国产日韩欧美一区二区三区三州_亚洲少妇熟女av_久久久久亚洲av国产精品_波多野结衣网站一区二区_亚洲欧美色片在线91_国产亚洲精品精品国产优播av_日本一区二区三区波多野结衣 _久久国产av不卡

404 Not Found


nginx
404 Not Found

404 Not Found


nginx
404 Not Found

404 Not Found


nginx
404 Not Found

404 Not Found


nginx
404 Not Found

404 Not Found


nginx
404 Not Found

404 Not Found


nginx

cntf基因A/G多態(tài)性作為東北地區(qū)雪上技能主導類運動員早期選材的相關性研究

2018-04-03 06:52:22周桐希
通化師范學院學報 2018年4期
關鍵詞:等位基因選材多態(tài)性

李 麗,周桐希

多年研究實踐表明:運動成績的取得與運動天賦和刻苦的訓練密不可分,經(jīng)過嚴格和刻苦的訓練并不一定能取得優(yōu)秀的運動成績,其原因在于不同人帶有不同遺傳素質(zhì)基因,也就是運動天賦不同.只有具有優(yōu)秀運動基因的人經(jīng)過科學訓練才能獲得優(yōu)異成績.縱觀我國運動員選材的發(fā)展,主要為經(jīng)驗選材法[1]、形態(tài)學選材法、家族選材法、PTC嘗味能力選材法、皮紋選材法、血型選材法及生理生化指標選材法.以上選材方法不能得出客觀、準確的結(jié)論.

目前,分子生物學技術(shù)已得到廣泛的應用,國內(nèi)外學者在運動相關基因研究領域進行大量研究,已取得了有意義的成果.cntf(ciliary neuro?trophic factor)基因全稱為睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子.cntf能夠促進突觸處神經(jīng)分化,故神經(jīng)發(fā)生損傷時能起到修復作用,即使神經(jīng)元沒發(fā)生損傷也能延緩其衰退[2].Oppenheim RW[3]證實 cntf可維持運動神經(jīng)元正常活動從而延緩其衰退;Anderson KD、Emerich DF和Emerich DF[4-6]實驗證實外源性的cntf對被損傷的神經(jīng)有修復作用.相關研究表明cntf基因多態(tài)性與力量素質(zhì)相關.近年來對于cntf基因與運動能力的相關性研究較少,黃昌林等[7]通過對攜帶AG基因型和GG基因型的我國軍人(男性、漢族)的握力測試,實驗研究的結(jié)果顯示此兩種基因型的力量與體指數(shù)無統(tǒng)計學差異.韓偉等[8]對我國越野滑雪運動員cntf基因三種基因型與普通人進行實驗研究得出的結(jié)論是無統(tǒng)計學差異.

基因選材是一種準確、客觀、科學的選材依據(jù),需要大量的實驗數(shù)據(jù)支持.冰雪項目基因選材方面的工作現(xiàn)在還沒有得到全面的開展,缺少運動項目、實驗方面的數(shù)據(jù)支持.2022年冬奧會在我國舉行,冬季項目選材和訓練工作得到重視.此項目現(xiàn)在已經(jīng)出現(xiàn)了一批具有世界水平的運動員,但后備人材的短缺制約著項目長期發(fā)展.利用當前優(yōu)秀運動員的寶貴資源,對他們進行相關選材指標尤其是基因指標的測定,對于我國建立優(yōu)秀運動員選材模型具有重要意義.本課題研究旨在對cntf基因能否作為雪上技能主導類運動員基因選材指標進行篩選,可為冰雪運動員的基因選材做前期積累工作.

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

東北地區(qū)單板大跳臺和坡式障礙優(yōu)秀運動員為實驗組,普通高校大學生為對照組.

實驗組:東北地區(qū)單板大跳臺和坡式障礙優(yōu)秀運動員為實驗組.測試對象:東北地區(qū)單板大跳臺和坡式障礙優(yōu)秀運動員21名(女11名、男子10名).國際運動健將級別運動員2名,國家一級運動員5名,其余為國家二級運動員.平均運動年限7年,年齡在10~26歲.

對照組:選取參加全國高考的非體育專業(yè)考生,在高中階段未參加過系統(tǒng)的體育訓練,未曾經(jīng)過體育術(shù)科考試,進入體院后沒有進行專項訓練.運動人體科學專業(yè)、體育人文專業(yè)本科生共115名.所有測試人員種族一致,年齡在16~23歲;調(diào)查表明本人無任何重大疾病,測試時保證身體健康.以上參加測試的人員均來自于中國北方漢族.

