李 鑫 李武良 李 萍

胃癌是國際上最常見的惡性腫瘤之一，同時也是我國十大癌癥之一。Chen等[1]研究結(jié)果表明，2015年我國新增429.2萬癌癥病例，281.4萬人因癌癥死亡，其中胃癌是癌癥死亡的主要原因。幽門螺桿菌（Helicobacter pylori,H.pylori）為消化道常見菌群，我國H.pylori感染率為47%～66%[2]。研究表明，70%左右的胃癌病患由H.pylori引起，另外研究表明近90%的胃癌患者被確認與H.pylori感染相關(guān)[3-4]。目前，常用的H.pylori檢測手段主要有組織活檢、細菌培養(yǎng)、PCR基因診斷、13C或14C-尿素呼氣檢驗（14CUrea Breath test，14C-UBT）[5-8]。 由于14C-UBT 簡單快捷且準確度及敏感度較高，被廣泛應(yīng)用。同時，14C-UBT可對胃黏膜H.pylori密度進行定量評估，有效減少因H.pylori在胃內(nèi)病灶非均勻性分布所致的取樣誤差[9]。P53抑癌基因是機體內(nèi)一種抑制細胞癌變的基因，正常情況下，細胞或器官中P53蛋白含量極低，較難檢測。當(dāng)細胞DNA受到損傷并無法修復(fù)時P53蛋白大量表達，抑制癌變細胞[15-17]。骨橋蛋白（osteopontin,OPN）廣泛存在于細胞、組織、器官中，參與組織修復(fù)，與細胞黏附、遷移及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)[18]。本研究通過14C-UBT檢測不同TNM分期胃癌患者H.pylori感染狀況及OPN的表達，旨在揭示不同TNM分期胃癌患者H.pylori的感染情況與胃癌進展的相關(guān)性。

資料與方法

一、一般資料

選取2014年5至2017年5月在我院經(jīng)胃鏡及病理檢查確診的胃癌患者105例，其中男60例，女45例；通過14C-UBT檢測[10]確診，其中H.pylori陽性74例，H.pylori陰性31例。根據(jù)TNM分期Ⅰ期25例，其中男 15例，女 10例，平均年齡（48.26±11.37）歲；Ⅱ期25例，其中男14例，女11例，平均年齡（47.82±10.96）歲；Ⅲ期 30例，其中男 17例，女13例，平均年齡（47.67±11.96）歲；Ⅳ期 25例，其中男15例，女10例，平均年齡 （47.82±10.96歲）。不同TNM分期胃癌患者的臨床病理指標見表1。

表1 不同TNM分期胃癌患者的臨床病理指標 （n）

二、方法

1.14C-UBT

所有患者檢測前4周禁止使用抗生素及H.pylori敏感藥物，患者空腹服用1粒14C膠囊，靜坐25 min后引導(dǎo)患者向CO2吸收瓶勻速吹氣1～4 min，使瓶內(nèi)CO2吸收劑由紫紅色變?yōu)闊o色，H.pylori液體閃爍計數(shù)儀測定3～5 min，DPM≥100視為陽性，DPM＜100為陰性（根據(jù)測定儀器說明書）。

2.OPN及P53的檢測

采用免疫組化SP檢測患者胃癌組織中OPN和P53的表達，OPN及P53單克隆抗體、免疫組化SP試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)有限公司，檢測按照試劑盒說明書操作。

三、數(shù)據(jù)分析

本研究使用SPSS 22.0進行數(shù)據(jù)處理。計數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗；采用Spearman進行相關(guān)性分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、胃癌患者H.pylori檢測結(jié)果

結(jié)果顯示，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期感染率分別為52.0%（13/25），68.0%（17/25）、76.7%（23/30）、84.0%（21/25）；隨著胃癌患者病情的發(fā)展H.pylori的感染率顯著升高（χ2=27.450，P=0.000）。

