張花

“動(dòng)物細(xì)胞工程”現(xiàn)代生物專題中的重、難點(diǎn)，是高考中的?？純?nèi)容?！皠?dòng)物細(xì)胞工程”常用的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備，其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。

1 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

1.1概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。

1.2過程：動(dòng)物胚胎或幼齡 單個(gè)細(xì)胞 動(dòng)物的組織器官

細(xì)胞懸浮液細(xì)胞株 細(xì)胞系

特別提醒：①將組織分散成單個(gè)細(xì)胞用胰蛋白酶或膠原蛋白酶。

②原代培養(yǎng)：組織消化后的初次培養(yǎng)產(chǎn)生細(xì)胞株，其遺傳物質(zhì)沒有改變。

傳代培養(yǎng)：把原代培養(yǎng)增殖的細(xì)胞分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)稱傳代培養(yǎng)，40-50代后，出現(xiàn)不能傳下去的細(xì)胞，部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變，出現(xiàn)細(xì)胞系。

1.3動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)過程中的生長(zhǎng)特性

① 細(xì)胞貼壁：細(xì)胞懸液中分散的細(xì)胞很快貼附在瓶壁上稱細(xì)胞貼壁。

貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶處理使其從從瓶壁分散下來。

② 接觸抑制：當(dāng)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)就停止細(xì)胞分裂，這種現(xiàn)象稱接觸抑制。

1.4培養(yǎng)的條件

① 無菌無毒環(huán)境：通常在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定的抗生素，以防止培養(yǎng)過程中的污染。

② 營(yíng)養(yǎng)：葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、維生素、血清血漿，其中葡萄糖和動(dòng)物血清是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中特有的營(yíng)養(yǎng)成分。

③ 溫度和PH：哺乳動(dòng)物以 為宜，適宜PH值為7.2-7.4

④ 氣體環(huán)境： ：維持細(xì)胞的有氧呼吸 ：維持溶液的PH

例1、實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)（非克隆培養(yǎng)）的基本過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A、甲過程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠消毒 B、乙過程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶消化

C、丙過程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型 D、丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)型

解析：乙過程是將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，需要用胰蛋白酶處理；丙過程屬于原代培養(yǎng)，其產(chǎn)物細(xì)胞1為細(xì)胞株，細(xì)胞的核型穩(wěn)定；丁過程屬于傳代培養(yǎng)，其產(chǎn)物細(xì)胞2為細(xì)胞系，部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，整個(gè)培養(yǎng)過程中嚴(yán)格要求無菌無毒環(huán)境。

答案：C

2 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

2.1細(xì)胞核移植技術(shù)

概念：動(dòng)物體細(xì)胞核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成為動(dòng)物個(gè)體。

用核移植的方法培養(yǎng)得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。

2.2體細(xì)胞核移植技術(shù)的過程

取材 培養(yǎng) 顯微注射到去核的次級(jí)卵母細(xì)胞 重組細(xì)胞 重組胚胎

受體雌性動(dòng)物 克隆動(dòng)物

2.3原理：體細(xì)胞核具有全能性

2.4特點(diǎn)：①核移植屬于無性移植，②培育的個(gè)體性狀與提供體細(xì)胞核的個(gè)體相一致。

例2、科學(xué)家將雌黑鼠乳腺細(xì)胞的細(xì)胞核移入白鼠去核的卵細(xì)胞內(nèi)，待發(fā)育成早期胚胎后植入褐鼠的子宮，該褐鼠產(chǎn)下的小鼠的體色和性別是（ ）

A、黑，雌 B、褐，雌 C、白，雄

D、黑，雄

解析：根據(jù)題意可知，細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)主要來自雌性黑鼠，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自白鼠的卵細(xì)胞。生物的性狀主要由細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)決定，所以小鼠的體色應(yīng)為黑色，性別為雌性。

3 動(dòng)物細(xì)胞融合

3.1概念：動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合后形成一個(gè)細(xì)胞的過程，融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)遺傳信息的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞。

3.2原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性

3.3過程

誘導(dǎo)劑：PEG，電激振動(dòng)，離心，滅活的病毒（特有方法）。

3.4意義：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。

（作者單位：新疆石河子148團(tuán)中學(xué)）