1.2 實驗內(nèi)容

采用分子生物學PCR-RFLP的方法對實驗組和對照組的cntf基因A/G多態(tài)性進行測定.

1.3 主要實驗儀器

PCR擴增儀(德國艾本德股份公司GSX1);電泳儀(北京市六一儀器廠DYY-6D);凝膠成像系統(tǒng)(美國Protein Simple公司Alphaimager Mini).

1.4 實驗操作主要過程

(1)全血DNA提取.靜脈取新鮮全血5ml放入到帶抗凝劑的試管中,按照普瑞麥格全血DNA攝取試劑盒操作.

(2)設計cntf基因的引物.查找Gene Bank數(shù)據(jù)庫嚴格按照引物設計原則.依據(jù)Thome[9]等報道的cntf的引物序列和cntf基因多態(tài)位點的特點,利用Primer select 5.0軟件來設計引物,提供給生物科技公司,由上海捷瑞公司合成,放在冰箱中保存.

(3)擴增cntf基因.擴增cntf基因的反應體系包括:Taq 酶 0.25μl、5×Taq Buffer 5μl、dNTP 0.5μl、滅菌雙蒸水15.25μl、上下游引物各1μl、以及DNA模板2μl,共25μl.

(4)cntf基因 PCR擴增參數(shù).95℃預變性5min;94℃變性5min35s、58℃退火30s、72℃延伸15s,共循環(huán)36次;72℃終末延伸8min;4℃保存.

(5)cntf基因A/G多態(tài)位點的酶切反應體系.cntf基因A/G多態(tài)位點的酶切反應體系包括:HaeⅢ限制性內(nèi)切酶0.4μl、Buffer 0.2μl、BSA 0.1μl,以及擴增產(chǎn)物17.3μl,共18μl.

(6)電泳.依據(jù)所測得物質(zhì)的分子量來確定濃度為:DNA由于分子量大確定濃度為0.8%;cntf基因經(jīng)過酶切分子量濃度為3%.設置電泳儀器U=100V、P=50W、I=50mA,時間50min.電泳完畢后,觀察凝膠采用紫外可見光分析裝置,利用軟件分析結(jié)果.

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

(1)對照組和實驗組的基因型頻率分布運用基因平衡定律(Hardy-Weinberg,H-W)對其進行檢驗,確定所測人群的群體代表性,利用遺傳學統(tǒng)計方法對三種基因不同多態(tài)性的頻率和等位基因進行整理.

(2)用SPSS統(tǒng)計學軟件對所得的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計,用卡方對基因型和等位基因頻率進行檢驗,(P<0.05)為顯著差異,(P<0.01)極其顯著差異.

2 cntf基因A/G多態(tài)性的實驗結(jié)果

(1)cntf基因A/G多態(tài)性的判斷.睫狀神經(jīng)因子cntf基因保證雞胚睫狀神經(jīng)元最初從雞眼睛中提取.它是一個酸性蛋白質(zhì),具有200個殘基的氨基酸,是一種細胞因子,屬于白介素6家族.人的cntf基因定位第11號染色體長臂近端,由兩個外顯子和一個1kb左右內(nèi)含子組成,本實驗中HaeⅢ酶切多態(tài)位點位于第二個外顯子和內(nèi)含子之間,設計引物擴增后的長度為134bp,用HaeⅢ酶切后所得到產(chǎn)物G等位基因是40bp和94bp,A等位基因是134bp沒有酶切位點,出現(xiàn)的三種基因型是AG、AA、GG.cntf基因A/G凝膠電泳圖(見圖1).

圖1 cntf基因A/G凝膠電泳圖

Marker電泳條帶:Lane 1為 100bp、200bp、300bp、400bp、500bp、600bp.

純合子AA電泳條帶:Lane 4.

純合子GG電泳條帶:Lane 13、10、9、8、7、6、5、3、2.

雜合子AG電泳條帶:Lane 12、11.

PCR產(chǎn)物電泳條帶:Lane 14.

(2)cntf基因A/G多態(tài)性基因頻率的平衡檢驗.由表1得出:經(jīng)Hardy-Weinberg平衡定律的檢驗,實驗組和對照組的HEW值為1.64和1.34.實驗組和對照組基因型頻率因(P>0.05)符合Hardy-Weinberg平衡檢驗.結(jié)果顯示,對照組和實驗組cntf基因A/G多態(tài)性頻率分布符合遺傳定律.

