付 穎，黃 瓊，張 帥，陳 儉，徐恩萍

（浙江大學(xué)司法鑒定中心，浙江 杭州 310029）

1 案例

1.1 簡要案情

1例父子關(guān)系鑒定中采集被鑒定人的末梢血進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)被檢父D12S391基因座STR分型為20，21，22，23，后單獨采集被檢父帶毛囊的毛發(fā)樣本進(jìn)行驗證。

1.2 DNA檢驗

采用Chelex-100法提取樣本基因組DNA。采用Goldeneye?20A試劑盒［基點認(rèn)知技術(shù)（北京）有限公司］對被鑒定人血樣進(jìn)行擴(kuò)增，后用EX22試劑盒（無錫中德美聯(lián)生物技術(shù)有限公司）對被檢父毛發(fā)進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增體系及具體操作均按照各試劑盒說明書進(jìn)行，擴(kuò)增產(chǎn)物均在3130xl基因分析儀（美國AB公司）上進(jìn)行電泳分離檢測。

1.3 分型結(jié)果

被檢父與孩子之間在不考慮D12S391基因座的情況下可以排除兩者存在生物學(xué)遺傳關(guān)系。

被檢父血樣和毛發(fā)的D12S391基因座STR分型一致，均為 20，21，22，23，且四個峰的峰高均衡（圖1），其他基因座分型均為一個或兩個峰。

圖1 被檢父D12S391基因座分型圖譜

對被檢父D12S391基因座進(jìn)行了等位基因測序檢測。結(jié)果證實了D12S391基因座存在四個重復(fù)序列：[AGAT]12[AGAC]8、[AGAT]13[AGAC]8、[AGAT]13[AGAC]9和[AGAT]13[AGAC]9[AGAT]。

2 討 論

在正常情況下，STR基因座的分型圖譜表現(xiàn)為一條帶或者兩條帶，本案例中采用Goldeneye?20A試劑盒擴(kuò)增時被檢父D12S391基因座分型出現(xiàn)四條帶，在更換EX22試劑盒擴(kuò)增后該基因座分型仍檢出四條帶，且 STR 分型一致，均為 20，21，22，23。排除了實驗室污染或電泳時泳道滲漏以及PCR擴(kuò)增引起的非特異產(chǎn)物，同時證明不是引物設(shè)計的原因。等位基因測序結(jié)果進(jìn)一步表明，血液與毛發(fā)樣本沒有污染，四個重復(fù)序列確實存在。

關(guān)于三帶型等位基因的研究及案例已有很多文獻(xiàn)[1-6]報道，其產(chǎn)生機(jī)制主要有5個方面：（1）父系或母系同源染色體在減數(shù)分裂時不分離而整體遺傳給子代，即三體綜合征；（2）同源染色體在減數(shù)分裂時出現(xiàn)不等價交換；（3）在受精卵發(fā)育階段，染色體不分離，產(chǎn)生不同基因型細(xì)胞組成的嵌合體；（4）雙胞胎在胚胎發(fā)育期間發(fā)生血液交換；（5）異基因骨髓或造血干細(xì)胞移植后形成的嵌合體，形成三或四等位基因[2]。BUTLER等[1-2]認(rèn)為三帶型的出現(xiàn)與染色體有關(guān)。但四等位基因的產(chǎn)生機(jī)制與三帶型的產(chǎn)生機(jī)制是否一致需要進(jìn)一步研究。

由于本案例中被檢父與孩子之間排除親子關(guān)系，被檢父拒絕進(jìn)一步檢驗，也無法獲得被檢父直系親屬的數(shù)據(jù)，故無法進(jìn)一步研究D12S391基因座等位基因的遺傳方式以及出現(xiàn)四等位基因的具體原因。

[1]BUTLER J M.法醫(yī)DNA分型：STR遺傳標(biāo)記的生物學(xué)、方法學(xué)及遺傳學(xué)[M].2版.侯一平，劉雅誠，譯.北京：科學(xué)出版社，2007：98-99.

[2]韓莉莉，潘棱，沈曉麗，等.STR基因座中檢出三帶型等位基因三例及遺傳分析[J].海南醫(yī)學(xué)，2011，22（15）：1-3.

[3]賈雲(yún)舒，錢水，周鳳蕾，等.D13S317基因座三等位基因遺傳學(xué)分析[J].中國法醫(yī)學(xué)雜志，2015，30（3）：312-313.

[4]宋曉麗，趙奇，劉曉云，等.D16S539基因座中檢出三帶型等位基因及遺傳分析[J].暨南大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版），2015，36（2）：143-145.

[5]劉亞舉，劉開會，高林波，等.STR基因座中檢出三等位基因 1 例[J].法醫(yī)學(xué)雜志，2008，24（5）：399-400.

[6]陳芳，陳儉，付穎，等.STR基因座中檢出三帶型等位基因 7 例[J].法醫(yī)學(xué)雜志，2014，30（3）：215-216.