒng)色譜柱相比，粒徑更小，色譜柱理論塔板高度減小，更有利于試樣的分離。UPC2技術(shù)開辟了分離科學(xué)的新類別，其分析條件溫和，不受分析物揮發(fā)性的限制，對于揮發(fā)性或非揮發(fā)性的組分都能提供良好的保留和分離，其固定相可采用現(xiàn)有的正、反相液相色譜固定相材料，選擇性更加廣泛，對于分離結(jié)構(gòu)類似物[37-38]、手性化合物[39]等能提供更好的效果，正逐漸成為對傳統(tǒng)GC、HPLC方法的有力補(bǔ)充，為食品科學(xué)、分析科學(xué)等不同領(lǐng)域所遇到的分離難題提供了優(yōu)異的解決方案。王麗婷等[40]將茶葉樣品用石油醚提取，經(jīng)固相萃取凈化后，采用CO2為流動相主體，乙腈為助溶劑進(jìn)行梯度洗脫，建立了基于UPC2技術(shù)測定茶葉中聯(lián)苯菊酯的方法。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，聯(lián)苯菊酯的LOD值為20 μg/L，線性范圍為0.32～10.30 mg/L，在茶葉中的加標(biāo)回收率為88.7%～98.2%，RSD值為1.4%～2.8%。與GC-MS相比，使用UPC2檢測茶葉中的聯(lián)苯菊酯，樣品的前處理過程更加簡單快速方便，且回收率滿足樣品檢測要求。同時，在UPC2實(shí)驗(yàn)中，聯(lián)苯菊酯保留時間為0.95 min，而GC-MS實(shí)驗(yàn)中聯(lián)苯菊酯的保留時間為18 min，UPC2在較短時間內(nèi)達(dá)到很好的分離，具有更高的檢測效率，同時也節(jié)約了實(shí)驗(yàn)成本。四極桿-飛行時間質(zhì)譜（quadrupoleflight time mass spectra，Q-TOF/MS）具有極快的掃描速度和高靈敏度，能夠提供高分辨率精確質(zhì)荷比離子用于化合物定性定量分析，同時利用串聯(lián)質(zhì)譜功能進(jìn)行二級質(zhì)譜裂解，可獲得大量高分辨質(zhì)譜碎片離子信息，用于進(jìn)一步的結(jié)構(gòu)確證和定量分析，將其與UPC2聯(lián)用后作為高分辨檢測設(shè)備，已經(jīng)在茶葉安全研究領(lǐng)域開始得到應(yīng)用。趙悅臣[41]、張新忠[42]等利用UPC2-Q-TOF/MS技術(shù)分別建立了手性農(nóng)藥腈菌唑?qū)τ丑w、順式-氟環(huán)唑?qū)τ丑w在紅茶中的殘留分析方法。樣品采用乙腈-水混合溶液超聲提取，經(jīng)Cleanert TPT固相萃取柱凈化后，采用Chromega Chrial CCA色譜柱分離，CO2-異丙醇（95∶5，V/V）為流動相洗脫，UPC2-Q-TOF/MS基質(zhì)外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，目標(biāo)農(nóng)藥均在0.01～1.00 mg/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)大于0.98。紅茶中腈菌唑?qū)τ丑w的平均回收率為84.1%～86.4%，RSD值小于9.6%，LOQ值為0.01 mg/kg；順式-氟環(huán)唑?qū)τ丑w平均回收率為74.1%～84.0%，RSD值小于8%，LOQ值為0.01 mg/kg。采用該技術(shù)對20 份市售紅茶樣品進(jìn)行檢測，均未檢出腈菌唑?qū)τ丑w、順式-氟環(huán)唑?qū)τ丑w殘留。

UPC2作為新興色譜分析技術(shù)，其基礎(chǔ)理論研究還不夠成熟，還需要不斷深入，另外UPC2，特別是UPC2-Q-TOF/MS儀器價格昂貴，操作要求高，維護(hù)難度大，難以大范圍的配備和使用，使用普及率不高。

色譜技術(shù)尤其是色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)用于檢測茶葉農(nóng)藥殘留精度高且LOD低（表2），在有條件的大型實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用非常廣泛，然而針對茶葉農(nóng)藥殘留、特別是混合農(nóng)藥殘留時，樣品前處理方式復(fù)雜，且所需儀器大多比較貴重、體積大，無法滿足快速、低成本、現(xiàn)場檢測的要求。

表2 色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在茶葉農(nóng)藥殘留檢測中的應(yīng)用Table 2 Application of chromatography coupled with mass spectrometry for the determination of pesticide residues in tea

1.3.2 光譜法

三維熒光法是近年來發(fā)展快速的光譜分析技術(shù)，它能夠獲得待測物質(zhì)完整的熒光特征信息，得到與激發(fā)光、發(fā)射光波長同時變化的光度信息的三維譜圖，等高線圖具有指紋性，利用這些光譜信息可完成多組分混合物體系中較為復(fù)雜的定量與定性分析任務(wù)。它的特點(diǎn)和優(yōu)勢是靈敏度高、選擇性強(qiáng)、簡便快捷和破環(huán)性小，因此在快速、實(shí)時和無損檢測方面有著巨大的潛力，廣泛應(yīng)用于食品安全檢測領(lǐng)域，如利用三維熒光法檢測牛奶中的金霉素[48]、鴨肉中的西維因[49]、豬肉中的萊克多巴胺[50]等藥物殘留。

王書濤等[51]利用三維熒光技術(shù)分析了綠茶、鐵觀音的正己烷溶液及其氯菊酯農(nóng)藥殘留溶液的熒光特性，根據(jù)三維熒光光譜繪制了三維等高線譜圖，得出這2 種茶葉的熒光峰均位于激發(fā)波長（λex）/發(fā)射波長（λem）＝（390～410）/675 nm，氯菊酯的熒光峰λex/λem＝300/330 nm。為了準(zhǔn)確測定這2 種茶葉中氯菊酯農(nóng)藥殘留的含量，采用遺傳算法優(yōu)化的徑向基函數(shù)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)對其進(jìn)行了分析，當(dāng)訓(xùn)練到74 次時，均方差精度達(dá)到10-3，綠茶、鐵觀音的氯菊酯溶液預(yù)測樣本的平均回收率分別為99.35%和98.89%，平均RSD值分別為1.25%和1.21%。與建立的徑向基函數(shù)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)模型相比，三維熒光分析技術(shù)與遺傳算法優(yōu)化的徑向基函數(shù)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)相結(jié)合能夠較好地檢測出茶葉中氯菊酯農(nóng)藥殘留的含量，檢測靈敏度大幅提高，LOD范圍廣，可達(dá)0.004 8～24.000 0 mg/kg，遠(yuǎn)低于歐盟規(guī)定的茶葉中氯菊酯最高殘留限量0.1 mg/kg，為檢測農(nóng)藥殘留提供了一種快速簡便的新方法。

盡管三維熒光檢測存在諸多的優(yōu)點(diǎn)，但也存在一定的應(yīng)用局限性：首先，該技術(shù)對待測物質(zhì)有一定的限制，檢測過程中必須能夠捕捉到熒光信息，即待測物質(zhì)的分子必須有一定的吸收激發(fā)光的結(jié)構(gòu)，并且具有較高的熒光量子產(chǎn)率；其次，該方法待測物質(zhì)的熒光強(qiáng)度和熒光光譜容易受到環(huán)境因素（如溫度、溶劑、pH值等）的影響；最后，三維熒光分析中會受到溶液介質(zhì)中微小粒子或分子的影響而產(chǎn)生散射峰（如瑞利散射和拉曼散射）。

1.3.3 免疫檢測法

免疫檢測法是基于抗原和抗體間的高選擇性反應(yīng)而建立起來的痕量檢測技術(shù)，具有檢測速度快、費(fèi)用低廉、儀器簡單易攜、靈敏度高和特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，非常適用于緊急情況下的現(xiàn)場快速檢測，是一些高毒農(nóng)藥殘留初篩測定的好方法。酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）是當(dāng)前使用最多、被普遍接受的一類免疫檢測方法，在茶葉農(nóng)藥殘留檢測領(lǐng)域應(yīng)用最成熟、商品化程度也最高，目前已建立并開發(fā)了茶葉中多種不同類型農(nóng)藥殘留的免疫檢測技術(shù)、試劑盒和試紙條。

Lu Yang等[52]合成制備了針對多種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的廣譜多克隆抗體，建立了擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的直接ELISA檢測方法，可同時測定綠茶中溴氰菊酯、氯氰菊酯、氟胺氰菊酯、氰戊菊酯和甲氰菊酯5 種農(nóng)藥殘留。通過優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，直接ELISA法中抗體的最佳用量為2.0 mg/mL，酶標(biāo)半抗原稀釋倍數(shù)為1.0×106倍，反應(yīng)體系的最適pH值為7.5，鹽質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.5%。茶樣采用正己烷-丙酮提取后，經(jīng)活性碳和弗羅里硅土固相萃取柱凈化，用含質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%魚粉蛋白胨的磷酸鹽緩沖液稀釋50 倍后使用ELISA法測定，加標(biāo)回收率為84.50%～98.10%，RSD值為1.51%～3.94%，靈敏度（IC50）為1.1～2.0 μg/L。相同前處理條件下，采用ELISA法和GC-ECD法檢測結(jié)果具有很好的一致性，相關(guān)系數(shù)r＝0.998 4，表明ELISA法適用于茶葉樣品中5 種農(nóng)藥殘留的快速檢測。

Song Yang等[53]建立了快速測定茶葉中氰戊菊酯的ELISA方法。茶樣采用正己烷-丙酮提取后，經(jīng)活性碳和弗羅里硅土固相萃取柱凈化用于ELISA測定。該方法的回收率在76.67%～91.43%之間，變異系數(shù)為3.75%～26.00%，IC50為9.0 μg/L，LOD（IC15）為0.5 μg/L，與采用GC-ECD法檢測結(jié)果具有很好的一致性（r＝0.998 4），適用于茶葉樣品中氰戊菊酯的快速檢測。

Zhang Yan等[54]建立了用于測定茶葉中硫丹的ELISA方法。茶樣采用甲醇提取后，用含0.5%明膠的磷酸鹽緩沖液稀釋900 倍，直接用于ELISA測定。該方法的回收率為63.13%～125.61%，IC50為5.3 μg/kg，IC15為0.8 μg/kg。采用GC和GC-MS對方法進(jìn)行確證，檢測結(jié)果間具有較好的一致性。但ELISA法顯著減少了樣品前處理過程，而且更易操作。

