張偉超，劉 琥，陳基萍，許兆偉，錢 平

（1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動科動醫(yī)學(xué)院，湖北 武漢 430070；2.廣西揚(yáng)翔股份有限公司，廣西 貴港 537131）

豬等孢球蟲（I.suis）主要危害初生仔豬，引起仔豬腹瀉、消瘦及發(fā)育遲緩，鮮有死亡。當(dāng)3～5日齡仔豬感染球蟲時(shí)，由于消化系統(tǒng)逐漸完善，感染性卵囊被胃液消化，子孢子溢出侵入腸上皮細(xì)胞（Lindsay等，1980），進(jìn)行 2～3代裂殖生殖，然后轉(zhuǎn)為配子生殖，形成雌雄配子，最終雌雄配子結(jié)合發(fā)育成為卵囊，隨糞便排出體外。在20～37℃的環(huán)境下，球蟲卵囊可快速實(shí)現(xiàn)孢子化，進(jìn)而發(fā)育為具有感染性的卵囊（Lindsay等，1982）。因在自然環(huán)境中對酸、堿消毒劑具有較強(qiáng)的抵抗力，孢子化卵囊可通過土壤、水源、飼料給豬場帶來威脅。規(guī)?；i場產(chǎn)房內(nèi)的溫度一年四季控制在20～35℃范圍內(nèi)，為球蟲的擴(kuò)散提供了理想的溫度和濕度條件。

本文針對廣西某規(guī)模化豬場2017年夏季發(fā)生的仔豬腹瀉進(jìn)行了現(xiàn)場調(diào)查分析。該場包含兩個(gè)獨(dú)立的母豬區(qū)，分別為一區(qū)和二區(qū)。一區(qū)為老區(qū)，自2017年6月起產(chǎn)房內(nèi)7～14日齡仔豬開始出現(xiàn)持續(xù)拉稀現(xiàn)象，初為糊狀（牙膏狀），后期轉(zhuǎn)為水樣，仔豬呈漸進(jìn)性消瘦，少數(shù)脫水嚴(yán)重的仔豬出現(xiàn)病弱、死亡；二區(qū)為新建場區(qū)，2017年6月中旬開始產(chǎn)仔，偶見零星拉稀。對腹瀉糞樣進(jìn)行觀察，初步推測為球蟲感染。另外，通過溝通了解到該場一區(qū)已經(jīng)有一年未對3～5日齡的仔豬進(jìn)行百球清保健，因此更加確定了球蟲感染的可能。

隨后，采集糞樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測，以證實(shí)是否存在球蟲卵囊；安排灌喂百球清進(jìn)行保健和治療，1周后再次采集產(chǎn)房仔豬的糞便，檢測糞便中是否仍然存在球蟲卵囊。

1 材料與方法

1.1 材料

飽和食鹽水500 mL，拉稀仔豬糞便5 g，青霉素瓶，采樣袋，載玻片，蓋玻片，玻璃棒。

1.2 方法

1.2.1 樣品采集 1）現(xiàn)場采集一區(qū)和二區(qū)產(chǎn)房腹瀉仔豬糞便各10份、對應(yīng)母豬糞便各5份；2）對仔豬用藥保健、治療1周后，再次采集產(chǎn)房仔豬糞便各10份檢查蟲卵數(shù)量。

1.2.2 飽和食鹽水漂浮鏡檢球蟲卵囊 1）取約1 g腹瀉仔豬糞便裝入青霉素瓶中，加入適量飽和食鹽水?dāng)嚢璩苫鞈乙海?）繼續(xù)加入飽和食鹽水，直至滿而不溢、液面微凸，將一張干凈的載玻片反扣到瓶口，靜置15 min，以便漂浮到液面上的蟲卵與玻片黏附；3）快速翻轉(zhuǎn)載玻片，取一干凈的蓋玻片蓋至液滴上，以備鏡檢；4）顯微鏡鏡檢，分別以20倍、40倍物鏡觀察漂浮結(jié)果，并保存圖片。

2 結(jié)果

現(xiàn)場觀察發(fā)現(xiàn)，腹瀉糞樣呈典型的黃色、灰白色、牙膏糊狀，另外有部分拉褐色糞便（帶血），仔豬被毛凌亂、潮濕，呈漸進(jìn)性消瘦，并伴有酸臭味，見圖1。

圖1 感染球蟲仔豬的腹瀉糞樣及外觀表現(xiàn)