二、H.pylori感染與不同TNM分期胃癌患者P53表達的關(guān)系

Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期H.pylori陽性胃癌患者的P53表達率均顯著高于H.pylori陰性患者 （P＜0.05），且Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者H.pylori陽性率與P53表達率呈正相關(guān)，Ⅳ期胃癌患者H.pylori陽性與P53表達率相關(guān)系數(shù)為0.752，見表2。

表2 不同TNM分期胃癌組織中P53表達分析 [n（%）]

三、H.pylori感染與不同TNM分期胃癌患者OPN表達的關(guān)系

Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期H.pylori陽性胃癌患者的OPN表達率均顯著高于H.pylori陰性患者 （P＜0.05），且Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者H.pylori陽性與OPN表達率呈正相關(guān)，且隨著胃癌病情加重相關(guān)性明顯，見表3。

表3 不同TNM分期胃癌組織中骨橋蛋白（OPN）的表達分析 [n（%）]

討 論

目前，國際癌癥研究中心（International Agency for Research on Cancer,IARC）已經(jīng)將H.pylori列為Ⅰ類致癌因子[11]。胃癌是我國最常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，研究表明胃癌病死率占癌癥病死率的24%左右，為癌癥死亡率首要因素。H.pylori通過感染損傷胃黏膜，促使胃細胞更新速度加快，增加了細胞更新時DNA復(fù)制錯誤機率，最終導(dǎo)致DNA損傷[12]。H.pylori可導(dǎo)致機體釋放過多的超氧自由基導(dǎo)致胃細胞過氧化損傷，引發(fā)癌癥[13]。H.pylori感染的檢測手段主要有組織活檢、細菌培養(yǎng)、血清及非血清H.pylori檢測、13C-UBT或14C-UBT[5-8]。本研究采用14C-UBT檢測不同TNM胃癌分期患者H.pylori的感染狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期感染率分別為52.0%，68.0%、76.7%、84.0%，與石玲[15]在 H.pylori感染與原發(fā)性肝癌的相關(guān)性研究結(jié)果相似，提示H.pylori感染率隨著癌癥病情的發(fā)展顯著升高，這一觀點在胃癌、肝癌等癌癥研究中得到支持。

P53抑癌基因是機體內(nèi)一種抑制細胞癌變的基因，正常情況下，細胞或器官中P53蛋白含量極低，較難檢測。當(dāng)細胞DNA受到損傷并無法修復(fù)時P53蛋白大量表達，抑制癌變細胞[16-18]。骨橋蛋白廣泛存在于細胞、組織、器官中，參與組織修復(fù)，與細胞黏附、遷移及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)[19]。研究表明，骨橋蛋白在肺癌、胃癌、肝癌等原發(fā)性腫瘤及其淋巴轉(zhuǎn)移瘤組織中過量表達，可能參與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移[20-22]。本研究中Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期H.pylori陽性胃癌患者的P53和OPN表達率均顯著高于H.pylori陰性患者（P ＜ 0.05），且Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者 H.pylori陽性與P53和OPN表達率呈正相關(guān)，并且隨著患者病情的加重胃癌患者H.pylori陽性與P53和OPN表達率的相關(guān)性越密切。提示P53和OPN可能參與H.pylori通過感染引發(fā)癌癥的機制。

綜上所述，胃癌晚期即Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者H.pylori感染率顯著升高，且H.pylori感染與OPN表達率和P53表達率呈正相關(guān)，并隨著胃癌病情的加深相關(guān)越緊密。

[1]Chen W,Zheng R,Baade P D,et al.Cancer statistics in China,2015[J].Ca A Cancer J Clin,2016,66(2):115-132.

[2]Nagy P,Johansson S,Molloybland M.Systematic review of time trends in the prevalence of Helicobacter pylori infection in China and the USA[J].Gut Pathog,2016,8(1):8.