表1 cntf基因A/G多態(tài)性頻率分布的Hardy-Weinberg平衡定律的檢驗

(3)實驗組和對照組cntf基因A/G多態(tài)性等位基因頻率的檢驗.表2表明:無論實驗組還是對照組的等位基因G頻率都高于A頻率,A等位基因?qū)嶒灲M和對照組分別為14.3%和18.7%,G等位基因為85.7%和81.3%.經(jīng)卡方檢驗實驗組等位基因頻率χ2=0.468,χ2(0.05)=5.99,χ2<χ2(0.05).結(jié)論P=0.494(P>0.05),無統(tǒng)計學差異.

表2 實驗組和對照組cntf基因A/G多態(tài)性等位基因頻率分布

(4)實驗組和對照組cntf基因A/G多態(tài)性頻率的卡方檢驗.據(jù)表3表明:實驗組AA基因型頻率為19.0%,AG基因型頻率為4.8%,GG基因型頻率為76.2%;對照組AA基因型頻率為25.2%,AG基因型頻率為6.1%,GG基因型頻率為68.7%.經(jīng)卡方檢驗實驗組基因型頻率χ2=0.474,χ2(0.05)=5.99,χ2<χ2(0.05).結(jié)論P=0.789(P>0.05),無統(tǒng)計學差異.cntf基因A/G多態(tài)性分布頻率的順序:①GG型,②AA型,③AG型.

表3 實驗組和對照組cntf基因A/G多態(tài)性頻率

3 分析與討論

cntf基因能增加體內(nèi)外大部分神經(jīng)元的存活、阻止損傷后神經(jīng)元的衰退、促進其恢復和影響神經(jīng)元分化,增進運動神經(jīng)元存活并具有保護作用[10].這可能是cntf基因與力量素質(zhì)有關的原因之一.Roth Stephen M通過對cntf多態(tài)性實驗研究,結(jié)果表明,A/G型在進行快速運動時比G/G型產(chǎn)生的肌肉力量更大[11].cntf基因能保持骨骼肌的形態(tài)和功能,增加肌纖維數(shù)目、減少由于缺少神經(jīng)支配、衰老等原因而造成的肌萎縮、肌肉力量下降.它有營養(yǎng)肌肉的作用,cntf的受體存在于骨骼肌纖維中,兩者的結(jié)合對骨骼肌纖維的生長有一定的促進作用,在促進長粗的同時通過對肌纖維的生長營養(yǎng)調(diào)控作用以提高肌肉的功能[12].由于肌纖維營養(yǎng)充足,促進肌肉蛋白質(zhì)合成使得肌纖維生理橫斷面積粗大,由于生理橫斷面積變粗、突觸部位運動神經(jīng)元和所支配的肌纖維的數(shù)量增加,從而促進肌肉力量的增長.研究顯示:cntf對神經(jīng)肌肉的病癥可能有治療作用,如早期阿爾茨海默病、帕金森氏綜合癥和重癥肌無力[13].實驗表明,24個月的老年鼠坐骨神經(jīng)cntf的表達量比6個月成年鼠低2~4倍,讓其進行游泳訓練,cntf的含量與游泳速度呈高度相關(P<0.0003).老年鼠比目魚肌肌肉力量經(jīng)過cntf處理14天后,肌力增加2.5倍(P<0.001).此研究證實:cntf基因與肌肉力量相關.

本實驗結(jié)果顯示:經(jīng)Hardy-Weinberg平衡檢驗,對照組基因型頻率P=1.34,實驗組基因型頻率P=1.64(P>0.05)符合Hardy-Weinberg平衡,具有群體代表性.運動員組與對照組cntf基因的多態(tài)性中G等位基因分布頻率普遍偏高,實驗組基因型頻率經(jīng)卡方檢驗運動員基因型頻率與對照組相比(P>0.05)無統(tǒng)計學差異,此結(jié)果表明cntf基因A/G多態(tài)性,不可成為早期選材的指標,但研究結(jié)果顯示運動員組G等位基因頻率高.

分析其可能原因:實驗組21個,全部為東北地區(qū)單板大跳臺和坡式障礙優(yōu)秀運動員,此兩類項目屬于技能主導類項群.雖為省級運動員,但全國此類項目優(yōu)秀運動員全部集中于東北三省,尤其黑龍江省是雪上項目的強省.可以說,此21名運動員代表國家的水平.人數(shù)少是影響實驗結(jié)果的主要因素.隨著國家對冰雪項目越來越重視,在國家和地方政府的大力扶持下,運動員的人數(shù)會逐漸增多,在今后的研究中增加實驗組的人數(shù)或通過增加同一項群實驗人員的數(shù)量,再進行進一步研究以期得到客觀的結(jié)論.