免疫檢測法特別是ELISA法作為高通量生物分析技術(shù)，與色譜等儀器分析方法相比，可以簡化甚至省去樣品前處理過程，在大量樣本和現(xiàn)場樣本快速篩選檢測中優(yōu)勢明顯。但該方法是一種半定量檢測技術(shù)，與待測農(nóng)藥結(jié)構(gòu)類似的化合物存在一定程度的交叉反應(yīng)，對基質(zhì)和不同實(shí)驗(yàn)條件的抗干擾能力差，容易出現(xiàn)假陽性，準(zhǔn)確性往往要用更精準(zhǔn)的色譜方法進(jìn)行驗(yàn)證。

2 茶葉中重金屬殘留檢測技術(shù)

2.1 重金屬來源及危害

原子質(zhì)量在63.5～200.6 u之間且密度大于5 g/m3的金屬稱作重金屬[55]，如鉛、銅、汞、鎘、鉻、鋅、鎳、鈷及類金屬砷等。隨著現(xiàn)代工業(yè)的迅速發(fā)展，重金屬殘留已成為繼農(nóng)藥殘留后又一影響茶葉質(zhì)量安全的重要因素。大氣沉降是茶葉中重金屬的重要來源之一[56]。工礦業(yè)生產(chǎn)活動、機(jī)動車燃料燃燒和輪胎磨損等每天產(chǎn)生大量的含重金屬的有害氣體和粉塵排向大氣，這些重金屬污染物通過自然沉降、雨淋沉降等途徑被茶樹或土壤吸附最終進(jìn)入到茶葉中。茶園土壤是茶葉中重金屬的主要來源[57]。隨著茶園周邊各類企業(yè)的增加，工業(yè)“三廢”的排放、大氣重金屬沉降、茶園中農(nóng)藥、化肥等農(nóng)資的大量使用，使土壤環(huán)境受到不同程度的重金屬污染。重金屬通過茶樹根系由土壤向茶葉中遷移并積累，從而導(dǎo)致茶葉的污染。此外，茶葉加工過程中茶葉與加工機(jī)具發(fā)生摩擦和碰撞，金屬表面材料的磨損容易沾染茶葉[58-59]，也容易造成茶葉重金屬污染。重金屬污染范圍廣、持續(xù)時間長、生物毒性顯著，很難被降解代謝，具有蓄積性，可通過食物鏈在生物體內(nèi)富集，甚至轉(zhuǎn)化為毒害性更大的甲基化合物（如甲基汞），長期飲用含過量重金屬殘留的茶葉，很容易造成人體慢性蓄積中毒，導(dǎo)致心血管、腎臟、骨骼、中樞神經(jīng)功能損傷等嚴(yán)重疾病[60]。因此，對茶葉中重金屬含量進(jìn)行檢測非常關(guān)鍵，以確保重金屬攝入量在允許的范圍內(nèi)。

2.2 樣品前處理技術(shù)

重金屬常以化合態(tài)形式存在于不同樣品中，在檢測其含量時，首先要對實(shí)際樣品進(jìn)行消解處理，破壞有機(jī)質(zhì)，使重金屬轉(zhuǎn)變?yōu)殡x子態(tài)，然后再利用不同檢測儀器進(jìn)行測定[61]。茶葉重金屬檢測中常用的前處理技術(shù)有干灰化法、濕式消解法、微波消解法和高壓消解法[62-64]。近年來，出現(xiàn)了一些快速且簡單的前處理技術(shù)，如酸浸提法、超聲提取法、固體懸浮液進(jìn)樣法等，已成功應(yīng)用于茶葉中重金屬元素的檢測。

酸浸提法利用鹽酸或硝酸直接浸泡茶葉樣品，將其中的待測重金屬元素浸出來。袁建等[65]用酸浸提法處理茶葉樣品，以2 mol/L的鹽酸為浸提液，在70 ℃時浸泡60 min提取茶葉中的重金屬，使用石墨爐原子吸收光譜法（graphite furnace atomic absorption spectrometry，GFAAS）測定。銅的回收率大于96%，鉛的回收率大于93%。與灰化消解相比，酸浸提法操作簡單方便、速度快，但酸消耗量大，不是所有被測元素都能夠提取完全，回收率相對較低。

超聲提取法利用超聲波輻射壓強(qiáng)產(chǎn)生的強(qiáng)烈空化效應(yīng)、機(jī)械振動和擾動效應(yīng)，增大物質(zhì)分子的運(yùn)動頻率和速度，增加溶劑的穿透力，從而加速目標(biāo)成分進(jìn)入溶劑促進(jìn)提取。公維磊等[66]采用鹽酸作為提取劑，利用超聲提取-火焰原子吸收光譜法（flame atomic absorption spectrometry，F(xiàn)AAS）測定茶葉樣品中的鋅、鐵、銅、錳等重金屬，并以濕法消解作為對比，優(yōu)化了超聲時間、反應(yīng)溫度和鹽酸濃度等條件，確定了最佳超聲時間為20 min，反應(yīng)溫度為50 ℃，鹽酸濃度為0.75 mol/L。4 種重金屬元素的LOD值依次為0.005、0.006、0.008、0.007 mg/L，回收率為94.47%～99.28%，RSD值小于10%。與濕法消解相比，該方法可同時處理多個樣品，操作簡便快速，耗時更短，適用于茶葉中鋅、鐵、銅、錳等痕量元素的定量分析。

固體懸浮液進(jìn)樣法是以固體細(xì)粉和漿料在合適的溶劑中以懸浮狀態(tài)進(jìn)樣的技術(shù)，綜合了液體進(jìn)樣和固體進(jìn)樣的優(yōu)點(diǎn)，該方法不需要對樣品進(jìn)行任何化學(xué)處理，可以直接進(jìn)樣測定，具有簡便、快速、實(shí)用的優(yōu)勢，且節(jié)省了大量具腐蝕性的試劑，不污染環(huán)境。鄧世林等[67]以質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.15%的瓊脂懸浮液為懸浮劑，將固體茶葉樣品均勻、穩(wěn)定地懸浮于瓊脂膠體中，由自動進(jìn)樣器直接注入石墨爐，準(zhǔn)確地測定了茶葉中的鎘含量。該方法的線性范圍為0～10 μg/L，LOD值為0.065 μg/L，加標(biāo)回收率為94%～106%，RSD值小于5%。利用該方法測定茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，測定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)值一致。該方法省去了繁瑣的樣品前處理過程，簡單、快速、準(zhǔn)確、實(shí)用。

上述幾種樣品前處理方法的優(yōu)缺點(diǎn)見表3。

表3 茶葉中重金屬檢測樣品前處理方法比較Table 3 Comparison of sample pretreatment methods for pesticide residues in tea

2.3 重金屬殘留檢測技術(shù)

表4 茶葉中重金屬殘留的檢測實(shí)例Table 4 Selected analytical methods for heavy metals in tea

重金屬的檢測方法種類多樣，表4列舉了茶葉中重金屬常見的傳統(tǒng)檢測方法，主要有：1）分光光度法（spectrophotometry，SP）；2）原子光譜法，包括FAAS、GFAAS和原子熒光光譜法（atomic fluorescence spectrometry，AFS）；3）電感耦合等離子體法，包括電感耦合等離子體-質(zhì)譜法（inductively coupled plasmamass spectrometry，ICP-MS）和電感耦合等離子體-原子發(fā)射光譜法（inductively coupled plasma-atomic emission spectrometry，ICP-AES）。

2.3.1 SP法

SP法操作簡便，所需儀器簡單，檢測成本低，穩(wěn)定性和回收率較高，是檢測重金屬最簡單的一類方法。李景梅等[81]以干灰化法處理茶葉樣品，以DBC-偶氮胂為顯色劑，在pH 4.1的醋酸鈉緩沖介質(zhì)和十六烷基三甲基溴化銨表面活性劑存在下，采用SP法測定了鐵觀音、茉莉和綠茶樣品中的鋁（Ⅲ）含量。該方法的回收率為98.3%～101.0%，LOD值為1.38 μg/L，RSD值為2.26%～2.51%，測得樣品中的鋁含量在0.59～1.23 μg/g之間。SP法使用簡單，但LOD一般較高，對含量較低的重金屬元素檢測效果不理想，有時要找到合適的顯色劑也比較困難。

2.3.2 原子光譜法

原子光譜法特征譜線單一、定性準(zhǔn)確，并根據(jù)比爾定律進(jìn)行定量測定，靈敏度高、線性范圍寬，是目前重金屬檢測中應(yīng)用最普遍的一類方法。Hazer等[71]采用表面涂有離子交換樹脂XAD-1180的螯合樹脂分離富集，建立了FAAS測定茶葉樣品中鎘（II）、錳（II）、鎳（II）、鉛（II）和鋅（II）等金屬含量的方法。該方法的富集倍數(shù)在10～30 倍之間，樹脂對鎘（II）和鎳（II）的吸附能力分別為5.3 mg/g和3.7 mg/g，5 種被測元素的LOD值依次為0.7、10.0、3.1、29.0、0.8 μg/L，回收率大于95%。通過對標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的分析，驗(yàn)證了方法的準(zhǔn)確性和精確性。該方法還可用于水樣和尿素肥料樣品中重金屬的測定。Citak等[82]提出了FAAS測定紅茶和綠茶樣品中鉛、銅、鎘等重金屬的新方法，利用氫氧化鋯共沉淀法對上述重金屬元素進(jìn)行分離富集，富集倍數(shù)為25 倍，根據(jù)不同質(zhì)量的鋯對共沉淀法的影響，確定在反應(yīng)中加入1 mg氫氧化鋯。該方法的回收率為95%～100%，LOD值為0.27～2.50 μg/L。該方法不僅能夠檢測茶葉樣品中的重金屬，還可用于煙草和咖啡樣品中重金屬的測定。Zhong Wensi等[83]采用微波消解-高分辨連續(xù)光源GFAAS法對中國部分地區(qū)7 種茶葉（綠茶、黃茶、白茶、烏龍茶、紅茶、普洱茶和茉莉茶）樣品中的重金屬元素鉛、鎘、鉻、銅和鎳進(jìn)行了研究。建立了樣品預(yù)處理、樣品消解和定量分析的實(shí)驗(yàn)方法，得到了良好的分析精密度（RSD 0.6%～2.5%）和回收率（98.91%～101.32%）。結(jié)果表明，在25 份被測茶葉樣品中，鉛的含量為0.48～10.57 mg/kg，其中，80%樣品的鉛含量超過了GB 2762—2012《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量》中的規(guī)定（鉛≤5 mg/kg）[84]；鎘和鉻的含量分別為0.01～0.39、0.27～2.45 mg/kg，均在NY 659—2003《茶葉中鉻、鎘、汞、砷及氟化物限量》標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的范圍內(nèi)（鎘≤1 mg/kg，鉻≤5 mg/kg）[85]；銅的含量為7.73～63.71 mg/kg，其中，36%的樣品銅含量超過了NY/T 288—2012《綠色食品 茶葉》標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定（銅≤30 mg/kg）[86]；鎳的含量為2.70～13.41 mg/kg。在不同類型茶葉中，以綠茶中5 種重金屬元素總含量最高（76.47 mg/kg），其次為紅茶（44.98 mg/kg）、普洱茶（43.35 mg/kg）、茉莉茶（40.82 mg/kg）和烏龍茶（25.98 mg/kg）。石杰等[87]以硝酸-雙氧水體系高壓消解處理茶葉樣品，采用氫化物-AFS法測定茶葉中的痕量鉍和鎘，方法的回收率在96.1%～104.0%之間，RSD值為1.43%～6.72%，LOD值依次為0.094 6、0.028 0 μg/L。應(yīng)用該方法對毛尖、銀針、野生苦丁、鐵觀音、碧螺春、茉莉花等茶葉樣品進(jìn)行分析，在所有樣品中均檢測到鉍和鎘，含量分別為3.65～118.54、7.30～21.93 ng/g。