鏡檢發(fā)現(xiàn)，采集的一區(qū)和二區(qū)產(chǎn)房仔豬糞便中均有大量的球蟲卵囊，感染比例分別為100%和70%（見表1），卵囊處于孢子化階段（見圖2），可在卵囊中發(fā)現(xiàn)孢子化的各個(gè)階段（見圖3），母豬糞便中未發(fā)現(xiàn)任何蟲卵。

表1 用藥前后球蟲卵囊檢出率

圖2 一區(qū)與二區(qū)仔豬糞便中的孢子化卵囊（左）和未孢子化卵囊（右）

圖3 產(chǎn)房仔豬糞便中等孢球蟲卵囊的孢子化過程

對3～5日齡仔豬灌喂百球清（托曲珠利）進(jìn)行保健，對7～14日齡發(fā)生腹瀉的仔豬進(jìn)行治療，腹瀉情況明顯好轉(zhuǎn)。1周后再次收集糞便進(jìn)行飽和食鹽水漂浮鏡檢，結(jié)果顯示，糞便中的蟲卵數(shù)顯著減少，陽性比例也大幅度下降至20%和10%（見表 1）。

3 討論

目前，引起規(guī)?；i場哺乳仔豬腹瀉的因素有很多，以病毒性腹瀉的危害最為嚴(yán)重，如流行性腹瀉發(fā)生時(shí)，死亡率可達(dá)100%，細(xì)菌性腹瀉次之，而寄生蟲性腹瀉往往最容易被忽視。引起產(chǎn)房內(nèi)腹瀉的寄生蟲主要為球蟲，感染豬的球蟲主要為艾美爾球蟲和等孢球蟲，兩種球蟲的差異主要表現(xiàn)在孢子化形態(tài)的差異。在人工感染條件下，多數(shù)艾美爾球蟲對仔豬沒有致病性，真正威脅仔豬健康的是等孢球蟲。鑒于目前母豬場往往擁有較高等級的生物安全，產(chǎn)房在斷奶后必須經(jīng)過嚴(yán)格的清洗、消毒、空欄干燥等流程。從理論上講，產(chǎn)房內(nèi)幾乎所有病原均能夠被殺死。但在實(shí)際生產(chǎn)中，即便是剛啟用的新建欄舍或經(jīng)過嚴(yán)格熏蒸消毒的欄舍，仍有較大的概率發(fā)生仔豬等孢球蟲病。大多數(shù)養(yǎng)豬人可能會認(rèn)為仔豬感染等孢球蟲是因?yàn)榻佑|母豬糞便而引起的，但有研究表明，母豬感染艾美爾球蟲的概率為60%～95%，而等孢球蟲感染率不足1%（Lindsay等，1984），而且進(jìn)一步的試驗(yàn)調(diào)查顯示，母豬在僅存在艾美爾球蟲感染（初乳、胎盤均未發(fā)現(xiàn)處于任何階段的球蟲）的情況下，所產(chǎn)仔豬后期檢測到的球蟲感染病原并無等孢球蟲（Stuart和 Lindsay,1986），由此可見，母豬并不是仔豬等孢球蟲感染的主要來源。

另外，通常為7～14日齡的豬群表現(xiàn)球蟲感染，這主要取決于球蟲特殊的生活史。0～7日齡的仔豬由于胃腸道消化功能不全、酶活比較低，還不足以完全消化掉球蟲的卵囊壁，因而0～7日齡仔豬常不表現(xiàn)出感染癥狀。隨著酶活性的明顯提高，卵囊壁被消化釋放出子孢子，子孢子在腸上皮細(xì)胞中首先進(jìn)行2～3 d的無性生殖（裂殖生殖），然后進(jìn)入有性生殖階段，最后雌雄配子形成卵囊，隨糞便排出。在這個(gè)過程，裂殖生殖階段的蟲體破壞了腸上皮的吸收功能，引致體液丟失和腹瀉。發(fā)生嚴(yán)重感染時(shí)，仔豬可能在球蟲裂殖生殖階段就出現(xiàn)死亡，此時(shí)腹瀉糞樣中甚至還檢測不到球蟲卵囊。正常情況下，在表現(xiàn)出臨床癥狀2～3 d后方可在糞便中檢查到球蟲卵囊，且糊狀糞便中含有的卵囊可能更多。

