張優(yōu)明 王麗 駱海濤

[摘要] 血清堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）是一組特異的磷酸酯酶，屬于單酯磷酸水解酶，存在于機(jī)體的很多組織器官中，但各器官堿性磷酸酶的理化性質(zhì)都有不同，由以骨骼，牙齒和肝臟等部位堿性磷酸酶含量較多。由于兒童期生長(zhǎng)發(fā)育迅速，骨組織中此酶的含量相對(duì)增高，因此有必要了解兒童期血清堿性磷酸酶（ALP）水平，探討其參考區(qū)間及其與性別、年齡之間的相關(guān)性，不同年齡組之間應(yīng)該建立各自的參考區(qū)間，并結(jié)合臨床實(shí)際情況區(qū)分出生理和病理原因的升高，為相關(guān)疾病的診斷提供依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 兒童期；血清堿性磷酸酶；活性；參考區(qū)間；探討

[中圖分類號(hào)] R446.11 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1672-5654（2018）03（c）-0166-03

血清堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）是一組特異的磷酸酯酶，屬于單酯磷酸水解酶，此酶能催化核酸分子基因的轉(zhuǎn)換，它不是單一的酶，是一種同工酶，存在于機(jī)體的很多組織器官中，但各器官堿性磷酸酶的理化性質(zhì)都有不同，由以骨骼，牙齒和肝臟等部位堿性磷酸酶含量較多。成人血清堿性磷酸酶水平一般用于判斷肝膽疾病，是肝功檢查組合的一項(xiàng)重要指標(biāo)。正常人血清中的堿性磷酸酶主要來(lái)自骨骼，它是骨骼在發(fā)育期破骨細(xì)胞釋放的一種酶，骨ALP由成骨細(xì)胞產(chǎn)生，是成骨細(xì)胞特異標(biāo)志物之一，兒童骨骼生長(zhǎng)迅速骨ALP是兒童血清ALP的主要來(lái)源，兒童血清堿性磷酸酶是兒科醫(yī)生比較重視的一個(gè)重要指標(biāo)，因此有必要建立學(xué)齡前兒童血清堿性磷酸酶（ALP）參考值區(qū)間，以便對(duì)疾病的診斷作出正確的判斷[1]。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

為2016年3月—2017年5月來(lái)該院兒科體檢的學(xué)齡前兒童1 580名，其中男856名，女724名，年齡2～6歲。健康成人為2016年5—12月來(lái)該院健康體檢者365名，其中男167名，女198名，年齡19～32歲。通過(guò)列表對(duì)兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行比較。

1.2 儀器與試劑

采用BECKMANCOULTER UniCel DxC800 synchron clinical System自動(dòng)生化分析儀，堿性磷酸酶測(cè)定試劑盒，Eeagent Kit for Alkaline Phosphatase Test，該試劑盒可以檢測(cè)細(xì)胞或組織中的裂解液或勻漿液、血漿、血清等樣品中的堿性磷酸酶活性，Pare-nitrophenyl phosphate是一種常用的磷酸酶顯色底物液，在堿性條件下可以在磷酸酶的作用下生成黃色產(chǎn)物，在400～415 nm波長(zhǎng)下檢測(cè)吸光度，根據(jù)黃色產(chǎn)物的深淺判斷堿性磷酸酶的含量，一般兩者成正比關(guān)系。操作過(guò)程嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室SOP文件進(jìn)行。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

正常抽取兒童空腹靜脈血約4.0 mL，離心分離出血清備用，避免樣品溶液中混入EDTA、氟離子和檸檬酸鹽等堿性磷酸酶的抑制劑，實(shí)驗(yàn)前用標(biāo)準(zhǔn)血清將儀器進(jìn)行調(diào)節(jié)至最佳工作狀態(tài)，然后將測(cè)試血清和標(biāo)準(zhǔn)血清同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)以保證檢測(cè)結(jié)果的可接受性程度，對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)算對(duì)比列表得到相應(yīng)的參考范圍，對(duì)超過(guò)檢測(cè)區(qū)間的數(shù)據(jù)另用骨堿性磷酸酶進(jìn)行下一步分析，但要保證采血后2 h內(nèi)測(cè)試進(jìn)行完畢。判斷標(biāo)準(zhǔn)：BALP≤213 U/L為正常，213 U/L308 U/L為重度升高。血清堿性磷酸酶活性過(guò)低也和一些疾病相關(guān)[2]。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

按照不同性別和不同年齡兩組間數(shù)據(jù)均數(shù)進(jìn)行比較，統(tǒng)計(jì)分析檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)。采用兩組獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，按年齡多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析和SNK-q法，取檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

比較性別不同兩組間兒童期血清堿性磷酸酶結(jié)果，分析兩者之間血清堿性磷酸酶（ALP）水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.771 4，P=0.440，P>0.05），均成正態(tài)分布，見(jiàn)表1。

比較年齡不同兩組間血清堿性磷酸酶結(jié)果，分析每組間血清堿性磷酸酶（ALP）水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且（F=0.106，P=0.951，P>0.05），均成正態(tài)分布，見(jiàn)表2。

分析1 580名學(xué)齡前兒童2～6歲血清堿性磷酸酶水平均呈正態(tài)分布，且與年齡、性別無(wú)關(guān)，學(xué)齡前兒童2～6歲血清堿性磷酸酶檢測(cè)結(jié)果為（228.66±56.719）U/L，95的可信區(qū)間為（118.53～336.32）U/L，可以作為2～6學(xué)齡前兒童血清堿性磷酸酶參考值區(qū)間。