原子光譜法操作簡單，分析方法成熟，但只能對茶葉中重金屬的總量進(jìn)行分析，且一次只能檢測一種元素，影響檢測速度，而且檢測重金屬元素的種類有限，如AFS法目前只能檢測砷、汞、硒、銻、鉍等十幾種金屬元素。

2.3.3 電感耦合等離子體法

ICP法檢測速度快、干擾少、靈敏度和精密度高，尤其是ICP-MS法，能夠同時測定多種重金屬元素，克服了原子吸收光譜法不能同時檢測多種元素的局限，以及原子發(fā)射光譜法光譜干擾嚴(yán)重、不適宜測定砷、鎘、汞等元素的缺點(diǎn)。

陳紅梅等[88]以微波消解法處理茶葉樣品，使用ICP-MS分析其中的鉛、鉻、砷、鎘、銅等重金屬元素，加入5 mL硝酸和0.5 mL過氧化氫作為消化劑，使磨碎的茶葉樣品消解完全，經(jīng)過優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，該方法的回收率為91%～108%，LOD值為0.03～0.23 μg/L，LOQ值為0.1～1.3 μg/L，RSD值小于10%。利用該方法對茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行檢測，5 種被測元素的測定值均在標(biāo)準(zhǔn)值范圍內(nèi)。該方法具有多元素同時測定、操作簡便快速、靈敏度高、準(zhǔn)確度好等優(yōu)點(diǎn)，適合廣泛推廣。Othman等[89]以25%的硝酸為消化劑微波消解處理綠茶樣品，使用ICP-MS測定其中的鉛含量。鉛的LOD、LOQ值分別為0.3、1.0 μg/L，檢測范圍為6.3～200.0 μg/L。用該方法對沙特阿拉伯市場上9 個進(jìn)口中國綠茶樣品進(jìn)行分析，在所有樣品中均檢測到鉛元素，含量范圍為0.231～6.340 mg/kg。

ICP-MS還可以與其他技術(shù)（如HPLC）聯(lián)用進(jìn)行重金屬元素的價態(tài)分析和形態(tài)分析。王欣等[90]建立了HPLC-ICP-MS測定幾種富硒功能食品中硒酸根（SeO24-）、亞硒酸根（SeO32-）、硒代蛋氨酸（selenomethionine，SeMet）、硒代胱氨酸（selenocystine，SeCys2）、硒脲和硒代乙硫氨酸6 種硒形態(tài)的分析方法。樣品中的硒形態(tài)使用蛋白酶XIV水解提取，采用Hamilton PRP-X100分析柱，在流動相為20 mmol/L檸檬酸、pH 6.0、梯度洗脫條件下，15 min內(nèi)可以完全分離。6 種硒形態(tài)的LOD值分別為0.7、0.5、4.1、1.3、13.6、11.9 μg/L。應(yīng)用該方法測定了深圳市區(qū)部分市場及商場的富硒茶葉、富硒酵母等含硒功能食品中的硒形態(tài)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，富硒酵母片中SeMet、SeCys2含量較高，合格率也最高。在41 份被測樣品中，超過75%的樣品未檢測到硒代氨基酸，而在有些富硒大米中檢測到SeO32-。表明該地區(qū)市場上的富硒功能食品缺乏有效監(jiān)管，存在部分通過噴施無機(jī)硒偽造富硒功能食品的情況，應(yīng)當(dāng)引起足夠重視。倪張林等[91]應(yīng)用HPLC-ICP-MS技術(shù)，建立了花茶中砷（Ⅲ、Ⅴ）、一甲基砷、二甲基砷、砷膽堿、砷甜菜堿6 種砷形態(tài)的分析方法。樣品在真空條件下采用水-磷酸進(jìn)行提取，用Hamilton PRP-X100陰離子交換柱，以碳酸銨溶液和硝酸銨/磷酸氫二銨作為流動相進(jìn)行梯度洗脫。該方法的回收率在89.9%～104.1%之間，RSD值小于4.2%，6 種砷形態(tài)的LOQ值均為0.5 μg/L。應(yīng)用該方法對當(dāng)?shù)爻? 種常見花茶，包括洋甘菊、胎菊、金銀花、玫瑰花、茉莉花等樣品進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，5 種花茶中砷形態(tài)以無機(jī)砷（Ⅲ、Ⅴ）為主，含量范圍為19.4～221.0 μg/kg，有機(jī)砷在各花茶樣品中均有檢出，含量范圍為6.2～53.8 μg/kg。??an?ar等[92]采用ICP-MS和HPLC-ICP-MS分析了幾種茶葉樣品和茶湯中鎳的總量及其形態(tài)（鎳（Ⅱ）、鎳-奎尼酸、鎳-檸檬酸）。在茶葉和茶湯鎳總量分析中，樣品采用硝酸-雙氧水微波消解處理，ICP-MS測定，方法的LOD、LOQ值分別為0.006、0.02 ng/mL。在茶湯鎳形態(tài)分析中，樣品采用CIM DEAE-1柱前處理，以0.6 mol/L NH4NO3為淋洗液，HPLC-ICP-MS分離測定，方法的LOD、LOQ值分別為0.15、0.5 ng/mL。在茶湯制備過程中，鎳的浸出率大于85%。用該方法對白茶、綠茶、烏龍茶、紅茶、甘菊茶和芙蓉茶等茶樣和茶湯進(jìn)行分析，鎳含量的范圍在1.21～14.40 mg/kg之間，除了芙蓉茶外，所有茶湯樣品中鎳形態(tài)以鎳（II）為主。

ICP-MS是一種先進(jìn)的重金屬檢測技術(shù)，適用于原子光譜法能檢測的所有金屬元素，但儀器價格昂貴，對環(huán)境條件和所用試劑要求嚴(yán)格，運(yùn)行成本高，操作也比較復(fù)雜，需要專業(yè)人員操作，一般在有條件的大、中型檢測中心應(yīng)用較多。

表5對幾種茶葉中重金屬檢測技術(shù)的分析性能進(jìn)行了簡單比較?？梢钥闯觯@些技術(shù)是相互補(bǔ)充的，沒有一種技術(shù)能夠滿足所有的分析要求。多種技術(shù)方法聯(lián)合使用（如HPLC-ICP-MS）是未來重要的發(fā)展方向。

表5 幾種典型的茶葉中重金屬檢測方法分析性能的比較Table 5 Comparison of several typical analytical methods for heavy metals in tea

2.3.4 其他方法

除上述檢測方法外，用于茶葉中重金屬含量的檢測方法還有ELISA法、化學(xué)傳感器法、X射線熒光光譜法等。

Liu Gongliang等[93]通過制備抗重金屬鎘的單克隆抗體，建立了茶葉中鎘含量的ELISA檢測方法。該方法具有較強(qiáng)的特異性，與鎘、鉛、汞、錳、鉻、鎳、鋅、鈉、鈣、鐵、鎂、銅、鋁、鈷、錫、鉀等金屬離子幾乎不存在交叉反應(yīng)，IC50為2.300 2 μg/L，IC15為0.200 2 μg/L，回收率在100.47%～103.86%之間，批內(nèi)及批間變異系數(shù)分別為1.73%～7.14%、3.63%～6.81%。與采用GFAAS法檢測結(jié)果間具有良好的一致性（r＝0.99）。徐旭明等[94]以硝酸-雙氧水體系微波消解，選擇超傳導(dǎo)性黏結(jié)劑離子液體1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽和功能化的MWCNT修飾絲網(wǎng)印刷碳電極，建立了一種新型、高靈敏度和高選擇性的電化學(xué)傳感器，結(jié)合差分脈沖溶出伏安法快速檢測茶葉樣品中的鉛含量。該方法的線性范圍為2～600 μg/L，LOD值為0.63 μg/L，回收率為88.73%～95.11%，檢測結(jié)果與ICP-MS法測定值無顯著性差異，可用于茶葉中痕量鉛簡單、經(jīng)濟(jì)的檢測。對市售5 種茶葉樣品采用該方法進(jìn)行分析，均檢測到含有較高含量的鉛，含量范圍0.72～2.06 mg/kg。秦旭磊等[95]建立了一種采用能量色散X射線熒光光譜法（energy dispersive X-ray fluorescence spectrometry，EDXRF）無損測定茶葉中銅、鐵、鋅、鉛4 種重金屬含量的快速分析方法。X射線熒光光子能量的敏感區(qū)域選擇在3～16 keV之間，低于此區(qū)間探測器無法響應(yīng)，高于此區(qū)間信噪比過低。該方法對環(huán)境條件要求低，且無需對茶葉樣品進(jìn)行化學(xué)處理，茶葉中4 種被測元素的平均LOD值為1.25 mg/kg。選用FAAS法測得茶葉中金屬元素含量作為標(biāo)準(zhǔn)值，通過比較，EDXRF法測得數(shù)值實(shí)際相對誤差小于6%，RSD值小于5%，經(jīng)t檢驗(yàn)P＞0.05，表明兩種方法所測結(jié)果沒有顯著差異，能夠在現(xiàn)場環(huán)境下對茶葉樣品進(jìn)行即時檢測，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