豬場常常在仔豬3～5日齡時(shí)灌喂百球清（托曲珠利）來預(yù)防球蟲感染，因?yàn)橥星槔梢酝ㄟ^干擾球蟲的細(xì)胞核分裂和線粒體來影響球蟲的呼吸和代謝，達(dá)到殺滅蟲體的作用。當(dāng)發(fā)生嚴(yán)重感染時(shí)，也可作為治療用藥，阻止球蟲的反復(fù)感染對腸上皮細(xì)胞造成的損害。另外，通過全進(jìn)全出、徹底清欄洗欄（徹底清除殘余糞便及組織碎片）、消毒和空欄干燥（干燥可大幅降低球蟲卵囊孢子化的效率）等生物安全措施能夠抑制球蟲的散播，但仍不足以阻斷球蟲感染的發(fā)生。在本案例中，即便是新建欄舍，也出現(xiàn)了仔豬糞便中有大量等孢球蟲卵囊存在的情況。大家可能會將仔豬感染球蟲的原因歸咎于母豬帶蟲，但事實(shí)上我們并未在母豬糞便中檢測到任何球蟲卵囊的存在。因而，感染仔豬的等孢球蟲來源仍是個(gè)未解之謎，可能是人、其他動物、受污染的飲水、飼料、生產(chǎn)工具帶至產(chǎn)房造成的仔豬感染。由此可見，日常進(jìn)行欄舍消毒時(shí)應(yīng)針對欄舍、舍外走道、水鞋以及產(chǎn)房內(nèi)的生產(chǎn)物資等進(jìn)行徹底的消毒和熏蒸，消毒劑優(yōu)先選擇氨水復(fù)合物或漂白粉（濃度大于50%）。此外，還要預(yù)防寵物或老鼠等動物進(jìn)入欄舍內(nèi)造成球蟲卵囊的機(jī)械傳播。

球蟲在臨床上有一過性免疫的特性，即感染過球蟲的仔豬康復(fù)后對后續(xù)的感染會產(chǎn)生抵抗力，僅排出少量卵囊或不排卵囊，不表現(xiàn)臨床癥狀。這預(yù)示著球蟲是一個(gè)良好的疫苗載體。但由于目前尚未有合適的球蟲疫苗出現(xiàn)，因而仔豬球蟲病的預(yù)防只能依賴于藥物保健和提高場內(nèi)的生物安全等級。文中所提的豬場生物安全等級較高，且長期未表現(xiàn)出球蟲問題，因而將百球清的保健取消了，但隨后不到一年時(shí)間便出現(xiàn)了球蟲的暴發(fā)流行，這應(yīng)該是場內(nèi)出現(xiàn)了生物安全漏洞，再加上取消藥物保健使豬群失去了保險(xiǎn)，因而導(dǎo)致球蟲暴發(fā)。而南方夏季高溫、濕熱的氣候更是加速了球蟲的孢子化進(jìn)程，使球蟲的感染迅速擴(kuò)大?；蛟S是一區(qū)與二區(qū)的人、物品、老鼠等因素存在交叉污染，蟲卵從一區(qū)擴(kuò)散到二區(qū)的新建欄舍，二區(qū)的仔豬也同期暴發(fā)了球蟲感染。

綜上所述，在產(chǎn)房仔豬面對球蟲感染風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，首先，應(yīng)做好生物安全工作，進(jìn)出欄舍的人員、物品等必須進(jìn)行消毒，禁止寵物進(jìn)入欄舍，定期滅鼠，防止機(jī)械傳播；其次，保證欄舍內(nèi)的衛(wèi)生、清潔和干燥，減少環(huán)境中蟲卵的數(shù)量；另外，在3～5日齡時(shí)通過藥物保健來抑制球蟲對仔豬腸上皮細(xì)胞的入侵和感染，阻斷球蟲的有性生殖；最后，定期采集糞樣進(jìn)行監(jiān)測，時(shí)刻了解豬群的球蟲感染狀態(tài)，防止球蟲意外暴發(fā)。

[1]Lindsay D S,Stuart B P,Wheat B E,et al.Endogenous development of the swine coccidium,Isospora suis Biester 1934[J].J Parasitol,1980,66(5):771-779.

[2]Lindsay D S,Current W L,Ernst J V.Sporogony of Isospora suis Biester,1934 of swine[J].J Parasitol,1982,68(5):861-865.

[3]Lindsay D S,Ernst J V,Current W L,et al.Prevalence of oocysts of Isospora suis and Eimeria spp from sows on farms with and without a history of neonatal coccidiosis[J].J Am Vet Med Assoc,1984,185(4):419-421.

[4]Lindsay D S,Current W L,Taylor J R.Effects of experimentally induced Isospora suis infection on morbidity,mortality,and weight gains in nursing pigs[J].Am J Vet Res,1985,46(7):1511-1512.

[5]Stuart B P,Lindsay D S.Coccidiosis in swine[J].Vet Clin North Am Food Anim Pract,1986,2(2):455-468.