對(duì)超出兒童期血清血清堿性磷酸酶參考區(qū)間的6名兒童進(jìn)行了骨源堿性磷酸酶測(cè)定，骨源堿性磷酸酶測(cè)定對(duì)佝僂病的診斷具有重要意義，其中有4名骨堿性磷酸酶輕度升高，1名中度升高，1名重度升高，其血清堿性磷酸酶測(cè)定值均>210 U/L，最低為518 U/L，最高為988 U/L。

不同年齡段兒童血清堿性磷酸酶水平與成人血清堿性磷酸酶水平的比較；1 580名2～6歲學(xué)齡前兒童血清ALP水平（228.66±56.719）U/L與365名成人血清ALP水平（79.26±15.168）U/L進(jìn)行比較，均成正態(tài)分布，且兩者有顯著差異。與成人比較，學(xué)齡前兒童血清堿性磷酸酶水平明顯升高（t=-42.405 9，P=0.000，P<0.05）。符合兒童期生理特點(diǎn)。

3 討論

堿性磷酸酶（ALP）大部分分布于人體骨骼和肝臟等組織部位，并經(jīng)肝臟向膽道外排出的一種酶，但是此酶不是單一的酶，是一種同工酶，目前發(fā)現(xiàn)ALP有6種同功酶，其中ALP1、ALP2、ALP6均來(lái)自肝臟，ALP1陽(yáng)性見(jiàn)于肝外阻塞性黃疸、轉(zhuǎn)移性肝癌、肝膿腫。ALP2陽(yáng)性見(jiàn)于肝內(nèi)膽汁淤滯、急性肝炎、原發(fā)性肝癌等。ALP3來(lái)自骨細(xì)胞陽(yáng)性見(jiàn)于骨腫瘤和腫瘤骨轉(zhuǎn)移，佝僂病和骨軟化病。成人血清堿性磷酸酶水平是判斷肝膽疾病的重要指標(biāo)，但由于兒童期生長(zhǎng)發(fā)育較快，骨細(xì)胞增長(zhǎng)極度活躍，而ALP3又來(lái)自骨細(xì)胞，它是骨骼在發(fā)育期破骨細(xì)胞釋放的一種酶，是一種正常的生理現(xiàn)象，所以兒童期堿性磷酸酶明顯高于成人，不能用成人的堿性磷酸酶參考范圍作為參考作出錯(cuò)誤的判斷，誤認(rèn)為病理性升高，每個(gè)人體內(nèi)都有許多維護(hù)身體代謝平衡的激素，如胃內(nèi)有胃酸，胰臟內(nèi)有胰島素，生長(zhǎng)發(fā)育需要生長(zhǎng)激素，這些激素也有著各種各樣不為人知的作用，因此有必要建立學(xué)齡前兒童血清堿性磷酸酶參考值區(qū)間，血清堿性磷酸酶是我們?nèi)梭w十分重要的指標(biāo)。

通過(guò)以上數(shù)據(jù)分析比較不同年齡和不同性別之間血清堿性磷酸酶均成正態(tài)性分布，且按統(tǒng)計(jì)學(xué)原理分析差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，應(yīng)采取平均值的95%可信區(qū)間作為參考值區(qū)間。兒童期血清堿性磷酸酶有生理性或病理性增高和降低.在分析病情時(shí)一定要加以分析。生理性增高是由于兒童期生長(zhǎng)發(fā)育迅速，骨骼細(xì)胞發(fā)育活躍，生長(zhǎng)期兒童血清堿性磷酸酶主要來(lái)自成骨細(xì)胞，血清堿性磷酸酶活力可比正常人增高。病理性升高則主要有以下幾種情況：①骨骼系統(tǒng)疾病，如佝僂病、軟骨病、變形性骨炎，成骨細(xì)胞癌；②肝膽系統(tǒng)疾病，如肝外膽道阻塞、肝癌、肝硬化等；③應(yīng)用某些激素類藥物感染等；④病理性降低常見(jiàn)于重癥慢性腎炎、兒童甲狀腺機(jī)能不全或減退、乳糜泄，維生素C缺乏癥壞血病，營(yíng)養(yǎng)不良，呆小癥，遺傳性低磷酸酶血癥等疾病。

不同年齡段兒童血清堿性磷酸酶水平與成人血清堿性磷酸酶水平的比較。比較年齡不同兩組間血清堿性磷酸酶結(jié)果，分析每組間血清堿性磷酸酶（ALP）水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，均成正態(tài)分布。通過(guò)該次實(shí)驗(yàn)建立了2～6歲學(xué)齡前兒童血清堿性磷酸酶的95%可信區(qū)間作為參考值區(qū)間，其中發(fā)現(xiàn)6例兒童血清堿性磷酸酶活性異常升高，臨床上懷疑為佝僂病，因此該次實(shí)驗(yàn)建立的參考區(qū)間有助于兒童期佝僂病的篩查。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 王衛(wèi)兵.血清堿性磷酸酶測(cè)定結(jié)果的溯源性研究[J].中國(guó)醫(yī)療設(shè)備，2015，30（12）：49-52.

[2] 錢(qián)麗萍.2～6歲學(xué)齡前兒童血清堿性磷酸酶活性分析[J].江蘇衛(wèi)視保健，2014（1）：18.

（收稿日期：2017-12-22）