3 茶葉中真菌毒素檢測技術(shù)

3.1 真菌毒素來源及危害

真菌毒素，又稱霉菌毒素，是由某些真菌侵染食品、飼料及農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)生的、對人和動物有毒的次生代謝產(chǎn)物。常見的污染茶葉的真菌毒素有黃曲霉毒素（aflatoxin，AFT）、赭曲霉毒素A（ochratoxin A，OTA）、伏馬菌素（fumonisin，F(xiàn)B）、T-2毒素（T-2）、玉米赤霉烯酮（zearalenone，ZEA）等[96]。其中，AFT是目前發(fā)現(xiàn)的真菌毒素中毒性最強(qiáng)的一類，1993年被國際癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為IA類致癌物，主要包括黃曲霉毒素B1（aflatoxin B1，AFB1）、B2（aflatoxin B2，AFB2）、G1（aflatoxin G1，AFG1）和G2（aflatoxin G2，AFG2）4 種亞型。真菌毒素由青霉屬、曲霉屬、鐮刀菌屬等主要真菌產(chǎn)生。這些真菌廣泛分布在茶葉的種植、采收、加工、包裝、貯藏及運(yùn)輸?shù)雀鱾€環(huán)節(jié)中[97]，在種植過程中施肥（特別是一些葉面肥和菌肥）、人工采摘接觸、不潔的鮮葉和成茶的攤放地、茶廠的環(huán)境、工人的服裝、包裝器具和場所以及流通過程中運(yùn)輸工具不潔、包裝材料破損、貯藏不當(dāng)?shù)染赡茉斐纱罅空婢奈廴竞头敝砙98]。此外，這些真菌在茶園土壤、加工廠空氣中也有存在。Dutta等[99]從茶葉加工廠的空氣、茶樹葉片和土壤中分離到了34 種真菌，檢測發(fā)現(xiàn)其中8 株黃曲霉和2 株寄生曲霉可產(chǎn)生AFT。茶葉中的真菌毒素不僅關(guān)系到茶葉的質(zhì)量和品質(zhì)，也影響茶葉保健功能的發(fā)揮，而且對人體產(chǎn)生較大危害，長期攝入過多，會導(dǎo)致多器官功能損害，如肝細(xì)胞毒性、中毒性腎損害，引發(fā)癌癥等相關(guān)疾病[100]（表6）。

表6 部分與人類疾病有關(guān)的真菌毒素Table 6 Mycotoxins and their effects on human health

續(xù)表6

世界衛(wèi)生組織已將真菌毒素列為食源性疾病的重要根源，很多國家制定了農(nóng)產(chǎn)品、食品及飼料中的真菌毒素限量，但有關(guān)茶葉及其制品中真菌毒素的限量規(guī)定較少，目前僅有印度對紅茶中的AFT做了限量規(guī)定（≤0.03 μg/g）[101]。由于茶葉中真菌毒素是天然產(chǎn)生的，危害嚴(yán)重，分布廣泛，人為控制的難度比較大，因此對真菌毒素含量進(jìn)行檢測，了解污染度，對有效降低其危害具有十分重要的意義。

3.2 樣品前處理技術(shù)

真菌毒素是一類極性較強(qiáng)、不易揮發(fā)的化合物，分析化學(xué)中一些常用的前處理方法都可用于真菌毒素的提取、分離及純化，如固相萃取[102]、基質(zhì)分散固相萃取[103]等。

采用合適的提取溶劑、利用有效的提取方式和最佳的凈化方法對真菌毒素進(jìn)行前處理，是茶葉中真菌毒素檢測前極為重要的一步。根據(jù)現(xiàn)有研究報道，常用的提取溶劑有乙腈-水體系和甲醇-水體系，也使用二氯甲烷[102]、三氯甲烷[104]、甲醇-乙腈-水體系[105]等。乙腈滲透性好、選擇性強(qiáng)，容易進(jìn)入茶葉樣品組織內(nèi)，對真菌毒素的萃取能力強(qiáng)，不容易萃取出茶樣中的蠟類、脂肪酸等雜質(zhì)，能夠有效減少提取液中的干擾成分，有助于簡化后續(xù)的凈化操作，是目前茶葉及其制品中真菌毒素檢測最常用的提取溶劑。提取方式主要有高速均質(zhì)法[106]、振蕩法[107-110]和超聲波法[111-115]。高速均質(zhì)法速度快、效果好，單個樣品萃取只需幾分鐘，但每次只能處理一個樣品，效率較低。振蕩法操作簡便，結(jié)果準(zhǔn)確，可同時處理大批量樣品，缺點(diǎn)是提取時間長，一般大于30 min。超聲波法操作簡單、速度快、效率高，可同時處理大批量樣品，但溶劑用量大，且需要過濾、離心等操作將提取溶劑與樣品分離。

在測定茶葉中真菌毒素時，常用的凈化手段有免疫親和層析柱（immunoaffinity chromatography，IAC）[106-108,110-112,115]和多功能凈化柱（multifunction column，MFC）[109-110,112,114]2 種。其中IAC具有高特異性，能夠去除絕大部分雜質(zhì)，非常適用于基質(zhì)復(fù)雜的樣品，大大提高了茶葉及其制品中真菌毒素的前處理效率，是很多官方機(jī)構(gòu)認(rèn)可的凈化方法。應(yīng)用IAC首先要制備毒素抗體，抗體經(jīng)純化與毒素類似物無交叉反應(yīng)，然后固定在親和柱上，上樣后抗體與樣品中的毒素分子特異性結(jié)合，得到的洗脫物中雜質(zhì)含量低，不易造成背景干擾。該方法的缺點(diǎn)是免疫親和柱價格昂貴、檢測成本高，而且受到抗體種類及其穩(wěn)定性的限制，可檢測的真菌毒素種類很有限，現(xiàn)有的IAC大多只能用于一種真菌毒素的凈化處理。MFC是一種特殊的固相萃取柱，它以極性、非極性、離子交換等多類官能團(tuán)組成復(fù)合吸附填料，可選擇性吸附茶葉樣品中的脂類、蛋白類、糖類、色素等干擾雜質(zhì)，待測組分真菌毒素不被吸附而直接通過，從而進(jìn)一步完成凈化操作。該方法操作簡單，不需要活化、淋洗和洗脫步驟，直接上樣后，數(shù)十秒內(nèi)即可完成整個凈化過程，但是對部分真菌毒素有一定的吸附，造成回收率偏低。

表7列舉了近年來茶葉及其制品中真菌毒素的前處理方法及其回收率。

表7 茶葉及其制品中真菌毒素檢測的樣品前處理方法與回收率Table 7 Pretreatment methods and recovery rates of mycotoxin in tea samples

3.3 真菌毒素檢測技術(shù)

根據(jù)檢測原理的不同，茶葉中真菌毒素的檢測方法主要分為化學(xué)檢測法、儀器檢測法和免疫檢測法3大類。

3.3.1 化學(xué)檢測法

化學(xué)檢測法中最常用的是薄層色譜法（thin layer chromatography，TLC）[116]。該方法用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑把待檢測的真菌毒素從茶葉樣品中提取出來，經(jīng)純化后在薄層板上展開層析、分離，利用真菌毒素的熒光特性，與標(biāo)準(zhǔn)品比較進(jìn)行定性和定量。主要用于本身能發(fā)出熒光的真菌毒素（如AFT、OTA、ZEA、FB）的檢測。Abdel-Hafez等[117]采用TLC法對紅茶樣品中的真菌毒素進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)4 份紅茶樣品受到AFB1和AFB2污染，含量范圍為2.8～21.7 mg/kg。TLC法對設(shè)備要求不高，分析成本低、易于普及，但操作繁瑣、耗時長，檢測靈敏度以及重現(xiàn)性差，在茶葉真菌毒素檢測中的研究及應(yīng)用較少。

3.3.2 儀器檢測法

儀器檢測法基于真菌毒素的理化性質(zhì)，以HPLC法為代表，其突出特點(diǎn)是準(zhǔn)確度、靈敏度、穩(wěn)定性和重現(xiàn)性高，是目前茶葉中真菌毒素檢測的主流技術(shù)，主要適用于同一類真菌毒素的檢測。

Viswanath等[105]采用HPLC法測定紅茶中的4 種黃曲霉毒素（AFB1、AFB2、AFG1、AFG2）。茶樣用含體積分?jǐn)?shù)8%吐溫20的乙腈-甲醇-水（10∶6∶4，V/V）混合溶液振蕩提取，經(jīng)IAC柱凈化，以水-甲醇-乙腈（10∶6∶4，V/V）為流動相洗脫分離，然后用FLD檢測，測得AFB1、AFB2、AFG1的回收率為84%～106%，AFG2的回收率為65%～75%，RSD值均小于7.0%，LOQ值為2.5～5.0 μg/kg。用該方法對印度當(dāng)?shù)厥袌鲑徺I的7 個品牌和20 個非品牌紅茶樣品進(jìn)行分析，其中1 份樣品檢測到AFB1，含量為19.2 μg/kg。Haas等[118]采用不同樣品前處理方法，建立了HPLC-FLD和HPLC-MS檢測茶葉中真菌毒素AFT（AFB1、AFB2、AFG1、AFG2）、FB（FB1、FB2、FB3）和OTA的分析方法。AFT、FB和OTA的LOD值分別為1.7、10.0、0.5 μg/kg。將該方法用于奧地利部分茶葉商店和有機(jī)農(nóng)場的普洱茶樣品分析，在36 份普洱茶樣品中未檢測到AFT和FB，但有4 份樣品（11.1%）存在不同程度的OTA污染，含量范圍為0.65～94.70 μg/kg。Wu Jinyin等[119]以甲醇-水提取茶葉樣品，用含AFB1特異性抗體的IAC柱凈化，HPLC-FLD檢測，對廣州某茶葉市場濕倉貯存的普洱茶70 份樣品進(jìn)行分析，檢測到其中8 份樣品（11.43%）受到AFB1污染，含量范圍為5.294～8.521 μg/kg。Omurtag等[120]采用鄰苯二甲醛進(jìn)行衍生化處理，HPLC-FLD檢測紅茶樣品中的黃曲霉毒素FB1和FB2含量。該方法的LOD值為0.025～0.125 μg/g，回收率為86.9%～102.0%。將該方法用于實(shí)際樣品分析，在所有樣品中均未檢測到FB2，但有2 份紅茶樣品檢出FB1，含量為0.160～1.487 μg/g。HPLC用于檢測茶葉中的真菌毒素，通常使用FLD，為了降低LOD，需要在柱前或者柱后進(jìn)行衍生化處理[109,112]，操作繁瑣復(fù)雜，存在穩(wěn)定性差、耗時等不足。