[3]Azami M,Nasirkandy MP,Mansouri A,et al.Global Prevalence of Helicobacter Pylori Infection in Pregnant Women:A Systematic Review and Meta-Analysis Study[J].Int J Med Sci,2017,5(1):30-36.

[4]張萬岱,胡伏蓮,蕭樹東,等.中國自然人群幽門螺桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查[J].現(xiàn)代消化及介入診療,2010,15(5):265-270.

[5]楊才明,陳玉忠.13C-UBT和14C-UBT等七種診斷幽門螺桿菌感染檢測技術(shù)比較與評價[J].標記免疫分析與臨床,2012,19(2):126-128.

[6]Zullo A,Hassan C,Trapani S,et al.Rapid urease test for H.pylori,diagnosis:pros and cons[J].Int Emer Med,2010,5(3):257-258.

[7]Cosgun Y,Yildirim A,Yucel M,et al.Evaluation of Invasive and Noninvasive Methods for the Diagnosis of Helicobacter Pylori Infection[J].Asian Pac J Cancer Preve,2016,17(12):6165.

[8]Pourakbari B,Ghazi M,Mahmoudi S,et al.Diagnosis of Helicobacter pylori infection by invasive and noninvasive tests[J].Braz J Microbiol,2013,44(3):795-798.

[9]Sahni H,Palshetkar K,Shaikh T,et al.Comparison between rapid urease test and carbon 14 urea breath test in the diagnosis of Helicobacter pylori infection[J].Int J Med Sci,2015:2362-2365.

[10]張萬岱,姚永莉.幽門螺桿菌感染診斷方法的評價與診斷標準[A].全國中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會議[C],2013.

[11]田雨,王蔚虹,胡伏蓮.中國幽門螺桿菌感染治療共識意見[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)刊,2007,9(2):104-105.

[12]楊舒,張雷.幽門螺旋桿菌致病與免疫機制的研究進展[J].中國病原生物學(xué)雜志,2017(3):283-285.

[13]王蓋昊,戴飛,趙紅珍,等.幽門螺桿菌致病機制的分子免疫學(xué)研究進展[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2016,96(44):3609-3613.

[14]林東紅,張慶,肖佛義.13C/14C-尿素呼氣試驗在篩查232例早期胃癌中的價值[J].養(yǎng)生保健指南:醫(yī)藥研究,2015,(7):124-124.

[15]石玲.幽門螺桿菌感染與原發(fā)性肝癌的相關(guān)性研究[D].廣西醫(yī)科大學(xué),2014.

[16]林海鵬,盧曉明,王莉霞,等.沉默信息調(diào)節(jié)因子7和p53在胃癌組織的表達及臨床意義[J].中華實驗外科雜志,2017,34(5):850-852.

[17]樊林,陳銳,趙偉,等.Sirt1、P53及P-gp在胃癌中的表達及其臨床意義[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2013,34(5):642-646.

[18]秦娟,晏偉,王三喜,等.Ki67、p53及EGFR在胃癌組織中的表達水平及臨床意義[J].實用癌癥雜志,2017,32(1):37-39.

[19]胡雪,馬靜靜,董衛(wèi)國.骨橋蛋白在幽門螺桿菌感染相關(guān)性胃癌中的研究進展[J].實用醫(yī)學(xué)雜志,2017,33(6):851-853.

[20]周蕾,俞嵐,魏軍,等.胃癌組織中H.pylori-L型感染及骨橋蛋白、基質(zhì)金屬蛋白酶-2的表達[J].中國老年學(xué),2014,34(2):311-313.

[21]李政言,祥蔚,王曉東,等.乙肝病毒X蛋白上調(diào)骨橋蛋白增強肝癌細胞干性和復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移[A].中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會2016年全國學(xué)術(shù)會議論文集[C],2016.

[22]董文華,吳曉梅.骨橋蛋白與肺癌的最新研究[J].臨床肺科雜志,2016,2(3):549-551.