楊豐綺,胡鐵軍,唐玉嬌,于瑩瑩
(長春科技學(xué)院 吉林省鹿產(chǎn)業(yè)工程研究中心,吉林 長春 130600)
黑枸杞是生長在荒漠戈壁等特殊地域的茄科枸杞屬植物,因具有護(hù)眼明目、美容養(yǎng)顏、免疫調(diào)節(jié)、延緩衰老、改善血液循環(huán)、預(yù)防動脈硬化等多種功效而享有“軟黃金”的美譽(yù)[1-2]。紅枸杞富含枸杞多糖、維生素、礦物質(zhì)、β-胡蘿卜素等多種營養(yǎng)成分[3],能明顯提高機(jī)體的超氧化歧化酶(SOD)的活性,可對抗自由基過氧化,有利于活性氧的清除,從而有助于延緩衰老和抗疲勞。
黑枸杞作為純天然野生植物,富含游離氨基酸、礦物質(zhì)、生物堿、維生素等多種人體必需的營養(yǎng)元素。黑枸杞的游離氨基酸及多種微量元素含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于紅枸杞,更利于調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能[4]。此外,黑枸杞含有大量的花青素,這是紅枸杞所不具備的?;ㄇ嗨厥悄壳鞍l(fā)現(xiàn)的最有效的天然抗氧化劑,與維生素C相比具有更強(qiáng)的清除自由基的能力。黑枸杞中的花青素、多酚、多糖等活性成分能夠延緩人體細(xì)胞組織衰老,清除氧自由基,保持機(jī)體的年輕狀態(tài),增強(qiáng)免疫力,延年益壽[5]。黑枸杞的功效逐漸得到人們的關(guān)注。與紅枸杞相比,黑枸杞具有更大的研究價(jià)值和更廣闊的市場前景。
本試驗(yàn)不僅證實(shí)了與紅枸杞提取物相比黑枸杞提取物具有更大的清除自由基的作用,還將水提、醇提與超聲波技術(shù)相結(jié)合對黑枸杞活性成分進(jìn)行充分提取,為黑枸杞在食品、保健品及化妝品等領(lǐng)域的應(yīng)用提供參考。
黑枸杞干、紅枸杞干(青海),無水乙醇(南京化學(xué)試劑股份有限公司),DPPH(美國Sigma)。
超聲波清洗機(jī)(上海精密科學(xué)儀器有限公司),真空冷凍干燥機(jī)(上海利聞科學(xué)儀器有限公司),紫外可見分光光度計(jì)(尤尼柯〈上海〉儀器有限公司),高速冷凍離心機(jī)(上海盧湘儀離心機(jī)儀器有限公司),粉碎機(jī)(浙江新世紀(jì)粉碎設(shè)備有限公司)。
制備黑枸杞、紅枸杞水提取物的流程如圖1所示。
圖1黑枸杞、紅枸杞水提取物制備流程
制備黑枸杞、紅枸杞超聲波-水提取物的流程如圖2所示。
圖2黑枸杞、紅枸杞超聲波-水提取物制備流程
制備黑枸杞、紅枸杞醇提取物的流程如圖3所示。
圖3黑枸杞、紅枸杞醇提取物制備流程
制備黑枸杞、紅枸杞超聲波-醇提取物的流程如圖4所示。
圖4黑枸杞、紅枸杞超聲波-醇提取物制備流程
將稱量的DPPH粉末用無水乙醇溶解后定容,配制DPPH溶液并避光保存。將黑枸杞與紅枸杞各組提取物分別配制成0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/mL的溶液,取各濃度樣品溶液2.0 mL,分別加入2 mLDPPH溶液,避光放置30 min,以2 mL無水乙醇代替DPPH溶液作為空白組,對照組用等體積的蒸餾水代替樣品,用紫外分光光度計(jì)在517 nm處測定吸光值,按公式計(jì)算DPPH自由基清除率[6]。
清除率(%)={1-[(Ai-Aj)/A0]}×100%
對不同濃度的黑枸杞水提取物和紅枸杞水提取物進(jìn)行DPPH自由基清除能力的比較,結(jié)果如圖5所示。黑枸杞水提取物從低濃度開始就具有良好的自由基清除能力,而紅枸杞水提取物濃度低時(shí)自由基清除能力很低,當(dāng)提取物濃度達(dá)到1 mg/mL時(shí)清除能力仍遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于黑枸杞水提取物。
圖5 水提取物對DPPH自由基的清除能力
對不同濃度的黑枸杞醇提取物和紅枸杞醇提取物進(jìn)行DPPH自由基清除能力的比較,結(jié)果如圖6所示。紅枸杞醇提取物濃度升高對自由基清除能力無顯著影響,而黑枸杞醇提取物自由基清除能力顯著高于紅枸杞醇提取物,且最高可達(dá)55%。
圖6 醇提取物對DPPH自由基的清除能力
3.3 超聲波-水提取物、超聲波-醇提取物對DPPH自由基清除能力的影響
用超聲波技術(shù)作為輔助技術(shù)聯(lián)合水提取法、醇提取法分別提取黑枸杞、紅枸杞中的活性成分,并在比較DPPH自由基清除能力的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步比較用不同提取方法得到的提取物的抗氧化能力。由圖7可知,紅枸杞超聲波-水提取物及超聲波-醇提取物的自由基清除能力均顯著低于黑枸杞提取物,紅枸杞提取物濃度提高對自由基清除能力影響不大,但在一定范圍內(nèi),黑枸杞提取物對DPPH自由基清除能力的影響比較大,清除能力隨著濃度的提高而增強(qiáng)。將幾種提取物按清除能力從大到小排序,依次為:黑枸杞超聲波-水提取物>黑枸杞超聲波-醇提取物>紅枸杞超聲波-水提取物>紅枸杞超聲波-醇提取物。黑枸杞超聲波-水提取物的自由基清除能力最強(qiáng),高達(dá)87.6%。
就紅枸杞而言,起抗氧化作用的主要成分是枸杞多糖、β-胡蘿卜素等;就黑枸杞而言,起抗氧化作用的主要成分是花青素?;ㄇ嗨剡€具有預(yù)防心血管疾病、動脈硬化等作用。紅枸杞不含花青素成分,黑枸杞是目前自然界花青素含量最高的果實(shí)[7-8]。與紅枸杞相比,黑枸杞含有更多生物堿及微量元素。通過DPPH自由基清除能力實(shí)驗(yàn)可以看出,與紅枸杞提取物相比,黑枸杞提取物具有更好
的抗氧化、清除自由基、延緩衰老的功效。利用黑枸杞開發(fā)化妝品、藥品、保健品等,具有廣闊的前景。
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