4 結(jié)論

經(jīng)Hardy-Weinberg平衡定律的檢驗,對照組和實驗組cntf基因A/G多態(tài)性頻率分布符合遺傳定律,具有群體代表性.

cntf基因A/G多態(tài)性,不可成為早期選材的指標,但研究結(jié)果顯示運動員組G等位基因頻率高.

通過研究了解我國技能主導類滑雪運動員運動相關基因多態(tài)性的分布,以單板大跳臺和坡式障礙項目運動員基因選材為突破點,逐步開展我國冰雪運動員的基因選材工作,并在后備運動員選材過程中提供數(shù)據(jù)上的支持和選材標準,對此項目的長期發(fā)展具有參考作用.

參考文獻:

[1]張為民.關于運動員選材問題[J].國外體育科技資料,1978(8):9.

[2]曾凡輝,刑文華.運動員科學選材[M].北京:民體育出版社,1992.

[3]David S,Michelle H,Yalda J,et al.Elite swimmers and the Dallete of the ace I/D polymorphism[J].Hum Genet,2001,108:230-232.

[4]Ruth A,Nicolas T,et al.Genetic variation in the rennin-angiotensin

[5]Roath S.M.,Schrager M.A.,F(xiàn)erell E R,et al.cntf genotype is associated with muscular strength and quality in humans across the adult age span[J].JAppl Physiol,2001,90:1205-1210.

[6]Robin A Conwit,Shari Ling,Stephen Roth,et al.The relationship betweenciliary neurotrophic factor(cntf)genotype and motor unit physiology:preliminary studies[J].BMC Physiology,2005,9:1-14.

[7]謝燕群.運動員選材學[M].北京:人民體育出版社,1990.

[8]劉獻武.運動選材學[M].北京:人民體育出版社,1991.

[9]Grassi B,Rossiter HB,Hogan MC,et al.Faster uptake kinetics in canine skeletal muscle in situ after acute creatine kinase inhibition[J].J Physiol,2011,589(Pt1):221-233.

[10]St? ckli KA,Lottspeich F,Sendtner M,etal.Molec?ular cloning,express-ion,and regional distribution of rat ciliary neurotrophic factor[J].Nature,1989(342):920-923.

[11]楊震,高炳宏,李之俊.力量素質(zhì)相關基因多態(tài)性的研究進展[J].西安體育學院學報,2006(4):71-75.

[12]Wilson IA,Brindle KM,F(xiàn)ulton AM,et al.Differ?ential localization of the mRNA of the M and B isoforms of cre-5[J].我國應用生理學雜志,2016,32(1):599-605.

[13]馬力宏,等.睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子基因多態(tài)性在我國漢族女性人群中的分布[J].應用生理學雜志,2004(3):238-239.

猜你喜歡
等位基因選材多態(tài)性
單核苷酸多態(tài)性與中醫(yī)證候相關性研究進展
親子鑒定中男性個體Amelogenin基因座異常1例
智慧健康(2021年17期)2021-07-30 14:38:32
考場作文選材如何“闖關”
記敘文的選材與主旨
WHOHLA命名委員會命名的新等位基因HLA-A*24∶327序列分析及確認
馬鈴薯cpDNA/mtDNA多態(tài)性的多重PCR檢測
DXS101基因座稀有等位基因的確認1例
GlobalFiler~? PCR擴增試劑盒驗證及其STR遺傳多態(tài)性
CYP3A4*1G基因多態(tài)性及功能的初步探討
等位基因座D21S11稀有等位基因32.3的確認
404 Not Found

404 Not Found


nginx
404 Not Found

404 Not Found


nginx
404 Not Found

404 Not Found


nginx
404 Not Found

404 Not Found


nginx
404 Not Found

404 Not Found


nginx
乌兰察布市| 徐州市| 嵊泗县| 武强县| 余庆县| 营口市| 民丰县| 开平市| 孙吴县| 墨竹工卡县| 自治县| 南通市| 花垣县| 麻江县| 承德县| 灵石县| 满城县| 鄂托克前旗| 龙海市| 应城市| 永州市| 江北区| 郓城县| 恩施市| 拜泉县| 曲周县| 阆中市| 罗山县| 长岭县| 大埔县| 芦溪县| 广西| 望谟县| 宝应县| 镇安县| 阳曲县| 高要市| 娄底市| 广水市| 新邵县| 巨野县|