茶葉生產(chǎn)中可能污染多種真菌毒素，如果對每一種真菌毒素逐一進(jìn)行檢測，要花費(fèi)大量的人力、物力和時間，這就需要建立可同步檢測多種類別真菌毒素的方法。質(zhì)譜法尤其是HPLC-MS/MS由于高分離效能、高選擇性和靈敏度等優(yōu)點(diǎn)，能實(shí)現(xiàn)多種真菌毒素的同步檢測，成為滿足這一需求的有力工具。Monbaliu等[121]建立了可同時測定茶葉和茶飲品中27 種真菌毒素的超高效液相色譜-MS/MS檢測方法，用含體積分?jǐn)?shù)0.3%甲酸的甲醇-水溶液為流動相洗脫分離。真菌毒素在茶葉中LOD值為2.1～121.0 μg/kg，在茶飲品中LOD值為0.4～46.0 μg/L。用該方法對91 份茶葉和茶飲品樣品進(jìn)行分析，有1 份樣品檢測到FB1，含量為76 μg/kg。葛寶坤等[122]建立了一種快速、靈敏、準(zhǔn)確測定減肥茶中多種真菌毒素的HPLC-MS/MS檢測方法。樣品中的真菌毒素采用PBS/甲醇溶液提取，通過在線IAC柱凈化，代替了需要手工操作、單次使用的IAC柱，節(jié)約了檢測成本，加快了檢測速度。該方法的回收率為65.3%～102.4%，RSD值小于14%，LOQ值為1～5 μg/kg，可同時測定減肥茶中FB、T-2、OTA、ZEA等10 種真菌毒素。應(yīng)用該方法檢測從市場上購買的碧生源、御生堂、天獅、三葉等品牌減肥茶樣品，在所有樣品中均未檢測到真菌毒素，結(jié)果令人滿意。

HPLC-MS/MS技術(shù)在真菌毒素的檢測中顯示出了巨大優(yōu)勢，雜質(zhì)影響小，不需要衍生就能夠準(zhǔn)確對真菌毒素進(jìn)行定性和定量。但需要昂貴的儀器及復(fù)雜的樣品前處理，對操作人員有一定的要求，檢測成本高、耗時長，不適于現(xiàn)場的快速檢測，大多用作實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證手段。

3.3.3 免疫檢測法

免疫檢測法是對HPLC、HPLC-MS/MS等大型儀器設(shè)備確證性檢測方法的有效補(bǔ)充，主要包括ELISA法和免疫層析法2 種。其原理是以一種抗體或多種抗體作為分析試劑，利用抗原、抗體間的高特異性結(jié)合反應(yīng)，并通過標(biāo)記物的信號放大，對待測毒素進(jìn)行定量或定性分析，可對茶葉中真菌毒素進(jìn)行現(xiàn)場快速篩查和鑒別[123]。

Zhang Daohong等[124]以膠體金顆粒為AFB1單克隆抗體的免疫標(biāo)記物，建立了一種高特異性、快速檢測茶葉樣品中AFB1的免疫層析檢測方法。該方法的可視化LOD值為1 ng/mL，與AFT的其他亞型AFB2、AFG1、AFG2交叉反應(yīng)率為0.02%～6.40%，在15 min內(nèi)即可得到檢測結(jié)果。利用該方法對5 份普洱茶樣品進(jìn)行分析，并用HPLC-MS確證，檢測到4 份樣品含有AFB1，含量為12.64～59.30 μg/kg。該方法還可用于花生、植物油和飼料樣品中AFB1含量的測定。劉輝等[125]建立了用于快速測定茶葉中AFB1的ELISA檢測方法。樣品采用乙腈-水（7∶3，V/V）提取，以PSA為吸附劑進(jìn)行分散固相萃取凈化。經(jīng)過優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，確定5 mL提取液中加入250 mg PSA可達(dá)到顯著的凈化效果。該方法的LOD值為0.078 μg/kg，IC50為0.327 ng/mL，檢測范圍為0.125～0.854 ng/mL，回收率在87.66%～97.17%之間，RSD值小于7.5%。采用HPLC法進(jìn)行驗(yàn)證，2 種方法檢測結(jié)果的一致性較好（r＝0.992 0）。用該方法對超市購買的綠茶、紅茶、烏龍茶樣品進(jìn)行分析，共檢測10 份樣品，其中4 份樣品檢測到AFB1，含量為1.8～4.1 μg/kg。Santos等[126]在西班牙采集了大量草本植物和茶葉樣品，采用聚酰胺柱和MFC柱凈化，ELISA法分析其中的AFT、OTA、ZEA、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、T-2、FB和黃綠青霉毒素含量。該方法的LOD值依次為1.400、0.025、0.140、14.800、0.280、83.000、16.500 μg/kg。在所有84 份樣品中，均檢測到AF、ZEA和T-2毒素，其中約84%的樣品同時含4 種以上的真菌毒素。

茶葉中真菌毒素的免疫檢測方法具有特異、靈敏、所需儀器簡單、操作簡便、檢測時間短等優(yōu)點(diǎn)。但是真菌毒素的抗體制備難度較大，開發(fā)費(fèi)用較高，檢測結(jié)果必須結(jié)合儀器方法進(jìn)行確證，以防非特異性結(jié)合導(dǎo)致的假陽性結(jié)果。不過，隨著新型抗體（如納米抗體、核酸適體）制備技術(shù)的日益發(fā)展，相應(yīng)抗體的開發(fā)周期縮短，制備成本進(jìn)一步降低，免疫檢測法在茶葉真菌毒素檢測中的應(yīng)用優(yōu)勢將更為明顯。

4 結(jié) 語

農(nóng)藥殘留、重金屬殘留、真菌毒素作為影響茶葉質(zhì)量安全的主要化學(xué)因素，已成為茶產(chǎn)業(yè)持續(xù)健康發(fā)展的重要障礙。國內(nèi)外學(xué)者對此展開了大量檢測研究，發(fā)展了諸多有效的檢測技術(shù)和方法。從本文可以看出，對于茶葉中農(nóng)藥殘留、重金屬殘留、真菌毒素的檢測，在前處理技術(shù)上，傳統(tǒng)技術(shù)和一些新技術(shù)并存，但近些年傳統(tǒng)技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)越來越少，一些新技術(shù)特別是懸浮液直接進(jìn)樣技術(shù)、免疫親和技術(shù)、分散固相萃取技術(shù)開始受到關(guān)注，并得到大量研究和應(yīng)用，這大大推動了茶葉質(zhì)量安全檢測方法前進(jìn)的步伐。在檢測技術(shù)上，色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法因其高通量、高靈敏度、高選擇性等優(yōu)點(diǎn)而作為該領(lǐng)域的確證技術(shù)。串聯(lián)質(zhì)譜法具有尤其重要的作用。免疫檢測法尤其是ELISA法具有快速、特異、靈敏、儀器簡單易攜等優(yōu)勢，更適于茶葉質(zhì)量安全的現(xiàn)場檢測。

然而，茶葉質(zhì)量安全檢測是一項長期而復(fù)雜的工作，涉及到茶葉產(chǎn)地、種植、采收、加工、流通等各個環(huán)節(jié)。隨著污染物數(shù)量日益增加、化學(xué)組成日趨復(fù)雜，對分析檢測方法也提出了更高的要求，必須在現(xiàn)有檢測技術(shù)基礎(chǔ)之上，不斷改進(jìn)、創(chuàng)新和提高，推出更加先進(jìn)的檢測方法來解決遇到的新的分析問題。簡單快速、高效準(zhǔn)確、自動化和智能化的樣品前處理技術(shù)，以及多組分同步檢測技術(shù)和高通量現(xiàn)場快速篩查技術(shù)將成為今后的發(fā)展方向。

參考文獻(xiàn)：

[1] NAGHMA K, HASAN M. Tea and health: studies in humans[J].Current Pharmaceutical Design, 2013, 19(34): 6141-6147. DOI:10.2174/1381612811319340008.

[2] LEE L K, FOO K Y. Recent advances on the beneficial use and health implications of Pu-Erh tea[J]. Food Research International, 2013,53(2): 619-628. DOI:10.1016/j.foodres.2013.02.036.

[3] LI X, ZHANG Z, LI P, et al. Determination for major chemical contaminants in tea (Camellia sinensis) matrices: a review[J].Food Research International, 2013, 53(2): 649-658. DOI:10.1016/j.foodres.2012.12.048.

[4] GILDEN R C, HUFFLING K, SATTLER B. Pesticides and health risks[J]. Journal of Obstetric, Gynecologic & Neonatal Nursing, 2010,39(1): 103-110. DOI:10.1111/j.1552-6909.2009.01092.x.

[5] BOLOGNESI C, MERLO F D. Pesticides: human health effects[J].Encyclopedia of Environmental Health, 2011, 156(1): 438-453.DOI:10.1016/B978-0-444-52272-6.00592-4.

[6] 王振川. 茶葉污染問題與控制技術(shù)途徑[J]. 茶葉科學(xué)技術(shù), 2007(2):33-35. DOI:10.3969/j.issn.1007-4872.2007.02.017.

[7] WEN X, CHAO H, YAN Q, et al. Determination of neonicotinoid pesticides residues in agricultural samples by solid-phase extraction combined with liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J].Journal of Chromatography A, 2011, 1218(28): 4426-4433.DOI:10.1016/j.chroma.2011.05.026.

[8] SCHUREK J, PORTOLéS T, HAJSLOVA J, et al. Application of head-space solid-phase microextraction coupled to comprehensive two-dimensional gas chromatography-time-of-flight mass spectrometry for the determination of multiple pesticide residues in tea samples[J].Analytica Chimica Acta, 2008, 611(2): 163-172. DOI:10.1016/j.aca.2008.01.007.

[9] KANRAR B, MANDAL S, BHATTACHARYYA A. Validation and uncertainty analysis of a multiresidue method for 42 pesticides in made tea, tea infusion and spent leaves using ethyl acetate extraction and liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2010, 1217(12): 1926-1933. DOI:10.1016/j.chroma.2010.01.062.

[10] KADIR H A, ABAS F, ZAKARIA O, et al. Analysis of pesticide residues in tea using accelerated solvent extraction with in-cell cleanup and gas chromatography tandem mass spectrometry[J]. Analytical Methods, 2015, 7(7): 3141-3147. DOI:10.1039/C4AY03053B.

[11] WU L J, SONG C M, ZHAO Y, et al. Determination of organochlorine pesticides in tea beverage by directly suspended droplet microextraction combined with GC-ECD[J]. Food Analytical Methods, 2015, 8(1): 147-153. DOI:10.1007/s12161-014-9882-y.

[12] HU Y Y, ZHENG P, HE Y Z, et al. Response surface optimization for determination of pesticide multiresidues by matrix solid-phase dispersion and gas chromatography[J]. Journal of Chromatography A,2005, 1098(1/2): 188-193. DOI:10.1016/j.chroma.2005.09.093.

[13] LI B, ZENG F G, DONG Q C, et al. Rapid determination method for 12 pyrethroid pesticide residues in tea by stir bar sorptive extractionthermal desorption-gas chromatography[J]. Physics Procedia, 2012,25(22): 1776-1780. DOI:10.1016/j.phpro.2012.03.310.

[14] JI J, DENG C H, ZHANG H Q, et al. Microwave-assisted steam distillation for the determination of organochlorine pesticides and pyrethroids in Chinese teas[J]. Talanta, 2007, 71(3): 1068-1074.DOI:10.1016/j.talanta.2006.05.087.

[15] DENG X J, GUO Q J, CHEN X P, et al. Rapid and effective sample clean-up based on magnetic multiwalled carbon nanotubes for the determination of pesticide residues in tea by gas chromatographymass spectrometry[J]. Food Chemistry, 2014, 145C(7): 853-858.DOI:0.1016/j.foodchem.2013.08.137.

[16] 湯樺, 陳大舟, 馮潔, 等. 高分辨同位素稀釋質(zhì)譜法測定亞太區(qū)域比對茶葉樣品中的農(nóng)藥殘留[J]. 化學(xué)通報, 2010, 73(10): 920-926.DOI:10.14159/j.cnki.0441-3776.2010.10.011.

[17] 蘇建峰, 鐘茂生, 陳晶, 等. 氣相色譜-質(zhì)譜法與氣相色譜法測定茶葉及茶葉加工品中295 種農(nóng)藥多殘留[J]. 分析測試學(xué)報, 2015, 34(6):625-638. DOI:10.3969/j.issn.1004-4957.2015.06.001.

[18] HOU Xiaohong, ZHENG Xin, ZHANG Conglu, et al. Ultrasoundassisted dispersive liquid-liquid microextraction based on the solidification of a floating organic droplet followed by gas chromatography for the determination of eight pyrethroid pesticides in tea samples[J]. Journal of Chromatography B, 2014, 969: 123-127.DOI:10.1016/j.jchromb.2014.08.010.

[19] WANG Chun, WU Qiuhua, WU Chunxia, et al. Application of dispersion-solidification liquid-liquid microextraction for the determination of triazole fungicides in environmental water samples by high-performance liquid chromatography[J]. Journal of Hazardous Materials, 2011, 185(1): 71-76. DOI:10.1016/j.jhazmat.2010.08.124.

[20] MATSADIQ G, HU H L, REN H B, et al. Quantification of multiresidue levels in peach juices, pulps and peels using dispersive liquidliquid microextraction based on floating organic droplet coupled with gas chromatography-electron capture detection[J]. Journal of Chromatography B, 2011, 879(22): 2113-2118. DOI:10.1016/j.jchromb.2011.05.047.

[21] LIU Dan, MIN Shungeng. Rapid analysis of organochlorine and pyrethroid pesticides in tea samples by directly suspended droplet microextraction using a gas chromatography-electron capture detector[J]. Journal of Chromatography A, 2012, 1235(8): 166-173.DOI:10.1016/j.chroma.2012.02.070.

[22] MOINFAR S, HOSSEINI M R. Development of dispersive liquidliquid microextraction method for the analysis of organophosphorus pesticides in tea[J]. Journal of Hazardous Materials, 2009, 169(1/2/3):907-911. DOI:10.1016/j.jhazmat.2009.04.030.

[23] OH C H. Purification method for multi-residual pesticides in green tea[J]. Natural Product Communications, 2007, 2(10): 1025-1030.

[24] LIANG Pei, WANG Jinjin, LIU Guojiao, et al. Determination of four sulfonylurea herbicides in tea by matrix solid-phase dispersion cleanup followed by dispersive liquid-liquid microextraction[J]. Journal of Separation Science, 2014, 37(17): 2380-2387. DOI:10.1002/jssc.201400449.

[25] HOU Ruyan, JIAO Weiting, QIAN Xiaosan, et al. Effective extraction method for determination of neonicotinoid residues in tea[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2013, 61(51): 12565-12571.DOI:10.1021/jf404100x.

[26] WU C C, CHU C, WANG Y S, et al. Multiresidue method for highperformance liquid chromatography determination of carbamate pesticides residues in tea samples[J]. Journal of Environmental Science and Health, Part B, 2009, 44(1): 58-68. DOI:10.1080/0360123080 2519744.

[27] LIU S Y, ZHENG Z T, WEI F L, et al. Simultaneous determination of seven neonicotinoid pesticide residues in food by ultraperformance liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2010, 58(6): 3271-3278.DOI:10.1021/jf904045j.

[28] KANRAR B, MANDAL S, BHATTACHARYYA A. Validation and uncertainty analysis of a multiresidue method for 67 pesticides in made tea, tea infusion, and spent leaves using ethyl acetate extraction and gas chromatography/mass spectrometry[J]. Journal of AOAC International,2010, 93(2): 411-424. DOI:10.1016/j.chroma.2010.01.062.

[29] PENG Chifang, KUANG Hua, LI Xiangqian, et al. Evaluation and interlaboratory validation of a GC-MS method for analysis of pesticide residues in teas[J]. Chemical Papers, 2007, 61(1): 1-5. DOI:10.2478/s11696-006-0086-9.

[30] ZHAO Pengyue, WANG Lei, JIANG Yaping, et al. Dispersive cleanup of acetonitrile extracts of tea samples by mixed multiwalled carbon nanotubes, primary secondary amine, and graphitized carbon black sorbents[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2012, 60(16):4026-4033. DOI:10.1021/jf205351t.

[31] CHEN Hongping, YIN Peng, WANG Qinghua, et al. A modified QuEChERS sample preparation method for the analysis of 70 pesticide residues in tea using gas chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Food Analytical Methods, 2014, 7(8): 1577-1587.DOI:10.1007/s12161- 014-9791-0.

[32] CAO Yalin, TANG Hua, CHEN Dazhou, et al. A novel method based on MSPD for simultaneous determination of 16 pesticide residues in tea by LC-MS/MS[J]. Journal of Chromatography B, 2015, 998: 72-79. DOI:10.1016/j.jchromb.2015.06.013.

[33] 李慧思, 黃超群, 蔣沁婷, 等. 在線凈化-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定茶葉中5 種煙堿類農(nóng)藥殘留[J]. 色譜, 2016, 34(3): 263-269.DOI:10.3724/SP.J.1123.2015.10003.

[34] 國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局. 茶葉中448 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法: GB/T 23205—2008[S]. 北京: 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2008: 12.

[35] 葉芳挺, 江錚, 馬樂, 等. TranscendTM在線凈化LC-MS-MS系統(tǒng)分析茶葉基質(zhì)中30 種農(nóng)藥殘留[J]. 食品安全導(dǎo)刊, 2011(10): 76-77.DOI:10.16043/j.cnki.cfs.2011.10.001.

[36] 徐永威, 孫慶龍, 黃靜, 等. Waters ACQUITY UPC2儀器結(jié)構(gòu)和性能特點(diǎn)[J]. 現(xiàn)代儀器, 2012, 18(5): 45-48.

[37] 周圍, 王波, 劉倩倩, 等. 超高效合相色譜法同時測定復(fù)合維生素片中11 種脂溶性維生素及其衍生物[J]. 分析化學(xué), 2015, 43(1): 115-120. DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.140437.

[38] ZHOU Q, GAO B Y, ZHANG X, et al. Chemical profiling of triacylglycerols and diacylglycerols in cow milk fat by ultraperformance convergence chromatography combined with a quadrupole time-of-flight mass spectrometry[J]. Food Chemistry,2014, 143(1): 199-204. DOI:10.1016/j.foodchem.2013.07.114.

[39] CHEN Z L, DONG F S, XU J, et al. Stereoselective separation and pharmacokinetic dissipation of the chiral neonicotinoid sulfoxaflor in soil by ultraperformance convergence chromatography/tandem mass spectrometry[J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2014,406(26): 6677-6690. DOI:10.1007/s00216-014-8089-9.

[40] 王麗婷, 王波, 周圍, 等. 超高效合相色譜及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測定茶葉中聯(lián)苯菊酯[J]. 分析化學(xué), 2015, 43(7): 1047-1052.DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.150096.

[41] 趙悅臣, 張新忠, 羅逢健, 等. 超高效合相色譜-四極桿飛行時間質(zhì)譜法測定水果和茶葉中手性農(nóng)藥順式-氟環(huán)唑?qū)τ丑w殘留[J]. 分析化學(xué), 2016, 44(8): 1200-1208. DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.160047.

[42] 張新忠, 趙悅臣, 羅逢健, 等. 水果和紅茶中腈菌唑?qū)τ丑w殘留的超高效合相色譜四極桿飛行時間質(zhì)譜分析[J]. 分析測試學(xué)報, 2016,35(11): 1376-1383. DOI:10.3969/j.issn.1004-4957.2016.11.002.

[43] HUO F F, HUA T, XUE W, et al. Utilizing a novel sorbent in the solid phase extraction for simultaneous determination of 15 pesticide residues in green tea by GC/MS[J]. Journal of Chromatography B,2016, 1023: 44-54. DOI:10.1016/j.jchromb.2016.04.053.

[44] HOU X, LEI S R, GUO L A, et al. Optimization of a multiresidue method for 101 pesticides in green tea leaves using gas chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Revista Brasileira de Farmacognosia, 2016, 26(4): 401-407. DOI:10.1016/j.bjp.2016.03.007.

[45] WU C C. Multiresidue method for the determination of pesticides in Oolong tea using QuEChERS by gas chromatography-triple quadrupole tandem mass spectrometry[J]. Food Chemistry, 2017, 229:580-587. DOI:10.1016/j.foodchem.2017.02.081.

[46] 賈瑋, 黃峻榕, 凌云, 等. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定茶葉中290種農(nóng)藥殘留組分[J]. 分析測試學(xué)報, 2013, 32(1): 9-22.DOI:10.3969/j.issn.1004-4957.2013.01.002.

[47] CHEN H P, PAN M L, LIU X, et al. Evaluation of transfer rates of multiple pesticides from green tea into infusion using water as pressurized liquid extraction solvent and ultra-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Food Chemistry, 2017,216: 1-9. DOI:10.1016/j.foodchem.2016.07.175.

[48] 吁芳, 趙進(jìn)輝, 劉木華. 基于三維熒光光譜技術(shù)的牛奶中金霉素殘留的檢測研究[J]. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 2012, 34(4): 818-822.DOI:10.3969/j.issn.1000-2286.2012.04.035.

[49] 肖海斌, 趙進(jìn)輝, 劉木華, 等. 三維熒光光譜技術(shù)結(jié)合PLSR在鴨肉中西維因殘留檢測的應(yīng)用[J]. 激光與光電子學(xué)進(jìn)展, 2014, 51(4): 196-200. DOI:10.3788/lop51.043001.

[50] 趙進(jìn)輝, 袁海超, 劉木華, 等. 基于APTLD的豬肉中萊克多巴胺殘留含量的三維同步熒光光譜快速測定[J]. 光譜學(xué)與光譜分析, 2014,34(4): 1012-1016. DOI:10.3964/j.issn.1000-0593(2014)04-1012-05.

[51] 王書濤, 苑媛媛, 王玉田, 等. 基于三維熒光與GA-RBF神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)對茶葉中氯菊酯農(nóng)藥殘留的檢測[J]. 發(fā)光學(xué)報, 2016, 37(10): 1267-1274. DOI:10.3788/fgxb20163710.1267.

[52] LU Yang, XU Na, ZHANG Yan, et al. Development of general immunoassays for pyrethroids: a new approach for hapten synthesis using pyrethroid metabolite analogue and application to food samples[J]. Food and Agricultural Immunology, 2010, 21(1): 27-45.DOI:10.1080/09540100903418867.

[53] SONG Yang, LU Yang, LIU Bing, et al. A sensitivity-improved enzyme-linked immunosorbent assay for fenvalerate: a new approach for hapten synthesis and application to tea samples[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture, 2011, 91(12): 2210-2216.DOI:10.1002/jsfa.4441.

[54] ZHANG Yan, LIU Junwei, ZHENG Wenjie, et al. Optimization and validation of enzyme-linked immunosorbent assay for the determination of endosulfan residues in food samples[J]. Journal of Environmental Science and Health, Part B, 2008, 43(2): 127-133.DOI:10.1080/03601230701795056.

[55] SRIVASTAVA N K, MAJUMDER C B. Novel biofiltration methods for the treatment of heavy metals from industrial wastewater[J].Journal of Hazardous Materials, 2008, 151(1): 1-8. DOI:10.1016/j.jhazmat.2007.09.101.

[56] 王陽, 李寶剛, 章明奎. 大氣沉降對茶葉重金屬積累的影響[J]. 科技導(dǎo)報, 2011, 29(21): 55-59. DOI:10.3981/j.issn.1000-7857.2011.21.009.

[57] 方鳳滿, 林躍勝, 魏曉飛. 土壤-茶樹系統(tǒng)中重金屬污染研究進(jìn)展[J]. 安徽師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版), 2013, 36(3): 288-292.DOI:10.3969/j.issn.1001-2443.2013.03.019.

[58] 高秀兵, 段學(xué)藝, 張寶林, 等. 綠茶加工過程中農(nóng)藥殘留、重金屬含量及微生物數(shù)量的變化[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報, 2012, 25(3): 958-961.DOI:10.3969/j.issn.1001-4829.2012.03.044.

[59] 韓文炎, 梁月榮, 楊亞軍, 等. 加工過程對茶葉鉛和銅污染的影響[J]. 茶葉科學(xué), 2006, 26(2): 95-101. DOI:10.3969/j.issn.1000-369X.2006.02.004.

[60] J?RUP L. Hazards of heavy metal contamination[J]. British Medical Bulletin, 2003, 68(1): 167-182. DOI:10.1093/bmb/ldg032.

[61] RASHID M H, FARDOUS Z, CHOWDHURY M A Z, et al.Determination of heavy metals in the soils of tea plantations and in fresh and processed tea leaves: an evaluation of six digestion methods[J]. Chemistry Central Journal, 2016, 10(1): 1-13.DOI:10.1186/s13065-016-0154-3.

[62] SOYLAK M, TUZEN M, SOUZA A S, et al. Optimization of microwave assisted digestion procedure for the determination of zinc,copper and nickel in tea samples employing flame atomic absorption spectrometry[J]. Journal of Hazardous Materials, 2007, 149(2): 264-268. DOI:10.1016/j.jhazmat.2007.03.072.

[63] NARIN I, COLAK H, TURKOGLU O, et al. Heavy metals in black tea samples produced in Turkey[J]. Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology, 2004, 72(4): 844-849. DOI:10.1007/s00128-004-0321-4.

[64] SZYMCZYCHA-MADEJA A, WELNA M, POHL P. Determination of essential and non-essential elements in green and black teas by FAAS and ICP OES simplified-multivariate classification of different tea products[J]. Microchemical Journal, 2015, 121(3): 122-129.DOI:10.1016/j.microc.2015.02.009.

[65] 袁建, 鞠興榮, 汪海峰, 等. 茶葉中有害金屬元素的快速檢測技術(shù)研究[J]. 食品科學(xué), 2004, 25(11): 259-263. DOI:10.3321/j.issn:1002-6630.2004.11.068.

[66] 公維磊, 張瀟, 楊金玲, 等. 超聲波提取法測定茶葉中鋅鐵銅錳[J].濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報, 2010, 33(2): 124-126; 129. DOI:10.3969/j.issn.1000-9760.2010.02.020.

[67] 鄧世林, 李新鳳, 鄧富良. 固體懸浮液進(jìn)樣石墨爐原子吸收法測定茶葉中的微量鎘[J]. 食品科學(xué), 2004, 25(2): 141-143. DOI:10.33 21/j.issn:1002-6630.2004.02.031.

[68] 劉榮森, 趙文善, 張長水. 鐵氰化鉀分光光度法測定茶葉中的鐵[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué), 2015, 43(9): 344-346. DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2015.09.111.

[69] TUZEN M, NARIN I, SOYLAK M, et al. XAD-4/PAN solid phase extraction system for atomic absorption spectrometric determinations of some trace metals in environmental samples[J]. Analytical Letters,2004, 37(3): 473-489. DOI:10.1081/AL-120028620.

[70] MAURíAUCEJO A R, ARNANDISCHOVER T, MARíNSáEZ R, et al.Application of pressurized fluid extraction to determine cadmium and zinc in plants[J]. Analytica Chimica Acta, 2007, 581(1): 78-82.DOI:10.1016/j.aca.2006.08.008.

[71] HAZER O, KARTAL ?, TOKALIO?LU ?. Atomic absorption spectrometric determination of Cd (II), Mn (II), Ni (II), Pb (II) and Zn (II)ions in water, fertilizer and tea samples after preconcentration on Amberlite XAD-1180 resin loaded with l-(2-pyridylazo)-2-naphthol[J].Journal of Analytical Chemistry, 2009, 64(6): 609-614. DOI:10.1134/S1061934809060124.

[72] DURAN C, OZDES D, SAHIN D, et al. Preconcentration of Cd (II)and Cu (II) ions by coprecipitation without any carrier element in some food and water samples[J]. Microchemical Journal, 2011, 98(2):317-322. DOI:10.1016/j.microc.2011.02.018.

[73] MANDIWANA K L, PANICHEV N, PANICHEVA S. Determination of chromium (VI) in black, green and herbal teas[J]. Food Chemistry,2011, 129(4): 1839-1843. DOI:10.1016/j.foodchem.2011.05.124.

[74] NING P B, GONG C M, ZHANG Y M, et al. Lead, cadmium, arsenic,mercury and copper levels in Chinese Yunnan Pu’er tea[J]. Food Additives and Contaminants Part B Surveillance, 2011, 4(1): 28-33.DOI:10.1080/19393210.2011.551945.

[75] G?RüR F K, KESER R, AK?AY N, et al. Radionuclides and heavy metals concentrations in Turkish market tea[J]. Food Control, 2011,22(12): 2065-2070. DOI:10.1016/j.foodcont.2011.06.005.

[76] 劉愛麗, 沈燕, 龔慧鴿, 等. 微波消解-ICP-AES法測定泰順茶葉中的微量元素[J]. 食品科學(xué), 2015, 36(24): 186-189. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201524034.

[77] HAN Q, MIHARA S, HASHIMOTO K, et al. Optimization of tea sample preparation methods for ICP-MS and application to verification of chinese tea authenticity[J]. Food Science and Technology Research,2014, 20(6): 1109-1119. DOI:10.3136/fstr.20.1109.

[78] LAGAD A R, ALAMELU D, CHAUDHARY K A, et al.Determination of heavy metals and lanthanides in Indian tea by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS)[J]. Atomic Spectroscopy-Norwalk Connecticut, 2012, 33(4): 109-116.

[79] SHALTOUT A A, ABD-ELKADER O H. Levels of trace elements in black teas commercialized in Saudi Arabia using inductively coupled plasma mass spectrometry[J]. Biological Trace Element Research,2016, 174(2): 477-483. DOI:10.1007/s12011-016-0728-x.

[80] MILANI R F, MORGANO M A, SARON E S, et al. Evaluation of direct analysis for trace elements in tea and herbal beverages by ICP-MS[J]. Journal of the Brazilian Chemical Society, 2015, 26(6):1211-1217. DOI:10.5935/0103-5053.20150085.

[81] 李景梅, 于輝, 鞠殿民, 等. DBC-偶氮胂分光光度法測定茶葉樣品中的鋁[J]. 茶葉科學(xué), 2006, 26(1): 76-78. DOI:10.3969/j.issn.1000-369X.2006.01.013.

[82] CITAK D, TUZEN M, SOYLAK M. Simultaneous coprecipitation of lead, cobalt, copper, cadmium, iron and nickel in food samples with zirconium (IV) hydroxide prior to their flame atomic absorption spectrometric determination[J]. Food and Chemical Toxicology, 2009,47(9): 2302-2307. DOI:10.1016/j.fct.2009.06.021.

[83] ZHONG Wensi, REN Ting, ZHAO Lijiao. Determination of Pb,Cd, Cr, Cu, and Ni in Chinese tea with high-resolution continuum source graphite furnace atomic absorption spectrometry[J]. Journal of Food and Drug Analysis, 2016, 24(1): 46-55. DOI:10.1016/j.jfda.2015.04.010.

[84] 衛(wèi)生部. 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量: GB 2762—2012[S].北京: 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2012: 3.

[85] 農(nóng)業(yè)部. 茶葉中鉻、鎘、汞、砷及氟化物限量: NY 659—2003[S].北京: 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2003: 1.

[86] 農(nóng)業(yè)部. 綠色食品 茶葉: NY/T 288—2012[S]. 北京: 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2012: 2.

[87] 石杰, 宋慶國, 趙開樓, 等. 斷續(xù)流動氫化物發(fā)生-原子熒光光譜法同時測定茶葉中的痕量鉍、鎘[J]. 食品科學(xué), 2005, 26(7): 163-165.DOI:10.3321/j.issn:1002-6630.2005.07.037.

[88] 陳紅梅, 張濱. ICP-MS法測定茶葉中鉛、鉻、鎘、砷、銅等重金屬元素[J]. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報, 2011, 2(4): 193-197.

[89] OTHMAN A, AL-ANSI S, AL-TUFAIL M. Determination of Lead in Saudi Arabian imported green tea by ICP-MS[J]. E-Journal of Chemistry, 2012, 9(1): 79-82. DOI:10.1155/2012/132683.

[90] 王欣, 幸苑娜, 陳澤勇, 等. 高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜法檢測富硒食品中6 種硒形態(tài)[J]. 分析化學(xué), 2013, 41(11): 1669-1674.DOI:10.3724/SP.J.1096.2013.30491.

[91] 倪張林, 湯富彬, 屈明華, 等. 高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測定花茶中砷形態(tài)[J]. 分析科學(xué)學(xué)報, 2013, 29(4):506-510.

[92] ??AN?AR J, ZULIANI T, ?IGON D, et al. Ni speciation in tea infusions by monolithic chromatography-ICP-MS and Q-TOF-MS[J].Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2013, 405(6): 2041-2051.DOI:10.1007/s00216-012-6611-5.

[93] LIU Gongliang, WANG Jufang, LI Zhiyong, et al. Development of direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay for the determination cadmium residue in farm produce[J]. Applied Biochemistry and Biotechnology, 2009, 159(3): 708-717.DOI:10.1007/s12010-009- 8539-6.

[94] 徐旭明, 竇文超, 趙廣英. MWCNTs-IL-SPCE傳感器檢測茶葉中痕量鉛研究[J]. 茶葉科學(xué), 2011, 31(6): 485-492.

[95] 秦旭磊, 李野, 宋忠華, 等. 基于EDXRF技術(shù)茶葉中金屬元素檢測方法研究[J]. 光譜學(xué)與光譜分析, 2015, 35(4): 1068-1071.DOI:10.3964/j.issn.1000-0593(2015)04-1068-04.

[96] 馬燕, 張冬蓮, 蘇小琴, 等. 茶葉中真菌毒素污染的國內(nèi)外研究概況[J]. 中國食品衛(wèi)生雜志, 2014, 26(6): 627-631. DOI:10.13590/j.cjfh.2014.06.027.

[97] MARIN S, RAMOS A J, CANO-SANCHO G, et al. Mycotoxins:occurrence, toxicology, and exposure assessment[J]. Food and Chemical Toxicology, 2013, 60(10): 218-237. DOI:10.1016/j.fct.2013.07.047.

[98] 朱金國, 莫瑾, 譚建錫, 等. 出口茶葉生產(chǎn)加工中有害微生物危害分析[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技, 2014(2): 304-307. DOI:10.3969/j.issn.1007-5739.2014.02.196.

[99] DUTTA B K, DUTTA S, NATH P K, et al. Mycotoxin production potential of mycoflora in tea[J]. Economic Crisis in Tea Industry,Studium Press, 2008, 200: 221-232.

[100] ZAIN M E. Impact of mycotoxins on humans and animals[J]. Journal of Saudi Chemical Society, 2011, 15(2): 129-144. DOI:10.1016/j.jscs.2010.06.006.

[101] BAROOAH A K. Present status of use of agrochemicals in tea industry of eastern India and future directions[J]. Science & Culture,2011, 77: 385-390.

[102] 付朝暉, 黃雪祥, 閔順耕. 超高效液相色譜法快速測定發(fā)酵茶葉中的黃曲霉毒素[J]. 分析試驗(yàn)室, 2009, 28(6): 112-115. DOI:10.39 69/j.issn.1000-0720.2009.06.029.

[103] 徐飛, 高貴桃, 錢鑫. 基質(zhì)固相分散-高效液相色譜法測定袋泡茶中黃曲霉毒素[J]. 理化檢驗(yàn)(化學(xué)分冊), 2014, 50(11): 1390-1393.

[104] 陳若恒, 譚志熹, 張秋麗. 荔灣區(qū)茶葉批發(fā)市場普洱茶中黃曲霉毒素B1污染調(diào)查[J]. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2014, 24(14): 2088-2089;2093.

[105] VISWANATH P, NANJEGOWDA D K, GOVINDEGOWDA H, et al.Aflatoxin determination in black tea (Camellia sinensis)-status and development of a protocol[J]. Journal of Food Safety, 2012, 32(1): 13-21. DOI:10.1111/j.1745-4565.2011.00339.x.

[106] 丁明, 鐘冬蓮. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定山茶油中黃曲霉毒素B1[J]. 分析試驗(yàn)室, 2012, 31(5): 26-29. DOI:10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2012.0131.

[107] 吳國華, 趙榕, 里南, 等. 茶葉中黃曲霉毒素B1的檢測方法研究[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報, 2014, 5(3): 808-812.

[108] 郭愛華, 王瑋, 李小麗. 柱前衍生-高效液相色譜法測定茶葉中的黃曲霉毒素B1[J]. 理化檢驗(yàn)(化學(xué)分冊), 2014, 50(9): 1124-1126.

[109] 劉妍, 譚貴良, 劉子雄, 等. 發(fā)酵茶中多種真菌毒素超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的測定[J]. 現(xiàn)代食品科技, 2016, 32(8): 322-327.DOI:10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.8.049.

[110] 譚志熹, 江俊生, 陳若恒, 等. 免疫親和柱凈化-酶聯(lián)免疫吸附法檢測普洱茶中黃曲霉毒素B1[J]. 預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇, 2014, 20(6): 413-415.DOI:10.16406/j.pmt.issn.1672-9153.2014.06.001.

[111] 王可, 魏永巨, 何燕, 等. 茶葉中黃曲霉毒素的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[J]. 環(huán)境與健康雜志, 2014, 31(8): 718-720. DOI:10.3969/j.issn.1009-0754.2005.02.021.

[112] 何豐瑞, 陳艷, 李永波. 高效液相色譜法測定袋泡茶葉中的黃曲霉毒素[J]. 中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2014, 24(3): 335-336; 340.

[113] 趙浩軍, 王坤, 楊衛(wèi)花, 等. 高效液相色譜柱后光化學(xué)反應(yīng)-熒光檢測茶葉中黃曲霉毒素B1[J]. 茶葉科學(xué), 2013, 33(3): 237-241.DOI:10.13305/j.cnki.jts.2013.03.001.

[114] 陳濤, 李桓, 陳大紅, 等. 紅茶中黃曲霉毒素B1的測定方法探討[J].海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志, 2016, 22(6): 51-53.

[115] 伍旭東, 羅發(fā)美, 車濤, 等. 高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定普洱茶茶籽油中的黃曲霉毒素B1[J]. 光譜實(shí)驗(yàn)室, 2014, 31(5): 610-616.DOI:10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2012.0131.

[116] RAHMANI A, JINAP S, SOLEIMANY F. Qualitative and quantitative analysis of mycotoxins[J]. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety, 2009, 8(3): 202-251. DOI:10.1111/j.1541-4337.2009.00079.x.

[117] ABDEL-HAFEZ A I I. Fungal flora and aflatoxin associated with cocoa, roasted coffee and tea powders in Egypt[J]. Cryptogamie Mycologie, 1992, 13(1): 31-45.

[118] HAAS D, PFEIFER B, REITERICH C, et al. Identification and quantification of fungi and mycotoxins from Pu-erh tea[J].International Journal of Food Microbiology, 2013, 166(2): 316-322.DOI:10.1016/j.ijfoodmicro.2013.07.024.

[119] WU Jinyin, YANG Guangyu, CHEN Jianling, et al. Investigation for Pu-erh tea contamination caused by mycotoxins in a tea market in Guangzhou[J]. Journal of Basic & Applied Sciences, 2014, 10: 349-356. DOI:10.6000/1927-5129.2014.10.46.

[120] OMURTAG G Z, YAZICIO?LU D. Determination of fumonisins B1and B2in herbal tea and medicinal plants in Turkey by highperformance liquid chromatography[J]. Journal of Food Protection,2004, 67(8): 1782-1786. DOI:10.4315/0362-028X-67.8. 1782.

[121] MONBALIU S, WU A, ZHANG D, et al. Multimycotoxin UPLCMS/MS for tea, herbal infusions and the derived drinkable products[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2010, 58(24): 12664-12671. DOI:10.1021/jf1033043.

[122] 葛寶坤, 趙孔祥, 陳旭艷. 減肥茶中多種真菌毒素的在線免疫親和凈化液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定研究[J]. 中國國境衛(wèi)生檢疫雜志,2011, 34(5): 382-387. DOI:10.16408/j.1004-9770.2011.05.003.

[123] 暴銥, 郭磊, 陳佳, 等. 生物毒素檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 分析化學(xué),2009, 37(5): 764-771. DOI:10.3321/j.issn:0253-3820.2009.05.030.

[124] ZHANG Daohong, LI Peiwu, YANG Yang, et al. A high selective immunochromatographic assay for rapid detection of aflatoxin B1[J].Talanta, 2011, 85(1): 736-742. DOI:10.1016/j.talanta.2011.04.061.

[125] 劉輝, 張燕. QuEChERS-酶聯(lián)免疫快速檢測法測定茶葉中黃曲霉毒素B1[J]. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報, 2015, 6(4): 1307-1313.

[126] SANTOS L, MARíN S, SANCHIS V, et al. Screening of mycotoxin multicontamination in medicinal and aromatic herbs sampled in Spain[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture, 2009, 89(10):1802-1807. DOI:10.1002/jsfa.3647.